固相萃取-LC-MS/MS测定牛奶中氟喹诺酮类药物残留

目的:建立同时测定牛奶中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星和芦氟沙星残留的固相萃取-HPLC/MS/MS测定方法。方法:牛奶样品经酸化、乙腈沉淀蛋白质后,过C18固相萃取小柱净化,HPLC-MS/MS分析,流动相为甲醇-10 mmol/L醋酸铵水溶液(25∶75),色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS C18柱。结果与结论:方法学试验表明:本方法灵敏度高(定量限0.5 ng/g)、精密度好(RSD     

固相萃取-UPLC-MS/MS法建立大鼠血浆中蒜氨酸含量测定方法

目的建立基于UPLC-MS/MS与固相萃取(SPE)相结合的大鼠血浆中蒜氨酸的分析方法。方法用强阳离子基质的SPE柱提取大鼠血浆中的蒜氨酸和降低基质效应,UPLC-MS/MS法进行测定。结果对SPE方法中淋洗液和洗脱液进行优化,选择水为淋洗液,甲醇-氨水(95∶5)为洗脱液,回收率>68%;蒜氨酸的标准曲线相关系数r2>0.99;蒜氨酸测定的日内精密度和日间精密度良好,相对标准偏差(RSD%)分别低于2.1和8.2。结论本方法可有效降低复杂生物样品中的基质效应,测定方法准确、可靠,具有很好的应用前景。     

固相萃取-反相HPLC法同时快速测定血浆中4种氟喹诺酮类药物

目的 建立同时快速测定人血浆中4种氟喹诺酮类药物(氟罗沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星)的方法 .方法 采用C<,18>固相萃取小柱萃取血浆中的4种氟喹诺酮类药物.色谱柱为ODS-BP柱(5 μ,250 mm×4.6 mm),流动相为含1.31 g/L L-异亮氨酸和0.80 g/L CuSO<,4>的水溶液-甲醇(80:20,V:V),激发波长为280 nm,发射波长为504 nm,流速为0.8 ml/min. 结果 4种氟喹诺酮类药物可良好分离,分离度达到1.5以上.4种药物的线性范围均是0.1-20 μg/ml,r均大于0.997 5,氟罗沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星的最小检测限依次分别为50 ng/ml、1 ng/ml、100 ng/ml、100ng/ml,萃取回收率均高于87.97%,方法 回收率均在95.40%与101.82%之间,日内RSD均小于3.7%,日间RSD均小于1.5%. 结论 固相萃取-反相HPLC法简便,灵敏度高,准确度高,精密度好,可用于氟喹诺酮类药物的快速测定.     

固相萃取气相色谱法测定茶叶中5种有机磷农药残留

目的 建立固相萃取气相色谱法同时测定茶叶中敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷等5 种有机磷农药残留. 方法 样品用固相萃取法萃取,乙酸乙酯/丙酮混合液洗脱,旋转蒸发仪浓缩,丙酮溶解定容,气相色谱柱分离后检测. 检测器温度260 ℃,进样口温度250 ℃. 燃气为氢气,流速80 mL/min. 载气为氮气,流速10 mL/min. 助燃气为空气,流速为100 mL/min. 结果 该方法检出限为0 . 01~0 . 02 mg/kg. 当加入标准溶液的浓度为0. 25 mg/kg时,加标回收率为74. 9% ~88. 9%,RSD在2. 4% ~10. 3%范围之间;当加入标准溶液的浓度为1. 0 mg/kg时,加标回收率为87. 9% ~100%,RSD在1. 7% ~5. 0%范围内. 结论 固相萃取气相色谱法检测效率高,适合大量样品的筛选和检测.     

氧化铝干柱层析固相萃取测定血中吩噻嗪类药物含量

目的 建立一种血中吩噻嗪类药物的萃取及测定方法。方法 采用氧化铝干柱层析固相萃取技术分离血中吩噻嗪类药物，紫外二阶导数光谱图测定萃取物中吩噻嗪类药物浓度。结果 对于吩噻嗪类药物含量在mg/L级药物的血样，pH8时氯丙嗪的萃取率＞80％；pH12时异丙嗪的萃取率＞90％。紫外二阶导数光谱图测定氯丙嗪的加样回收率＞90％。结论 本方法操作简便，试剂价廉，萃取率较高，测试重现性好，批量测试更省时间，对于含吩噻嗪类药物mg/L级的血样，测定结果可靠。     

固相萃取技术在农药残留分析中的应用

固相萃取是一种新型的样品预处理技术，操作简便。节省有机溶剂，易于实现自动化操作。已广泛应用于环境保护、药物检测、食品检验检疫等领域。在农药残留分析中，固相萃取技术的应用还使得提取不同类别农药的选择性增强，样品回收率提高，尤其是结合HPLC—MS、GC—MS等仪器的联合鉴定，可实现自动化分析，能简单、快速、灵敏地提取定量许多物质，从而大走提高了分析效率和精密度，具有广阔的发展前景。     

固相萃取-反相HPLC荧光法快速测定血浆中氟罗沙星

目的建立固相萃取-反相HPLC荧光法快速测定人血浆中氟罗沙星的方法。方法采用C18固相萃取小柱萃取血浆中的氟罗沙星。色谱柱为ODS-BP柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为含1.31 g/L L-异亮氨酸和0.80 g/LCuSO4的水溶液-甲醇(80∶20,V∶V),激发波长为280 nm,发射波长为504 nm,流速为0.8 ml/min。结果该方法在0.4-20μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 3),最小检测限50 ng/ml,萃取回收率和方法回收率分别为89.52%和100.45%,高、中、低3个浓度的日内RSD为3.2%,日间RSD为1.5%。结论该法血样处理简单,干扰小,灵敏度高,精密度好,可用于该药物体内监测的快速测定。     

固相萃取-LC/MS测定人血浆中腺苷蛋氨酸浓度

目的:建立固相萃取结合HPLC-MS测定人血浆中腺苷蛋氨酸(SAMe)浓度的方法,测定健康受试者单剂量口服腺苷蛋氨酸片后的血药浓度,估算其药代动力学参数。方法:血浆中加入阿昔洛韦作为内标,经高氯酸沉淀蛋白后取上清液利用固相萃取小柱进行预处理,洗脱液用HPLC-MS测定。色谱柱:Phenomenex SynerigiTM Hydro-RP C18柱(150 mm×2.0 mm,4μm),流动相:1%冰醋酸-甲醇,梯度洗脱,流速:0.2 mL/min;ESI-MS选择性正离子检测,监测离子:[M]+m/z399.2(SAMe)和[M+H]+m/z226.2(阿昔洛韦)。结果:检测方法的线性范围:0.05～5μg/mL,最低检测限:0.05μg/mL。应用此法测定了10名健康受试者单剂量口服1 000 mg腺苷蛋氨酸片的药物代谢过程。结论:本方法适合腺苷蛋氨酸的临床药代动力学研究。     

LC-MS/MS同时测定人体血浆中辛伐他汀及其活性代谢物辛伐他汀酸

目的 建立一种简单、灵敏、选择性好的液相色谱(LC-MS)与电喷雾质谱光谱法(MS)同时测定辛伐他汀(I)和辛伐他汀酸(Ⅱ)的检测模式.方法 经过提取,使用D3辛伐他汀(Ⅲ)和D3辛伐他汀酸(Ⅳ)作为内标,溶质分离在对称屏蔽下进行,RP8,5μ柱(150 mm×3.9mm),流动相为乙腈:50 mmol铵醋酸,pH值3.0(80:20).一个大气压电离单四极质谱检测.高效液相色谱(HPLC)系统与涡轮离子喷涂界面的MS/MS系统形成接口.辛伐他汀和辛伐他汀酸的量化是通过计算峰面积比(I/Ⅲ和Ⅱ/Ⅳ)而实现.MRM模式分析提取,并与标准曲线(R辛伐他汀=0.9994和R辛栈他汀=0.9996)进行比较.确定检测的准确性和精度,计算4个浓度(0.25、0.75、20.00和60.00 ng/mL)辛伐他汀和0.25、0.75、15.00和45.00 ng/mL辛伐他汀酸批内和批间的差异.结果 建立了LC-MS/MS同时测定人体血浆中辛伐他汀及其活性代谢物辛伐他汀酸的方法,批内相对标准差(RSD)低于15.00％,从3.40％到14.75％不等,批间RSD小于15.00％,从11.59％到1.47％不等.人体血浆检测限为0.25 ng/mL辛伐他汀和0.25 ng/mL辛伐他汀酸.结论 LC-MS/MS同时测定人体血浆中辛伐他汀及其活性代谢物辛伐他汀酸,方法简单,灵敏度高.     

固相萃取形式应用概况

固相萃取作为一种新发展起来的预处理技术,近年来得到了广泛的重视.本文分别介绍了固相萃取的三种形式:固相萃取柱、固相萃取盘和固相微萃取的原理及其在药物分析和其他方面的应用情况.     

LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中黄芩素及黄芩苷浓度

目的:建立LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中黄芩素及其代谢物黄芩苷浓度。方法:色谱分离采用C18色谱柱,流动相为甲醇-0.2%甲酸(74∶26),流速1 mL/min。血浆中加入内标木犀草素,甲醇沉淀蛋白,离心后上清液进行LC-MS/MS分析。检测离子:黄芩素[M+H]+270.9→122.8,黄芩苷[M+H]+447.0→271.3,内标[M+H]+286.9→153.0。结果:黄芩苷、黄芩素在10-2 000 ng/mL范围内,线性关系良好,平均回收率大于75%,日内和日间的RSD小于15%。结论:建立的LC-MS/MS法符合生物样品分析的要求,可用于研究大鼠静注黄芩素后,血浆中黄芩素、黄芩苷的同时测定。     

LC-MS/MS测定人血浆中替米沙坦的浓度

目的:建立测定人血浆中替米沙坦浓度的LC-MS/MS方法,并用该法研究替米沙坦片在健康人体内的药代动力学。 方法:采用LC-MS/MS测定人血浆中不同时间点替米沙坦的浓度,以地西泮为内标,血浆样品用乙腈沉淀蛋白,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18 (100 mm×2.1 mm,3.5 μm),流动相为乙腈-0.3%甲酸水溶液(55∶45),流速0.3 ml/min,柱温30℃。 结果:替米沙坦的线性范围为2.5～500 ng/ml (r=0.995 7),最低定量限为2.5 ng/ml(S/N>10),日内和日间RSD<8%。 结论:本法操作简单,选择性好,灵敏度高,适用于替米沙坦的人体药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中福辛普利及其活性代谢物福辛普利拉

目的:建立人血浆中福辛普利及其代谢物福辛普利拉的LC-MS/MS测定方法,研究健康志愿者口服福辛普利片后的药代动力学。方法:血浆样品加入内标扎来普隆,血浆样品酸化后用乙醚-二氯甲烷(3∶1)混合溶剂提取处理,LC-MS/MS分析。流动相为甲醇-10mmol/L醋酸胺水溶液,色谱柱为LichrospherC8,梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温25℃。质谱检测方式:选择性反应检测(SRM),20名健康受试者口服20mg福辛普利钠片,计算主要药代动力学参数。结果:福辛普利在0.1～15.0ng/mL,福辛普利拉1.0～700ng/mL范围内线性关系良好。福辛普利的日内RSD小于3.7%,日间RSD小于6.9%;福辛普利拉的日内RSD小于2.4%,日间RSD小于5.2%。福辛普利与福辛普利拉的t1/2分别为(2.72±1.75)h和(7.25±0.81)h,cmax分别为(4.61±2.34)ng/mL和(409.43±136.28)ng/mL,tmax分别为(1.21±0.42)h和(3.74±0.87)h。结论:本方法灵敏度高,测定结果准确,可用于人体药代动力学及相对生物利用度研究。     

高效液相色谱一质谱联用法测定人血浆中非索非那定的浓度

目的：建立以高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中非索非那定浓度的方法。方法：以苯乙双胍为内标物,采用C18柱,流动相由乙腈及30 mmol/ml NH4Ac（含0.1%甲酸,0.01%三氟乙酸）组成,采用梯度洗脱程序,测定血浆中非索非那定浓度。结果：非索非那定在2.26～676.46 ng/ml线性关系良好（r=0.999 6,n=7）,定量下限浓度为2.26 ng/ml,RSD为0.7%,高、中、低浓度测定的相对回收率分别为（109.9±1.7）%、（103.1±7.2）%和（101.5±13.4）%,日内RSD分别为2.1%、2.5%和9.8%,日间RSD分别为1.3%、5.7%和7.1%。结论：所建方法预处理简单﹑专属性强、灵敏度高,适合测定非索非那定的血药浓度。     

固相萃取LC-MS/MS法测定疏血通注射液中次黄嘌呤浓度

[目的]建立固相萃取液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定疏血通注射液中次黄嘌呤浓度。[方法]疏血通注射液经固相萃取柱处理后,采用LC-MS/MS进行含量测定。色谱柱为Acquity BEH C18分析柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以甲醇-水(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min。于ESI负离子模式下,以多反应离子监测(MRM)扫描方式进行监测,用于定量分析的离子为m/z 134.9→92.0(次黄嘌呤)和m/z 151.0→92.1(内标6-巯基嘌呤)。[结果]次黄嘌呤在质量浓度0.1～0.5μg/mL范围内与待测物和内标的峰面积比值呈良好线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为98.7%,RSD为0.31%。[结论]该方法简便、准确、灵敏,可用于疏血通注射液中次黄嘌呤的浓度测定。     

LC-MS/MS研究紫杉醇自组装前体脂质体在大鼠体内的组织分布及靶向性

目的:对自制紫杉醇自组装前体脂质体(PSAP)在大鼠体内的组织分布进行研究,并与市售紫杉醇注射液(Taxol)的组织分布特征进行了比较。方法:SD大鼠以5 mg/kg的剂量尾静脉注射PSAP及Taxol,建立LC-MS/MS方法,于给药后不同时间测定组织中的紫杉醇药物浓度,对两种制剂的大鼠体内组织分布特征和靶向性进行评价。结果:PSAP与Tax-ol组相比,肝、脾、卵巢、子宫中的药物分布明显高于Taxol组(P0.05),而在心脏中的分布明显低于Taxol组(P<0.05)。结论:紫杉醇自组装前体脂质体与市售注射液相比,大鼠体内配置发生明显变化,特别是提高紫杉醇在肝、脾、卵巢、子宫的药物分布同时降低心脏的分布,对于临床更好地治疗肝脾部、卵巢、子宫癌症和降低心脏毒性具有现实意义。     

化妆品中糖皮质激素类非法添加物的LC-MS/MS分析

建立化妆品中醋酸可的松、泼尼松、泼尼松龙、曲安西龙、地塞米松和醋酸地塞米松等非法添加物的LC-MS/MS同时测定方法。化妆品经酸化甲醇(冰醋酸调pH为4.0)超声提取,正己烷除脂净化,HPLC-MS/MS分析,流动相为甲醇-0.1%甲酸(60∶40),色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS C18(150 mm×2.0 mm,5μm)。方法学试验表明:本方法可作为化妆品中非法添加糖皮质激素的常规分析方法。     

基于LC-MS/MS技术的罗库溴铵微透析探针回收率测定的方法学研究

目的 建立罗库溴铵微透析探针回收率的测定方法,考察罗库溴铵在体外及SD大鼠体内探针回收率的稳定性和重现性,为进一步体内微透析试验提供依据.方法 采用LC-MS/MS技术测定透析液中罗库溴铵浓度,计算相应的探针回收率;采用增量法(正透析法)和减量法(反透析法)考察不同流速(0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 μL/min)、不同药物浓度(50、200、500 ng/mL)对体外探针回收率的影响.采用减量法测定SD大鼠体内的探针回收率,并与体外结果进行比较.结果 在相同条件下,探针体外回收率在流速为0.5～4μL/min范围内随着流速增加而降低;同一流速下,探针回收率与罗库溴铵浓度无关;增量法和减量法所测得的体外探针回收率在相同条件近似相等,且稳定性良好.减量法测得的SD大鼠体内探针回收率结果与体外相近.结论 微透析技术可用于罗库溴铵体内药物动力学研究,反透析法可作为罗库溴铵体内研究的探针回收率测定方法.     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中盐酸二甲双胍和罗格列酮浓度及其药代动力学

目的:建立LC-MS/MS同时测定人血浆中盐酸二甲双胍及罗格列酮浓度的方法,测定志愿者单次和多次顿服二甲双胍罗格列酮胶囊后盐酸二甲双胍和罗格列酮的血药浓度,估算其药代动力学参数。方法:血浆中加入盐酸苯乙双胍为内标,经乙腈沉淀蛋白,取上清直接进行LC-MS/MS测定。色谱柱为Phenomenex Luna CN 100A(150 mm×2.0 mm ID),流动相为CH3OH-30 mmol/L NH4Ac,pH 5.0(80∶20),流速为0.2 mL/min;ESI-MS/MS选择性反应正离子检测。临床试验方案采用拉丁方试验设计。结果:盐酸二甲双胍和罗格列酮的血浆线性范围分别为5~3 000 ng/mL和1.5~500 ng/mL,检测限均为1ng/mL。测定了12名志愿者单次和多次顿服二甲双胍罗格列酮胶囊后的血药浓度经时过程。结论:本方法操作简单,专属性强,灵敏度高,准确性好。盐酸二甲双胍和罗格列酮体内动力学行为符合线性药物动力学特征。