解毒软肝汤对免疫性肝纤维化大鼠转化生长因子β1的影响

目的:探讨解毒软肝汤治疗免疫性肝纤维化的疗效。方法:猪血清法建立免疫性肝纤维化大鼠模型,观察解毒软肝汤对肝纤维化大鼠光镜下肝组织病理学变化及对肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。结果:与模型组比较,解毒软肝汤能减轻模型大鼠肝组织纤维化,抑制模型大鼠肝组织TGF-β1的表达。结论:解毒软肝汤可有效治疗大鼠肝纤维化,其作用机制之一为抑制肝纤维化组织TGF-β1的表达。     

肝复健胶囊对大鼠免疫性肝纤维化及整合素α6表达的影响

目的 观察肝复健胶囊对免疫性肝纤维化(HF)模型大鼠整合素α6表达的影响.方法 大鼠腹腔注射猪血清0.5ml,每周2次,共12周,建立免疫性肝纤维化模型,以免疫组织化学方法观察肝复健胶囊(1.8,3.6,7.2 g/kg)对该模型大鼠肝组织整合素α6表达的影响,以及肝功能、肝纤维化指标HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ水平,并以鳖甲煎丸(3.6 g/kg)作为对照进行观察.结果 肝复健胶囊能明显减少该模型大鼠肝组织整合素α6表达,改善肝功能、抑制肝纤维化HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ水平,抑制胶原纤维增生.结论 肝复健胶囊可能通过抑制整合素α6表达,减少胶原在肝内的沉积,达到抑制大鼠免疫性肝纤维化作用.     

解毒软肝汤对免疫性肝纤维化大鼠血清学及组织学的影响

目的:通过解毒软肝汤对免疫性肝纤维化大鼠血清学及组织学影响的研究,确证该方药治疗免疫性肝纤维化的疗效。方法:猪血清法制备大鼠免疫性肝纤维化模型[1]。观察免疫性肝纤维化大鼠血清学及组织病理学的变化。结果:治疗组大鼠肝功能指标较阴性对照组无明显变化(P>0.05),较模型及阳性对照组均有显著性差异(P<0.01)。阴性对照组与模型组、阳性对照组、治疗组之间血清肝纤维化指标两两比较均有显著性差异(P<0.05)。组织病理学方面,阴性对照组同其它组均有显著性差异(P<0.05),模型组同阳性对照组及治疗组比较有显著性差异(P<0.05),阳性对照组同治疗组比较亦有显著性差异(P<0.05)。结论:血清学及组织病理学指标显示,解毒软肝汤能显著逆转、减轻免疫性肝纤维化程度,减轻肝脏功能损伤,疗效确定。     

软肝化癥丸抗肝纤维化作用的实验研究

目的 :探讨多法联用经验方软肝化丸对肝纤维化的治疗作用及作用机理。方法 :复制大鼠免疫性肝纤维化模型 ,取大鼠肝组织及血清观察肝脏和血清生化、血液流变学、肝脏病理、胶原基因表达、脂多糖诱导腹腔巨噬细胞产生细胞因子。结果 :软肝化丸具有保护肝功能 ,改善血液流变性 ,降低肝组织胶原蛋白的含量 ,抑制诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 (NO)水平、肿瘤坏死因子a(TNF a)和白介素 1(IL 1)的活性 ,抑制大鼠肝组织Ⅰ型胶原和Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结论 :软肝化丸能够保护大鼠肝功能 ,通过调节免疫及肝组织胶原蛋白的过度增生与沉积而达到抗肝纤维化的目的。     

鳖甲煎丸影响免疫性肝纤维化大鼠TNF-α表达的研究

目的:观察复方中药鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化模型大鼠肝组织TNF-α表达的影响,分析鳖甲煎丸抗肝纤维化的治疗作用并探讨其作用机制;并通过与抗肝纤维化药物秋水仙碱对照,为临床防治肝纤维化用药提供科学依据。方法:雄性Wistar大鼠90只,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎丸预防组、鳖甲煎丸治疗组,选用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型。各组于10周后取8只大鼠断头处死,取肝组织,免疫组化染色,用图像分析法检测TNF-α。结果:鳖甲煎丸能够从多个环节抑制肝脏纤维化病理改变,明显抑制TNF-α的表达,其作用接近或优于秋水仙碱。结论:鳖甲煎丸具有明显的抗肝纤维化作用。     

软肝饮对免疫性肝纤维化大鼠细胞因子及肝细胞超微结构的影响

目的；观察中药复方软肝饮对免疫性肝纤维化模型大鼠细胞因子及肝细胞超微结构的影响。方法：对人血白蛋白（HSA）诱导的免疫性肝纤维化大鼠模型予软肝饮小剂量（1g／kg）、大剂量（2g／kg）灌胃给药，连续8周，以鳖甲软肝片和秋水仙碱为阳性对照药；测定模型大鼠肿瘤坏死因子α（TNF—α）、白细胞介素1（IL-1）、转化生长因子β1（TGF—β1）含量的变化；用电镜观察肝细胞超微结构的变化。结果：软肝饮显著降低模型大鼠血清TNF—α、IL-1、TGF—β1量，并可保护模型大鼠肝细胞超微结构。结论：软肝饮可能通过恢复肝细胞形态及降低炎症细胞因子含量而起到抗肝纤维化的作用。     

芪术颗粒对肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞 αvβ3-ILK/AKT 信号通路的影响

目的:探讨芪术颗粒对CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型肝窦内皮细胞(Liver sinus endothelial cells,LSECs)中整合素αvβ3-整合素连接激酶(Integrin-linked protein kinase,ILK)/蛋白激酶B (Protein kinase B,AKT)信号通路的影响。方法:腹腔注射10%CCl4橄榄油溶液建立大鼠肝纤维化模型,原代分离肝纤维化大鼠及正常大鼠LSECs。70只雄性Wistar大鼠随机分为6组,芪术颗粒低、中、高剂量组,分别给予芪术颗粒0.5倍、1倍、2倍剂量灌胃,阳性药组给予复方鳖甲软肝片灌胃,正常组及模型组给予三蒸水灌胃,每天分别灌胃2次,连续灌胃5次。制备含药血清及正常血清。将制备的正常血清加入到正常组大鼠分离出的LSECs,其余组将对应的血清加入肝纤维化大鼠分离出的LSECs,常规培养48 h,Western blot检测LSECs中整合素αvβ3-ILK/AKT信号通路的变化情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠LSECs中αvβ3、磷酸化ILK/ILK、磷酸化AKT/AKT蛋白表达均升高(P 0.01)。与模型组比较,阳性药组及芪术颗粒各剂量组大鼠LSECs中整合素αvβ3表达均降低(P 0.05,P 0.01),随芪术颗粒剂量的增大,αvβ3表达逐渐降低;磷酸化ILK/ILK、磷酸化AKT/AKT蛋白的表达均减少(P 0.01),尤以芪术颗粒高剂量组降低最明显。与阳性药组比较,芪术颗粒高剂量组LSECs整合素αvβ3、磷酸化ILK、磷酸化AKT蛋白表达均降低,但差异无统计学意义(P 0.05)。结论:芪术颗粒可通过抑制肝纤维化大鼠LSECs整合素αvβ3-ILK/AKT信号通路发挥其抗肝纤维化作用。     

疏肝化瘀益气法对肝纤维化大鼠HIF-1α、VEGF表达的影响

目的研究疏肝化瘀益气法干预肝纤维化大鼠模型过程中,对大鼠肝脏组织HIF-1α、VEGF表达的影响。方法采用无菌猪血清诱导大鼠肝纤维化模型。随机分为3组。空白组、模型组给予生理盐水灌胃;软肝散干预组自造模开始即给予软肝散生药水煎剂灌胃。采用HE染色和Masson染色观察肝组织纤维化程度,RT-PCR、Western bolt检测肝组织中HIF-1α、VEGF蛋白的表达情况。结果与模型组相比,软肝散干预组肝组织中HIF-1α、VEGF表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。且随着干预给药时间的延长,其表达量逐渐降低。结论以疏肝化瘀益气法为指导的软肝散可以改善肝纤维化的病理改变,通过下调HIF-1α、VEGF表达,抑制HIF-1α、VEGF的过表达,调控HIF-1α/VEGF信号通路抑制肝组织纤维化进程,从而发挥抗纤维化的作用。     

软肝化症丸抗肝纤维化作用的实验研究

目的：探讨多法联用经验方软肝化症丸对肝纤维化的治疗作用及作用机理。方法：复制大鼠免疫性肝纤维化模型,取大鼠肝组织及血清观察肝脏和血清生化、血液流变学、肝脏病理、胶原基因表达、脂多糖诱导腹腔巨噬细胞产生细胞因子。结果：软肝化症丸具有保护肝功能,改善血液流变性,降低肝组织胶原蛋白的含量,抑制诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮（NO）水平、肿瘤坏死因子a(TNF-a）和白介素1（IL－1）的活性,抑制大鼠肝组织I型胶原和Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结论：软肝化症丸能够保护大鼠肝功能,通过调节免疫及肝组织胶原蛋白的过度增生与沉积而达到抗肝纤维化的目的。     

软肝化丸抗肝纤维化作用的实验研究

目的探讨多法联用经验方软肝化丸对肝纤维化的治疗作用及作用机理.方法复制大鼠免疫性肝纤维化模型,取大鼠肝组织及血清观察肝脏和血清生化、血液流变学、肝脏病理、胶原基因表达、脂多糖诱导腹腔巨噬细胞产生细胞因子.结果软肝化丸具有保护肝功能,改善血液流变性,降低肝组织胶原蛋白的含量,抑制诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮(NO)水平、肿瘤坏死因子a(TNF-a)和白介素1(IL-1)的活性,抑制大鼠肝组织工型胶原和Ⅲ型前胶原mRNA的表达.结论软肝化丸能够保护大鼠肝功能,通过调节免疫及肝组织胶原蛋白的过度增生与沉积而达到抗肝纤维化的目的.     

养营活血汤治疗肝纤维化大鼠的作用及机制研究

目的从不同剂量的养营活血汤对肝纤维化大鼠TGF-β1及α-SMA的影响探讨其抗肝纤维化的分子机制。方法采用CCl4诱导肝纤维化大鼠模型,通过苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理学,比较各组大鼠肝纤维化的程度。并用ELISA法检测大鼠肝组织α-SMA及血清TGF-β1的表达水平。结果与模型组比较,养营活血汤各剂量组肝纤维化程度显著降低,大鼠血清TGF-β1及肝组织α-SMA的表达显著降低(P0.05或P0.01)。结论养营活血汤对大鼠肝纤维化具有明显的干预和抑制作用,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1及α-SMA的表达,直接或间接抑制了HSC的活化,从而抑制了肝纤维化的进展。     

肝乐颗粒对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的探讨肝乐颗粒对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法除正常组大鼠外,其余各组大鼠采用四氯化碳诱导肝纤维化模型。于造模第7周起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,疗程6周。实验结束后,采用分光光度法测定血清一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量;同时以免疫组化技术测定肝组织中α-SMA蛋白的表达,RT-PCR测定肝组织中α-SMAmRNA的表达。结果肝乐颗粒各剂量组能明显降低肝纤维化大鼠NO、NOS、iNOS的含量,抑制肝纤维化大鼠肝组织中α-SMA蛋白和α-SMAmRNA的表达。结论肝乐颗粒能有效抑制四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝脏中α-SMA的表达。     

化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1表达的影响

目的探讨化浊解毒调肝方抗肝纤维化的作用机制。方法将120只健康雄性SD大鼠随机分为6组。即正常组、模型组、秋水仙碱预防组、化浊解毒调肝方预防组、秋水仙碱治疗组、化浊解毒调肝方治疗组各20只,除正常组外其它各组均采用腹腔注射未灭活的猪血清建立肝纤维化大鼠模型,分别采用秋水仙碱和化浊解毒调肝方进行药物干预。各组分别于造模8、12周末随机处死10只大鼠,用免疫组化法观察药物对肝组织基质金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)表达的影响。结果化浊解毒调肝方有明显的抑制肝纤维化模型大鼠肝组织TIMP-1的表达的作用,且抑制作用要优于秋水仙碱(P0.05)。结论化浊解毒调肝方可有效防治大鼠肝纤维化,其作用机制可能是通过抑制肝纤维化组织TIMP-1的表达实现的。     

软肝解毒煎对大鼠酒精性肝纤维化的防治研究

目的:观察软肝解毒煎预防治疗酒精性肝纤维化,阻断肝组织硬化,改善肝功能的作用。方法:选用纯系Wistar雄性大鼠,按体重随机均分为正常组、模型组、软肝解毒煎组3组。以正常组和模型组为对照,采用白酒ig造模,同时预防给予软肝解毒煎剂,剂量为21 g.kg-1,12周后,各组大鼠肝脏取材,应用光镜及电镜观察大鼠肝脏组织及超微结构,并测定血清单胺氧化酶(MAO)、羟脯氨酸(HP)含量。结果:软肝解毒煎组MAO,HP含量较模型组显著下降,均P<0.01,模型组肝组织大量胶原纤维增生,脂肪变性严重;软肝解毒煎组胶原纤维增生不明显,肝组织学及超微结构损伤显著减轻。结论:软肝解毒煎能有效预防酒精性肝纤维化。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠TGF-β1表达的影响

目的：观察银杏叶提取物（GbE）的抗大鼠肝纤维化作用及其作用机理。方法：采用CCl4诱导大鼠肝纤维化，同时分别以3个剂量的GbE进行干预，并设复方鳖甲软肝片为对照组，6周后取肝组织进行HE及Masson染色，观察肝组织炎症活动度及肝纤维化程度，采用免疫组化法测定肝组织α-SMA、TGF-β1蛋白表达，采用RT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达。结果：GbE各剂量组及复方鳖甲软肝片组肝组织炎症活动度及肝纤维化程度较模型组明显改善，α-SMA蛋白表达及TGF-β1 mRNA和蛋白表达也较模型组显著下降。结论：GbE可能通过抑制肝星状细胞的激活和转化，降低α-SMA蛋白表达及TGF-β1的转录及表达，抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化的发生及发展。     

健脾软肝方对四氯化碳致肝纤维化大鼠α-SMA及其mRNA表达的影响

目的:明确健脾软肝方对肝纤维化大鼠α-SMA及其mRNA表达的影响,初步探讨健脾软肝方防治肝纤维化的作用机制,为肝纤维化的中医临床治疗提供实验依据。方法:选取Wistar雄性大鼠72只,随机分为正常组、模型组、扶正化瘀胶囊组、健脾软肝方高、中、低剂量组。模型组利用CCl4对大鼠进行腹腔注射,按0.2 m L/100 g腹腔注射30%CCl4与70%橄榄油混合溶液,正常组注射等量生理盐水,2次/周,4周后复制大鼠肝纤维化动物模型,该实验采用免疫组化ABC法检测肝纤维化大鼠α-SMA蛋白的表达水平,采用Real-time PCR法检测肝纤维化大鼠α-SMA mRNA的表达水平,采用H-E染色和Mallory染色观察大鼠肝纤维化的病变程度。结果:模型组α-SMA蛋白表达显著上升(P0.05);健脾软肝方高、中、低剂量组组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05),其中高、中、低剂量组之间α-SMA蛋白阳性表达逐渐升高,可以呈一定的药物依赖关系。模型组α-SMA mRNA表达显著上升(P0.05);健脾软肝方高、中、低剂量组组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05),且高、中、低剂量组之间α-SMA mRNA表达水平逐渐升高,呈一定的药物依赖关系。结论:健脾软肝方抗肝纤维化的作用机制可能与抑制大鼠肝脏内α-SMA及其mRNA的表达有关。     

复方鳖甲软肝片对肝纤维化大鼠肝组织环氧合酶-2表达影响的实验研究

目的：观察复方鳖甲软肝片对肝纤维大鼠肝组织环氧合酶-2（COX-2）表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法：采用40%的CCl4皮下注射6周建立大鼠肝纤维化模型,同时以1g/kg·d-1的复方鳖甲软肝片灌胃干预6周,原位杂交检测肝组织COX-2mRNA表达,免疫组化检测肝组织α-SMA、COX-2蛋白表达,放免法检测肝组织匀浆血栓烷B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-KetoPGF1α）含量。结果：模型组大鼠肝组织α-SMA蛋白、COX-2mRNA和蛋白表达均较正常组明显增强,肝组织TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值也较正常组显著增高,COX-2与α-SMA表达呈明显正相关;应用复方鳖甲软肝片干预后,大鼠α-SMA蛋白、COX-2mRNA和蛋白表达均明显减少,肝组织TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值显著下降。结论：COX-2参与CCl4诱导肝纤维化的发病,复方鳖甲软肝片下调肝纤维化大鼠肝组织COX-2表达可是其抗肝纤维化的作用机制之一。     

黄芪汤对大鼠酒精性肝纤维化的保护作用

目的:探讨黄芪汤对酒精性肝纤维化的保护作用。方法:75只大鼠随机分为3组,对照组,模型组和黄芪汤治疗组。用连续灌服酒精的方法建立大鼠酒精性肝纤维化模型,在造模同时给予治疗组灌服黄芪汤。共12周,之后处死大鼠,取肝组织标本,光镜观察肝脏的病理变化,测定血清一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)、IL-6和ICAM-1表达,及肝脏匀浆一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的表达。结果:黄芪汤能减轻酒精性肝纤维化的组织病理改变。酒精性肝纤维化中,血清和肝脏匀浆NO和N 0S,血清IL-6和ICAM-1及其表达增加。结论:黄芪汤可显著抑制NO、NOS和IL-6及ICAM的表达(P<0.01),黄芪汤对酒精性肝纤维化有治疗作用。     

虎金颗粒对肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原及TIMP-1表达的影响

目的:探讨虎金颗粒对免疫性肝纤维化大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法:建立猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化模型,并给予虎金颗粒进行治疗,采用免疫组化法检测肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达,并通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定肝组织中TIMP-1mRNA的表达。结果:虎金颗粒可使受试动物肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原增生减少,纤维间隔变窄,肝组织TIMP-1 mRNA表达降低,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论:虎金颗粒可通过抑制肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和TIMP-1的合成表达,而发挥抗纤维化作用。     

软肝和脾丸对肝纤维化模型大鼠的影响

目的:探讨软肝和脾丸对肝纤维化的治疗作用。方法:用四氯化碳建立大鼠肝纤维化模型,给予软肝和脾丸混悬液治疗8周。测定血清和肝脏匀浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的表达,VG染色检测肝脏组织中胶原纤维的表达,免疫组化检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)和血小板源性生长因子(PDGF)的表达。结果:软肝和脾丸能减轻肝纤维化的组织病理改变,降低肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维的表达。软肝和脾丸可显著抑制MDA、NO、NOS、TGF-β1和PDGF的表达(P<0.01)。结论:软肝和脾丸对肝纤维化有治疗作用,其作用机制可能与影响MDA、NO、NOS、TGF-β1和PDGF的表达水平相关。