双弹头组合单抗免疫导向治疗肝癌的实验研究

以肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８、ＨＡｂ２５为载体，以￣（１３１）Ｉ、阿霉素（ＡＤＭ）为“弹头”．应用间接交联方法及氯胺Ｔ法，制备出肝癌“双弹头组合单抗”免疫导向偶合物［￣（１３１）Ｉ－ＨＡｂ１８－ＡＤＭ］／［￣（１３１）Ｉ－ＨＡｂ２５－ＡＤＭ］，其标记率４９．８％，比放射性６．８８×１０４Ｂｑ／μｇ，免疫结合率４２．５％。细胞毒实验结果显示双弹头组合单抗偶合物杀伤力显著强于单弹头单抗体偶合物（Ｐ＜０．０５）。荷肝癌棵鼠导向治疗实验，１６８小时ＳＰＥＣＴ扫描清楚定位，瘤／肝比值３．７３５±０．１２０，治疗效果显著强于其它各组（Ｐ＜０．０５）。上述结果表明，“双弹头”集中了化疗与放疗优点，二者协同，明显提高了杀伤效应；组合单抗较好地消除了肿瘤异质性对导向治疗的影响。     

肝癌“双弹头”组合单抗导向治疗的实验研究

肝癌＂双弹头＂组合单抗导向治疗的实验研究隋延仿，刘利，王文亮，刘彦仿，陈志南第四军医大学病理学教研室（西安７１００３２）目前，肝癌免疫导向治疗在肝癌综合治疗中已发挥了重要作用，但是，已有资料显示，它的临床应用效果远不令人满意。我们在分析了这项治疗技术...     

肝癌“双弹头”免疫导向药物的实验研究

以肝细胞癌单克隆抗体ＨＡｂ１８为载体，应用间接交流方法及氯胺Ｔ法，将１３１Ｉ和抗癌药物阿霉素（ＡＤＭ）连接到ＨＡｂ１８上，制备出“双弹头”肝癌免疫导向药物１３１Ｉ─ＨＡｂ１８─ＡＤＭ，其标记率为８５％，比放射性为７．７３×ｌ０４Ｂｑ／μｇ（１．９８μＣｉ／μｇ），免疫结合率为４３．５％。细胞毒实验结果显示，１３１Ｉ─ＨＡｂ１８─ＡＤＭ对靶肿瘤细胞ＳＭＭＣ─７７２１的杀伤效果明显强于ＨＡｂ１８─ＡＤＭ、ＨＡｂ１８─１３１Ｉ、ＡＭＤ。１３１Ｉ─ＨＡｂ１８─ＡＤＭ具有选择性的高效杀伤作用，它集中了化疗与内放射治疗的优点，互相补充，展示了肿瘤导向治疗的光明前景。     

~（131）Ⅰ－抗AFP抗体导向治疗肝癌的临床观察

１９８０～１９９３年，用（１３１）Ⅰ－抗ＡＦＰ抗体治疗不能切除肝癌７２例（１５３例次），治疗≥２次占４７例，平均（１３１）Ⅰ量为３１．８７（６．４～９７．４）Ｍｃｉ，中位数２７．４ｍｃｉ（１０１３．８ＭＢｑ）。结果：总有效率２０．８％（１５／７２），治后一年生存率３３．３％（２２／６６）；治疗≥２，≥３，≥４次者有效率分别为２９．８％（１４／４７）、６０．０％（９／１５）和７０．０％（７／１０）；一年生存率依次为４５．７％、７３．３％和８０．０％；瘤大小：≤７ｃｍ，７．１～１０ｃｍ和＞１０ｃｍ患者，治后瘤缩小率分别为１００．０％、７６．９％和５３．９％；一年生存率８７．５％、４８．０％和１５．４％；经肝动脉灌注治疗有效率高于ｉｖ给药者（６４．３％：１５．２％），一年生存率亦高于ｉｖ（６４．３％：３７．５％）。本研究表明，（１３１）Ⅰ－抗ＡＦＰ抗体导向治疗肝癌具有明显疗效。     

“双弹头”抗AFP抗体对肝癌导向综合治疗的实验和临床研究

为增强导向治疗的“弹头”杀伤力，提高肝癌导向综合治疗的疗效，对马抗人ＡＦＰ抗体进行了１３１Ⅰ和丝裂霉素（ＭＭＣ）双标记，制备同时携带１３１Ⅰ和ＭＭＣ的“双弹头”马抗人ＡＦＰ抗体（１３１Ⅰ－ＡＦＰＡｂ－ＭＭＣ）。荷人肝癌裸鼠的定位显像和抑癌率实验显示１３１Ⅰ－ＡＦＰＡｂ－ＭＭＣ具有良好的定位显像作用，抑癌率达７３．５％，明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。２２例配对的中晚期原发性肝癌患者的“双弹头”导向综合治疗结果：治疗组的有效率（ＣＲ＋ＰＲ＋ＭＲ）为６３．２％明显高于对照组（３１．８％），Ｐ＜０．０５；治疗组的１年生存率（５２．６％）亦明显高于对照组（２２．７％）Ｐ＜０．０５，且无严重毒副作用。表明：１３１Ⅰ－ＡＦＰＡｂ－ＭＭＣ的“双弹头”导向综合治疗可提高中晚期原发性肝癌的疗效     

阿霉素－转铁蛋白受体单抗偶连物对人肝细胞癌导向治疗的实验研究

作者以ＤｅｘｔｒａｎＴ＿（１０）为偶连剂，将阿霉素与抗转铁蛋白受体单克隆抗体共价交连，组成偶连物，再将其用于荷人肝细胞癌裸鼠的治疗。每只裸鼠皮下接种１×１０￣７个ＳＭＭＣ－７７２１人肝癌细胞，接种瘤细胞后第２、５、８天给药，逐日观察肿瘤大小，计算肿瘤几何平均直径（ＧＭＤ），并记录潜伏期。第３５日处死所有动物，剥取肿瘤称湿重，取脾脏测定淋巴细胞自然杀伤（ＮＫ）活性。结果表明，导向治疗组潜伏期（３３．０天）较单纯阿霉素组（２５．０天）明显延长，处死日导向治疗组ＧＭＤ（３．８０ｍｍ±１．９ｍｍ）还小于单纯阿霉素组（６．６９ｍｍ±２．３ｍｍ），其差异具有显著性意义（ｐ＜０．０５）。此外，导向治疗组ＮＫ活性（２８．２％±８．２％）亦显著高于单纯阿霉素组（１５．１％±３．６％）其差异具有显著性意义（Ｐ＜０．０５），此结果提示，阿霉素—转铁蛋白受体单抗偶连物可用于人肝癌的导向治疗。     

^131I—抗AFP—MMC“双弹头”导向治疗原发性肝癌毒副反应观察

目的：研究“双弹头”导向治疗原发性肝癌毒副反应。方法：用１３１Ｉ－抗ＡＦＰ－ＭＭＣ“双弹头”导向治疗原发性肝癌２９例（５４例次），用自身对照设计（单组比较设计），全组１３１Ｉ－平均治疗剂量为６２．０９×１０７Ｂｑ，（２１．５３～１４９．１１）×１０７Ｂｑ。结果：治疗后外周血象无明显变化，心和肾功能正常，肝功能ＡＬＴ有７例轻度升高；甲状腺功能Ｔ３、Ｔ４值下降分别有３例和１例，过敏反应出现３例。结论：本组治疗耐受性良好，毒副反应轻微。     

^131I—抗AFPMcAb—MMC“双弹头”免疫导向治疗原发性肝癌的临床观察

研制一种新型的集化疗和内照射治疗于一体的“双弹头”免疫导向治疗药物＾１３１Ｉ－抗ＡＦ－ＰＭｃＡｂ－ＭＭＣ，并初步观察其临床疗效。药物采用以大鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体为载体，丝裂霉素Ｃ和＾１３１Ｉ为双弹头，通过直接偶联和改良氯胺Ｔ法制备，静脉给药治疗１２例中晚期原发性肝癌，疗效与同期进行经动脉插管灌注或加栓塞的１４例对照组比较，导向组肿瘤缩小率、血清ＡＦＰ下降率及１年生存率分别为４５．５％、８３．３     

放射性核素标记抗体导向治疗原发性肝癌的研究现状

放射性核素标记抗体导向治疗原发性肝癌的研究现状广西医科大学附属肿瘤医院（５３００２１）李志革综述吴英德审校导向治疗为手术不能切除的中、晚期肝癌提供了一种有希望的治疗模式，因此是原发性肝癌治疗中值得探索的课题。现就近年应用核素１３１Ⅰ标记抗体治疗肝癌的...     

放射与抗VEGF抗体对人肝癌移植瘤生长的抑制作用

目的观察放射与抗VEGF单抗对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法SMMC-7721肝癌细胞种植于裸鼠后肢皮下,成瘤动物分为放射+抗体组、放射组、抗体组和对照组,单抗每次每只50μg隔日腹腔给药,共6次,放射剂量20Gy一次给予,测肿瘤直径并计算瘤体积。抗体给药结束后2周处死动物,称瘤重,免疫组化法测肿瘤微血管密度。结果放射和抗VEGF单抗明显抑制肿瘤生长,减少肿瘤微血管密度,但两组之间差异无显著性。放射与抗VEGF单抗联合较单纯放射或抗体抑瘤作用显著,三组瘤重抑制率分别为89.2%、75.3%和65.9%,差异有显著性。结论放射结合抗VEGF单抗显著抑制肝癌移植瘤生长,是肝癌综合治疗的有效途径。     

人醛缩酶A单抗ELISA对原发性肝细胞癌诊断价值的探讨

从人骨骼肌纯化醛缩酶（ＡＬＤ）Ａ，制备抗人ＡＬＤ－Ａ单克隆抗体，首次建立了测定血清ＡＬＤ－Ａ的竞争性ＥＬＩＳＡ，最小检出量０．１ｎｇ／ｍｌ，对ＡＬＤ－Ｂ和Ｃ无交叉反应。６０例正常人血清含量１３１±２４ｎｇ／ｍｌ，上限１７９ｎｇ／ｍｌ，均未超过此限；原发性肝细胞癌４５例５５４±１９３ｎｇ／ｍｌ，阳性率９５．５％（４４／４５），两组差异有非常显著意义（Ｐ＜０．００１）。对肝癌诊断有实用价值。单抗可大量制备，能使ＡＬＤ－Ａ检测标准化。     

原发性肝癌复发转移防治的临床与基础研究

简述近年复旦大学肝癌研究所获“九五”国家科技攻关等基金的资助对防治原发性肝癌复发转移的临床与基础研究课题的一些进展。在临床研究方面,亚临床复发作再切除手术是进一步提高疗效的主要途径,但预防复发则甚为困难。术后栓塞化疗（TACE）、生物治疗、术中肝动脉插管、冷冻肝切除等,可能有助于降低术后复发率。在实验研究方面,建立了人肝癌转移动物模型和细胞株。在分子水平对肝癌侵袭性作了研究,初步发现CerbB2、p12、p21、p53、mdm-2、VEGF、TGFα、EGF受体、MMP－2、uPA、uPA－R、ICAM－1与肝癌侵袭性呈正相关;nm23-H1、TIMP－2、Integrinα、E－cadherin、Kai-1则呈负相关。在实验性干预治疗方面,反义H－ras、Suramin、Heparin、抗肿瘤血管生成TNP－470、抗CD3／抗HBx的双特异抗体合并LAK治疗、基质金属蛋白酶抑制剂BBP－94及我所自行设计的β肽等对肝癌转移模型均有抑制转移的作用。预期生物治疗、转移复发的预测指标、多模式的干预治疗对防治肝癌转移甚为重要,其中抗肿瘤血管途径尤为突出。     

A Novel Monoclonal Antibody against Squamous Cell Carcinoma

The monoclonal antibody, INS-2, was raised against rat fibroblasts transformed by open reading frames E6 and E7 of human papillomavirus (HPV) DNA. In immunoperoxidase testing of frozen sections, the INS-2 antibody was reactive with all squamous cell carcinomas of the uterine cervix and esophagus tested. In contrast, no antibody binding was detected with adenocarcinomas of various origins. Similarly, normal tissues, lymphoid cells and erythrocytes from multiple donors were negative, except that binding localized at basal cells in normal squamous epithelium was observed. Interestingly, strong staining was observed in dysplastic cells of cervical intraepithelial neoplasia and at the growing edge of squamous cell carcinomas. The antigen for the INS-2 antibody is a non-sialyl glycoprotein with Mw. 40,000 and appears to be a squamous cell-specific cell differentiation marker, although it is not related to HPV-DNA-derived protein.     

肝癌188Re放射免疫治疗的实验研究

目的：研究新型核素188Re标记的抗人肝癌单抗片段HAb18 F（ab′）2对荷肝癌移植瘤裸鼠的抑瘤效应。方法：建立荷人肝癌移植瘤裸鼠模型。选择肿瘤体积为（30～150）mm3的动物随机分5组，其中3组分别尾静脉注射188Re－HAb18 F（ab′）2 3．7、11．1和18．5MBq，给药2次，观察动物体重和肿瘤体积变化。处死动物，摘取瘤体，石蜡包埋，进行HE染色。结果：3组剂量均有不同程度的抑瘤作用，且随着剂量的增加，抑瘤效应增加。低剂量组和中剂量组动物平均体重和生理盐水对照组相比无显著性差异(P＞0．05)。组织学检查表明，随着剂量的增加，肿瘤细胞核形态发生明显的变化，从凝固、核碎裂直至溶解。结论：188Re－HAb18 F（ab′）2是一种新型核素的肝癌导向治疗剂，具有潜在的临床应用前景，本文的研究可为其过渡到临床研究提供参考依据。     

原发性肝癌患者血清丙型肝炎病毒抗体测定及其临床意义

作者应用抗丙型肝炎病毒(HCV)酶联免疫分析(EIA)试剂盒,对50例原发性肝细胞癌(HCC)患者作了抗HCV检测;同时以40例健康成年献血员作为对照组。血清抗HCV罹患率在对照组为5％(2/40),而在HCC组为10％(5/50)。两组之间无明显差异(P>0.05),但HCC组5例抗HCV阳性者均伴有HBV感染。因此建议今后在对健康献血员作肝功能及HBV系列测定的同时,应作抗HCV测定;对抗HCV阳性者,应进一步作HCV的PCR检测,并应极治疗。     

Establishment of an Enzyme Immunoassay Using Monoclonal Antibody (HG1-219) and Its Application for the Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma

A monoclonal antibody (MoAb HG1-219) against a human gastric cancer cell line (HuG-1) and its shedding antigen (HG1-219 Ag) was generated and a solid-phase sandwich enzyme immunoassay (EIA-219) was developed. The mean serum HG1-219 Ag concentration in normal individuals was 30.5 ± 14.5 U/ml measured by EIA-219. When the mean + 3 SD of the antigen concentration in normal individuals was used as a cut-off level, 4.3% (2/47) of patients with chronic hepatitis, 9.1% (4/44) of cirrhotic patients and 37.5% (18/48) of patients with hepatocellular carcinoma (HCC) had HG1-219 Ag above the cut-off value. The positive rates of a-fetoprotein (AFP) (> 400 ng/ml) and protein induced by vitamin K absence or antagonist-II (PIVKA-II) for HCC were 26.7% (12/45) and 33.3% (12/36), respectively. There was no significant correlation between HG1–219 Ag and AFP or PIVKA-II in patients with HCC. The combination assay of EIA-219, AFP and PIVKA-II for HCC gave the positive rate of 75% (27/36). The effect of periodic acid on the HG1-219 Ag and the inhibition of EIA-219 by CA 19–9 suggest that the epitope of HG1–219 Ag is a suger chain similar to CA 19–9.     

肝癌研究进展

肝癌的研究在近半个世纪取得了很大进步。由于进一步弄清了病因因素,肝癌的预防已经有了可能,包括新生儿乙型肝炎疫苗接种、通过干扰素治疗肝炎以及改良饮水等,使肝癌的发病率降低。一组前瞻性随机分组筛查试验提示筛查确能降低肝癌死亡率。肝癌标记和影像医学的进步,使1cm的小肝部也不难检出。手术切除在改善肝癌预后方面继续起关键作用。我所415生存5年以上的病人中,95.4％曾接受一期或二期切除;1106例小肝癌切除的5年生存率达63.7％;109例不能切除肝癌经姑息性外科治疗缩小后发除的5年生存率达62.2％。大系列的肝癌切除和肝移植的对比分析,提示肝移植只适于因肝功能差而不宜切除的小肝癌。单一外科治疗已被“外科为主、局部治疗为辅、多种模式有机结合”所代替。临床研究强调“以证据为基础”,惜经证实对肝癌有效的药物不多。肝癌复发转移的研究将成为21世纪的研究重点。