基因治疗假肥大型肌营养不良症后机体的免疫反应

假肥大型肌营养不良症(DMD)是抗肌萎缩蛋白(dystrophin)基因突变致肌膜上dystrophin完全或部分缺失引起的。基因或干细胞治疗该病的目的是使其表达有功能的dystrophin,因多数DMD患者治疗前体内没有dystrophin,基因治疗后正常的dystrophin会被患者的免疫系统识别并引发免疫反应,进一步破坏病变的肌肉组织。本文介绍了基因治疗DMD后机体产生抗dystrophin的机制及免疫耐受,并探讨了今后临床治疗DMD的策略。     

假性肥大型肌营养不良症的基因治疗进展

假性肥大型肌营养不良症的基因治疗方法有成肌细胞移植、基因替代治疗 (腺病毒介导的肌营养蛋白基因和utrophin基因治疗 )、寡聚核苷酸治疗、氨基糖甙类治疗等。对成肌细胞进行永生化处理后移植 ,改进腺病毒载体和携带的基因以提高基因表达效率、减少毒性 ,合成特殊序列的寡聚核苷酸和以庆大霉素为代表的氨基糖甙类治疗等实验性治疗 ,在实验鼠上发现它们可不同程度地提高注射区肌纤维内肌营养蛋白的表达、离体肌纤维对高压反常收缩力的反应能力增加、对微量伊文氏蓝染料的通透性明显降低、减轻或延缓病理改变 ,但这些治疗的作用范围有限、持续时间短、对心肌的病变效果较差等问题有待进一步研究。     

假肥大型肌营养不良症基因治疗的成就和展望

假肥大型肌营养不良症基因治疗的成就和展望刘焯霖盛文利假肥大型肌营养不良症（ＤＭＤ）是神经肌肉系统最常见的Ｘ－连锁隐性遗传病。患者绝大多数为男性，通常在儿童期发病。临床主要表现为骨骼肌的进行性无力、萎缩，小腿腓肠肌的假性肥大等。与Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型的临...     

假肥大型肌营养不良症与氧自由基

Duchenne肌营养不良症(DMD)是一种X连锁隐性遗传性疾病,但对其发病机理仍不清楚.本文综述了近年来国内外有关DMD发病中氧自由基损害的研究进展.对自由基的特性,肌细胞破坏的机制及DMD抗氧化系统等方面作了阐述.     

假肥大型肌营养不良症2例

1临床资料例1：16岁,男性,因＂进行性四肢无力8a,加重半年＂于2011-06-30入院。8a前无明显诱因开始出现四肢无力,初尚能行走,端碗持筷,但步行蹒跚,逐渐加重;半年前发展至行走不能,双上肢活动费力,持物不稳,并出现四肢肌肉萎缩,于外院考虑：肌营养不良,未予以特殊处理。体格检查：     

假肥大型肌营养不良症的分子遗传学研究进展

本文综述了假肥大型肌营养不良症近几年来在分子遗传学方面的研究进展。涉及到有关DMD基因的染色体定位、基因鉴定、基因的结构本质、基因产物及其作用、DMD与BMD临床表现的差异及其可能的解释等方面。分子遗传学及遗传工程技术的发展为阐明本病的发病机理及提供有效的诊治手段开辟了广阔的前景。     

迪谢内肌营养不良症基因治疗的评价和问题

迪谢内肌营养不良症 (Ｄｕｃｈｅｎｎｅｍｕｓｃｕｌａｒｄｙｓｔｒｏｐｈｙ,ＤＭＤ)是一种以骨骼肌进行性变性、坏死为主要病理特征的致死性的Ｘ 性连锁隐性遗传性肌病。其发病率为男性活婴的 1/ 35 0 0 ,患者通常 3～ 5岁起病 ,主要表现为骨骼肌进行性近端无力、萎缩、腓肠肌假性肥大 ,12岁前丧失行走能力 ,通常于 2 0岁左右因呼吸衰竭或心力衰竭死亡[1] 。分子病理学研究证实 ,由于ＤＭＤ基因部分区域的缺失、重复或点突变 ,导致肌细胞膜上该基因编码的抗肌萎缩蛋白[2 ] (ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ ,Ｄｙｓ)的缺乏或结构变异 ,引起肌细胞膜的…     

肌营养不良蛋白在假肥大肌营养不良症肌组织中的表达研究

目的检测假肥大肌营养不良症肌组织中肌营养不良蛋白（ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ）的表达。方法用针对ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ棒状区第１５～１８重复区域的多克隆抗血清Ａｎｔｉ５～７，对２２例Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型（ＤＭＤ）和４例Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良症（ＢＭＤ）患者及１１例无神经肌肉疾病的急诊外伤患者（作为对照）的肌组织进行免疫组化分析。结果在对照组肌细胞中ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ存在着可达检测水平的表达，并特异地定位于肌细胞膜上。１９例ＤＭＤ没有可达检测水平的ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ表达，３例ＤＭＤ存在着ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ表达。４例ＢＭＤ肌细胞膜上则呈现出斑片状、不连续ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ弱阳性表达。结论ｄｙｓ－ｔｒｏｐｈｉｎ的缺乏是造成ＤＭＤ／ＢＭＤ表型的基本生化因素，此方法为临床上对ＤＭＤ／ＢＭＤ患者作出确诊提供了直接的特异生化测试指标。     

肌营养不良症的基因治疗

现行的几种针对肌营养不良症的基因治疗方法的综述,包括肌母细胞移植、质粒直接注射、逆转录病毒和腺病毒基因重组体等的优点和局限,指出现存的问题和解决这些问题的构想与方向。     

假肥大型肌营养不良中肌聚糖的改变及其意义

假肥大型肌营养不良是由于肌膜上ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ完全或部分缺乏引起的。近年研究发现 ,在肌膜上还存在肌聚糖 (ＳＧ)等ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ相关蛋白。ＳＧ为跨膜糖蛋白 ,包括α、β、γ、δ ＳＧ等。为深入了解迪谢内肌营养不良 (ＤＭＤ)和贝克肌营养不良 (ＢＭＤ)的发病机制 ,我们研究ＳＧ在ＤＭＤ和ＢＭＤ中的变化 ,并分析其意义。研究对象 :ＤＭＤ和ＢＭＤ根据临床表现、ＣＫ水平、肌电图、肌肉病理、ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ免疫组化染色以及家族遗传史作出诊断。ＤＭＤ1 4例 ,年龄 4～ 1 1岁 ;ＢＭＤ1 6例 ,年龄 6～ 2 9岁 ,均为男…     

假肥大型肌营养不良症40例临床特征与基因诊断

目的对假肥大型肌营养不良症（DMD／BMD）患者总结其临床特征并进行基因诊断,以提高对DMD／BMD疾病的认识及诊断水平。方法对40例DMD／BMD患者临床特征进行总结包括临床表现、血清肌酶、肌电图及肌肉活检等,并应用18对引物多重PCR的方法对其进行Dystrophin基因缺失诊断。结果DMD／BMD为儿童期隐匿起病、缓慢进行性加重,以肌无力和肌萎缩为特点,主要选择性侵犯四肢近端肌、盆带肌、腰带肌等,可有肌肉假性肥大,有些患者可有智能减退和心肌损害;血清肌酶水平异常增高,肌电图示肌源性损害,肌肉活检呈肌病特征。基因诊断27例存在外显子片段缺失,13例未检测到缺失。结论识别DMD／BMD的临床特征有助于提高对其的诊断水平,多重PCR作为一种简便快速的诊断方法可对DMD／BMD患者进行基因诊断。     

假肥大型肌营养不良患者dystrophin基因缺失断裂点的分子结构特点

目的分析假肥大型肌营养不良患者dystrophin基因缺失断裂点的分子结构特点，探讨dystrophin基因缺失的发生机制。方法以PCR步移法定位2例DMD患者基因断裂位点，克隆其缺失连接片段并测序，通过Pubmed文献检索获取既往55例缺失连接片段序列资料，对以上57例缺失连接片段5′端和3′端断裂点两侧的序列进行重复序列、基质附着区、TTTAAA序列以及基因缺失后修复方式的分析。结果57例缺失连接片段中40．4％断裂点位于重复序列，其中主要是L1元件和Alu元件；36．3％断裂点在邻近基质附着区5kb之内的区域；15．0％断裂点两侧50bp的范围内发现有，TTTAAA序列；基因缺失后修复的方式仅1例通过Alu元件同源连接，其余56例通过非同源末端连接进行修复，非同源末端连接以形成1～4bp的微小同源序列为主。结论重复序列、基质附着区、TTTAAA序列以及非同源末端连接修复机制均在一定程度上参与dystrophin基因的断裂重组。dystrophin基因缺失可能是由以上多种因素的综合作用所导致，染色体的物理结构可能在基因缺失中起主要作用。     

肌营养不良症的基因治疗

基因治疗是治疗包括肌营养不良症在内的多种神经系统疾病的最有前途的手段。本文综述现行的几种针对肌营养不良症的基因治疗方法,包括肌母细胞移植、质粒直接注射、逆转录病毒和腺病毒基因重组体等,介绍各种方法的优点和局限,指出现存的问题和解决这些问题的构想与方向。     

假肥大型肌营养不良患者的临床病理研究

目的探讨假肥大型肌营养不良症（PMD）患者的肌活检病理与其临床表现的相关性。方法选择 2010年 1月至 2016年 11月在南京大学医学院附属鼓楼医院病理科行肌活检确诊的 37例 PMD患者为研究对象,其中 Duchenne型肌营养不良症（DMD）15例,Becker型肌营养不良症（BMD）22例,所有患者均行改良 Gardner-Medwin and Walton（GM-W）量表评估其运动功能,骨骼肌活检观察肌肉病理改变。分析患者 GM-W评分与年龄、病程、核内移以及肥大因子/萎缩因子比例的相关性,比较GM-W评分≤ 3分和GM-W评分≥ 4分两组之间的主要病理特点差异。结果患者的 GM-W评分与年龄（r=0.453, P=0.005）和病程（r=0.578,P＜ 0.001）相关。其中 GM-W评分≥ 4分的 21例患者呈轻度、中度、重度核内移分别为 1例、6例和 14例,肥大因子/萎缩因子比例中位数为 2.09（1.71,3.41）;GM-W评分≤ 3分的 16例患者呈轻度、中度、重度核内移分别为8例、5例和3例,肥大因子/萎缩因子比例中位数为 1.77（1.51, 2.47）。GM-W评分与肌纤维核内移、肥大因子 /萎缩因子比例均明显相关（r=0.589,0.615;P＜ 0.001）GM-W评分≥ 4分和GM-W评分≤ 3分两组比较,核内移及肥大因子/萎缩因子比例的差异有统计学义（Z=-4.860,61.00;P ≤ 0.001）。结论假肥大型肌营养不良症患者的病理改变与临床表现严重程度相意。关,GM-W评分可为评估疾病的严重程度和进展情况提供依据。     

两步多重聚合酶链反应对假肥大型肌营养不良的基因诊断

应用分子生物学技术，用９组寡核苷酸引物分两步多重聚合酶链反应扩增ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因的９段脱氧核糖核酸序列。对３６例ＤＭＤ和４例ＢＭＤ进行基因诊断。首先用缺失率较高的５对引物扩增，检出缺失者１７例，再用４对引物扩增，检出缺失者２例。这样，９对引物多重ＰＣＲ总缺失率占受检患者的４７．５％，表明此法可检测出７９．１％左右有基因缺失的患者。实验结果提示，两步多重ＰＣＲ可用于ＤＭＤ／ＢＭＤ的基因诊断。     

两步—多重PCR诊断134例假肥大型进行性肌营养不良症基因缺失

研究临床检测假肥大型进行性肌营养不良症（ＤＭＤ／ＢＭＤ）基因缺失的有效手段。方法运用两步－多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术诊断ＤＭＤ／ＢＭＤ基因缺失。结果１３４例病人中，检测阳性率为４９．３％（６６／１３４）。结论多重ＰＣＲ诊断ＤＭＤ／ＢＭＤ基因缺失敏感、快速、准确，可在临床推广应用。     

两步多重聚合酶链反应对假肥大型肌营养不良的基因诊断

应用分子生物学技术，用９组寡核苷酸引物分两步多重聚合酶链反应（ｍＰＣＲ）扩增ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因的９段脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）序列。对３６例ＤＭＤ和４例ＢＭＤ进行基因诊断。首先用缺失率较高的５对引物扩增，检出缺失者１７例，再用４对引物扩增，检出缺失者２例。这样，９对引物多重ＰＣＲ总缺失率占受检患者的４７．５％，表明此法可检测出７９．１％左右有基因缺失的患者。实验结果提示，两步多重ＰＣＲ可用于ＤＭＤ／ＢＭＤ的基因诊断。文中从ＤＭＤ／ＢＭＤ的临床表型与基因缺失的关系上进行了比较、探讨。     

假肥大型进行性营养不良症红细胞超氧化物歧化酶的研究

为探讨引起DMD膜损害的因素，测定了37名DMD病人15名基因携带者红细胞SOD，并与年龄匹配的45名正常人，17名婴儿型、Kugelberg-Welander型脊性肌萎缩进行比较，结果说明DMD病人红细胞SOD活性升高，早期显著，而基因携带者及其余疾病无改变。     

假肥大型肌营养不良症患者及携带者的致病基因突变检测

目的 检测假肥大型肌营养不良症患者及携带者的dystrophin基因致病突变类型,为防止假肥大型肌营养不良症的再发提供信息.方法 利用多重引物连接依赖式扩增技术和变性高效液相色谱技术检测临床研究发现的20例假肥大型肌营养不良症患者的DMD基因突变.结果 缺失突变10例,重复突变1例,终止密码子突变4例,5例未发现致病突变.结论 通过致病突变的检测可以为防止患者家庭假肥大型肌营养不良症的再发提供优生优育指导.     

肌型肌酸激酶同工酶亚型在早期诊断假肥大型肌营养不良中的价值

目的 研究假肥大型肌营养不良（DMD）患者肌型肌酸激酶（CK－MM）亚型的变化,为早期诊断和正确评价病情提供依据。方法 采用不连续缓冲体系,在稳流低压条件下电泳分离CK－MM型亚,荧光扫描。结果 随着DMD患者病情的加重,其不同阶段的MM2／MM1均与对照组差异显著（P＜0．05）,DMD患者不同阶段的MM2／MM1值差异也显著（P＜0．05）,结论 CK－MM亚型的改变是DMD的早期诊断指标,是判断病情及科学评价治疗效果的依据。