20例中国人HCVⅡ/1b型高变区1序列变异的动态观察

目的 动态研究中国人群ＨＣＶⅡ／１ｂ型包膜蛋白Ｅ２／ＮＳ１高变区１（ＨＶＲ１）序列变异规律、意义及影响因素。方法 应用逆转录巢式ＰＣＲ技术从２０例ＨＣＶⅡ／１ｂ型感染的中国病人血清中扩增了ＨＣＶ部分包膜区基因片段（ｎｔ１４４９～１５８６，ＨＣＶ－Ｊ），纯化后直接采用双脱氧链末端终止法进行序列分析。结果 中国人群ＨＣＶ ＨＶＲ１位于氨基酸（ＡＡ）３８４～４１０位，有６个较保守的ＡＡ位点；３８５位Ｔｈ     

重型乙型肝炎病人中乙型肝炎病毒C基因启动子变异的研究

目的　了解重型乙型肝炎（ 乙肝） 病人血清乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡＣ基因启动子（ＣＰ） 的变异。方法　对用聚合酶链反应（ＰＣＲ） 法扩增的血清ＨＢＶＤＮＡ 直接测序。结果　７ 例亚急性重型肝炎病人的ＨＢＶ 分离株ＣＰ区分别有２～１２ 个替代变异，１ 例病人有１１ｂｐ 的碱基插入。ＣＰ变异主要发生于ＣＰ的第１ 和第２ 个ＡＴ丰富区，ｎｔ１ ７６２ 和ｎｔ１ ７６４ 的替代变异见于７ 例亚急性重型肝炎病人的４ 例中，是ＣＰ变异的热点，其中３ 例ＨＢｅＡｇ 阴性，说明和ＨＢｅＡｇ 阴性表型相关。ＣＰ的第３ 个ＡＴ丰富区、ＨＢＶ逆转录起始位点（ＤＲ１） 和前Ｃ基因、前基因组转录起始位点未见变异。结论　重型肝炎病人的ＨＢＶＣＰ区存在较多的变异，ＣＰ变异主要发生于和前Ｃ基因相关的第１ 和第２ 个ＡＴ丰富区，可能和ＨＢｅＡｇ 阴性表型相关     

对中国人群中Ⅲ／2a型HCV高变区1序列变异规律的横？…

目的 研究中国丙型肝炎患者Ⅲ／２ａ型丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）包膜蛋白Ｅ２／ＮＳ１高变区１（ＨＶＲ１）序列变异的规律及意义。方法 应用逆转录巢式ＰＣＲ技术,从３８例Ⅲ／２ａ型ＨＣＶ感染患者血清中,扩增ＨＣＶ部分包膜区基因片断（ｎｔ１４０～１５８２,ＨＣＶ－Ｊ６）,纯化后直接采用双脱氧链末端终止法进行序列分析。结果 本组Ⅲ／２ａ型ＨＣＶ ＨＶＲ１位于氨基酸（ａａ）３８４～４０８位,与有关文献报道的结果（     

丙型肝炎病毒第一高变区HVR1的研究进展

ＨＶＲ１含有丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）重要的中和性抗原表位，是疫苗研究的重要靶点。但由于其高度变异性，使ＨＶＲ１成为ＨＣＶ治疗和预防的瓶颈。本文从ＨＶＲ１的高变性、及引起宿主的体液免疫和细胞免疫反应，介绍国际上有关ＨＶＲ１的最新研究进展，这对ＨＣＶ的防治、尤其是对其预防具有重要的参考价值。     

乙型肝炎病毒核心基因变异的研究

用聚合酶键反应（ＰＣＲ）对３份肝癌组织及１份乙型肝炎表面抗原阳性但核心抗体（抗－ＨＢｃ）为阴性的无症状携带者血清，扩增及克隆了核心（Ｃ）基因。经核苷酸序列分析，与我国ＨＢＶ克隆株ＰＡＤＲ－１比较，发现无症状携带者的Ｃ基因与ＰＡＤＲ－１的基因差别不大；但自肝癌组织克隆的Ｃ基因平均每例有１５．６个核苷酸变异。结果提示，ＨＢＶ核心基因的变异与疾病的严重程度可能有关。     

用聚合酶链反应检测人肝细胞癌乙型肝炎病毒DNA和丙型肝炎病毒RNA

为研究乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）和丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＤＮＡ）与肝细胞癌的关系，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和巢式ＰＣＲ（ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）分别检测４２例肝肿瘤组织中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。结果：１例胆管细胞癌组织ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性，１例胆管囊腺瘤ＨＢＶＤＮＡ阳性。４０例肝细胞癌组织中，单纯ＨＢＶＤＮＡ阳性１９例，单纯ＨＣＶＲＮＡ阳性３例，二者均阳性１０例。ＨＢＶＤＮＡ阳性率７２．５％，ＨＣＶＲＮＡ阳性率３２．５％。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ感染与肝癌组织学分型无关；且肝细胞癌中ＨＣＶ感染与ＨＢＶ未见相关。结果提示，我国ＨＢＶ感染仍是引起肝细胞癌的主要原因。但由于肝细胞癌患者中ＨＣＶ的感染率也较高，且有上升趋势，因此ＨＣＶ可能也是肝细胞癌发生的重要原因之一。     

乙丙型肝炎病毒重叠感染时病毒的相互作用

目的　探讨乙、丙型肝炎病毒（ＨＢＶ、ＨＣＶ） 重叠感染时,病毒之间的相互作用。方法　检测３０ 例ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染患者血清病毒标志物的变化、ＨＢＶ前Ｃ区１ ８９６ 位点突变的发生比率及血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α、白细胞介素（ＩＬ）６ 含量。结果　与单纯ＨＢＶ或ＨＣＶ 感染者相比,重叠感染患者乙肝表面抗原（ＨＢｅＡｇ） 、ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ 阳性比率明显降低,乙肝ｅ 抗体（ 抗ＨＢｅ） 阳性比率明显升高,ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ ＩｇＧ 及抗ＨＣＶ 几何平均滴度也明显降低,部分患者ＨＢｓＡｇ 阴转。而ＨＢＶ前Ｃ区１ ８９６ 位点突变发生率及血清ＴＮＦα、ＩＬ６ 含量却明显高于单纯感染者。结论　ＨＢＶ、ＨＣＶ感染同一宿主时,存在相互干扰、抑制;ＨＢｅＡｇ 的消失、抗ＨＢｅ 的阳转既与ＨＣＶ对ＨＢＶ 复制的直接抑制有关,又与ＨＢＶ的前Ｃ区变异有关,且ＨＣＶ 的重叠感染可能是导致ＨＢＶ 前Ｃ区变异的原因之一,其作用机制可能与导致机体免疫压力升高有关     

丙型肝炎病毒1b型NS5 A区基因结构变异与α干扰？…

目的 观察丙型肝炎患者丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）１ｂ型基因组部分ＮＳ５ Ａ区核苷酸,氨基酸的变异情况并探讨其与α干扰素疗效的相关性。方法 患者干扰素治疗前,中,后留血标本,用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＨＣＶ病毒ＮＳ５ Ａ区部分基因片段并用直接测序法测序。与ＨＣＶ－Ｊ株及ＨＣＶ－河北株（ＨＣＶ－ＨＢ）比较核苷酸及氨基酸序列的同源性,根据α干扰素疗效分析ＨＣＶ１ｂ是否存在干扰素敏感决定区。     

乙/丙型肝炎病毒双重感染患者前C区终止变异低频率

目的了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）双重感染患者前Ｃ区基因变异，及其可能的临床意义。方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）与限制片段长度多态性（ＲＦＬＰ）来分析２５例ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性（Ａ组）和３１例ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阳性但抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ均阴性（Ｂ组）的慢性肝病患者前Ｃ区密码２８终止变异（终２８）。结果ＨＢＶ和ＨＣＶ双重感染患者（Ａ组）血清ＨＢＶＤＮＡ第１次ＰＣＲ阳性率（１６％）明显低于单独ＨＢＶ感染组（６５％）（Ｐ＜０．００１）；前Ｃ终２８检出率（２８％）亦明显低于单独ＨＢＶ感染（６８％）（Ｐ＜０．００１）。结论提示双重感染患者ＨＢＶ前Ｃ终止变异低频率可能与ＨＢＶ低水平复制有关     

甲状腺疾病与TOX,RV,MCV,HSV关系的探讨

为了探讨甲状腺疾病的诱因 ,我们利用放射免疫分析确定甲亢、甲减、桥本氏甲状腺炎患者以及正常人 ,利用他们的血清同时检测弓形体 (ＴＯＸ -ＩｇＭ) ,风疹病毒 (ＲＶ -ＩｇＭ)、巨细胞病毒 (ＭＣＶ -ＩｇＭ)、疮疹病毒 (ＨＳＶ -ＩｇＭ) ,发现甲亢、甲减、桥本氏甲状腺炎的ＴＯＲＣＨ系列阳性率明显高于正常组(ｐ <0 0 1) ;而三者之间ＴＯＲＣＨ系列推测阳性率无显著性的差别 (ｐ >0 0 5 )。提示ＴＯＲＣＨ系列病毒不仅是人体不孕症的原因之一 ,而且可能是甲状腺疾病的诱因之一。对象、方法和结果一、对象和检测指标 :(一 )正常对照组 :3…     

丙型肝炎病毒准种的研究和临床意义

丙型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ,ＨＣＶ)是一种重要的致人类肝炎病毒 ,它与瘟病毒和黄病毒有相似的基因组结构 ,在分类上归属于黄病毒家族中的一个独立的属〔1〕。与其他ＲＮＡ病毒类似。ＨＣＶ易发生变异 ,其基因序列呈高度异质性(ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ)。ＨＣＶ基因组异质性可以见于两种情况 :基因型 (ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ)和准种 (ｑｕａｓｉｓｐｅｃｉｅｓ)。其中 ,ＨＣＶ准种在病毒逃避宿主免疫监视、病毒持续存在及耐受抗病毒治疗中的重要地位日益受到重视〔2 ,3〕。但是 ,由于对准种的筛选标准尚不统一及ＰＣＲ…     

重型乙型肝炎病人中乙型肝炎病毒C基因启动子变？…

目的 了解重型乙型肝炎（乙肝）病人血清乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ Ｃ基因启动子（ＣＰ）的变异。方法 对用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法扩增的血清ＨＢＶ ＤＮＡ直接测序。结果 ７例亚急性重型肝炎病人的ＨＢＶ分离株ＣＰ区分别有２￣１２个替代变异,１例病人有１１ｂｐ的碱基插入。ＣＰ变异主要发生于ＣＰ的第１和第２个ＡＴ丰富,ｎｔｌ７６２和ｎｔｌ７６４的替代变异见于７例亚急性重型肝炎病人的４例中,是ＣＰ变异的热点,     

采用PCR技术对绒毛和羊水巨细胞病毒感染研究的比较分析

本文采用ＰＣＲ方法检测了早孕及孕中期羊水人巨细胞病毒的感染情况，孕早期１０１例绒毛的ＨＣＭＶ感染８７例，５４例羊水标本经ＰＣＲ检测发现ＨＣＭＶ阳性２４例，进一步分析三个孕期的ＨＣＭＶ感染表明ＨＣＭＶ可以经胎盘传播给胎儿，同时胎盘有一定的屏幕作用，而且母体胎儿自身也有相当的保护能力。此研究结果证实ＰＣＲ方法检测先天性ＨＣＭＶ感染敏感，快速，并具有特异性。     

HCV感染者体内病毒NS3区部分区段的演变观测

目的　观察２ 例慢性 Ｈ Ｃ Ｖ 携带者及１ 例 Ｈ Ｃ Ｖ Ｒ Ｎ Ａ 转阴者体内包含 Ｃ Ｔ Ｌ 抗原表位的 Ｈ Ｃ Ｖ Ｎ Ｓ３ 区部分区段的长期演变。方法　通过反转录 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增, Ｍ１３ 亚克隆,对３ 例 Ｈ Ｃ Ｖ 感染者的 Ｈ Ｃ Ｖ Ｎ Ｓ３ 区部分区段的一级结构进行测定。对感染者的 Ｈ Ｌ Ａ 进行分型。根据基序（ ｍｏｔｉｆ） 及 Ｈ Ｌ Ａ 分型资料预测该区段中的 Ｃ Ｔ Ｌ 抗原表位。结果　文献报道的 Ｈ Ｌ Ａ Ａ２ 限制的抗原表位在无 Ｈ Ｌ Ａ Ａ２ 的感染者 Ｃ 中,１９９１ 年至１９９６ 年氨基酸序列无变异。具有 Ｈ Ｌ Ａ Ａ２ 的感染者 Ｗ, Ｚ 部分氨基酸序列中该表位的起始密码子发生无义突变,测序资料中包含稳定的变异位点的肽段,符合 Ｍ Ｈ Ｃ结合肽的基序（ ｍｏｔｉｆ） 。结论　无义突变可能与 Ｃ Ｔ Ｌ 的免疫压力有关。稳定变异位点产生的原因可能是免疫逃避。     

丙型肝炎病毒准种特性的研究进展

丙型病毒性肝炎 (丙肝 )是一种广泛传播的疾病 ,是导致慢性病毒性肝炎、肝炎肝硬变、肝细胞癌 (ＨＣＣ)的主要病因之一 ,而这些病变形成与其病原丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)某些重要的生物学特性有关〔1〕 。与其他ＲＮＡ病毒类似 ,ＨＣＶ基因组的易变异性可产生不同的型或亚型 ,而且在ＨＣＶ感染者体内可同时存在具有多种序列组成不同但却有很高同源性 (同源性≥ 95 % )的ＨＣＶ变异株病毒群体 ,即称为ＨＣＶ准种 (Ｑｕａｓｉｓｐｅｃｉｅｓ) ,亦有相似株和类似株之称〔2 ,3〕 。近年来研究表明 ,ＨＣＶ准种株决定其某些重要的生物学特性 ,而且…     

几种细胞因子对HSV-1感染单核巨噬细胞的影响

以ＨＳＶ－１接种Ｕ９３７和小鼠腹腔巨噬细胞，并在接种前后分别以不同的细胞因子处理细胞，借助病滴定、免疫荧光抗体试验检测病毒抗原，用ＰＣＲ检测病毒基因，研究了细胞因子对ＨＳＶ－１感染单核巨噬细胞的影响。结果报告如下。Ｍ－ＣＳＦ对ＨＳＶ－１感染Ｕ９３７细胞具有抑制作用。病毒接种前或后三天以２００Ｕ／ｍｌＭ－ＣＳＦ持续处理Ｕ９３７细胞，接种ＨＳＶ－１后病毒滴度的下降、病毒抗原及基因组ＤＮＡ的消失较末处理组迅速，Ｍ－ＣＳＦ还能拮抗ＬＰＳ对病毒增殖的促进作用。ＩＦＮ－α中和单抗与Ｍ－ＣＳＦ同时持续处理Ｕ９…     

庚型肝炎病毒（HGV／GBV—C）NS3区基因序列的多变性

用ＲＴ－ＰＣＲ方法从非甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病人血清中检测庚型肝炎病毒。采用５６个循环周期的减温ＰＣＲ方法对ＮＳ３区基因进行扩增，并对阳性ＰＣＲ产物进行了克隆、测序。在ＮＳ３区，ＨＧＶ与样品之间核苷酸的同源性在８２．０％～９１．４％之间；而ＧＢＶ－Ｃ与样品之间的同源性为７８．４％～８４．２％之间。ＮＳ３区变异较大，这种变异可能与ＨＣＶ的基因变异的趋势相类似。     

乙型肝炎病毒X基因变异与临床

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因是病毒基因组内功能重叠最明显的区域。近来的研究表明，ＨＢＶＸ基因变异类型主要为Ｃ基因启动子区内的聚集变异，尤其是第Ｔ１７６２、Ａ１７６４联合点突变，是在转录水平上造成ＨＢｅＡｇ（一）ＨＢＶ感染的原因；以及ＤＲ２变异合并Ｃ基因启动子全段或部分缺失，此类变异毒株感染是造成部分非甲－戊型肝炎的原因；ＨＢＶＸ基因变异与重型肝炎的关系仍不明确。     

PCR法检测EB病毒BNLF1基因

目前已建立分子杂交和ＰＣＲ检测ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｒ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ的方法。近年来研究发现ＥＢＶ致癌作用与ＬＭＰ１蛋白的表达密切相关〔１〕。为此,我们针对ＥＢＶ表达ＬＭＰ１蛋白的ＢＮＬＦ１基因片段建立ＰＣＲ检测方法。１　材料与方法１１　标准病毒和对照病毒　含有ＥＢＶ的Ｒａｊｉ细胞系和带有ＰＧＥＭＩＢＮＬＦ１的菌种有美国国立卫生研究院（ＮＩＨ）Ｊａｃｋｓｏｎ博士赠送。ＨＣＭＶＡＤ１６９、ＨＳＶⅠ、ＶＺＶ购自于上海第二医科大学。１２　主要试剂与仪器　限制性内切酶ＳｔｙＩ,Ｍａｒｋｅｒ购…     

中国人丙型肝炎病毒基因组3′端非编码区的研究

目的分析中国丙型肝炎病人ＨＣＶ基因组３′端非编码区（３′ＮＣＲ）,以促进对ＨＣＶ基因组复制机制的研究。方法采用两种方法,从上海地区感染ＨＣＶ的病人血清中,扩增获得ＨＣＶ基因组３′端非编码区：一是用套式ＰＣＲ直接扩增,二是先分别获得ＨＣＶ３′ＮＣＲ的前半部分和后半部分,再将两片段进行融合ＰＣＲ。ＰＣＲ产物进行测序后作同源性分析。在此基础上,建立了针对３′端非编码区的ＲＴＰＣＲ方法,并与基于５′端非编码区的ＲＴＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ的特异性和灵敏度比较。结果序列分析表明,中国丙型肝炎病人ＨＣＶ基因组３′非编码区由４部分组成：高度变异区、Ｐｏｌｙ（Ｕ）区、Ｐｏｌｙ（Ｕ／Ｃ）区和９８碱基区。同源性分析显示,９８碱基区在不同分离株间高度保守并与国外报道株一致,而Ｐｏｌｙ（ＵＵＣ）区存在较大差异。３′端非编码区和５′非编码区ＲＴＰＣＲ检测血清ＨＣＶＲＮＡ有较高符合率（９５％）。结论ＨＣＶ基因组３′端非编码区的３′末端（９８碱基）,在不同分离株间的高度保守性提示,该区在ＨＣＶ基因复制中起重要作用。基于３′非编码区的ＲＴＰＣＲ方法,将有助于ＨＣＶ感染的诊断。