外周血单核细胞miRNA表达谱在肺结核中的诊断价值

目的分析活动性肺结核患者(TB)外周血CD14+单核细胞mi RNA表达谱,筛选一组用于结核诊断及鉴别诊断的分子标志物。方法选取健康对照(HD)、结核菌潜伏感染者(LTBI)、TB各6例,采集外周抗凝血并分离外周单个核细胞(PBMC),再用免疫磁珠技术分选CD14+单核细胞,提取总RNA,利用mi RNA芯片检测CD14+单核细胞中mi RNA表达谱。筛选差异表达的mi RNA分子,利用Taq Man探针q PCR技术在大样本人群中进行验证(HD、LTBI、TB各25例)。结果基因芯片结果显示mi R-487家族可以将三组人群进行有效区分,依据其在不同人群中表达趋势共分为4个基因簇。从每个基因簇中筛选具有代表性的4个mi RNA分子进行Taq Man q PCR验证,包括mi R-487b-3p、mi R-134-5p、mi R-487a-3p、mi R-539-3p,其表达趋势与芯片结果一致。其中TB人群mi R-487b-3p表达量显著低于HD、LTBI,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01);mi R-487a-3p在LTBI、TB人群中表达水平显著低于HD(P<0.01,P<0.05);TB人群mi R-539-3p表达水平显著高于HD、LTBI(P<0.05,P<0.05)。结论 mi R-487家族与结核菌感染、发病的关系密切,其中mi R-487b-3p联合mi R-539-3p可以作为活动性结核诊断标识,而mi R-487a-3p可以作为结核菌感染诊断标识。     

miRNA在高危HPV感染的宫颈组织中表达的意义

目的探讨多种mi RNA(mi R-29a、mi R-99a、mi R-127、mi R-199a)在高危人乳头瘤病毒(HPV)感染的宫颈组织中的表达情况,探讨其在宫颈癌发病过程中的作用。方法采用Real-time PCR检测高危HPV感染的宫颈组织中的四种mi RNA的表达及其与高危HPV感染的宫颈组织各级临床病理改变之间的关系。结果与正常组相比mi R-29a在宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ组、CINⅡ组和宫颈癌组中表达下调,差异有统计学意义(P0.05)。mi R-99a、mi R-199a各级别宫颈病变中均表达下调,差异有统计学意义(P0.05)。mi R-127在CINⅠ组和CINⅡ组中表达差异无统计学意义,而CINⅢ组和宫颈癌组中表达下调,差异有统计学意义(P0.05)。结论四种mi RNA在高危HPV感染所致的各级CIN及宫颈癌病变中表达下降,mi RNA可能与高危HPV所致的CIN向宫颈癌的衍变中发挥作用。     

miRNA-203a及其靶基因P63在银屑病不同时期的表达分析

目的探讨mi R-203a、p63亚基TAp63和ΔNp63m RNA及其蛋白在寻常型银屑病不同发展时期皮损组织中的表达情况。方法收集寻常型银屑病进行期、静止期和退行期皮损组织共30例、皮损旁组织15例和正常皮肤组织15例,通过Real time PCR技术检测mi R-203a、ΔNp63和TAp63 m RNA在银屑病不同发展时期皮损组织、皮损旁组织和对照组中的表达情况。免疫组化法检测ΔNp63蛋白在银屑病不同发展时期皮损组织、皮损旁组织和对照组中的表达情况。银屑病不同发展时期皮损组织中mi R-203a与p63m RNA相关性采用Pearson相关分析。结果 RT-PCR结果显示mi R-203a在不同发展时期的银屑病皮损及皮损旁正常组织中表达上调(P0.05)。ΔNp63m RNA在不同发展时期银屑病皮损组织表达上调(P0.05),TAp63 m RNA在银屑病不同发展时期皮损组织表达降低(P0.05)。免疫组化结果显示,ΔNp63蛋白在寻常型银屑病的进行期和退行期中表达上调(P0.05)。银屑病不同发展时期皮损中mi R-203a与ΔNp63m RNA表达呈正相关(r=0.30,P0.05),mi R-203a与TAp63 m RNA表达呈负相关(r=-0.37,P0.05)。结论 mi R-203a、p63及其亚基ΔNp63和TAp63在银屑病的发病机制可能发挥着重要的调节作用。     

microRNA在纤维化疾病中的研究进展及与宫腔粘连疾病的关系

micro RNA(mi RNA)是一类单链小分子RNA,能通过转录后水平调节细胞的蛋白表达,广泛参与多种生理和病理过程。mi RNA在纤维化疾病的发生发展中起着重要的作用。宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)是子宫内膜损伤后的纤维化病变,宫腔和/或宫颈管部分或全部闭塞,致月经改变、腹痛、不孕与复发性流产等。本文将综述mi RNA在纤维化疾病中的意义,探索其与宫腔粘连疾病形成的关系,探讨宫腔粘连的发病机制。     

斯钙素2在肾细胞癌患者外周血清中的表达及临床意义

目的 探讨斯钙素2 (stanniocalcin 2,STC2)在肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)患者外周血清中的表达及其临床意义.方法 通过荧光实时定量-聚合酶链反应(real time-polymerase chain reaction,real time-PCR)和酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测60例肾细胞癌患者(RCC组)和60例正常人群(对照组)血清中STC2基因和蛋白水平表达,并结合患者临床病理参数及生存情况进行预后分析.结果 RCC组患者血清中STC2在基因和蛋白水平表达均较对照组升高(P＜0.001),外周血清STC2基因高表达者更多见于出现血尿、腰痛及腹部肿块等临床表现、肿瘤WHO/ISUP分级高、AJCC临床分期晚及出现淋巴转移和远处转移RCC患者(P＜0.001),STC2低表达RCC组患者总体生存期长于高表达者(P＞0.05).结论 RCC组患者血清中STC2表达升高,术前外周血STC2高表达RCC患者预后较差,STC2有望成为RCC患者新的预后判断指标.     

环状RNA在肝癌进展中的作用及其潜在价值

环状核糖核酸(circular ribonucleic acid, circRNA)是肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)与RNA领域研究的新热点之一。与传统含5′和3′末端的线性RNA不同,circRNA分子呈封闭环状结构,为一类特殊的非编码RNA分子,富含microRNA(miRNA)结合位点,在肝细胞中起miRNA海绵(miRNA sponge)作用,以竞争性内源RNA机制调控miRNA抑制/促进靶基因表达,在HCC进展中起重要作用。本文述评了circRNA在HCC进展中表达、调控机制及其潜在价值。     

肾细胞癌外周血中长链非编码RNA差异表达分析

目的 探讨肾细胞癌(RCC)外周血中长链非编码RNA(lncRNA)及mRNA的表达情况。方法 选择5例病理学诊断RCC患者的外周血血浆为实验组,同期5例健康人的外周血血浆作为对照组,采用基因芯片技术检测lncRNA及mRNA表达情况,实时荧光定量PCR进行验证分析。结果 与对照组相比,实验组RCC患者外周血中3 664个lncRNA异常表达(fold change≥2,P＜0.05),其中1 511个lncRNA上调表达,2 153个lncRNA下调表达;mRNA差异表达有2 268个(fold change≥2,P＜0.05),其中932个mRNA上调表达,1 336个mRNA下调表达。随机挑选上调表达的ENST00000547549、ENST00000591689及下调表达的NR_038263进行实时荧光定量PCR验证,其检测结果与芯片检测结果一致。结论 lncRNA基因芯片是检测RCC外周血差异表达基因高效、快速的检测手段。外周血中异常表达的lncRNA与mRNA可能是RCC潜在诊断及随访的生物分子,并可能成为治疗的靶点。     

胃黏膜相关组织淋巴瘤组织中miR-142-5p及miR-155表达及其临床意义

目的筛选胃黏膜相关组织(MALT)淋巴瘤的micro RNAs(mi RNAs)谱,并探讨mi RNAs表达与胃MALT淋巴瘤临床病理生物学行为的关系。方法收集台州市第一人民医院和温州医科大学附属第一医院2003年1月~2013年6月间手术治疗胃MALT淋巴瘤47例,检测手术切除标本的石蜡mi RNAs水平,并比较mi RNAs谱中mi R-142-5p及mi R-155的表达及其临床意义。结果胃MALT淋巴瘤组织中有38条mi RNA上调,包括差异17倍mi R-142-5p和4.5倍mi R-155;另外,有28条下调包括mi R-34a表达差异为4.9倍。本研究结果发现胃MALT淋巴瘤组织mi R-142-5p及mi R-155表达显著高于相应正常胃黏膜(P<0.01),且Hp感染阳性胃MALT淋巴瘤病例mi R-142-5p相对表达量显著低于Hp感染阴性病例(0.65比1.29,P=0.022),且较大肿瘤(≥5 cm)病例的mi R-142-5p相对表达量显著高于小肿瘤(<5 cm)病例(1.63比1.36,P=0.038),肿瘤浸润深度超过肌层及全层病例的mi R-142-5p表达显著高于肿瘤浸润局限于黏膜及黏膜下层病例(1.19比0.67,P=0.041),且Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ期组mi R-142-5p相对表达量显著高于Ⅰ期病例(1.36比0.67,P=0.034)。另外,本资料表明Hp感染阳性胃MALT淋巴瘤病例mi R-155相对表达量显著低于Hp感染阴性病例(1.34比11.46,P=0.010),且较大肿瘤(≥5 cm)病例的mi R-155相对表达量显著低于小肿瘤(<5 cm)病例(1.34比4.36)(P=0.048),肿瘤浸润深度超过肌层及全层病例的mi R-155表达显著高于肿瘤浸润局限于黏膜及黏膜下层病例(1.86比1.37,P=0.048),且Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ期组mi R-155相对表达量显著高于Ⅰ期病例(13.90比1.81,P=0.009)。结论胃MALT淋巴瘤组织与正常胃组织之间mi RNAs表达差异显著,尤其是mi R-142-5p及mi R-155基因,且这两种基因表达与肿瘤大小、核分裂像及恶性程度等密切相关,提示mi RNA在胃恶性淋巴瘤的发生发展过程中发挥重要作用。     

肾细胞癌组织中Notch信号途径蛋白表达水平的检测及其意义

目的：检测人肾细胞癌（RCC）组织中Notch信号途径相关蛋白的表达水平，探讨Notch信号途径分子与人RCC发生发展的关系。方法：手术方法获得6例经病理检查诊断为RCC组织标本，采用Western blotting法检测RCC组织和癌旁组织中Notch信号通路受体、配体蛋白表达水平。结果：与癌旁组织比较，RCC组织中Notch信号的受体Notch-1以及配体Jagged-1的表达水平均明显降低(P<0.05），受体Notch-2及配体Jagged-2表达水平均明显升高(P<0.05）。结论：RCC中Notch信号途径蛋白表达水平发生了明显的变化，Notch信号途径可能参与了RCC的发生发展过程。     

环状RNA在肺癌中的诊断价值分析

肺癌是全球最常见的癌症之一,也是因癌症导致患者死亡的第一病因[1]。近年来虽然肺癌的靶向治疗和免疫治疗取得了明显的进展,但提高肺癌的早期诊断水平仍是提高其远期疗效的最有效方式。环状RNA(circRNA)作为非编码RNA(ncRNA)的家族成员之一,具有高度的特异性、保守性和稳定性,通过调控细胞信号通路发挥其在肺癌发生发展过程中的作用,并具有潜在的临床价值。circ RNA的主要生物学功能包括作为微小RNA(mi RNA)海绵,调节亲本基因的转录,调节蛋白与编码蛋白之间的相互作用。绝大多数circ RNA充当mi RNA的海绵体作用。与正常组织相比,肺癌组织中存在差异表达的circ RNA,其表达水平与肺癌的临床病理因素相关。     

长链非编码RNA在肾细胞癌中作用机制的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是近年生命科学领域研究的热点,在各种生命活动中发挥着复杂、精确的调控功能.lncRNA在表观遗传、转录及转录后水平等多个层面发挥重要的调控作用,影响细胞正常的生物学行为,也参与肿瘤的发生发展.在肾细胞癌(RCC)中多种lncRNA存在异常表达,其调控网络的失常与RCC的迁移、侵袭、预后、...     

梅毒血清固定患者细胞免疫功能及外周血miR-155表达水平的研究

目的检测梅毒患者细胞免疫相关因子及外周血mi R-155分子表达水平,探讨其与血清固定的相关性。方法采用反转录-荧光定量PCR检测梅毒血清固定患者(观察组)、治疗后TRUSTDD转阴者(对照组A)和健康人群(对照组B)外周血mi R-155表达量,并采用ELISA检测三组血清细胞免疫相关因子。结果观察组血清INF-γ、IL-2水平低于两对照组(F=13.571,5.299,P0.01),IL-4、IL-10水平高于两对照组(F=6.851,9.695,P0.01),差异均有统计学意义。观察组mi R-155的2-△△ct数值对照组(t=5.159,t=7.475,P0.001),即观察组mi R-155表达水平低于两对照组,差异有统计学意义。且mi R-155表达与IFN-γ、IL-2水平呈负相关(r=-0.361、-0.61,P=0.007,P0.001),与IL-4、IL-10水平呈正相关(r=0.463、0.495,P0.001)。结论 mi R-155可能作为梅毒患者细胞免疫调节上游因子之一参与了梅毒感染免疫应答。     

LncRNA XIST和miR-101-3p在SLE患者外周血单核细胞中的表达及临床应用价值

目的 分析长链非编码RNA(Lnc RNA)X染色体失活特异转录本(XIST)和微小RNA-101-3p(mi R-101-3p)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞中的表达及临床应用价值。方法 选取2019年4月至2021年10月在新乡市中心医院治疗的180例SLE患者作为观察组,选择同期180例健康体检者作为对照组。根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分将观察组分为稳定期组80例和活动期组100例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法对患者外周血单核细胞中Lnc RNA XIST、mi R-101-3p的相对表达水平进行检测。分析Lnc RNA XIST与mi R-101-3p的相关性以及二者与SLEDAI评分的相关性;对影响SLE的因素进行logistic回归分析;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Lnc RNA XIST、mi R-101-3p的表达对SLE的诊断价值。结果 与对照组相比,观察组患者外周血单核细胞Lnc RNA XIST水平升高,mi R-101-3p水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);活动期组患者较稳定期组外周血单核...     

长链非编码RNA小核仁核糖核酸宿主基因11在肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是真核细胞中一种转录本超过200个核苷酸的RNA分子,几乎不具备编码蛋白质的能力,但可以调节其他基因的表达从而参与多种肿瘤的发生和发展.lncRNA小核仁核糖核酸宿主基因11(SNHG11)是一种近年来备受关注的lncRNA.随着研究的深入,已经报道并证实了lncRNA SNHG11在多...     

miR1934，一种脂联素特异性调控的靶microRNA，在肥胖小鼠的脂肪组织中表达降低

目的:脂联素(Adiponectin,Ap N)是脂肪细胞分泌的最主要抗炎细胞因子。利用Ap N过表达(Ap N-Over)和Ap N基因敲除(Ap N-KO)小鼠模型筛选出Ap N的靶micro RNAs(mi RNAs),以探寻脂肪组织新的具抗炎作用的功能性mi RNAs。方法:给予4周龄雄性Ap N-Over小鼠和其野生型对照小鼠高脂饮食6周后,分离提取腹股沟脂肪组织。采用mi RNA微陈列芯片筛选出两组小鼠脂肪组织间表达有差异的mi RNAs;在Ap N-Over,Ap N-KO和高脂(HFD)诱发的肥胖小鼠脂肪组织中用定量PCR验证上述筛选出的差异mi RNAs;采用生物信息学数据库预测mi RNAs的靶基因。结果:Ap N-Over小鼠脂肪组织中有12个mi RNAs的表达与野生对照小鼠显著不同;定量PCR验证结果显示有3个mi RNAs确实受到Ap N的调节:mi R532-5p的表达被Ap N下调,而mi R883b-5p和mi R1934的表达被上调;其中仅有mi R1934在Ap N-KO小鼠的脂肪组织中明显下降,与Ap NOver小鼠脂肪组织呈现相反的表达模式;mi R1934在HFD诱发的肥胖小鼠的内脏脂肪组织中的表达明显低于普通饮食喂养的小鼠(1.00±0.22 vs.0.54±0.13,P=0.04)。生物信息数据库预测出mi R1934有53个靶基因,其中2个靶基因为丝氨酸/苏氨酸激酶3(serine/threonine kinase 3,STK3)和趋化因子(C-C motif)配体[chemokine(C-C motif)ligand,CCL19],二者均为参与JNK信号通路的分子。结论:mi R1934是体内脂肪组织中受脂联素特异性调节的mi RNA。肥胖小鼠内脏脂肪组织中mi R1934的表达显著降低;生物信息学分析初步发现mi R1934可能参与调节JNK信号通路。因此脂联素特异性的靶mi R1934有可能为改善脂肪组织炎症及其相关的代谢异常提供新的治疗前景。     

miR-196a在下咽鳞状细胞癌血浆中的表达及其临床意义

目的探讨mi R-196a在下咽鳞状细胞癌(HSCC)患者血浆中的表达水平及其与下咽癌临床因素的关系,明确mi R-196a的诊断价值及临床意义。方法利用57例临床确诊HSCC患者血浆配对样本,健康体检者血浆样本50例,从血浆标本中提取总RNA,应用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,q RT-PCR)方法检测mi R-196a在血浆中的表达水平,收集57例HSCC患者病理、临床资料,统计分析血浆mi R-196a水平和临床病理特征的关系。构建受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),探讨血浆mi R-196a的诊断价值。结果在HSCC患者中术前mi R-196a的水平9.11(5.69,12.43)显著高于术后12.69(9.16,14.84)及健康体检者12.85(11.18,14.91)(P<0.01);血浆标本中HSCC患者术后mi R-196a水平与健康体检者比较无显著差异(P>0.05)。mi R-196a血浆中的表达水平和分化程度(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)、临床分期(P<0.05)有显著相关性;与年龄、吸烟史无关(P>0.05)。ROC曲线下面积为0.755,截断(cut-off)值为△Ct=10.84,95%CI:0.66~8.85(P<0.01)。结论血浆mi R-196a血浆表达水平与HSCC患者的肿瘤分期、淋巴结转移、病理类型等若干临床特征相关。mi R-196a有望作为HSCC微创诊断分子标志物。     

miR-31的肿瘤调控作用

<正>micro RNA(mi RNA)是一类长20~25nt的单链非编码RNA分子,广泛存在于从植物、线虫到人类的细胞中。目前最新的miRNA数据库(miRBase)版本号是21.0(2014.6,www.mirbase.org),涵盖了223个物种、共35 828条成熟mi RNA序列。miRNA通过与靶mRNA的互补配对在转录后水平对基因表达进行调控,导致m RNA的降解或翻译抑制,参与包括细胞增殖凋亡、细胞分化、发育和逆境应答等所有已验证     

qRT-PCR法在结肠癌血清miR-21检测中的应用

目的研究实时荧光定量复扩增法(q RT-PCR)在检测结肠癌血清mi R-21表达的临床应用。方法选取50例结肠癌患者作为研究组,选取20例健康者作为对照组,分别在研究组术前1周、术后1周、1个月抽取静脉血液进行mi R-21表达检测,对照组同期抽取血液进行检测,观察两组血浆中mi R-21表达差异,分析mi R-21表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移的相关性。结果研究组与对照组血清mi R-21表达水平分为(6.11±0.82)、(2.55±0.51),差异有统计学意义(P0.05);结肠癌血清mi R-21表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移均有明显的正相关性(r分别为0.654、0.613、0.477、0.712,P均0.05)。结论采用实时荧光定量复扩增法(q RT-PCR)检测结肠癌患者血清mi R-21表达量明显高于健康者,其表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移存在一定相关性。