结直肠癌组织中lncRNA FOXC2-AS1与EZH2的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中长链非编码RNA(lncRNA)RNA FOXC2-AS1、Zeste基因增强子同源物2(EZH2)表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测86例CRC癌组织和癌旁组织中lncRNA FOXC2-AS1、EZH2的表达。采用免疫组化法检测癌组织和癌旁组织中EZH2的蛋白表达。采用Pearson相关分析lncRNA FOXC2-AS1与EZH2表达的相关性。统计学分析癌组织中lncRNA FOXC2-AS1、EZH2的表达与临床病理特征之间的关系。Kaplan-Meier生存曲线分析不同lncRNA FOXC2-AS1、EZH2表达水平患者的5年总体生存率的差异。结果与癌旁组织比较,癌组织中lncRNA FOXC2-AS1及EZH2 mRNA表达水平升高(P<0.05),EZH2蛋白表达阳性率较高(P<0.05)。癌组织中lncRNA FOXC2-AS1与EZH2 mRNA表达水平呈正相关(r=0.623,P<0.05)。癌组织中lncRNA FOXC2-AS1及EZH2表达与肿瘤分期有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置、肿瘤分化程度及是否伴淋巴结转移无关(P>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示lncRNA FOXC2-AS1及EZH2高表达的患者5年总体生存率低于lncRNA FOXC2-AS1及EZH2低表达患者(P<0.05)。结论CRC癌组织中lncRNA FOXC2-AS1及EZH2表达水平升高,lncRNA FOXC2-AS1及EZH2的高表达与肿瘤分期有关,二者有望成为新的评价肿瘤预后的分子标志物。     

结直肠癌淋巴结转移与泛素结合酶UbcH10的表达

目的检测结直肠癌中泛素结合酶UbcH10的表达,并探讨其与结直肠癌患者临床病理特征和淋巴结转移的相关性。方法采用免疫组织化学法检测结直肠癌组织及正常组织中UbcH10蛋白的表达量,分析其与结直肠癌患者临床病理特征的关系。采用Matrigel侵袭实验分析UbcH10对结直肠癌HT-29细胞株侵袭能力的影响。结果 UbcH10蛋白在正常组织细胞中几乎不表达,在结直肠癌组织的细胞核中高表达,并且表达水平与肿瘤的分化程度、淋巴结转移相关(P0.05)。Matrigel侵袭实验结果显示UbcH10过表达可显著增加HT-29细胞的体外侵袭能力。结论 UbcH10基因在结直肠癌患者肿瘤组织中过度表达,并与结直肠癌的疾病进展密切相关,可作为结直肠癌诊断和淋巴结转移的潜在肿瘤标志物及结直肠癌基因治疗的新靶点。     

基质金属蛋白酶-2、7在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨结直肠癌中基质金属蛋白酶-2、7(MMP-2、MMP-7)的表达及其临床意义.方法 采用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)法和免疫组化法检测42例结直肠癌组织及其邻近正常黏膜组织中MMP-2 mRNA和MMP-7 mRNA及其蛋白,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系.结果 结直肠癌组织MMP-2 mRNA、MMP-7 mRNA的转录水平和MMP-2、MMP-7的表达水平均显著高于邻近正常黏膜组织(P均<0.05),且均与浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期正相关.结直肠癌组织MMP-2 mRNA转录水平和MMP-7 mRNA转录水平、MMP-2表达水平和MMP-7表达水平均呈正相关(rs=0.454,P=0.003;rs=0.343,P=0.026).结论 MMP-2和MMP-7在结直肠癌发生发展中起重要作用,联合检测二者有助于结直肠癌的恶性程度及生物学行为的判断及预后评估.     

结直肠癌组织KLK5 mRNA表达及其与临床病理参数的关系

目的对正常结直肠组织和癌组织KLK5 mRNA进行定量,并分析其表达与部分临床病理特征的关系。方法应用荧光实时PCR（RT-PCR）技术检测51例结直肠癌切除的癌组织及相应正常组织中KLK5基因mRNA的表达。结果67％（33／51）的患者结直肠癌组织可检测到KLK5 mRNA表达。KLK5基因表达与淋巴结转移和临床分期显著相关（P〈0．05）。结论KLK5基因在结直肠癌组织中为异常高表达,并与淋巴结转移和临床分期显著相关。     

KPNA2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌组织中核转运蛋白KPNA2的表达及其与结直肠癌临床病理特征之间的关系。方法收集110例原发性结直肠癌患者的肿瘤组织及对应的正常肠黏膜组织,应用免疫组化法检测组织中KPNA2的表达水平,分析其表达与临床病理特征及预后的关系。结果 KPNA2在结直肠癌组织中的表达明显高于正常组织,并且其高表达与组织分化、Dukes分期、T分期、N分期及M分期有关(P 0. 05)。Kaplan-Meier法分析结果显示,KPNA2蛋白高表达的患者5年总生存率低于低表达的患者(P 0. 05)。结论结直肠癌组织中KPNA2的表达明显升高,KPNA2高表达可能促进了结直肠癌的发生和发展,具有成为判断结直肠癌预后的潜在价值。     

Survivin基因在结直肠癌中的表达及其对预后的判断价值

目的:研究凋亡抑制蛋白Survivin基因在结直肠癌组织和外周血清中的表达及其与临床病理参数的关系,同时评估其对结直肠肿瘤转移预后的意义.方法:应用实时定量RT-PCR方法,检测31例结直肠癌组织及其邻近正常结直肠组织和13例结直肠非肿瘤性组织及外周血清中Survivin mRNA的表达.同时回顾分析其与诸多临床、病理参数问的关系.结果:肿瘤组织中Survivin基因特异性高表达,阳性率为100%,显著高于结直肠非肿瘤性组织中Survivin的表达(P<0.01).而正常结直肠黏膜则不表达.但其与年龄、性别、肿瘤位置、大小及Dukes分期等临床、病理参数无关;有淋巴结及远处转移患者外周血清中Survivin基因高表达,与无转移者有显著差异(P<0.05).结论:Survivin基因特异表达于结直肠肿瘤组织.并通过抑制结直肠癌细胞凋亡促进癌细胞增殖及肿瘤新生血管生成而参与结直肠癌的发生发展;外周血液中Survivin基因检测对筛选结直肠癌高危转移患者和判断预后及有一定参考意义.     

细胞周期蛋白G2在结直肠癌中表达水平与临床意义

目的探讨细胞周期蛋白G2(cyclin G2,CCNG2)在结直肠癌中的表达意义。方法采用免疫组织化学方法、蛋白印迹法(Western blot)检测57例结直肠癌组织及距其癌组织边缘2cm以上的镜下未见癌浸润的正常组织中蛋白的表达情况。结果免疫组织化学结果表明,CCNG2蛋白在结直肠癌组织中的表达较正常结直肠组织明显降低,分别为38.6%(22/57)、91.3%(31/33)(P0.05)。Western blot结果表明,CCNG2的蛋白在结直肠癌组织的表达相对量较正常结直肠组织的表达相对量明显降低(P0.05)。CCNG2蛋白表达与结直肠癌T分期、淋巴结转移、肿瘤临床分期及肿瘤分化有关(P0.05)。结论结直肠癌组织中CCNG2蛋白表达明显减低,且与结直肠癌T分期、淋巴结转移、临床分期及肿瘤分化有关。     

Dpr2、Nodal在结直肠癌组织中的表达与临床意义

目的：探讨Dpr2及Nodal在结直肠癌组织中的表达情况及临床意义。方法采用qRT-PCR检测结直肠癌癌组织及其对应的癌旁正常组织中Dpr2 mRNA、Nodal mRNA的表达情况,应用免疫组化法检测 Dpr2及 Nodal蛋白的表达。生存率统计采用 Kaplan-Meier法,生存曲线比较采用 Log-Rank检验,预后分析采用 Cox回归模型分析。结果结直肠癌组织中 Dpr2 mRNA的表达低于对应的癌旁组织（0.0015±0.008 vs.0.004±0.0004,P＜0.000）,Nodal mRNA表达显著高于癌旁组织（0.0091±0.0014 vs.0.0048±0.0014,P＜0.000）。相对于癌旁正常组织而言,结直肠癌组织中Dpr2蛋白的表达降低（P＝0.001）,而Nodal蛋白表达则增加（P＜0.001）。同时,结直肠癌中Dpr2蛋白的表达与肿瘤分化程度相关（P＜0.05）,而与性别、年龄、肿瘤位置、淋巴结转移、浸润深度及TNM分期无关,结直肠癌中Nodal蛋白的表达与肿瘤分化程度及浸润深度相关（P＜0.05）,而与其他临床病理特征无关（P＞0.05）。经生存分析及 Cox 风险模型显示,Dpr2及Nodal是结直肠癌的独立预后因素。结论 Dpr2/Nodal通路在结直肠癌组织中的异常表达可能在肿瘤形成及进展过程中发挥重要作用。？     

趋化因子CXCL9在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:分析趋化因子CXCL9[chemokine(C-X-C motif)ligand 9]在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法:回顾分析复旦大学附属上海市第五人民医院手术治疗的60例结直肠癌患者的临床资料,采用免疫组织化学方法和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time polymerase chain reaction,Real-Time PCR)技术检测结直肠癌组织、癌旁组织、区域淋巴结及正常结直肠组织中CXCL9的蛋白和mRNA的表达情况,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测60例结直肠癌患者及20例健康志愿者的血清CXCL9浓度,探讨CXCL9与结直肠癌临床病理因素间的关系。结果:结直肠癌组织中CXCL9蛋白的阳性表达率及CXCL9 mRNA相对表达量均显著高于正常结直肠组织、癌旁组织、无癌转移的区域淋巴结;有癌转移的区域淋巴结中CXCL9蛋白的阳性表达率及CXCL9 mRNA相对表达量显著高于无癌转移的区域淋巴结,差异有统计学意义(P0.01)。CXCL9的表达与结直肠癌的浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期相关(P0.05),而与年龄、性别、肿瘤直径无关(P0.05)。血清CXCL9浓度随Dukes分期的增加而升高(P0.05),有淋巴结转移的结直肠癌患者血清CXCL9浓度显著低于无淋巴结转移患者(P0.05)。结论:趋化因子CXCL9可能参与结直肠癌的发生、发展过程,其表达水平与结直肠癌的浸润深度、临床分期、转移等因素相关。     

结直肠癌组织中hTcf-4 mRNA表达的研究

目的:研究hTcf-4mRNA在结直肠癌组织及癌旁正常组织的表达,探讨其在结直肠癌发生发展中的作用。方法:用荧光定量PCR检测31例结直肠癌标本及相应的癌旁正常组织hTcf-4mRNA的表达。结果:31例癌组织hTcf-4mRNA表达高于癌旁正常组织(P<0.05);Dukes不同分期结直肠癌hTcf-4mRNA表达随着浸润深度的加深其表达有增高趋势(P<0.05)。结论:hTcf-4mRNA在结直肠癌组织中表达增高,并与结直肠癌侵袭转移有关,可作为判定结直肠癌转移及预后的参考指标。     

结直肠癌组织中PGC-1α表达水平与临床病理特征及预后的关系

目的检测结直肠癌组织中过氧化物酶体增殖物受体共激活因子-1α(PGC-1α)的表达水平,并探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法采用回顾性研究方法,选取2011年8月至2015年2月于首都医科大学附属北京友谊医院接受手术治疗的结直肠癌患者的癌组织及其癌旁组织共92例,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测PGC-1αmRNA的表达水平。同时用生物信息学工具基因表达谱交互式分析软件(GEPIA)对美国癌症和肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中275例结直肠癌患者的PGC-1αmRNA的表达进行分析。结果 PGC-1αmRNA在结直肠癌组织中呈低表达,PGC-1αmRNA的表达水平与性别、年龄、组织分化程度、T分期及淋巴结转移无明显相关,远处转移患者的PGC-1αmRNA的表达水平显著低于无远处转移的患者(P=0. 035),PGC-1αmRNA高表达患者的3年生存率高于低表达患者(85. 1%vs. 67. 5%,P=0. 044)。结论 qRT-PCR技术可对结直肠癌组织中PGC-1αmRNA的表达水平进行定量检测; PGC-1αmRNA表达与结直肠癌远处转移相关,且高表达的患者预后较低表达患者好,可为结直肠癌的预后提供参考。     

结直肠癌组织c-met表达及与肿瘤血管生成关系

目的研究人结直肠癌组织中c-met蛋白的表达及与微血管密度（MVD）的关系,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测50例结直肠癌组织、50例正常黏膜组织及20例结直肠腺瘤组织中c-met蛋白的表达以及CD105标记的MVD。结果 c-met蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率明显高于结直肠腺瘤组织与正常黏膜组织（χ2=31.929,P〈0.01）。结直肠癌组织中MVD明显高于结直肠腺瘤和正常黏膜组织（H=92.435,P〈0.01）。结直肠癌组织c-met蛋白表达和MVD与肿瘤部位、组织学分级无关,而与Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移及远处转移密切相关（χ2=4.000～9.018,t=2.605～4.024,P〈0.05、0.01）,c-met阳性表达的结直肠癌组织中MVD显著高于c-met阴性者（t=2.752,P〈0.01）。结论 c-met在结直肠癌的侵袭与转移中可能发挥着重要作用,联合检测c-met的表达及MVD可能有助于结直肠癌预后的判断。     

PGP9.5在结直肠癌进展中的表达及其临床意义

目的:探讨蛋白基因产物PGP9.5表达与结直肠癌生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学S-P法检测PGP9.5在正常组织、结直肠癌肿瘤组织中的表达.采用Western blot免疫印迹法检测PGP9.5在结直肠肿瘤中的蛋白表达含量.结果:在98例组织中,从正常肠黏膜、腺瘤到进展期结直肠癌,PGP9.5蛋白表达呈上升趋势,且差异有显著性(P＜0.05).在正常结直肠组织中PGP9.5呈阴性表达;在结直肠腺瘤及癌组织中主要表达于癌细胞浆和细胞质中,间质细胞中弱表达.在结直肠腺瘤及癌中PGP9.5阳性表达率分别为50.0%和82.4%.PGP9.5表达与结直肠癌淋巴结转移、临床分期和浸润深度有关(P＜0.05),与性别、年龄、病理分化程度无关(P＞0.05).结论:PGP9.5在结直肠癌进展中有重要作用,可能是一个独立预后指标.常规检测其在结直肠癌中的表达,有助于对结直肠癌治疗和预后的判断.     

转化生长因子β1Ⅱ型受体在结直肠癌及癌前病变中的的表达

目的探讨转化生长因子β1Ⅱ型受体在结直肠癌及癌前病变中的表达及其意义。方法采用逆转录聚合酶链反应检测40例结直肠癌及癌周正常组织和13例结直肠腺瘤中TβR～Ⅱ mRNA的表达。结果腺瘤组织和正常组织之间TβR-Ⅱ mRNA表达阳性率无显差异；而癌组织TβR-Ⅱ mRNA水平明显低于癌周正常组织，其表达水平和浸润深度、有无淋巴结转移、Dukes分期负相关，而与远处转移、细胞分化无关。结论TGF-β1及其Ⅱ型受体在结直肠癌变的过程中发挥重要作用，IβR-Ⅱ在转录水平的下调是散发结直肠癌逃避TGF-β1的负调控的重要机理。     

抑癌基因DAB2IP在结直肠癌中的表达及临床意义

探讨抑癌基因DAB2IP在结直肠癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学方法对103例结直肠癌组织、正常黏膜和转移淋巴结组织进行蛋白检测.结果:DAB2IP在正常黏膜中的表达远高于结直肠癌组织和转移淋巴结组织(P＜0.05),其表达水平与淋巴结转移、远处转移、淋巴结转移度、临床Dukes分期、CEA和生存时间相关(P＜0.05),DAB2IP是结直肠癌重要的预后因素(P＜0.05).结果:DAB2IP下调可能导致结直肠癌的发生、浸润转移和生存时间减少.     

叉头状螺旋转录因子3在结直肠癌组织中的表达及与临床病理的关系

目的探讨结直肠癌组织中叉头状螺旋转录因子Foxp3的表达水平以及与结直肠癌患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色检测45例结直肠癌组织和癌旁组织中Foxp3的表达。结果结直肠癌组织中Foxp3的阳性表达率71.1%(32/45)明显高于癌旁组织阳性表达率22.2%(10/45),两者差异有统计学意义(P0.01),且Foxp3表达水平与肿瘤的分期和淋巴结转移有相关性(P0.05);肿瘤分期为Ⅲ期/Ⅳ期,以及淋巴结转移的结直肠癌组织中的Foxp3阳性表达率高于肿瘤分期Ⅰ期/Ⅱ期、以及淋巴结未转移的结直肠癌组织,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Foxp3在结直肠癌组织中高表达,有助于判断结直肠癌转移潜能,有望成为结直肠癌评估诊断的新靶点。     

生长因子受体结合蛋白2表达与结直肠癌进展和预后的相关性

目的:评价生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound protein 2,Grb2)表达水平与结直肠癌进展及预后的关系。方法:对Grb2的蛋白表达及细胞定位进行免疫组化检测。用t检验、chi-square检验等分析Grb2的表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、淋巴结转移个数、TNM分期、辅助化疗、血清癌胚抗原(CEA)和血清CA19-9之间的关系。用Kaplan-Meier法分析Grb2的表达水平对患者生存率的影响;用Cox回归分析结直肠癌预后的影响因素。结果:Grb2主要表达于结直肠癌上皮细胞的胞质。结直肠癌组织中胞质Grb2的表达显著高于腺瘤和癌旁组织(P0.05),而结肠癌组织、腺瘤、癌旁组织中胞核Grb2中的表达水平差异无统计学意义。癌上皮细胞胞质中Grb2高表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、TNM分期、辅助化疗、血清CEA、血清CA19-9之间均无相关性,Grb2表达与淋巴结转移个数有相关性(P=0.001)。Cox单因素分析发现,胞质Grb2高表达能预测患者的不良预后;进一步纳入TNM等指标,Cox多因素分析发现,Grb2是结直肠癌预后的独立影响因素[无瘤生存风险比(HR)=2.664,P=0.015;总体生存风险比(HR)=2.574,P=0.019]。结论:Grb2高表达与结直肠癌进展密切相关,是结直肠癌预后的独立危险因素。     

大鼠髓核细胞体外衰老模型的建立

目的：评价生长因子受体结合蛋白2(growthfactorreceptorboundprotein2,Grb2)表达水平与结直肠癌进展及预后的关系。方法：对Grb2的蛋白表达及细胞定位进行免疫组化检测。用t检验、chisquare检验等分析Grb2的表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、淋巴结转移个数、TNM分期、辅助化疗、血清癌胚抗原（CEA）和血清CA199之间的关系。用KaplanMeier法分析Grb2的表达水平对患者生存率的影响;用Cox回归分析结直肠癌预后的影响因素。结果：Grb2主要表达于结直肠癌上皮细胞的胞质。结直肠癌组织中胞质Grb2的表达显著高于腺瘤和癌旁组织（P<0.05),而结肠癌组织、腺瘤、癌旁组织中胞核Grb2中的表达水平差异无统计学意义。癌上皮细胞胞质中Grb2高表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、TNM分期、辅助化疗、血清CEA、血清CA199之间均无相关性,Grb2表达与淋巴结转移个数有相关性（P=0.001）。Cox单因素分析发现,胞质Grb2高表达能预测患者的不良预后;进一步纳入TNM等指标,Cox多因素分析发现,Grb2是结直肠癌预后的独立影响因素［无瘤生存风险比（HR）=2.664,P=0.015;总体生存风险比（HR）=2.574,P=0.019］。结论：Grb2高表达与结直肠癌进展密切相关,是结直肠癌预后的独立危险因素。     

同源盒蛋白1和叉头框蛋白C2在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨同源盒蛋白1（Six1）、叉头框蛋白C2（FOXC2）在结肠癌中的表达及其与结肠癌发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组织化学法SP法检测70例结肠癌组织和30例癌旁正常组织中Six1、FOXC2的表达情况,分析两者在结肠癌发生发展中的相关性,及与肿瘤患者临床病理特征之间的关系。结果Six1、FOXC2在结肠癌中的阳性表达率分别为82.9%和74.3%,均明显高于癌旁正常组织中的表达(16.7%,20.0%,P<0.05),且两者在结肠癌中的表达具有相关性（r=0.426,P<0.01）。Six1、FOXC2在结肠癌中的表达水平与肿瘤TNM分期、浸润深度、淋巴结转移密切相关（P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化状态无关（P>0.05)。结论Six1、FOXC2高表达可能共同参与了结肠癌的发生发展过程并在结肠癌的侵袭转移过程中存在协同作用, 故二者的表达可能与结肠癌的不良预后具有密切联系。     

结直肠癌中AQP5、ERK蛋白表达及其相关性研究

目的研究结直肠癌中AQP5、ERK蛋白的表达及其相互关系,初步探讨它们在结直肠癌发生发展中的生物意义。方法采用组织芯片及免疫组化SP法,检测60例结直肠癌、20例癌旁粘膜中AQP5、ERK蛋白的表达,比较AQP5及ERK蛋白表达与临床病理参数间的关系及二者相关性研究。结果结直肠癌组织中AQP5、ERK蛋白表达的阳性率与癌旁组织比较有显著性差异(53.3%vs0%;55.0%vs20%;P<0.05);AQP5与ERK蛋白表达强度之间呈正相关(C=0.745,P<0.05);AQP5蛋白与结直肠癌的分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期相关;ERK蛋白随肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的进展而增高。结论AQP5蛋白高表达可能与结直肠癌生物学行为密切相关;在结直肠癌发生、发展过程中,可能与AQP5→Ras→ERK→Rb信号通路的异常激活,使细胞发生恶性转化,并促进恶性转化细胞的浸润、转移。