骨髓间充质干细胞治疗大鼠慢加急性肝衰竭的实验研究

目的 探究骨髓间充质干细胞治疗大鼠慢加急性肝衰竭的效果.方法 选取清洁级SD成年雄性大鼠40只,采用随机数字表法分为模型组与用药组,每组20只.经腹腔注射10％D-氨基半乳糖(D-Gal N)诱导大鼠急性肝衰竭模型.造模后12 h,用药组经尾静脉注射1.5 mL骨髓间充质干细胞(BMSCs)悬液,连续给药3 d,而模型组注射等体积无菌磷酸盐缓冲溶液(PBS).比较两组肝脏功能及BCL2-Asso-ciated X蛋白质(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况.结果 用药组天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)水平均低于模型组,血白蛋白(Alb)高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);用药组Bcl-2、PCNA蛋白水平均低于模型组,Bax蛋白水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 骨髓间充质干细胞治疗大鼠慢加急性肝衰竭,能有效改善肝功能,促进肝细胞再生.     

急性肝衰竭大鼠模型中大黄提取物治疗作用分析

目的探讨对急性肝衰竭大鼠模型采用大黄提取物的治疗作用。方法利用D-氨基半乳糖建立大鼠急性肝功能衰竭模型。选取SD大鼠15只,随机分为3组(n=5)。A组为健康大鼠,不施加任何试验处理;B组为肝衰竭大鼠,造模后12 h尾静脉注射1 mL生理盐水;C组为大黄提取物治疗组,造模后12 h向腹腔注射大黄提取物(10 mL/kg),每日3次,连续注射2 d。各组大鼠均在造模48 h之后注射10%的水合氯醛进行麻醉,取门静脉血以及肝组织标本进行试验指标观测。结果 B组大鼠造模后出现急性肝衰竭表现,而A组、C组均无或仅有少量症状出现。B组大鼠在造模48 h后血清ALT、AST以及TBiL含量均出现显著上升,而C组出现下降。结论大黄提取物有利于促进急性肝衰竭大鼠的恢复,并且能促进骨髓间充质干细胞的增殖,增强BMSCs细胞移植的治疗效果。此治疗方法能够促进肝细胞的再生和修复,为肝功能障碍患者提供一定的治疗。     

大黄素对急性肝衰竭大鼠肝功能的影响

目的探讨大黄素对急性肝衰竭（ALF）大鼠肝功能的影响。方法sD大鼠随机分三组：健康对照组、模型（ALF）组、大黄素组。D-氨基半乳糖（D—Gal）诱导大鼠急性肝功能衰竭模型,大黄素组于造模后12h开始腹腔注射大黄素10mg／kg,每天2次。模型组及大黄素组分别在造模后24、72和120、168h,随机各取6只,留取门静脉血及肝组织。结果造模后24h,大鼠血清ALT、AST值明显升高,分别为（537．3±133．7）U／L和（797．2±159．3）U／L,显著高于正常组的（34．5±4．2）U／L和（81．6±5．1）U／L,差异有统计学意义（t=-5．579、-4．825,P〈0．01）,以72h最为显著。造模后24h,大黄素组与模型组血清ALT、AST差异无统计学意义,造模后72h,大黄素组血清ALT、AST分别为（116．8±56．2）U／L和（165．5±78．7）U／L,显著低于模型组的（728．0±137．4）U／L和（1416．7±254．7）U／L,差异有统计学意义（t=-6．735、-6．544,P〈0．05）。至120h和168h,两组血清ALT、AST均持续下降。结论大黄素具有改善急性肝衰竭大鼠肝功能的作用,具体机制有待进一步研究。     

骨髓间充质干细胞移植和动员对重症急性胰腺炎大鼠肝肾细胞凋亡的保护作用

目的探讨自体骨髓间充质干细胞移植和干细胞动员对重症急性胰腺炎大鼠肝肾细胞凋亡的保护作用。方法腹腔注射L-精氨酸制备大鼠SAP模型,随机分为假手术组、模型组、骨髓干细胞移植(mesenchymal stem cells,MSC)组、重组人粒细胞集落刺激因子组(G-CSF)及MSC+G-CSF组(n=48),各组再按术后不同观察时间段分为12、24、48、72h亚组(n=12)。MSC组造模后6h经股静脉注入自体骨髓间充质干细胞1.2ml,G-CSF组造模前连续3天皮下注入G-CSF 40μg/kg,MSC+G-CSF组则联合应用,假手术组仅腹腔注射等体积生理盐水。在术后相应时间点观察各组大鼠的死亡率,肝肾脏组织的病理变化,比较Bax、Bcl-2蛋白水平和细胞凋亡指数差异。结果各治疗组48h前未见死亡,72h死亡率与模型组比较无显著差异(P>0.05);肝脏、肾脏病理变化均较模型组减轻;治疗组各时间点肝肾细胞Bax表达较模型组下调,Bcl-2蛋白上调,凋亡指数较模型组有明显下降。MSC+G-CSF组24h点后Bax含量,48h、72h点Bcl-2含量,24h/48h点后细胞凋亡指数与MSC组和G-CSF组比较差异显著(P<0.05),MSC组和G-CSF组各时间比较无显著差异(P>0.05)。结论联合自体骨髓MSC移植与动员能有效抑制重症急性胰腺炎时肝脏和肾脏的细胞凋亡。     

黄芩苷对D-氨基半乳糖致大鼠急性肝衰竭的保护作用

目的观察黄芩苷对大鼠急性肝衰竭的保护作用并探讨可能机制。方法 86只大鼠随机分为正常对照组、模型组和黄芩苷组,模型组和黄芩苷组再分为1、3、5、7天4个亚组。采用腹腔注射D-氨基半乳糖建立大鼠急性肝衰竭动物模型,黄芩苷组于造模后每隔12h腹腔注射黄芩苷(120mg/kg)1次。全自动生化仪检测血清ALT、AST和TBil水平;HE染色观察肝组织病理学变化;RT-PCR法检测肝组织Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA表达;蛋白免疫印迹法检测肝组织Bax、Bcl-2蛋白表达量。统计学处理采用方差分析。结果黄芩苷组肝组织损伤程度明显轻于模型组。黄芩苷组大鼠各时间点血清ALT、AST、TBil水平较模型组明显降低(t=18.85,15.63,8.86;P均<0.01)。黄芩苷组肝组织Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA的表达趋势与模型组一致,随时间延长3天时达高峰,5、7天时逐渐降低,与模型组相比Bax、caspase-3 mRNA表达量明显降低(t=-55.51,-16.20;P均<0.01)、Bcl-2 mRNA表达量较模型组升高(t=51.91,P<0.01)。黄芩苷组Bax、Bcl-2蛋白表达趋势与模型组一致,Bax蛋白表达量较模型组明显降低(t=-21.32,P<0.01),Bcl-2蛋白表达量较模型组明显升高(t=50.91,P<0.01);黄芩苷组各时间点Bcl-2/Bax蛋白比率明显高于模型组(t=68.08,58.11,64.04,17.50;P均<0.01)。结论黄芩苷可以通过上调抗凋亡基因Bcl-2的表达和下调促凋亡基因Bax,进而减少caspase-3的表达,保护D-GalN诱导的大鼠急性肝衰竭。     

骨髓间充质干细胞治疗大鼠白毒伞中毒致急性肝衰竭的效果

目的：探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗大鼠白毒伞中毒致急性肝衰竭的疗效及机制。方法选取10只体重约80 g的雄性清洁级SD大鼠用于BMSCs的培养。另选取体重在220～250 g的成年大鼠45只作为研究对象,用于肝衰竭模型制备以及BMSCs输注治疗。在45只大鼠中随机抽取15只作为空白对照组,剩下的30只均给予白毒伞粗毒素灌胃制备肝衰竭模型,将造模成功的大鼠随机均分为两组,肝衰竭模型组和治疗组（实验BMSCs输注治疗）。对比各组大鼠7 d生存率及肝功能、凝血功能、炎症因子、肝脏病理等指标情况。结果与肝衰竭模型组相比,治疗组SD大鼠体重减轻明显更少,7 d生存率明显更高。移植结束后治疗组大鼠肝功能、凝血功能、炎症因子等指标及肝脏病理均较肝衰竭模型组显著改善（ P＜0.05）。结论 BMSCs输注对白毒伞中毒致急性肝衰竭大鼠具有十分明显的治疗作用,能显著改善大鼠肝功能衰竭。     

大黄对急性肝衰竭大鼠细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3表达影响

目的:观察大黄对急性肝衰竭大鼠细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3表达的影响,旨在探讨其防治急性肝衰竭的作用机制。方法:30只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和大黄组。大黄组大鼠造模前3 d予大黄水煎液10 g/(kg·d)灌胃,采用D-氨基半乳糖(D-Ga1N)/内毒素脂多糖(LPS)腹腔注射造成大鼠急性肝衰竭模型。造模6 h后,取血检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)含量,并开腹取大鼠肝组织,应用原位末端标记(TUNEL)法检测肝细胞凋亡情况,应用免疫组化法分别检测肝组织中Bcl-2和Caspase-3蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清AST、ALT、TBIL含量和肝细胞凋亡指数(AI)及Caspase-3蛋白表达均明显升高(均P0.01),Bcl-2蛋白表达明显下降(P0.01);与模型组比较,大黄组大鼠血清AST、ALT和TBIL含量、AI及Caspase-3蛋白表达均显著下降(均P0.01),而Bcl-2蛋白表达明显上调(P0.01)。结论:大黄可明显减轻急性肝衰竭大鼠肝脏损伤,其作用机制可能与上调Bcl-2表达、下调Caspase-3表达,从而抑制肝细胞凋亡有关。     

血管内皮生长因子在急性肝衰竭大鼠中的变化及其意义

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在急性肝衰竭（acute liver failure,ALF）大鼠中的变化及其对肝再生的作用。方法SD大鼠分两组：正常组6只,模型组48只。D-氨基半乳糖（D-Gal）诱发大鼠急性肝衰竭模型,造模后分6、12、24、36、48、72、120、168h8个时间点取大鼠血及肝脏标本,动态观察肝功能的变化。采用免疫组织化学法检测肝组织中VEGF、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的变化。结果造模后24h,丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TB）等指标显著升高（均P〈0.05）,以48～72h为著。PCNA在正常组表达很少,造模后6h显著升高（P〈0.01）,48h达最高峰,72h则明显下降（P〈0.01）。VEGF在正常大鼠肝组织中表达量很少或不表达,模型组随着时间的推移,VEGF水平逐渐升高,其变化与PCNA一致,48h达高峰,72h开始下降。结论VEGF在急性肝衰竭大鼠中的表达与肝细胞再生程度密切相关,其对肝再生具有重要作用。这可能为急性肝衰竭提供一种新的治疗途径。     

同种异体骨髓基质干细胞移植修复急性化学性肝损伤

目的 探讨骨髓基质干细胞（BMSCs）同种异体移植治疗急性化学性肝损伤的疗效。方法 采用CCl4喂养制作SD大鼠急性化学性肝损伤模型，同种大鼠骨髓提取BMSCs。45只SD大鼠随机分为正常对照组、肝损伤对照组、肝损伤移植组（肝损伤大鼠，向肝实质内移植BMSCs），每组15只。分别在造模前、BMSCs移植术后6h及1，5周，每组各取3只大鼠检测血清中ALT，AST，A／G，SOD，MDA，Hyp水平和肝组织中SOD，MDA，Hyp水平，并进行统计学检验。结果 移植后6h，肝损伤移植组和肝损伤对照组血清ALT，AST，A／G，MDA，SOD，Hyp和组织SOD，MDA，Hyp水平仍均明显低于正常对照组，差异有统计学意义，肝损伤移植组和肝损伤对照组比较，差异无统计学意义；移植后1，5周，肝损伤移植组血清ALT，AST，A／G，MDA，SOD，肝组织SOD，MDA水平明显高于肝损伤对照组．并且较移植后6h明显升高，差异有统计学意义。结论 BMSCs移植可全面修复急性化学性肝损伤所致的肝功能损害。     

同期输注供者骨髓间充质干细胞对肝移植大鼠免疫的影响

目的 探讨肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞对受体肝移植免疫的影响.方法 实验分为空白对照组(A组)、移植组(B组)和输注供者骨髓间充质干细胞组(C组).A组SD大鼠5只,只行剖腹探查,B,C组Wistar和SD大鼠各10只.行Wistar-SD大鼠肝移植同时,C组提取供体骨髓间质干细胞同期输注给受者,B组给予输注生理盐水.观察术后第7天肝功能的变化、病理改变和受体生存期.结果 肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞,ALT,AST,TBIL,ALB较B组显著降低,生存期明显延长,病理改变仅呈急性轻度排斥反应,而单纯移植组呈急性重度排斥反应.结论 肝移植同时输注骨髓间充质干细胞促进受体对移植肝的免疫耐受.     

骨髓间充质干细胞移植对环磷酰胺诱导卵巢损伤大鼠Bax及Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对环磷酰胺(CTX)所致卵巢损伤的保护作用。方法 30只Sprague Dawley大鼠随机分为空白对照组、模型组及细胞移植组,每组10只,空白对照组大鼠腹腔注射生理盐水,模型组及细胞移植组大鼠腹腔注射CTX制备卵巢早衰模型,细胞移植组于第1天注射CTX后24 h经尾静脉移植BMSCs。停药1周后处死所有大鼠,剖腹取卵巢测质量,观察卵泡数量变化,用免疫组织化学法及Western blot法测定卵巢组织中Bax、Bcl-2蛋白表达。结果模型组、细胞移植组大鼠总卵泡数、中大卵泡数及卵巢湿质量低于空白对照组(P<0.05),但细胞移植组大鼠总卵泡数、中大卵泡数及卵巢湿质量高于模型组(P<0.05)。空白对照组Bax主要表达于黄体细胞,卵泡颗粒细胞仅见散在Bax表达;模型组Bax主要表达于颗粒细胞的细胞质,尤其在闭锁卵泡、生长卵泡及窦状卵泡中表达明显;细胞移植组卵泡颗粒细胞中Bax表达范围明显小于模型组。空白对照组Bcl-2在各级卵泡颗粒细胞及黄体细胞中表达量均多,模型组Bcl-2在卵泡颗粒细胞仅散在表达,细胞移植组Bcl-2表达范围明显大于模型组。与空白对照组比较,模型组、细胞移植组大鼠卵巢组织中Bax蛋白表达量明显升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达量明显下降(P<0.05);但与模型组比较,细胞移植组大鼠卵巢组织中Bax表达量明显下降(P<0.05),Bcl-2表达量明显升高(P<0.05)。结论 BMSCs移植能通过调整卵巢组织中Bax、Bcl-2表达水平减少CTX对卵巢功能的损伤。     

大黄素对急性肝功能衰竭大鼠肝脏的保护作用机制

目的探讨大黄素对急性肝功能衰竭（ALF）大鼠肝脏的保护作用机制。方法将SD大鼠随机分为健康对照组（6只）、ALF模型组（24只）和大黄素保护组（24只）。模型组、保护组用D-氨基半乳糖（D-Gal）建立ALF动物实验模型,12h后保护组按10mg/kg腹腔注射大黄素,2次/d;健康对照组注射等量0.9%氯化钠溶液。模型组、保护组在建模后24、72、120、168h随机各取6只,取门静脉血检测肝功能指标,取肝组织检测其NF-资B水平,并进行比较分析。结果模型组造模后24、72、120hALT水平均明显高于对照组（均P＜0.05）,24、72、120、168hAST水平均明显高于对照组（均P＜0.05）;保护组造模后24、72hALT、AST水平均明显高于对照组（均P＜0.05）;造模后72hALT、AST水平均为模型组高于保护组（均P＜0.05）,造模后120、168hAST水平亦均为模型组高于保护组（均P＜0.05）。HE染色见对照组大鼠肝组织结构完整,能清晰看到肝索;模型组大鼠肝小叶结构明显被破坏,肝细胞大片坏死。造模后24、72、120h模型组、保护组NF-资B水平均明显高于对照组（均P＜0.05）,两组均在72h达到高峰;模型组造模后168h明显高于对照组（P＜0.05）;造模后24、72、120、168h模型组均高于保护组（均P＜0.05）。结论大黄素对ALF大鼠的肝脏功能有保护作用,其机制可能与下调肝脏组织中NF-资B表达有关。     

自体骨髓间充质干细胞移植加动员在重症急性胰腺炎大鼠胰腺保护中的作用

目的探讨自体骨髓间充质干细胞移植和干细胞动员对重症急性胰腺炎大鼠胰腺的保护作用。方法腹腔注射L-精氨酸制备大鼠SAP模型,随机分为假手术组、模型组、骨髓干细胞移植组(MSC)、重组人粒细胞集落刺激因子组(G-CSF)及MSC+G-CSF组(n=48),各组再按术后不同观察时间段分为12、24、48、72h亚组(n=12)。MSC组造模后6h经股静脉注入自体骨髓间充质干细胞1.2ml,G-CSF组造模前连续3天皮下注入G-CSF 40μg/kg,MSC+G-CSF组则联合应用,假手术组仅腹腔注射等体积生理盐水。在术后相应时间点观察各组大鼠的死亡率,观察胰腺病理改变并评分,测定Bax蛋白水平和细胞凋亡指数,检测血清中TNF-α、IL-6、AMY、CRP含量,用方差分析比较各治疗组间的指标差异。结果各治疗组48h前未见死亡,72h死亡率与模型组比较无显著差异(P>0.05);胰腺病理变化较模型组减轻;治疗组各时间点Bax蛋白水平和凋亡指数均较模型组增高(P<0.05),MSC+G-CSF组48、72h凋亡指数及24、48,72h Bax蛋白含量与MSC和G-CSF组比较差异显著(P<0.05);各治疗组血清TNF-α、IL-6、AMY、CRP含量24h/48h后较模型组明显降低(P<0.05),MSC+G-CSF组48h/72h各指标与MSC组和G-CSF组比较差异显著(P<0.05);MSC组与G-CSF组各项指标比较均无显著性差异(P>0.05)。结论联合自体骨髓MSC移植与动员能有效保护重症急性胰腺炎早期大鼠胰腺的损伤,可能与MSC的抗炎症及促进胰腺腺泡细胞凋亡等机制有关。     

骨髓间充质干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对阿尔茨海默病(AD)大鼠空间学习记忆能力的影响。方法:雄性Wistar大鼠45只,随机分为假手术对照组(SOC组)、双侧FF切断模型组(模型组)和骨髓间充质干细胞移植治疗组(治疗组)。用Morris水迷宫检测各组动物逃避潜伏期。结果:与对照组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),与模型组相比,BMSCs治疗组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05)。结论:BMSCs移植能够改善AD大鼠空间学习记忆能力。     

OX40在急性肝衰竭大鼠肝组织中的表达及意义

目的观察共刺激分子(costimulatory molecule)OX40在急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)大鼠肝组织中表达的变化,探讨OX40在急性肝衰竭发病机制中的作用。方法雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、急性肝衰竭(ALF)模型组。急性肝衰竭组:腹腔同时注射D-氨基半乳糖(D-GalN)800mg/kg和脂多糖(LPS)8微克/只,在D-GalN和LPS注射后6、12、24、48h 4个时间点留取大鼠血及肝脏标本。全自动生化仪检测血清ALT、AST水平。苏木素-伊红(HE)染色下观察肝组织变化。RT-PCR法检测大鼠肝组织OX40mRNA表达。Western blot法检测肝组织OX40蛋白表达。结果肝衰竭组血清ALT和AST水平在12h升高最明显,24h开始下降。肝衰竭组肝组织OX40mRNA水平至12h达峰值,之后逐渐下降,与对照组比较,各时间点差异具有统计学意义(F=29.970,162.975,62.476,25.124,P<0.05)。肝衰竭组OX40蛋白的表达于12h达到最大值,与对照组相比,差异有统计学意义(F=17.240,169.298,88.289,74.984,P<0.05)。结论 OX40在急性肝衰竭过程中呈上升趋势,于12h达高峰,提示OX40可能在急性肝衰竭过程中发挥重要作用。     

BMSCs移植对单侧输尿管结扎大鼠CD4~+CD25~+Treg的影响

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对单侧输尿管结扎(UUO)梗阻性肾病模型大鼠外周血调节性T细胞CD4+CD25+Treg以及肾脏组织CD4+CD25+Treg特异性标志物FoxP3表达影响。方法自Wistar大鼠分离BMSCs,经体外传代培养、成脂诱导及鉴定后制备细胞悬液。54只Wistar大鼠随机分为假手术组、BMSCs干预组和生理盐水注射组,每组18只。BMSCs干预组和生理盐水注射组大鼠经UUO建立梗阻性肾病模型,并于造模同时经下腔静脉分别注入BMSCs和等体积生理盐水。分别于造模后第3、7和14天,采集外周血后分批处死各组大鼠(每组6只),留取肾脏组织标本。流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Treg占CD4+Treg的百分比(CD4+CD25+Treg/CD4+Treg);HE染色光学显微镜观察肾脏组织病理学改变;免疫荧光组织化学方法检测肾脏组织CD4+CD25+Treg特异性标志物FoxP3表达。结果 BMSCs干预组和生理盐水注射组大鼠造模后各时点外周血CD4+CD25+Treg/CD4+Treg均明显高于假手术组(P<0.05),BMSCs干预组与生理盐水注射组比较差异无统计学意义...     

人骨髓间充质干细胞移植对肝衰竭大鼠的治疗作用

目的:探讨体外诱导肝向分化成功后的人骨髓间充质干细胞经门静脉移植对肝衰竭大鼠肝功能及组织的影响。方法:人骨髓间充质干细胞传至第6代后,体外利用肝细胞生长因子(HGF)和上皮细胞生长因子(EGF)诱导其肝向分化。使用四氯化碳建立急性肝衰竭大鼠模型,随机分5组:HGF诱导分化细胞移植组、EGF诱导分化细胞移植组、HGF+EGF联合诱导移植组、无诱导细胞移植组和无细胞移植组,经门静脉移植人骨髓间充质干细胞,分别于移植后12 h、72 h、7 d、1月和2月时间点观察检测肝功能指标及肝脏病理的变化情况。结果:HGF诱导分化细胞移植组、EGF诱导细胞移植组、HGF+EGF联合诱导移植组、无诱导细胞移植组大鼠的生存情况、谷丙转氨酶、胆红素、白蛋白水平各指标较无细胞移植组均明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);但HGF诱导细胞移植组、EGF诱导细胞移植组和HGF+EGF联合诱导移植组各指标较无诱导细胞移植组,差异无统计学意义(P>0.05)。病理分析提示细胞移植组的大鼠肝显微结构较无细胞移植组改善明显。结论:肝向分化的人骨髓间充质干细胞移植入肝衰竭大鼠体内能够显著改善肝功能。     

骨髓基质细胞移植对大鼠脑缺血后Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

骨髓基质细胞（BoneMarrowStromalCell,BMSCs）,也被称为骨髓间充质干细胞,因其可自我更新、多向分化的特性,以及可取自自体,具有临床应用的可行性,而成为干细胞疗法最具潜力的种子细胞]。我们观察并分析了BMSCs移植对脑梗死大鼠脑组织神经细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达的影响,以探索BMSCs的治疗作用和机制。     

骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对缺血再灌注大鼠脑组织神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.方法:SD大鼠84只,随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=24)、磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=24)和MSCs组(n=24).模型组、PBS组和MSCs组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,假手术组除不插尼龙线外,其余步骤相同.PBS组和MSCs组分别于建模成功后24 h分别经颈动脉注入等体积的PBS液和已制备好的同种异体MSCs悬液.每组于脑缺血2 h再灌注2 d、4 d、6 d、8 d时行神经功能缺损评分及脑灌注固定取材,采用免疫组化染色及TUNEL检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白的表达及凋亡细胞数.结果:假手术组在各时间点神经功能评分为0分,无神经功能缺损,未见细胞凋亡,未见Bcl-2和Bax表达.与模型组和PBS组比较,脑缺血2 h再灌注4 d开始,MSCs组神经细胞凋亡数、Bax蛋白表达和神经功能缺损评分较低,Bcl-2蛋白表达较高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:骨髓间充质干细胞移植能改善脑损伤大鼠的功能;上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少神经细胞凋亡,可能是其主要机制之一.     

同源异体间充质干细胞上清液干预大鼠佐剂性关节炎

目的:探讨同源异体骨髓来源的间充质干细胞上清液对大鼠佐剂性关节炎的预防作用.方法:培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞,收集培养间充质干细胞48h的上清液;将健康雄性SD大鼠右后足跖皮内一次性注射弗氏完全佐剂0.1 mL/只制作佐剂性关节炎模型,造模后行间充质干细胞上清液干预;造模前及造模后第7、14、21和28天测量大鼠体重和后足爪体积,同时观察大鼠生存状况;并于干预后第28天摄四肢关节X片并做病理检查.结果:间充质干细胞上清液干预组大鼠的原发性炎症和继发病变均不明显,关节X片检查和病理检查均未见明显异常;干预组与模型组大鼠相比,体重、足爪体积差异有统计学意义(P＜0.05).结论:间充质干细胞上清液可有效干预弗氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎的进展.