β-catenin、Axin在卵巢上皮细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨β-连环蛋白(β-catenin)和轴蛋白(Axin)在卵巢癌组织中表达情况及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色法检测42例卵巢上皮细胞癌、20例卵巢良性肿瘤组织标本中β-catenin和Axin蛋白的表达情况,分析β-catenin、Axin表达与卵巢癌临床病理因素的关系。结果卵巢上皮细胞癌组织中β-catenin的异常表达率明显高于卵巢上皮性良性肿瘤组织(P<0.05),Axin阳性表达率明显低于卵巢上皮性良性肿瘤组织(P<0.05);β-catenin和Axin在卵巢上皮细胞癌中的表达呈负相关性(r=-0.442,P<0.05);β-catenin异常表达率和Axin阳性表达率与卵巢上皮细胞癌临床分期、组织学分级、有无淋巴结转移密切相关(P均<0.05),而与病理类型无明显关系(P均>0.05)。结论β-catenin、Axin表达与卵巢癌临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关,β-catenin、Axin可作为预测卵巢癌侵袭转移及预后的指标。     

HER-2在上皮性卵巢癌组织的表达及其临床意义

目的:研究HER-2在上皮性卵巢癌组织、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织的表达及其临床意义,为卵巢癌的发病及转移机制提供一定的理论依据.方法:应用MaxVision快捷免疫组化法检测27例上皮性卵巢癌、29例卵巢良性肿瘤和32例正常卵巢组织中HER-2的表达情况;并分析HER-2的表达与临床病理特征的关系.结果:HER-2在上皮性卵巢癌组织的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织(P<0.05).在上皮性卵巢癌组织中,临床分期越晚,病理学分级越高,HER-2的阳性表达率也越高(P<0.05).结论:HER-2在卵巢癌组织异常表达,与上皮性卵巢癌的恶性程度有关.     

上皮性卵巢肿瘤组织中MMP2和MMP9的表达及临床意义

目的研究基质金属蛋白酶(MMP2和MMP9)在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化EnVision法检测38例上皮性卵巢癌(A组)、20例交界性上皮性卵巢肿瘤(B组)、20例良性上皮性卵巢肿瘤(C组)和20例正常卵巢组织(D组)中MMP2和MMP9的表达和预后。结果 MMP2和MMP9在上皮性卵巢癌中的阳性率分别为94.7%和92.1%,显著高于良性卵巢肿瘤(40%)和正常卵巢(40%和50%),A组中的强阳性率(73.7%和78.9%)显著高于B组(27.2%和31.8%)、C组(5%)和D组(10%)(P<0.05);晚期上皮性卵巢癌中的强阳性率(94.4%和88.9%)显著高于早期的强阳性率(40%和45%)(P<0.05);中低分化(G2～G3级)上皮性卵巢癌中的强阳性率(53.3%和40%)显著高于高分化(G1级)的强阳性率(12.5%)(P<0.05);有淋巴转移的上皮性卵巢癌中的强阳性率(94.7%和89.5%)显著高于无淋巴转移组的强阳性率(68.4%和73.7%)(P<0.05)。结论 MMP2和MMP9可能参与卵巢的正常生理功能,它的异常高表达在上皮性卵巢癌的浸润、转移和交界性上皮性卵巢肿瘤的复发中起了重要作用。     

P-AKT和MMP-9在卵巢癌组织中的表达情况及临床意义

目的研究转移相关基因P-AKT和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织和卵巢恶性癌组织中的表达情况及其相关性,旨在为卵巢癌的诊断及预后判断提供理论依据。方法采用免疫组化SP法检测15例正常卵巢组织、32例卵巢良性肿瘤组织和48例卵巢恶性癌组织中P-AKT、MMP-9的表达情况和微血管密度(MVD),分析各指标表达情况与临床病理特征的关系及相互间的关系。结果 P-AKT在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织和卵巢恶性癌组织中的阳性表达率分别为0,40.63%,87.5%,在卵巢癌组织中临床分期较晚和伴随淋巴结转移时明显增高(P0.05);MMP-9在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织和卵巢恶性癌组织中的阳性表达率分别为0,44.00%,75.00%,在卵巢癌组织中临床分期较晚、组织学分级较差和伴随淋巴结转移时明显增高(P0.05);MVD值在有淋巴结转移的卵巢癌组织中明显高于无淋巴结转移者(P0.05)。Spearman相关性分析显示PAKT和MMP-9在卵巢恶性癌组织中呈显著正相关(P0.05)。结论 P-AKT、MMP-9是鉴别卵巢良恶性肿瘤的指标之一,检测淋巴结转移者中的MVD值对卵巢癌的恶性程度判断有帮助。     

cyclinB1和Survivin在卵巢肿瘤组织的表达及作用研究

目的：探讨cyclinB1和Survivin在卵巢上皮性肿瘤的表达与肿瘤良恶性、肿瘤分级的关系，来评判肿瘤的恶性程度及更好地预测患者的生存率。方法：采用免疫组化法检测58例上皮性卵巢癌、62例上皮性卵巢良性肿瘤中cyclinB1和Survivin的表达情况，分析cyclinB1和Survivin的表达与临床病理特征的关系。结果：cyclinB1和Survlvin在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率明显高于卵巢良性上皮性肿瘤，并且随着临床分期越晚及病理学分级越高，cyclinB1和Survivin的阳性表达也越明显。（P〈0.05）结论：cyclinB1和Survivin在上皮性卵巢癌组织中的异常表达与上皮性卵巢癌的恶性程度有关。     

CD44v6和P16表达与子宫内膜腺癌生物学行为的关系

目的探讨CD44v6和P16表达与子宫内膜腺癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化方法,对50例原发性子宫内膜腺癌组织进行了CD44v6和P16检测。结果CD44v6和P16在子宫内膜腺癌中阳性率分别为70%和52%。CD44v6和P16表达与子宫内膜腺癌的组织学分级、临床分期和转移相关(P<0.05)。结论CD44v6和P16表达可作为判断子宫内膜腺癌的恶性程度、预测肿瘤侵袭转移和评估预后的参考指标。     

HE4和CA125联合CD44检测在卵巢癌诊断及预后评估中的价值

目的分析血清人附睾分泌蛋白4(HE4)和糖类抗原125(CA125)联合CD44检测在卵巢癌诊断及预后评估中的价值。方法选取50例拟行手术治疗的上皮性卵巢癌患者作为观察组,50例卵巢上皮类良性疾病患者作为对照组,50例健康体检女性作为正常组。采集3组血液样本后使用ELISA法、电化学发光法以及免疫组化S-P法检测3组血清HE4、CA125及CD44水平,并比较观察组患者手术前后血清HE4、CA125及CD44变化。结果观察组HE4、CA125及CD44水平均显著高于对照组和正常组(P均0.05),对照组与正常组之间的差异无统计学意义(P均0.05)。HE4、CA125、HE4联合CA125、HE4和CA125联合CD44的敏感度分别为82.4%,68.6%,92.5%和96.9%,特异性分别为82.4%,61.7%,90.6%和95.2%。Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌患者HE4、CA125及CD44水平均显著高于Ⅰ~Ⅱ期(P均0.05),且观察组患者手术后HE4、CA125及CD44水平均显著低于手术前(P均0.05)。随访发现手术疗效显著者,HE4、CA125及CD44水平均明显下降(P均0.05)。HE4、CA125及CD44检测结果与病情进展之间的相符率分别为68.3%,75.0%和70.0%。结论 HE4、CA125联合CD44在卵巢癌诊断中有较高的敏感度和特异性,能够有效反映患者的病情变化,对于判断卵巢癌患者预后情况有重要价值。     

榄香烯对人胃癌细胞SGC-7901的体外生长及CD44v6、CD44的影响

目的:探讨榄香烯对人胃癌细胞株SGC-7901体外生长及细胞黏附分子CD44v6、CD44的影响。方法:Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测榄香烯对SGC-7901细胞增殖的影响;采用DAPI荧光染色法进行细胞核形态学分析;流式细胞仪检测细胞膜表面CD44v6、CD44表达。结果:榄香烯抑制SGC–7901细胞增殖,其呈量效和时效关系;DAPI染色显示榄香烯诱导SGC-7901细胞凋亡并显示特征性的凋亡细胞核形态;流式细胞仪检测结果显示榄香烯20、30、40μg/mL组与对照组相比,SGC-7901细胞膜表面CD44v6表达明显减少(P<0.01),CD44表达的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:榄香烯能抑制SGC-7901细胞增殖、诱导细胞凋亡,其抗肿瘤转移的机制可能与下调CD44v6表达相关。     

CD133及Notch1基因在上皮性卵巢癌中的表达和临床病理意义

目的探讨卵巢癌组织中CD133及Notch1的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测46例上皮性卵巢癌组织、18例良性上皮性卵巢肿瘤组织及10例正常卵巢组织中CD133及Notch1的表达情况。结果正常卵巢组织、良性上皮性卵巢肿瘤组织及卵巢癌组织中CD133及Notch1的表达呈升高趋势,组间比较有显著性差异。CD133及Notch1表达水平与卵巢癌的分期、病理分级及淋巴结转移相关,而与年龄及组织类型无关。Spearman相关性分析显示CD133表达与Notch1的表达呈正相关。结论 CD133及Notch1的高表达可能与卵巢癌的发生、发展有关。     

华蟾素对卵巢癌3AO细胞CD44s表达的影响

目的 探讨华蟾素对体外培养的卵巢癌3AO细胞CD44s表达的影响.方法 体外培养卵巢癌3AO细胞,不同浓度的华蟾素干预后,应用RT-PCR检测CD44s mRNA的表达,流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果 卵巢癌3AO细胞对照组CD44smRNA表达为1.3±0.1,细胞凋亡率为(2.31±0.98)%;0.25mg/ml华蟾素对卵巢癌3AO细胞CD44s mRNA和凋亡率的影响较对照组,无显著性差异(P＜0.05);2.5 mg/mL华蟾素干预后,3AO细胞CD44s mRNA 表达为1.0±0.1,癌细胞凋亡率为(28.69±4.16)%,较对照组有显著性差异(P＜0.05):25 mg·ml-1华蟾素与2.5mg·ml-1华蟾素对卵巢癌3AO细胞CD44s mRNA表达和凋亡率的影响无显著性差异(P＜0.05),较对照组有显著性差异(P＜0.05).结论 2.5 mg·ml-1华蟾素可有效抑制卵巢癌3AO细胞CD44s的表达,抑制癌细胞的侵蚀性生长.     

卵巢肿瘤中CD_(44)V_6与PCNA的表达及其意义

目的 :探讨卵巢良恶性肿瘤中 CD4 4V6 与 PCNA的表达及其临床意义。方法 :应用免疫组化 SP法对 42例恶性卵巢肿瘤、 2 4例良性卵巢肿瘤和 10例正常卵巢组织中 CD4 4V6 与 PCNA的表达进行检测。结果 :CD4 4V6 与 PCNA的表达特点相似 ,两者在恶性卵巢肿瘤中的表达均高于在良性卵巢肿瘤及正常卵巢中的表达 ;在发生转移的恶性卵巢肿瘤中的表达均高于未发生转移的恶性卵巢肿瘤中的表达。结论 :CD4 4V6 与 PCNA在恶性卵巢肿瘤的发生、发展及浸润、转移中起重要作用 ,可以作为预测恶性卵巢肿瘤转移潜能的指标     

扶正消癌方对Lewis肺癌模型小鼠的抑瘤作用

目的 观察扶正消癌方对Lewis肺癌模型小鼠肿瘤生长的抑制作用及其机制. 方法 选择60只C57BL/6J小鼠右前肢腋下接种Lewis肺癌细胞建立Lewis肺癌小鼠模型,随机分为荷瘤模型组、环磷酰胺(CTX)组、中药预防组、综合组,每组15只.CTX组接种72h后一次性腹腔注射CTX溶液0.2ml(4mg/ml),中药预防组接种前5天开始灌胃扶正消癌方0.4ml(2g/ml),综合组在CTX组基础上灌胃扶正消癌方药0.4ml(2g/ml),荷瘤模型组给予0.4ml生理盐水灌胃;每天灌胃1次,至造模后12天.观察各组小鼠生存状态及移植瘤生长情况,称量瘤重、胸腺重,计算抑瘤率、胸腺指数.免疫组化法检测瘤组织细胞黏附因子CD44的表达.结果 与荷瘤模型组比较,各组瘤重均显著降低(P＜0.01),综合组瘤重显著低于CTX组(P＜0.01),CTX组、中药预防组、综合组抑瘤率分别为83.97％、55.71％、87.23％.与荷瘤模型组比较,CTX组和综合组胸腺重均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),CTX组胸腺指数显著降低(P＜0.01);与CTX组比较,中药预防组胸腺重量显著增加(P＜0.01),综合组胸腺指数显著增加(P＜0.05).综合组CD44表达程度最低,与CTX组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 扶正消癌方可以协同化疗药物,提高肿瘤细胞对免疫系统及抗癌药物的敏感性,下调或逆转Lewis肺癌模型小鼠黏附因子CD44表达,发挥抑瘤和抗转移作用.     

卵巢肿瘤细胞凋亡与细胞增殖的关系

目的 :评估卵巢肿瘤细胞凋亡与增殖状况及两者的关系。方法 :运用流式细胞术检测良交恶三组卵巢肿瘤中bcl-2、p16、Rb,Cyclin D1蛋白及 TGF-β1 因子的表达和 DNA含量 (恶性组 3 3例、交界组 12例、良性组 5例 )。各指标间的相关性通过单因素直线相关分析和多因素直线相关分析来评估。结果 :bcl-2和 AP%间 ,TGF-β1 和 PI间俱呈负相关 ( r=-0 .2 8,P<0 .0 5 ,r=-0 .2 5 ,P<0 .0 5 )。多因素相关分析发现 p16的 F I值和 PI值呈负相关 ( Yi=-2 0 .3 2 ,P=0 .0 81)。恶性组和交界组卵巢肿瘤的 AP%值与良性肿瘤比较发生了相对减少。多因素分析证实 A P%值与 DI值呈负相关 ( Yi=-9.96,P=0 .0 3 7)。恶性组的细胞累积率高于良性组 ( P<0 .0 1)和交界组 ( P<0 .0 5 )。bcl-2和 p16呈负相关 ( r=-0 .2 6,P<0 .0 5 )。结论 :bc L -2能够抑制凋亡 ,它的增加有助于细胞恶性转变。 TGF-β1 能够抑制增殖 ,细胞对 TGF -β1 反应性的降低有助于恶变。 p16、 Rb的缺失和 Cyciln D1的增加有助于卵巢癌的发生和发展。恶性肿瘤中 AP%值的相对下降对于肿瘤恶变具有重要意义。 bcl-2和 p16间的负相关提示凋亡和增殖间具有相互作用。正由于凋亡相关蛋白和细胞周期调节因子间的相互作用 ,使恶性肿瘤保持较高的细胞累积率。     

VEGF-C在非小细胞肺癌血清及淋巴液中的表达及意义

目的通过对非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中、淋巴液中血管内皮生长因子C(VEGF-C)水平表达的测定来探讨VEGF-C和VEGFR-3在NSCLC肿瘤淋巴转移中的意义。方法采取肺部良性病变手术患者术前血清及术中采取胸导管内淋巴液作为对照组,肺癌患者术前血清及术中行肺癌根治术前,采胸导管内淋巴液为肺癌组,应用酶联免疫(ELISA)法检测VEGF-C浓度。结果55例NSCLC患者淋巴液中VEGF-C水平较血清中VEGF-C水平显著升高,而二者较肺部良性病变对照组淋巴液血清中VEGF-C浓度显著升高(P均<0.01)。肿瘤淋巴结转移组中淋巴液血清中VEGF-C浓度显著高于未有淋巴结转移患者(P均<0.01)。淋巴结转移组中,淋巴液VEGF-C浓度较血清VEGF-C浓度明显增高(P<0.01)。结论NSCLC患者淋巴液及血清中VEGF-C水平高低与肺癌淋巴结转移有关,对其检测可以作为肺癌侵袭转移的量化指标,特别是对淋巴液VEGF-C的研究,可为抑制肿瘤淋巴管生成的靶向治疗提供理论依据。     

肿瘤特异生长因子检测在卵巢恶性肿瘤诊断中的意义

目的　研究肿瘤特异生长因子 (TSGF)检测对卵巢恶性肿瘤的诊断意义。方法　采用比色法检测 4 3例卵巢恶性肿瘤患者、5 0例良性肿瘤患者及 5 0例健康体检者的血清TSGF含量。结果　恶性组血清TSGF浓度显著高于良性组和对照组 (P均 <0 .0 1)。Ⅲ～Ⅳ期恶性肿瘤患者血清浓度高于Ⅰ～Ⅱ期患者。血清TSGF测定诊断恶性肿瘤的敏感度为 79% ,特异度为92 %。结论　血清TSGF检测对恶性卵巢肿瘤的早期诊断有重要意义。     

miRNA-139-5p靶向Notch1/Jagged1调控胃癌干细胞增殖转移及益气补肾方的干预作用

目的:明确miRNA-139-5p对Notch1/Jagged1信号通路的靶向调控关系,探讨益气补肾方抗胃癌干细胞增殖转移的作用机制。方法:通过免疫磁珠分选及鉴定CD44+EpCAM+SGC-7901 CSC;双荧光素酶报告基因检测miRNA-139-5p与Notch1的结合作用;qRT-PCR检测不同细胞株中miRNA-139-5p、Notch1与Jagged1 mRNA表达;Western Blot检测不同细胞株中Notch1、Jagged1蛋白表达;qRT-PCR检测益气补肾方含药血清干预后,胃癌细胞株中miRNA-139-5p、Notch1与Jagged1 mRNA表达以及Notch1、Jagged1蛋白表达。结果:免疫磁珠能较好地分选出CD44+EpCAM+SGC-7901 CSC细胞株。转染克隆有Notch13’-UTR野生型载体质粒实验中,miRNA-139-5p组荧光素酶活性明显受到抑制,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。胃癌细胞中miRNA-139-5p的表达量显著减少,Notch1、Jagged1的mRNA与蛋白表达量均显著增加(P<0.05,P<0.01)。益气补肾含药血清干预后,胃癌细胞中miRNA-139-5p表达水平显著升高,Notch1、Jagged1 mRNA与蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。结论:Notch1基因是miRNA-139-5p直接作用的靶基因,益气补肾方可能是通过调控miRNA-139-5p/Notch1/Jagged1信号通路而发挥抗胃癌增殖转移的作用。     

食管鳞状细胞癌RKIP基因甲基化状态的检测及临床意义

目的研究食管鳞状细胞癌(ESCC)中RKIP基因启动子甲基化及其蛋白表达情况。方法采用改进的甲基化特异性PCR(MSP)和免疫组织化学SP法检测ESCC组织及相应癌旁正常组织中RKIP基因的DNA甲基化和蛋白表达情况。结果 77例ESCC组织中RKIP基因启动子的甲基化发生率(75%)显著高于癌旁正常组织(27%)(2=35.582,P<0.01);有淋巴结转移的ESCC组织中甲基化率(87%)高于无淋巴结转移的ESCC组织(59%)(2=7.494,P<0.01);低分化ESCC组织中甲基化发生率(94%)高于高、中分化ES-CC组织(50%,25%)(P均<0.01)。77例ESCC组织中RKIP蛋白的表达率(36%)与相应癌旁正常组织的RKIP蛋白表达率(77%)比较有显著性差异(2=25.39,P<0.001);有淋巴结转移的ESCC组织中蛋白表达率(24%)低于无淋巴结转移的ESCC组织(53%)(2=6.648,P=0.01)。结论 RKIP基因启动子区甲基化导致的基因沉默可能是ESCC的发生机制之一,可作为反映ESCC生物学行为的检测指标。     

增免抑瘤方对顺铂耐药卵巢癌裸鼠耐药相关基因HIF-1α、Glut1、MDR1、P-gp表达的影响

目的研究增免抑瘤方(ZMYL)对顺铂耐药卵巢癌裸鼠耐药调控基因HIF-1α、Glut1、MDR1、P-gp表达的影响。方法采用顺铂耐药人卵巢癌细胞株COC1/DDP构建裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组,中药高、中、低剂量组,顺铂组(DDP),联合组(DDP联合中药),各组给予相应干预措施共3周。定期测量瘤体最大、最小径线,绘制肿瘤生长曲线,给药结束后处死裸鼠,剥取瘤体计算瘤重及抑瘤率,免疫组化测定瘤体HIF-1α、Glut1的表达,定量RT-PCR测定瘤体MDR1、P-gp的表达。结果①抑瘤率:联合组抑瘤率最高,达(59.26±6.86)%,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01);中药各剂量组均有一定的抑瘤作用,抑瘤率低于顺铂组(P<0.01)。②免疫组化结果:联合组HIF-1α的表达最低(P<0.01);中药高、中剂量组HIF-1α的表达较顺铂组降低(P<0.01);低剂量组与之比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合组以及中药高剂量组Glut1的表达低于顺铂组(P<0.01);中剂量组与之比较差异无统计学意义(P>0.05);低剂量组高于顺铂组(P<0.05),但与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。③定量RT-PCR结果:顺铂组MDR1、P-gp的表达较对照组升高(P<0.01);联合组以及中药各剂量组MDR1、P-gp的表达较顺铂组降低(P<0.01)。结论增免抑瘤方辅助化疗可逆转耐药卵巢癌裸鼠对顺铂的耐药性,增强其抑瘤作用;其作用机制可能通过下调瘤体内缺氧标记物Glut1、HIF-1α的表达,下调多药耐药基因MDR1、P-gp的表达,从缺氧介导的"药泵"耐药机制途径改善卵巢癌化疗耐药。