粘附分子、粘附蛋白与胶质瘤的研究进展

粘附分子、粘附蛋白介导着细胞与细胞、细胞与细胞外基质的粘附,它们在胶质瘤细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞、肿瘤内血管内皮细胞上的表达,为淋巴细胞对胶质瘤细胞的识别,胶质瘤的局部浸润,瘤细胞沿血管内脏的浸润和转移提供了分子基础,通过调节细胞表面粘附分子,粘附蛋白的表达,利用它们的单抗,活性生物片段,反义寡核苷酸链,增强免疫系统的识别,抑制肿瘤的局部浸润,从而达到治疗作用。     

脑胶质细胞瘤侵袭性的相关因素

胶质瘤的侵袭性涉及多个方面 :粘附分子和细胞外基质 ;蛋白水解酶系统 ;血管生成及相关基因等。整合素使瘤细胞粘附到细胞外基质 ,尿激酶型纤溶酶原激活剂系统和基质金属蛋白酶系统能够水解细胞外基质 ,血管内皮生长及其受体能够促进肿瘤血管的生成 ,侵袭相关基因在肿瘤侵袭中起调控作用。它们各自作用于不同的环节 ,但相互之间又存在广泛的联系 ,形成一个复杂的网络 ,它们的共同作用在胶质瘤的侵袭性中起着重要作用     

肿瘤血管内皮细胞对胶质瘤细胞侵袭力的影响

目的 探讨胶质瘤血管内皮细胞(GVEC)在胶质瘤瘤细胞浸润过程中的作用.方法 通过免疫磁珠分离肿瘤血管内皮细胞,Tanswell 研究内皮细胞对胶质瘤细胞的迁徙和侵袭能力.结果 将内皮细胞与胶质瘤细胞共同培养后能显著增加其迁徙和侵袭能力,并能增加MMP-2,9 蛋白的表达.结论 血管内皮细胞与胶质瘤浸润的过程密切相关,通过增加MMP-2,9 蛋白的表达提高浸润的能力.     

Stathmin在脑胶质瘤血管内皮细胞中的表达及意义

目的 观察Stathmin及CD105在脑胶质瘤血管内皮细胞中的表达,探讨其在脑胶质瘤血管形成中的作用. 方法 用SP免疫组化法检测10例正常脑组织和78例脑胶质瘤血管内皮细胞中Stathmin和CD105蛋白表达,并通过检测肿瘤微血管密度(MVD)分析肿瘤血管形成.结果 正常脑组织血管内皮细胞中Stathmin和CD105均无表达,脑胶质瘤血管内皮细胞中二者均呈高表达;随着胶质瘤病理级别的增高,Stathmin和CD105表达上调,MVD值增高,Stathmin-MVD和CD105-MVD与脑胶质瘤病理分级均成正相关(r=0.912,P<0.05;P<0.936,P<0.05);且Stathmin-MVD和CD105-MVD之间也存在正相关(r=0.996,P<0.05). 结论 Stathmin与CD105在脑胶质瘤血管内皮细胞中均呈高表达,在肿瘤微血管形成过程起重要作用.     

VE-statin/Egfl7-siRNA抑制恶性胶质瘤诱导内皮细胞血管生成能力的体外研究

目的通过细胞培养及RNA干扰技术探讨类表皮生长因子域7(VE-statin/Egfl 7)在恶性胶质瘤血管生成中的作用和机制。方法Transwell培养技术建立U 251-HUVEC共培养系统,体外模拟恶性胶质瘤与内皮细胞的相互作用;并通过构建靶向VE-statin/Egfl7基因的siRNA慢病毒载体抑制U251和HUVEC细胞中该基因的表达。通过内皮细胞增殖、粘附、迁移及成管实验检测该基因在体外恶性胶质瘤微环境中对血管生成的影响。结果沉默VE-statin/Egfl 7基因表达后,HUVEC生长出现暂时性减缓,但很快恢复正常增殖状态,而且内皮细胞的迁移能力不受影响,但是内皮细胞的粘附能力明显受到抑制;成管实验发现,VE-statin/Egfl7基因沉默后内皮细胞不能形成毛细血管样结构。结论 VE-statin/Egfl7可通过调节内皮细胞的粘附性而在恶性胶质瘤血管生成过程的血管管腔形成过程中起着关键性调控作用。     

整合素与胶质瘤新血管生成及侵袭性生长的关系

整合素是指细胞与细胞或细胞与细胞外基质相关联的细胞膜表面的一族细胞粘附分子。主要介导细胞与细胞及细胞与细胞外基质之间的相互粘附和双向信号传导，对细胞的生长、增殖、分化、凋亡等过程起到重要的调控作用。研究发现。整合素介导的粘附行为和信号传导．在肿瘤的发生、发展、新血管生成、侵袭性生长等阶段亦发挥重要的作用。胶质瘤是中枢神经系统最为常见的恶性肿瘤。     

VEGF在人脑胶质瘤中的表达与肿瘤增殖及肿瘤血管生成的关系

目的研究血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在人脑胶质瘤中的表达与肿瘤增殖及血管生成的关系。方法应用免疫组化技术和形态定量分析法,检测98例手术切除脑胶质瘤中VEGF表达、PCNA标记指数(PCNA LI)、微血管密度(Microvessel density,MVD)表达。结果(1)肿瘤细胞及血管内皮细胞均可以表达VEGF,阳性颗粒分布于肿瘤胞浆中;(2)高级别肿瘤PCNA、LI、MVD显著高于低级别肿瘤(P<0.05);VEGF表达阳性肿瘤的PCNA、LI、MVD显著高于VEGF表达阴性肿瘤(P<0.05);(3)在星形细胞肿瘤中,随着MVD的增大,VEGF在肿瘤血管内皮的染色率逐渐增加,与肿瘤的MVD存在正相关关系(r值为0.44,P<0.01)。结论脑胶质瘤的VEGF表达与MVD呈正相关关系,VEGF在肿瘤细胞增殖及血管再生过程中起重要作用。     

Notch信号通路在脑胶质瘤中的研究进展

Notch信号通路通过细胞间受体及配体作用介导信号转导,在系统发育及肿瘤发生、发展等生理病理过程中发挥重要作用。Notch信号通路在脑胶质瘤方面也被广泛研究,Notch配体、受体及其下游基因在脑胶质瘤中都有不同程度的增高,且与胶质瘤级别呈一定的相关性。选择性抑制Notch信号通路,胶质瘤细胞生长受抑、凋亡增加,肿瘤动物模型存活时间延长。最近研究还发现Notch的配体之一DLL4(Deltalike-4)可以抑制肿瘤血管内皮细胞增殖,调控肿瘤血管形成,成为潜在的胶质瘤治疗靶点。     

恶性脑肿瘤抗血管治疗研究进展

恶性脑肿瘤尤其恶性胶质瘤是人体血管化程度最高的肿瘤,血管生成和增生在其生长和侵袭中起重要作用并与其恶性程度相关。针对血管生成的抗血管治疗为恶性脑肿瘤的综合治疗提供了一种新的策略,抗血管治疗可通过全身系统给药和肿瘤局部给药两种途径进行,针对血管生成的多步骤,可通过运用内源性血管生成抑制物、对抗血管生成因子的作用、直接诱导血管内皮细胞的调亡和影响血管平滑肌细胞和细胞外基质形成血管支架等方法在多层次进行干预。     

一氧化氮对肿瘤血管生成的作用

肿瘤血管生成(angiogenesis)是指从肿瘤或其周围芽生出新的以毛细血管为主的血管系统的过程,由肿瘤细胞、血管内皮细胞和巨噬细胞所合成分泌的促血管生成物质及血管生成抑制物失平衡所致.自1971年Folkmann提出"肿瘤的生长取决于血管生成"以来,人们越来越认识到血管生成不仅能提供营养、促进肿瘤生长,同时在恶性肿瘤(如胶质瘤等)的浸润、转移等生物学行为中也起着重要作用.     

胶质瘤VEGF基因表达与血管生成和脑水肿的关系

目的　探讨胶质瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因表达与血管生成和脑水肿的关系。方法　采用Northernblot和ABC免疫组化方法检测34例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中VEGF基因表达;Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体组织化学染色显示微血管,用微血管计数(MVC)测定肿瘤血管生成;从脑水肿与肿瘤本身的体积之比获得水肿指数(EI),估价脑水肿的程度。结果　34例脑胶质瘤和8例正常脑组织均可表达3.9Kb的VEGFmRNA片段。VEGFmRNA表达与脑胶质瘤的血管生成、瘤周脑水肿均呈显著正相关(r=0.836,P＜0.01;r=0.890,P＜0.01);高恶度胶质瘤VEGFmRNA表达、MVC、EI分别显著高于低恶度胶质瘤(P＜0.01);低恶度胶质瘤VEGFmRNA表达、MVC均显著高于正常脑组织(P＜0.05)。免疫组化染色显示,VEGF蛋白主要分布在高恶度胶质瘤组织的瘤细胞和内皮细胞,低恶度胶质瘤呈低水平表达。结论　VEGF可能通过参与胶质瘤血管生成和脑水肿发生,对胶质瘤的恶性演进起促进作用。     

缺氧诱导细胞外基质重塑在胶质瘤抗血管治疗耐药中的研究进展

细胞外基质（ECM）是肿瘤微环境的重要组成部分,参与调控多种肿瘤的恶性表型。在胶质瘤中,缺氧微环境可刺激细胞诱导ECM重塑,为肿瘤新生血管的形成提供空间。此外,缺氧可调控一系列信号分子诱导血管生成拟态（VM）的形成。VM是一种缺氧驱动肿瘤细胞自身胞外基质重塑、不依赖内皮细胞的肿瘤血管形成方式,可在内皮源性肿瘤血管被抑制时依然为肿瘤供氧,故成为胶质瘤高侵袭性表型和治疗抗性的重要原因之一。因此,靶向血管拟态中ECM重塑关键因子及环节有望为胶质瘤治疗方案提供新思路。     

ABCG2与VEGF、VEGFR和CD34在胶质瘤组织芯片中的共表达

目的 探讨ABCG2在胶质瘤血管形成过程中与VEGF、VEGFR和CD34的关系和共表达.方法 构建布有90例各级别人脑胶质瘤的组织芯片,用EnVision法的免疫组织化学染色,分别分析ABCG2、VEGF、VEGFR和CD34在胶质瘤中的表达率、微血管密度(MVD)及其相关性,并以免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测CD34和ABCG2共表达的细胞.结果 ABCG2、VEGF、VEGFR和CD34的表达率均随胶质瘤恶性程度增加而增高;并且ABCG2表达水平与肿瘤MVD显著相关,γ=0.540,P＜0.001.ABCG2阳性表达的Ⅲ、Ⅳ级肿瘤标本MVD比Ⅰ、Ⅱ级高.VEGF、VEGFR和ABCG2均为阳性表达的肿瘤标本MVD平均值显著高于ABCG2阴性表达者,P＜0.001.在CD34显示的肿瘤血管腔壁上同时见到了ABCG2的表达.结论 胶质瘤的恶性进展除了与公认的肿瘤细胞和肿瘤血管内皮细胞共表达的VEGF和VEGFR高表达相关,还与ABCG2高表达相关.在同一根血管上同时见到了ABCG2(肿瘤干细胞标志蛋白)和CD34(内皮细胞标志蛋白)的共表达,表明肿瘤干细胞除了生成肿瘤细胞,还有可能生成肿瘤血管内皮细胞.     

胶质瘤干细胞来源的外泌体对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的探讨胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)来源的外泌体对人脑微血管内皮细胞(HBMECs)的增殖和迁移的影响。方法培养和分离人胶质瘤U87细胞系来源的胶质瘤干细胞(GSCs),对培养的肿瘤球细胞及其诱导分化的细胞采用免疫组织化学染色的方法鉴定。然后提取胶质瘤干细胞分泌的外泌体(GSCs-exo),分别添加不同浓度的GSCsexo (20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml)处理人脑微血管内皮细胞(HBMECs)。在处理结束后,采用CCK-8法检测GSCs-exo对血管内皮细胞增殖的影响、Transwell小室检测GSCs-exo对细胞迁移能力的影响。结果肿瘤球细胞培养状态下呈悬浮生长,免疫组织化学荧光染色法证明培养的肿瘤球细胞中特异性表达CD133和Nestin,其诱导分化的细胞染色可见GFAP和Neun表达阳性。随着GSCs-exo浓度的升高,促血管内皮细胞的增殖能力逐渐增强,迁移能力也大大提高(P 0. 05)。结论在胶质瘤微环境中,胶质瘤干细胞来源的外泌体可以促进血管内皮细胞的增殖和迁移,GSCs-exo可能是胶质瘤血管形成的关键因素。     

NF-κB在胶质瘤细胞凋亡中的作用

NF-κB蛋白家族作为转录调控因子,参与细胞的增殖、抑制细胞的凋亡,并被证实和许多肿瘤的形成有关,在肿瘤发生发展过程中具有重要作用.近年来研究发现NF-κB与胶质瘤的恶性程度、侵袭性、血管生成密切相关,NF-κB通路介导了肿瘤相关基因的异常表达,从而抑制胶质瘤细胞凋亡,促进胶质瘤血管形成和转移等,直接影响胶质瘤的发生和发展,而降低胶质瘤中NF-κB的活性有可能成为治疗胶质瘤的新方向.     

人脑胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型中血管生成拟态现象的观察

目的 观察胶质瘤裸鼠移植瘤生长过程中的血管生成拟态现象(VM)以及与血管内皮依赖性血管之间的关系.方法 采用人脑胶质瘤细胞株U87单细胞悬液(2×106个/0.1 ml)于4周龄裸鼠皮下注射建立移植瘤模型.应用血管内皮细胞标志物CD34和高碘酸雪夫(PAS)试剂双染的方法检测40例不同大小的皮下移植瘤中的VM和血管内皮依赖性血管.结果 VM和血管内皮依赖性血管在不同大小的裸鼠皮下U87移植瘤中均存在.微血管密度(MVD)和肿瘤的直径呈正相关(r=0.393,P=0.012),血管生成拟态密度(VMD)与MVD负相关(r=-0.404,P=0.010),而与肿瘤的直径没有显著的相关性(P =0.575).结论 血管生成拟态与内皮依赖性血管是两种不同的肿瘤循环形式,在U87裸鼠皮下移植瘤的生长过程中持续存在并具有互补性,共同为肿瘤的生长提供营养支持.     

VEGF受体3在人脑胶质母细胞瘤中的表达及作用

目的研究血管内皮细胞生长因子受体3在人脑胶质母细胞瘤中的内皮细胞中的表达,其对肿瘤血管内皮细胞增殖,迁徙和血管成形功能的作用。方法使用实时聚合酶链式反应(RTPCR),酶联免疫吸附法(ELISA)研究血管内皮细胞生长因子C在脑胶质瘤组织和肿瘤细胞U87、U251中的表达,使用RT-PCR,免疫组化方法研究血管内皮细胞生长因子3在脑胶质母细胞组织和内皮细胞中的表达,使用特异性阻滞剂MAZ51阻滞其在人脑胶质母细胞瘤中的内皮细胞中的作用。结果血管内皮细胞生长因子C表达于人脑胶质瘤组织和肿瘤细胞中,血管内皮细胞生长因子3表达于人脑胶质母细胞瘤组织和内皮细胞中,使用阻滞剂MAZ51可降低肿瘤血管内皮细胞增殖,迁徙和血管成形能力。结论血管内皮细胞生长因子受体3参与人脑胶质母细胞瘤血管拟态形成,可能成为脑胶质瘤肿瘤抗血管治疗的新靶点。     

人脑星形细胞肿瘤CD133和巢蛋白阳性细胞的分布特征

目的 探讨CD133 和巢蛋白阳性细胞在人脑星形细胞肿瘤中的分布特征.方法 采集不同级别星形细胞肿瘤标本31 例,免疫组织化学染色检测其胶质瘤干细胞标志物CD133 和巢蛋白表达水平,光学显微镜下观察CD133 和巢蛋白阳性细胞在不同级别星形细胞肿瘤中的分布特征.结果 不同级别肿瘤之间和同一肿瘤不同区域之间CD133 阳性细胞的分布呈现极大变异性,低级别星形细胞肿瘤完全不表达或仅单个细胞表达,高级别星形细胞肿瘤成簇表达,其特异性分布特征为CD133 阳性细胞围绕微血管分布,单个细胞贴附于血管外壁,在肿瘤周围水肿区域亦可呈散在分布而不贴附于血管外壁;簇状或巢状分布的CD133 阳性细胞均位于近血管区域,CD133 阳性细胞形态亦不尽一致,无论是新生发芽的肿瘤性血管内皮细胞还是成熟的血管内皮细胞均不表达CD133.巢蛋白阳性细胞在不同级别肿瘤之间和同一肿瘤不同区域之间具有与CD133 阳性细胞相似的分布特征,但新生发芽的肿瘤性血管内皮细胞巢蛋白表达阳性;变性肿瘤中巢蛋白阳性细胞可呈" 开屏状"分布,而CD133 阳性细胞未见类似分布.结论 CD133 和巢蛋白阳性细胞在人脑星形细胞肿瘤中呈现近微血管分布和富集于肿瘤周围水肿区域的分布特征,新生发芽的肿瘤性血管内皮细胞巢蛋白表达阳性.     

NCAM与胶质瘤的研究进展

神经细胞粘附分子(neural cell adhesion molecule,简称NCAM)作为细胞粘附分子家族中的一员,介导细胞间的粘附,既有许多有益的生物学作用,又与许多疾病的发生发展有关。研究表明它在肿瘤的侵袭转移的发生发展过程中起重要作用。本文概要介绍NCAM的分子基因结构与功能,及它与胶质瘤的关系,尤其是它在胶质瘤中的表达和作用。     

Tie-2受体在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的测定Tie-2受体在人脑胶质瘤组织中的表达水平,评价其与肿瘤血管生成及临床病理特征的关系。方法采用免疫组化方法,检测42例人脑胶质瘤组织中Tie-2、CD34的蛋白表达情况,并测定肿瘤组织的微血管密度(MVD)。结果Tie-2受体阳性表达主要位于血管内皮细胞内,在肿瘤细胞内仅有少量表达。Tie-2受体表达水平与胶质瘤的临床病理分级、肿瘤内MVD显著相关(P<0.01),而与患者性别、年龄、肿瘤大小无关。结论Tie-2受体可能在胶质瘤血管生成和肿瘤恶性发展中起重要调控作用,有望成为判断胶质瘤恶性程度和预后的重要指标。