一期法测定正常人和甲型血友病病人血浆及冷沉淀中FⅧ：C结果分析

一期法测定正常人和甲型血友病病人血浆及冷沉淀中ＦⅧ：Ｃ结果分析１６１００５齐齐哈尔市红十字中心血站孙维萍，陈月，张立建ＦⅧ：Ｃ促凝血活性缺乏可引起甲型血友病［１］。临床上，诊断血友病、监测血友病病人治疗效果及检测凝血因子Ⅷ制剂（如冷沉淀）都需要测定Ｆ...     

冷沉淀中血管性血友病因子含量测定及意义

目的通过检测冷沉淀中血管性血友病因子(vWF),并与新鲜冰冻血浆和冷上清比较,为评价冷沉淀质量和临床应用提供依据。方法应用酶联免疫吸附法检测无偿献血者新鲜冰冻血浆、冷沉淀和冷上清中vWF含量。结果新鲜冰冻血浆、冷沉淀和冷上清中vWF表达水平分别为(126.47±7.80)%、(268.50±19.51)%和(19.92±2.34)%。其中冷沉淀组明显高于新鲜冰冻血浆和冷上清。结论在严格控制制备条件下,冷沉淀中富含vWF,冷上清中残留的vWF很低,临床应用时,应该予以区别后选择使用。     

冷沉淀中Ⅷ因子和纤维蛋白原含量测定

冷沉淀由全血分离的新鲜冰冻血浆 (freshfrozenplasma,FFP)制备 ,通常 1单位容量为 2 0～ 30ml(2 0 0ml血浆中提取 ) ,主要含有凝血因子Ⅷ (FⅧ )、纤维蛋白原 (Fbg)、血管性血友病因子 (VonWillebrand因子 ,vWF)、XⅢ因子以及纤维结合蛋白等成分。目前仍是国内治疗甲型血友病、纤维蛋白原缺乏症等疾病的最佳制品之一 ,因此检测冷沉淀中的FⅧ和Fbg的含量是保证冷沉淀质量的必要手段。笔者随机抽检 8批共 32袋冷沉淀 ,对FⅧ、纤维蛋白原含量进行检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1　标本来源　徐州市街头流动采血车无偿献血者 ,冷沉…     

血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体的检测及其与因子ⅧC区的关系

本研究应用快速而敏感的ELISA法检测血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体,并探讨其与因子ⅧC区的关系.收集140例血友病A患者样本,其中重型（FⅧ∶C＜1％）84例,中型（FⅧ∶C 1-5％）34例,轻型（FⅧ∶C＞5％）22例;患者均已经过因子Ⅷ替代治疗.正常对照样本80例.以本室制备的抗因子Ⅷ单克隆抗体包被酶标板,封闭后加入重组人凝血因子Ⅷ,洗涤后加入待测稀释血浆,再次洗涤后加入HRP标记的羊抗人IgG,OPD显色,记录A490,以正常人血浆为对照,样本A490大于正常人对照3 SD定义为因子Ⅷ抗体阳性.以抗His抗体包被酶标板,封闭后加入本室制备的rFⅧ-C1C2区蛋白,洗涤后加入待测稀释血浆,再次洗涤后加入HRP标记的羊抗人IgG,OPD显色,记录A490,以正常人血浆为对照,样本A490大于正常人对照3 SD定义阳性.结果表明,通过ELISA法检测,56例（40％）血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体阳性,其中46例（82.1％）因子Ⅷ同种抗体阳性的血浆样本中存在与因子ⅧC1C2结合的同种抗体.结论：因子ⅧC功能区是中国血友病A患者因子Ⅷ同种抗体的主要结合部位之一.     

两种方法融化冰冻血浆制备冷沉淀的比较

<正> 通常采用4℃冰箱融化冰冻血浆制备冷沉淀(每单位由400ml全血制备),融化时间长,约需16～20小时.为了缩短制备冷沉淀融化血浆的时间,我们试用4℃冰水和4℃冰箱两种方法融化血浆并对因子Ⅶ活性单位得率进行比较.现将结果报告如下:     

无偿献血者血管性血友病因子的含量及临床意义

目的通过检测献血者血浆中血管性血友病因子(vWF),为其制备冷沉淀和临床应用提供依据。方法应用酶联免疫吸附法检测无偿献血者血浆和普通冰冻血浆中vWF含量。结果无偿献血者血浆中vWF含量为(125.81±48.71)%,去冷沉淀血浆中含量为(25.52±9.29)%。结论无偿献血者血液采集后6h内分离的血浆,其vWF含量稳定,可用于冷沉淀制备和临床应用。     

血浆冷沉淀在血友病甲患者手术中的应用(附9例报告)

<正> 血友病甲是常见的遗传性凝血障碍性疾病之一,临床特征为自发性或外伤后出血不止。对血友病甲患者施行外科手术时,首先要监测FⅧ:C,适量补充凝血因子Ⅷ,使其维持在一定的水平,才能使病人安全地度过手术期。1964年Pool等首先成功地将血浆冷沉淀用一于治疗血友病甲患者出血,此后被逐渐推广应用。1982年以来,笔者对9名施行外科手术的血友病甲患者,术前和术后补充适量的冷沉淀因子Ⅷ,获得良好的止血效果,现报告如下。     

对甲型血友病输血治疗的探讨

患者男性31岁,入院前1d不慎钝器擦伤右大腿外侧后疼痛剧烈、局部皮肤出现青紫当时未予重视,自行冷敷后疼痛明显减轻,当时无发热、畏寒,无头晕、头痛症状。数分钟后右大腿逐渐肿胀,并向远端蔓延,疼痛逐渐加重,遂入院治疗。体格检查右下肢中段至膝关节处肿胀明显,分别散在小的张力性水泡,皮肤紧绷,大腿中部腿围65cm,左腿腿围55cm,右膝关节肿胀,活动欠佳,最大屈曲度10°。询问病史：即往有反复外伤下肢血肿史,1993年在新疆医学院附一医院诊断“甲型血友病”。     

急性脑血管病血浆因子Ⅷ相关抗原测定的临床意义

本文对经头颅CT证实的急性脑血管病61例及对照组29例作了血浆因子Ⅷ相关抗原(ⅧR:Ag)测定。发现脑梗塞组及脑出血组均明显高于正常人(p<0.001),脑出血组又明显高于脑梗塞组,且脑出血病人死亡组明显高于存活组。其结果表明血浆因子ⅧR:Ag测定可作为急性脑血管病的危险因素及预后的指标之一。     

血管性血友病因子活性检测在病毒灭活冷沉淀质量控制中的应用

目的建立血管性血友病因子标准曲线,探讨在血管性血友病因子检测病毒灭活冷沉淀质量控制中的应用。方法将80袋200ml新鲜冰冻血浆在4℃血浆解冻箱溶解后平均分为两袋,每袋约100ml,分两组做实验研究,一组直接做成冷沉淀(对照组)留标本2ml,另一组做病毒灭活后做冷沉淀(实验组)留标本2ml,将标本急冻统一检测血管性血友病因子活性。结果 80袋对照组血管性血友病因子(v WF)活性为262.40+22.35%;实验组血管性血友病因子(v WF)活性为211.72+16.32%。结论病毒灭活血浆做冷沉淀除了不稳定因子VIII及纤维蛋白原有不同程度降低外,血管性血友病因子活性降低的幅度大约为19%,也可作为一项监测病毒灭活冷沉淀的指标使用。     

我国人凝血因子Ⅷ制品中血管性血友病因子效力分析

目的 获得国内人凝血因子Ⅷ(FⅧ)制品中血管性血友病因子(vWF)的效力信息.方法 获得国内7家及国外1家血液制品厂生产的FⅧ制品,检测其中FⅧ和vWF各项指标.结果 国内7家FⅧ制品中有2个厂家FⅧ制品中vWF活性损失超过25％;国内不同厂家FⅧ制品中vWF活性与FⅧ活性比值差异较大,P＜0.05.C、D、F厂家制品...     

人工制备的因子Ⅷ缺乏血浆

<正> 分析因子Ⅷ的凝血活性在临床诊断甲型血友病和生产治疗用的因子Ⅷ浓制剂中是非常重要的.测定因子Ⅶ:C活性方法目前主要有两种.一是一期法,一是二期法.由于二期法操作较为繁琐,所以不易推广.而一期法操作相对简单,颇受欢迎.国外采用最多的方法是一     

显色底物分光光度计法测定FⅧ：C新技术的研究进展

用显色底物分光光度计法测定人凝血因子Ⅷ促凝活性(FⅧ:C)是70年代末、80年代初发展起来的1种FⅧ:C检测新技术。其基本过程是将混合试剂在Ca~(2-)活化下与因子Ⅷ反应,其生成物与显色底物作用后,测定形成的显色物质的吸光度。显色底物法测定FⅧ:C技术于1976年由Seghatchian等人首创,用于血友病血浆和供血者血浆中因子Ⅷ水平分析。由于使用显色底物进行比色分析。故被称为     

一步离子交换层析制备人血管性血友病因子/人凝血因子Ⅷ蛋白液

目的研究通过一步离子交换层析法,制备vWF∶Rco/FⅧ∶C≈1的人血管性血友病因子/人凝血因子Ⅷ蛋白液。方法选用Toyopearl^? DEAE-650填料,取同一批次的人血管性血友病因子(vWF)上柱前液,研究不同上样量、不同洗脱液盐浓度对洗脱液中人血管性血友病因子抗原(vWF∶Ag)、人凝血因子Ⅷ效价(FⅧ∶C)、人血管性血友病因子效价(vWF∶Rco)的影响。结果从得率考虑,上样量最佳为4—5倍柱体积;洗脱液盐浓度0.42 mol/L时,vWF∶Rco/FⅧ∶C≈1∶1,vWF回收率≈60%,为最佳配方。结论在本试验层析条件前提下,调节洗脱液中盐浓度0.42 mol/L,可获得vWF∶Rco/FⅧ∶C≈1∶1的vWF/FⅧ蛋白液。     

制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆的质量优化

目的比较不同保存时间、保存温度、速冻效果对新鲜冰冻血浆纤维蛋白原(FIB)、Ⅷ因子(FⅧ)的影响,选择最佳条件用于制备冷沉淀的原料血浆。方法 (1)以采血时间为时间起点,选取46例4℃保存6~≤8h、8~≤10h、10~≤12h、12~≤14h、14~≤16h、16~≤18h新鲜冰冻血浆检测FIB、FⅧ并分析合格率。(2)以采血时间为时间起点,选取46例4℃保存6~8h、22℃ 6~8h、22℃8~≤10h新鲜冰冻血浆检测FIB、FⅧ的含量并分析合格率。(3)选取29例新鲜冰冻血浆检测速冻前后FIB、FⅧ的含量并分析合格率。结果 (1)随保存时间的延长,4℃条件下FIB、FⅧ的含量、合格率呈下降趋势,FⅧ下降在12~≤14h开始显著变化(P0.05),FIB、FⅧ合格率在14~≤16h开始显著变化(P0.05),FIB合格率16~≤18h开始显著变化(P0.05)。(3)与4℃ 6~≤8h组比较,22℃8~≤10h组新鲜冰冻血浆FIB、FⅧ的合格率与含量下降,差异有统计学意义(P0.05)。(3)速冻对FIB、FⅧ含量、合格率无影响(P0.05)。结论 4℃12h内或22℃ 8h内的新鲜冰冻血浆速冻后有更高的FIB、FⅧ合格率和含量,更适合用于制备冷沉淀。