益气血补肝肾方对子宫内膜整合素αvβ3表达的影响

目的:观察益气血补肝肾方对子宫内膜整合素αvβ3表达的影响,探讨益气血补肝肾方提高妊娠率的机制。方法:600只小鼠随机分为超促排卵组、促排卵组、自然排卵组各200只,每组小鼠中又分为中药干预组与对照组各100只,分别用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法检测整合素αvβ3的表达。结果:超促排卵组和促排卵组小鼠中,中药干预组妊娠率显著高于对照组(P<0.05)。但自然排卵组中药干预后妊娠率与对照组无统计学差异(P>0.05)。免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法均显示,超促排卵组和促排卵组小鼠中,中药干预后整合素αvβ3的表达显著升高(P<0.05),而对自然排卵组则无明显影响(P>0.05)。结论:益气血补肝肾可能通过上调超促排卵及促排卵小鼠子宫内膜整合素αvβ3表达,改善子宫内膜容受性,从而提高妊娠率。     

迪康凝胶对大鼠烫伤创面的治疗作用及可能机制研究

目的 探讨迪康凝胶对烫伤大鼠创面愈合的效果及作用机制.方法 将SD大鼠随机分为模型组、美宝烫伤膏组、迪康凝胶组,3组均采用超级控温烫伤仪,造背部深Ⅱ度烫伤.模型组不给药,其余给药1次/d,连续21 d.连续考察21 d内创面愈合情况及创面病理组织形态.ELISA法检测组织TNF-α和IL-8及Ⅰ 、Ⅲ型胶原.RT-PCR检测组织TNF-α和IL-8表达水平.结果 与模型组比较,迪康凝胶组愈合时间缩短(P<0.05,P<0.01),创伤愈合率增高(P<0.05,P<0.01),差异有统计学意义.组织学观察证明,迪康凝胶具有良好的组织损伤修复作用.ELISA检测表明,烫伤后两药物组创面组织TNF-α和IL-8含量均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);而胶原Ⅰ 、Ⅲ组织含量均高于模型组.RT-PCR检测表明,两药物组组织TNF-αmRNA和IL-8 mRNA表达水平均与其蛋白浓度水平基本一致.结论 迪康凝胶能促进大鼠皮肤烫伤后创面愈合,是治疗烫伤创面的有效药物.     

局部应用油酸对糖尿病小鼠创面愈合的影响

目的 探讨局部应用油酸对糖尿病创面炎症反应和组织愈合的影响.方法 84只C57BL/6小鼠经链脲霉素诱导建立糖尿病模型,建模后1个月于小鼠背部制作直径1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,根据创面处理方式的不同将小鼠分为油酸组(30mmol/L油酸溶液)和对照组(使用等体积溶剂代替油酸溶液),每组各42只.以数码照相获取图像观察创面愈合情况,计算创面愈合率;采集创面标本经免疫组织化学染色结合计算机图像软件计数创面内中性粒细胞(PMN)和巨噬细胞(M(φ));利用ELISA法测定创面组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达.结果 从伤后5d起,油酸组创面愈合率均显著高于对照组(P＜0.01).油酸组和对照组创面愈合时间分别为(17.2 ±2.6)d和(19.5±1.9)d(P ＜0.05).油酸组伤后12、24 h的创面PMN计数和伤后3、5d的创面M(φ)计数均显著高于对照组(P＜0.01),伤后10、15 d时创面PMN计数和M(φ)计数则明显低于对照组(P ＜0.05或P＜0.01).油酸组伤后3d时创面TNF-α表达及伤后12、24 h和3d时创面IL-6表达均明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01),伤后10 d时创面TNF-α和IL-6表达均显著低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 油酸能够在创伤早期加速糖尿病创面的早期炎症反应进程,在后期避免炎症反应的持续,从而促进糖尿病小鼠创面的愈合.     

新生小鼠缺氧缺血脑组织基质细胞衍生因子1α的表达及其作用

目的 观察基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)在新生小鼠缺氧缺血性脑组织中的表达模式,及外源性给予SDF-1α对新生小鼠脑组织增殖细胞相关核抗原ki67表达和小鼠神经行为学的影响。方法 将90只KM小乳鼠分为空白组、缺氧缺血性脑损伤模型组(HIBD模型组)和SDF-1α组,每组30只。HIBD模型组和SDF-1α组于HIBD造模后30 min分别腹腔注射0.9% NaCl和SDF-1α(每只小鼠2.0 μg/d),3个亚组分别连续腹腔注射1、3、7 d,空白组仅腹腔注射等体积0.9% NaCl。通过免疫荧光与Real-time PCR观察HIBD后不同时间点SDF-1α的表达情况,通过免疫荧光及Western blotting观察ki67的表达,通过高架十字迷宫实验观察小鼠神经行为学的变化。结果 HIBD模型组脑组织SDF-1α表达上调,第3天达高峰,与空白组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。SDF-1α组ki67在各时间点的表达均较HIBD模型组增加(P≤0.01),小鼠的神经行为学表现也较HIBD模型组明显改善(P<0.05)。结论 SDF-1α在脑组织缺氧缺血损伤后表达上调且有时间窗。外源性SDF-1α可促进ki67的表达,对发生缺氧缺血性脑损伤的小鼠的神经行为学表现有改善作用。     

种植窗期人子宫内膜组织SDF-1α/CXCR4的表达

目的 研究不同卵巢反应性的种植窗期子宫内膜组织中基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及其受体CXCR4的表达.方法 收集种植窗期子宫内膜组织(n=17),根据卵巢反应性分为卵巢高反应组(n=6)、卵巢中等反应组(n=6)和正常对照组(n=5).应用RT-PCR、Real-time PCR、免疫组织化学染色和Western blotting方法 ,检测并比较各组种植窗期子宫内膜组织SDF-1α/CXCR4 mRNA和蛋白表达.结果 免疫组织化学染色显示,CXCR4在种植窗期子宫内膜组织中高表达;SDF-1α在内膜腺体和腔上皮细胞中表达,而在问质细胞中不表达.各组子宫内膜组织SDF-1α/CXCR4 mRNA和蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 高甾体激素对种植窗期子宫内膜趋化因子SDF-1α及其受体CXCR4的表达无明显影响.提示SDF-1α/CXCR4可能不参与甾体激素对种植窗期CD56bright CDl6-NK细胞募集的调控.     

脑外伤小鼠海马TNF-α表达的变化

  目的 探讨脑外伤小鼠海马肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的变化。方法 60只Balb/c小鼠随机分为2组,假手术组（30只）和脑外伤组（30只）。每组依据手术后不同时间点再分6 h、1 d、3 d 3组,每组10只。免疫组化和Western blot检测各组小鼠海马TNF-α蛋白的表达。RT-PCR方法检测各组小鼠海马TNF-α mRNA的表达。结果 免疫组化和Western blot结果发现,脑外伤组小鼠海马TNF-α蛋白表达量明显高于假手术组（P<0.05）;RT-PCR结果也显示脑外伤组小鼠海马TNF-α mRNA表达量明显高于假手术组（P<0.05）。结论 脑外伤小鼠海马TNF-α表达明显升高。     

谷氨酰胺对内质网应激介导的哮喘小鼠气道重塑模型的干预作用

[目的]探讨谷氨酰胺对内质应激介导的哮喘小鼠气道重塑模型的干预作用及其机制.[方法]取雌性BALB/c小鼠,随机分为正常对照组、模型对照组(OVA慢性气道重塑)及谷氨酰胺治疗组(750 mg/kg),给予相应处理.在末次给药24 h后,给予不同剂量乙酰胆碱激发行气道反应评估;取小鼠肺组织,采用免疫组织化学染色法检测α-SAM表达水平,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中OVA特异性IgE、细胞因子IL-6,IL-12含量,Western blot法检测肺组织中的CHOP,GPR78含量.[结果]与模型对照组比较,谷氨酰胺治疗组OVA诱导的哮喘小鼠气道高反应性明显降低(P<0.05),肺组织中α-SAM表达明显减少(P<0.05),BALF中OVA特异性IgE和IL-6水平显著降低,IL-12水平明显升高(P<0.05);Western blot检测结果显示,与模型对照组比较,谷氨酰胺治疗组CHOP和GRP78蛋白表达量显著降低(P<0.05).[结论]谷氨酰胺可通过抑制内质网应激减缓气道炎症及气道重塑,对过敏性哮喘具有保护作用.     

胆总管结扎术大鼠血清通过调控AP-2α对骨髓间充质干细胞旁分泌功能影响的实验研究

目的:观察肝肺综合征胆管结扎术(CBDL)大鼠模型血清对骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)旁分泌功能的影响,并探索可能机制。方法:选择200 g左右雄性SD大鼠24只,将其随机分为Sham手术组(S组)和CBDL手术组(C组)两组,术后4周分别取各组大鼠血清刺激体外培养的BM-MSCs;分别在刺激12 h、24 h、48 h后测定细胞AP-2α表达及旁分泌血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)水平。siRNA转染抑制AP-2α表达水平,通过经Western blot检测siRNA转染效果,并检测各组细胞旁分泌功能的变化。结果:与S组相比,C组血清刺激后,BM-MSCs中AP-2α的表达以及SDF-1、VEGF的分泌在各个时间点均较S组明显升高,且呈递增趋势(P<0.05),而PDGF-BB的分泌仅在C组血清刺激后48h明显升高(P<0.05)。Western blot结果显示,AP-2αsiRNA转染可明显降低AP-2α的表达水平(P<0.05)。ELISA试验结果显示,siRNA降低AP-2α的表达后能明显抑制C组血清刺激引起的SDF-1、VEGF、PDGF-BB分泌增加(P<0.05)。结论:CBDL大鼠血清刺激可明显增加体外培养的BM-MSCs旁分泌SDF-1、VEGF、PDGF-BB的水平,这可能与AP-2α的表达增高相关。     

牡蛎酶解液对2型糖尿病小鼠皮肤软组织创伤愈合修复的作用及其机制研究

目的 探究牡蛎酶解液对2型糖尿病小鼠皮肤软组织创伤愈合修复的作用,并分析相关机制。方法将50只成功复制的2型糖尿病皮肤软组织创伤小鼠随机分为模型对照组、阳性对照组,以及牡蛎酶解液低、中、高剂量组,每组10只,其中牡蛎酶解液低、中、高剂量组小鼠于模型复制成功后次日分别给予0.25 g/10(g·d)、0.50 g/10(g·d)、1.00 g/10(g·d)牡蛎酶解液灌胃处理;模型对照组、阳性对照组同时间分别给予等量生理盐水、初元Ⅰ型产品0.1 mL/10(g·d)灌胃处理。分别于术后第3天、7天、14天观察小鼠创面并计算创面愈合率;苏木精-伊红（HE）染色观察模型复制后第14天小鼠创面组织病理变化;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测创面组织白细胞介素6 (IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blotting检测创面组织基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达。结果 牡蛎酶解液低、中、高剂量组、阳性对照组和模型对照组小鼠术后3 d、7 d、14 d的创面愈合率比较,采用重复测量设计的方差分析,结果：(1)不同时间点小鼠创面愈合率...     

Survivin表达对鼠髓样树突状细胞成熟的影响

目的:探讨survivin的表达变化对小鼠骨髓来源树突状细胞分化成熟的影响.方法:无菌条件下取小鼠的骨髓细胞作为树突状前体细胞,用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)和白细胞介素4(Interleukin 4,IL-4)的培养基定向诱导树突状前体细胞分化成未成熟树突状细胞(Immature dendritic cells,iDC),用GM-CSF,IL-4及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)定向诱导树突状前体细胞分化成成熟树突状细胞(Mature dendritic cells,mDC):运用半定量RT-PCR,Western blot比较树突状前体细胞、iDC与mDC中survivin mRNA、survivin蛋白的含量变化.结果:RT-PCR检测结果显示,树突状前体细胞survivin mRNA表达值为(0.735±0.081),iDC为(0.596±0.073,P<0.05),mDC为(0.393±0.052,P<0.01);Western blot检测结果显示:树突状前体细胞survivin蛋白的表达值为(0.767±0.045),iDC的表达值为(0.396±0.016,P<0.05),mDC的表达值为(0.168±0.009,P<0.01).结论:survivin在树突状前体细胞中高表达,在iDC与mDC中表达量略低;且survivin在iDC中的表达量高于mDC,这个结论为我们的后续实验提供了理论基础.     

人脐带间充质干细胞对小鼠皮肤创面愈合及VEGF表达的影响

目的 研究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对小鼠全层皮肤切除创面愈合及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法 采用组织块贴壁法分离培养hUC-MSCs,流式细胞术检测细胞免疫表型,并做向成骨、成脂细胞方向分化.48只雄性BALB/c小鼠采用完全随机分组方法分为hUC-MSCs组和PBS组,每组24只,在其背部形成一全层皮肤缺损创面模型,分别于创周注射hUC-MSCs悬液和PBS液.于3、7、14 d观察创面愈合情况,HE染色观察病理学改变,免疫组织化学及Western blot检测VEGF蛋白的表达.结果 流式细胞术检测显示所培养的细胞为hUC-MSCs,体外诱导其能向成骨、成脂细胞方向分化.hUC-MSCs组创面愈合率在各时间点均较PBS组显著增高(P＜0.05).HE染色显示hUC-MSCs组创面愈合质量优于PBS组.免疫组化显示hUC-MSCs组VEGF在3d时表达最多,7、14 d逐渐减少,但均较PBS组增高.Western blot结果显示hUC-MSCs组3、7、14 d创面VEGF蛋白表达显著高于PBS组(P＜0.05).结论 hUC-MSCs可增强皮肤创面VEGF的表达,促进皮肤创面的修复.     

树突状细胞负载Tα146-162治疗实验性自身免疫性重症肌无力小鼠的B细胞活化机制研究

目的 从B细胞活化的角度探讨Tα146-162-iMDC干预实验性自身免疫性重症肌无力小鼠(EAMG)的作用机制.方法 34只6～8周健康雄性C57BL/6J小鼠,随机分为模型组(A)、干预组(B)和对照组(C).体外培养树突状细胞,然后负载Tα146-162对干预组小鼠进行干预.从初次免疫起至第90 d实验终止前,行EAMG严重性临床评估及发病率的计算.RT-PCR法检测Cbl mRNA表达,Western blot法检测Syk和Lyn蛋白及蛋白磷酸化表达.结果 A组发病率高于B组(75% vs 25%,P<0.05).实验终止时两组临床评分分别为1.69±1.12、0.35±0.67(P<0.01).C组无发病小鼠.A组小鼠的脾脏和淋巴结Cbl mRNA表达水平均明显低于C组小鼠(P<0.01),B组小鼠的脾脏和淋巴结Cbl mRNA表达水平较A组明显升高(P<0.05),但仍低于C组(P<0.05).A组小鼠的脾脏和淋巴结Syk蛋白和磷酸化表达水平较C组小鼠升高(P<0.01),B组较A组下降(P<0.05),但高于C组(P<0.05);A组小鼠的脾脏和淋巴结Lyn蛋白表达和磷酸化水平较C组小鼠降低(P<0.01),B组较A组升高(P<0.05),但仍低于C组(P<0.05). 结论 Tα146-162-iMDC干预,能显著降低EAMG的发病率,改善临床症状,其机制可能与Cbl负性调控B细胞活化有关.     

pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体的构建及在小鼠骨髓间充质干细胞中的表达

目的构建pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体并转染骨髓间充质干细胞(MSCs),观察其在MSCs内的表达。方法设计并合成SDF-1α基因引物,用RT-PCR法从小鼠平滑肌细胞中扩增出带有XhoI与EcoRI酶切位点的SDF-1α基因片段,将SDF-1α基因片段克隆到真核表达载体pDsRed2-N1上,酶切和测序鉴定。培养小鼠MSCs并Vimentin蛋白免疫荧光鉴定。通过脂质体将pDsRed2-N1-SDF-1α转染入小鼠MSCs。免疫荧光检测转染后的MSCs表达SDF-1α蛋白的情况。结果扩增出的基因片断大小与基因文库中已知的SDF-1α序列大小完全相符,酶切也得到目的基因片断,测序结果显示与已知的SDF-1α序列相同,成功构建pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体。培养的细胞经Vimentin蛋白免疫荧光检测为阳性,pDsRed2-N1-SDF-1α表达载体转染到MSCs,24h后细胞免疫荧光检测可见SDF-1α融合蛋白表达。结论pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体能够在小鼠MSCs中表达SDF-1α蛋白。     

大鼠骨髓内皮祖细胞移植对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏损伤的修复

目的 探讨大鼠骨髓内皮祖细胞移植对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的修复作用.方法 应用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,内皮祖细胞选择性培养液培养后移植到单侧输尿管梗阻大鼠.应用PAS、HE、Masson染色方法判断梗阻大鼠损伤和修复情况,应用免疫组织化学检测α-SMA和HIF-1α表达,应用Western blot检测HIF表达.结果各组间肝功能、肾功能无显著性差异;与假手术组比,UUO组肾脏病理积分显著增加,移植组肾脏病理积分显著低于UUO组(P<0.05);UUO组α-SMA在14、21d显著高于假手术组(P<0.05),移植组α-SMA在14、21d显著低于UUO组(P<0.05);假手术组仅有少量HIF表达,且主要表达在胞质,UUO组HIF表达随病程进展逐渐增加(P<0.05),移植组HIF表达显著低于UUO组(P<0.05).结论 EPCs移植改善了UUO大鼠梗阻肾脏的损伤、纤维化和低氧状况.     

c-Myc在小鼠同步化毛囊周期中的表达

目的探明转录因子c-Myc在同步化之后的小鼠毛囊周期中表达的规律及可能意义。方法通过经典的松蜡合剂脱毛法使小鼠背皮毛囊周期同步化,分别采用免疫组织化学、RT-PCR、Western blot检测c-Myc在毛囊周期不同时相点(拔毛后5、10、16、20、25d)表达的强弱变化及分布规律。结果在所有5个时相点的皮肤中c-Myc都存在不同强度的表达,RT-PCR与Western blot检测结果呈现出一致的规律,即生长期中期(10d)、晚期(16d)和退化期(20d)表达较强,生长期早期(5d)和静止期(25d)表达较弱。免疫组织化学结果显示:c-Myc表达在生长期主要分布于毛囊内根鞘与毛母质,在退化期主要分布于残存的内根鞘,在静止期毛囊中没有表达。结论c-Myc的表达存在于生长期的内根鞘、毛母质和退化期残留的内根鞘。c-Myc可能在毛囊角质形成细胞的终末分化过程中发挥重要作用。     

HBx基因抑制肝前体细胞凋亡与分化的小鼠体内研究

目的 构建将乙肝病毒X(hepatitis B virus X,HBx)基因导入小鼠肝脏内的动物模型,探讨HBx蛋白对小鼠体内肝前体细胞凋亡与分化的影响.方法 从小鼠肝门静脉注射携带HBx基因的肝前体细胞和生理盐水,于第30、60、90、120天收取小鼠肝前体细胞标本,通过RT-PCR和Western blot 验证HBx基因在肝前体细胞中的表达;通过荧光显微镜、免疫组织化学染色法、RT-PCR检测细胞株是否到达小鼠肝脏并表达目的基因;使用TUNEL-FITC/DAPI法、RT-PCR和Western blot检测肝前体细胞的凋亡和分化情况.结果 携带了HBx基因的肝前体细胞株成功到达小鼠肝脏内并表达HBx蛋白,TUNEL-FITC/DAPI法显示HBx显著抑制小鼠肝前体细胞发生凋亡,RT-PCR和Western blot结果显示,抗凋亡蛋白Bcl2、Mcl-1的表达上调,促凋亡蛋白Bax的表达下调,细胞分化早期指标CK19表达增加,而细胞晚期分化指标CK18表达降低,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 HBx蛋白在小鼠体内可以抑制肝前体细胞凋亡和分化成熟,诱发肝癌发生的早期事件.     

小鼠开放性脑损伤后MAP2/SDF1的表达与损伤时间推断的研究

目的 探讨小鼠开放性脑损伤后不同时间点微管结合蛋白(microtubule-associated prote-ins,MAP-2)和基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)的表达,为法医实践中推断脑组织损伤时间提供科学的参考依据.方法 建立小鼠脑组织开放性脑损伤模型,应用免疫组织化学技术观察脑损伤后MAP-2和SDF-1在不同时间点的表达情况.结果 随着脑组织损伤时间的延长,MAP-2的表达下调,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),脑组织损失3 d时达最低峰,14 d基本达正常水平,但仍低于对照组.脑损伤后SDF-1表达上调,呈持续升高状态,14 d仍高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 小鼠开放性脑损伤后MAP-2和SDF-1的表达呈一定的时序性变化规律,可作为推断脑损伤时间的参考指标之一.     

参枝苓口服液对APP/PS1双转基因小鼠海马α7-nAChRs和mGluR5表达的影响

目的探讨参枝苓口服液对APP/PS1双转基因小鼠海马神经元突触信号传递相关蛋白α7-nAChRs和mGluR5表达的影响。方法将雄性3月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分成5组,模型组、多奈哌齐组[0.92 mg/(kg·d)],参枝苓大剂量组[50 g/(kg·d)]、参枝苓中剂量组[25 g/(kg·d)]、参枝苓小剂量组[12.5 g/(kg·d)]。正常组为同月龄同背景野生型C57BL/6J小鼠。连续灌胃3个月,进行行为学跳台实验。实验结束后取海马组织,运用蛋白印迹法(Western blot)和免疫组织化学方法检测小鼠海马CA1区突触相关蛋白α7-nAChRs和mGluR5的表达。结果 Western blot检测显示,模型组小鼠海马α7-nAChRs的蛋白条带比正常组小鼠明显变窄,颜色变浅(P0.01)、而mGluR5蛋白条带明显增宽,颜色变深(P0.01);与模型组小鼠相比,各干预组α7-nAChRs蛋白条带增宽、颜色变深(P0.05或P0.01),mGluR5蛋白条带变窄、颜色变浅(P0.05或P0.01)。免疫组织化学染色检测小鼠海马α7-nAChRs和mGluR5的阳性细胞表达结果与Western blot检测结果一致。结论参枝苓口服液可能是通过调节小鼠海马CA1区突触中的关键蛋白,改善突触功能发挥减缓阿尔茨海默病(AD)大脑损伤,维持记忆获得能力,从而发挥抗痴呆作用。     

TNF-α激活NF-κB信号通路抑制培养成纤维细胞SDF-1α分泌

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)激活核因子-κB(NF-κB)信号通路对成纤维细胞生物学行为的影响。方法小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)进行体外培养,将细胞分为TNF-α组、TNF-α+吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组及对照组,处理后的细胞采用CCK-8方法检测细胞增殖情况、Western blot和细胞免疫荧光检测IκBα蛋白表达与定位、ELISA检测基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的分泌。结果 TNF-α在一定浓度范围内对成纤维细胞起到明显的促增殖作用,CCK-8检测显示TNF-α组在不同浓度和不同时相点MEF的光密度值与TNF-α+PDTC组及对照组相比差异显著(P<0.05);免疫荧光染色显示IκBα主要分布于细胞质,TNF-α组与对照组和TNF-α+PDTC组相比,IκBα荧光强度明显减弱。Western blot结果发现TNF-α刺激后30 min,TNF-α组和TNF-α+PDTC组IκBα蛋白表达[(3 070.0±39.0)vs(1 421.7±75.3),(3 212.2±57.5)vs(1 468.2±45.8),P<0.05]均降至最低值,随时间推移逐渐恢复,TNF-α+PDTC组IκBα蛋白表达显著高于TNF-α组[(3 112.3±89.7)vs(2 610.4±26.9),P<0.05];ELISA检测发现TNF-α作用后成纤维细胞SDF-1α的分泌呈减少趋势[(15.9±1.6)vs(12.7±0.6),P<0.05],TNF-α+PDTC组则能显著逆转TNF-α作用[(23.5±3.2)vs(15.0±1.2),(21.6±0.4)vs(12.7±0.6),P<0.05],促进SDF-1α分泌。结论 TNF-α能通过激活NF-κB通路,影响小鼠胚胎成纤维细胞的增殖并抑制SDF-1α分泌。