昆明山海棠碱诱导Jurkat淋巴瘤细胞核DNA链断裂和DNA片段化

目的 探讨昆明山海棠碱对淋巴瘤细胞核DNA的影响，以了解THH碱诱导细胞凋亡的机制。方法 THH碱诱导Jurkat细胞后，TUNEL荧光标记DNA链断裂，细胞DNA含量分析方法分析DNA片段化，均以流式细胞术检测。结果 THH碱能诱导Jurkat淋巴瘤细胞DNA链断裂，之后DNA发生片段化。结论 提示在THH碱诱导Jurkat凋亡过程中，核DNA发生重要变化。     

昆明山海棠碱诱导Jurkat淋巴瘤细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻及瘤细胞超微结构改变的研究

目的 检测昆明山海棠碱(THH碱)诱导Jurkat T淋巴瘤细胞的凋亡效应。方法 THH碱多剂量多时间点诱导Jurkat T淋巴瘤细胞细胞后，采用Annexin-V-Fluorescence标记膜外翻磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine，PS)的凋亡细胞，同时荧光素PI标记坏死细胞，流式细胞术检测分别检测其阳性细胞率。同时采用判断凋亡发生的“金标准”——形态学观察方法观察其超微结构的改变。结果 THH碱诱导后磷脂酰丝氨酸外翻的细胞显著增加，有明显的时间和剂量相关性，超微结构观察可见大量细胞明显发生细胞体积缩小、核固缩、胞浆浓缩、凋亡小体形成等凋亡典型的形态特征。结论 THH碱能非常显著地诱导Jurkat T淋巴瘤细胞发生凋亡。     

芦荟大黄素对Jurkat T细胞增殖和凋亡的作用及机制

目的 研究芦荟大黄素对Jurkat T细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并探讨可能的机制.方法 应用细胞计数测定增殖,Hoechst/PI双染法及DNA片断化分析细胞凋亡特征,流式细胞术检测细胞周期分布.进一步应用二氢乙锭荧光染色测量活性氧产物,Western blotting检测胞浆细胞色素C(Cyt-c)的量,比色法检测caspase-3和caspase-9活性.结果 芦荟大黄素剂量和时间依赖性地抑制Jurkat T细胞增殖.芦荟大黄素诱发细胞核皱缩,核DNA片断化,细胞周期出现亚G1期凋亡峰,且停滞于G2/M期.芦荟大黄素介导细胞内活性氧水平显著提高,线粒体释放Cyt-c量显著增加,caspase-3和caspase-9活性显著增强.结论 芦荟大黄素剂量依赖性地抑制Jurkat T细胞增殖并诱导其凋亡.诱导凋亡的机制中,包括增加活性氧产物和线粒体损伤途径.     

昆明山海棠碱通过Fas受体介导途径诱导Jurkat淋巴瘤细胞株凋亡

目的 探讨Fas、caspase-8在昆明山海棠碱(THH碱)对Jurkat淋巴瘤细胞的凋亡诱导中的变化，以进一步研究THH碱诱导凋亡的分子机制。方法 采用Annexin—Ⅴ标记和流式细胞术检测细胞的凋亡发生率，采用western blotting分析FasL、caspase-7、caspase-8、Bid等蛋白表达的变化。结果 THH碱能有效诱导Jurkat细胞凋亡；在其凋亡过程中，FasL逐渐表达增强、caspase-7、caspase-8、Bid剪切激活，并呈时间依赖性。结论 THH碱通过Fas受体—配体介导激活caspase-8，caspase-8再激活caspase-7和Bid等网络途径诱导Jurkat细胞凋亡。     

THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat淋巴瘤细胞株凋亡

目的 探讨昆明山海棠碱在凋亡中对细胞内游离钙离子浓度的影响。方法 THH碱诱导Jurkat细胞后，采用Indo-1 AM及PI进行细胞染色、流式细胞术等手段在单细胞水平上检测细胞内钙离子浓度的变化。结果 THH碱诱导后细胞内钙离子浓度未见明显变化。结论 THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat细胞凋亡。     

钼酸盐对人肝癌细胞抑制增殖和诱导凋亡作用的实验研究

目的 观察钼酸氨对体外培养人肝癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用.方法 应用CCK-8法检测不同浓度钼酸氨对HepG2细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率.结果 钼酸氨能明显抑制HepG2细胞增殖、诱导细胞凋亡、影响细胞周期,并存在剂量-效应关系和时间-效应关系,随着钼酸氨浓度升高和作用时间延长,凋亡细胞和G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期及G2/M期细胞减少,并出现凋亡峰.结论 钼酸氨能抑制HepG2细胞增殖,诱导细胞凋亡,影响细胞周期,将细胞特异性地阻滞在G1期.     

雷公藤甲素对白血病HL-60和Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨雷公藤甲素对人急性髓系白血病HL-60细胞、急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法、PI染色法、透射电镜观察不同浓度雷公藤甲素作用于两种细胞,对其生长增殖、凋亡、细胞周期及形态等方面的影响。结果:雷公藤甲素能显著抑制HL-60、Jurkat细胞的增殖,降低其存活率。给药24 h后,半数细胞抑制剂量(IC50)分别为(42.50±9.38)nmol/L和(60.91±9.77)nmol/L。能以剂量依赖方式诱导两种细胞凋亡,细胞周期分布G1期比例增加,S期比例降低(P<0.05),且伴有典型的细胞凋亡形态学改变。结论:雷公藤甲素能显著抑制HL-60、Jurkat细胞的生长增殖,并诱导细胞凋亡。     

人重组Fas配体体外诱导细胞周期特异性凋亡模型的建立

目的 运用人重组Fas配体（rhFasL），体外诱导稳定而又典型的Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型，为针对其细胞凋亡过程中的细胞周期机制研究、肿瘤的生物学治疗和自身免疫性疾病的防治等提供科学的研究平台。方法 以白血病细胞系（Molt-4和Jurkat细胞系）和进入细胞周期的外周血淋巴细胞为载体，用人重组Fas配体诱导细胞6～36h后，用亚G1峰法、传统的AnnexinV／PI和改良后的API法进行标记并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 改良后的API法显示人重组Fas配体诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性及始动位点；传统的AnnexinV／PI显示在将细胞凋亡控制在10％～20％并以早期细胞凋亡为主时诱导的模型最典型；亚G1峰法只能检测晚期细胞凋亡和进行DNA直方图分析。结论人重组Fas配体体外诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性并始动于G1期，联合应用传统的Annex-in-V／PI及改良后的API法能为建立稳定而又典型的体外Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型提供技术支撑。     

昆明山海棠碱诱导Jurkat淋巴瘤细胞株的PARP酶剪切和caspase-3激活

目的　探讨昆明山海棠碱诱导淋巴瘤细胞凋亡过程中caspase 3和PARP酶的作用 ,以了解THH碱诱导细胞凋亡的机制。方法　THH碱诱导JurkatT淋巴瘤细胞后 ,FAM DEVD FMK荧光标记活化的caspase 3 ,免疫细胞化学方法荧光标记PARP酶剪切后的 89× 10 3片段 ,均以流式细胞术检测。结果　THH碱能有效诱导caspase 3激活和PARP酶剪切。结论　提示在THH碱能诱导JurkatT淋巴瘤细胞凋亡过程中caspase 3和PARP酶参与调控 ,它们可能抑制了受损伤DNA的修复 ,从而导致DNA片段化     

粉防己碱抑制人卵巢癌HO-8910细胞生长的研究

目的探讨粉防己碱对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡的作用。方法MTT法测定细胞增殖情况;吖啶橙荧光染色（AO）观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡。结果粉防己碱对HO-8910细胞有抑制增殖作用,呈时间、剂量依赖性;光镜可观察到细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测结果分析,实验组G1／G0期上升,S期和G2／M期下降,细胞凋亡率上升。结论粉防己碱在体外能抑制卵巢癌HO-8910细胞增殖,诱导HO-8910细胞发生凋亡。     

昆明山海棠诱导Jurkat等3个细胞株微核形成的研究

目的：为研究昆明山海棠（THH）的毒理作用。方法：使用流式细胞仪检测发现THH均可诱导Jurkat、CHE和NIH3T3细胞株微核形成和细胞凋亡。结果：3个细胞株表现出完全相似的变化规律,但Jurkat淋巴瘤细胞更为敏感,仅25μl/皿即在各时相点出现微核形成高峰,50μl/皿即出现细胞凋亡高峰。结论：THH对Jurkat肿瘤细胞比对CHE和NIH3T3细胞具有更大的细胞毒性。     

苯乙酸钠诱导Jurkat细胞凋亡机制研究

目的:探讨苯乙酸钠(Sodium pheny-acetate,NaPA)诱导Jurkat(人粒细胞白血病细胞株)细胞凋亡机制及对细胞周期各时相的影响。方法:应用MTT比色法及流式细胞仪检测NaPA对Jurkat细胞的增值抑制率及细胞周期各时相的变化,并通过电子显微镜观察Jurkat细胞的亚细胞结构改变。结果:NaPA对Jurkat细胞增殖有明显的抑制作用,抑制率为27%~58%,且呈剂量依赖性。流式细胞仪结果表明,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率增高,电子显微镜下可见线粒体肿胀,细胞核固缩。结论:NaPA能够抑制Jurkat细胞G1期向S期转化进程,诱导Jurkat细胞凋亡。     

雄黄对T淋巴细胞白血病细胞系CEM的促凋亡作用

目的 观察雄黄对人类T淋巴细胞白血病细胞凋亡的影响。方法 人类T淋巴细胞白血病细胞系CEM体外培养，采用MTT法测定对细胞生长的抑制率，流式细胞仪分析细胞周期，并检测凋亡相关蛋白Apo2．7和Fas的表达。结果 雄黄体外对CEM细胞的生长有抑制作用，流式细胞仪检测可见亚二倍体的凋亡细胞和凋亡相关蛋白Apo2．7表达的升高，对细胞周期的影响表现为G2／M期的阻滞，而对Fas蛋白的表达没有影响。结论 雄黄有诱导CEM细胞凋亡的作用。     

苦参碱对SMMC-7721细胞周期及凋亡的影响

目的:研究苦参碱对肝癌细胞周期和凋亡的影响。方法:体外培养SMMC-7221细胞,采用MTT法观察不同浓度苦参碱对SMMC-7721细胞抑制情况,应用免疫组化法观察激活型Caspase-3蛋白表达,采用流式细胞术PI单染观察细胞周期。结果:苦参碱抑制SMMC-7221细胞增殖,抑制率呈浓度依赖关系,IC50为1.1 g/L,0.8 g/L和1.2 g/L苦参碱作用48 h,SMMC-7221细胞激活型Caspase-3表达增强,引起G1期阻滞。结论:苦参碱能够抑制肝癌增殖,诱导其凋亡。     

白藜芦醇诱导急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞凋亡

目的：探讨白藜芦醇抑制急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞增殖、引发S期阻滞和诱导凋亡的作用。方法：白藜芦醇体外处理培养的Jurkat细胞后,采用MTT法测定细胞活力,Wrigh-Giemsa染色、Hoechest 33258/PI荧光染色和透射电镜观察Jurkat细胞的形态学改变;流式细胞术分析细胞周期。结果：白藜芦醇0.2 mmol·L^-1处理组的抑制Jurkat细胞增殖率达64.01%,并具有剂量和时间依赖性。白藜芦醇处理细胞24 h后可见凋亡形态学改变,Hoechest 33258/PI染色显示白藜芦醇处理组细胞部分细胞核呈亮蓝色,随培养时间延长,亮蓝色荧光染色细胞数量逐渐增多。Wrigh-Giemsa染色和透射电镜观察发现部分细胞体积缩小、染色质浓缩及边集等现象的出现。流式细胞术检测表明,0.05 mmol·L^-1白黎芦醇处理48 h组62.57％的细胞被阻滞于细胞周期S期,亚二倍体细胞数量12.01%,未加药对照组细胞亚二倍体细胞数量2.05%。结论：白藜芦醇可以抑制Jurkat细胞的增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并诱导其发生凋亡