过敏性紫癜患儿Th17细胞表达及意义

目的 探讨Th17细胞在儿童过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)免疫发病机制中的作用.方法 过敏性紫癜急性期患儿55例,采用流式细胞分析法检测外周血Th17细胞的比例,ELISA法检测血浆相关细胞因子IL-17和IL-6的水平,并进行相关性分析.同期选取20例同龄健康儿童作为对照.结果 HSP患儿外周血Th17/CD4+T细胞比例显著高于对照组[(1.91±0.78)% vs(0.52±0.24)%,(P＜0.01)];HSP患儿血浆IL-17和IL-6的水平亦明显高于对照组[IL-17:(47.4±17.6)pg/ml vs (15.6±11.2) pg/ml;IL-6:(273.8±42.4)pg/ml vs(228.7±37.4)pg/ml,(P＜0.01)].患儿血浆IL-17和IL-6的水平呈正相关(r=0.762,P＜0.01).结论 过敏性紫癜急性期患儿Th17细胞比例增加,IL-17和IL-6水平升高,提示Th17细胞可能参与了HSP的发病及其炎性反应过程.     

益气活血中药对急性肺损伤大鼠血浆和肺组织中炎症介质的影响

目的 探讨益气活血中药黄芪与丹参对急性肺损伤(ALI)模型大鼠血浆和肺组织匀浆中炎症介质的影响.方法 将30只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、中药组,每组10只.采用气管滴入脂多糖(LPS)法复制ALI动物模型.模型组和正常对照组每日灌胃2ml生理盐水,中药组每日灌胃0.25 mg/L的益气活血中药2ml,均连用1周.采用放射免疫法检测各组大鼠血浆及肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1、6、8)含量.结果 中药组大鼠血浆及肺组织匀浆中TNF-α含量(μg/L)分别为　35.59±7.05、3.01±1.78,均低于模型组(均P＜ 0.05);IL-1含量(μg/L)分别为0.22±0.13、0.35±0.08,IL-6含量(ng/L)分别为32.56±9.72、105.82± 16.13,IL-8(μg/L)分别为0.52±0.22、1.23±0.52,均低于模型组(P＜ 0.05或P＜ 0.01);中药组各项指标与正常对照组比较差异无统计学意义(均P＞0.05).结论益气活血中药黄芪和丹参可能是通过抑制TNF-α、IL-1、6、8生成和释放,从而起到对模型大鼠ALI的防治作用.     

硫化氢对油酸诱导急性肺损伤大鼠细胞外基质的调节作用

目的 探讨外源性硫化氢(H2S)对油酸诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠细胞外基质(ECM)的调节作用.方法 雄性SD大鼠35只,随机分为对照组(n=5)、油酸组(n=15)、油酸+硫氢化钠(NaHS)组(n=15).油酸组大鼠尾静脉注射油酸0.1 mL/kg;油酸+NaHS组先腹腔注射NaHS 56 μmol/kg(溶于0.5 mL生理盐水中),30 min后再尾静脉注射油酸0.1 mL/kg.以上两组均分为2、4、6 h三个观察点,每个点5只.对照组大鼠尾静脉注射0.1 mL/kg生理盐水,观察6 h.在观察时间结束后,麻醉大鼠,行支气管肺泡灌洗,灌洗液(BALF)沉渣行瑞士染色进行中性粒细胞(PMN)分类计数;取右肺上叶,计算湿重/干重(W/D)值;用ELISA法检测血浆、肺组织匀浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平;用敏感硫电极法检测H2S水平.结果 与对照组比较,油酸组2、4、6 h PMN显著升高(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组各时间点PMN显著降低(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4、6 h肺W/D值显著升高(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组4、6 h肺W/D值显著降低(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4、6 h血浆、肺组织匀浆H2S水平显著降低(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组血浆、肺组织匀浆H2S水平4、6 h显著升高(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4 h血浆、肺组织匀浆及6 h血浆MMP-9水平显著升高(P均<0.05);与油酸组比较,油酸+NaHS组4 h 血浆MMP-9水平显著降低(P<0.05),2、6 h血浆、肺组织匀浆及 4 h 肺组织匀浆MMP-9水平降低,但差异无统计学意义(P均>0.05).与对照组比较,油酸组4 h 血浆、肺组织匀浆及6 h肺组织匀浆TIMP-1水平显著降低(P均<0.05);与油酸组比较,油酸+NaHS组2、4、6 h血浆、肺组织匀浆TIMP-1水平升高,但差异无统计学意义(P均>0.05).结论 外源性H2S可能通过调节肺组织MMP-9和TIMP-1水平的变化,发挥对油酸诱导大鼠ALI 的细胞外基质的调节作用.     

抑制核因子-κB对创伤休克大鼠肝脏热休克蛋白70的影响

目的 探讨抑制核因子-κB(NF-κB)后热休克蛋白70(HSP70)在创伤失血性休克肝组织中的变化及其对肝脏结构和功能的影响.方法 雄性健康Wistar大鼠66只,采用双侧股骨骨折伴失血性休克创伤模型,随机分成正常对照组6只,创伤休克组30只,NF-κB抑制伴创伤休克组30只,NF-κB抑制采用致伤前1 h腹腔注射二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)200mg/kg.动态观察伤后0.5、2、4、6、8h大鼠肝组织NF-κB、HSP70、肝脏病理、肝功能、TNF-α、IL-6等变化.NF-κB采用EMSA法测定结合活性,HSP70采用免疫印迹法测定其蛋白含量,并进行计算机图像分析.数据采用SPSS 12.0软件分析,两组间比较采用成组资料的t检验.结果 NF-κB的活性伤后迅速升高,伤后6 h达到高峰;HSP70伤后2 h较正常对照相比[(10.8±1.1)、vs.(4.7±0.5),P＜0.01],伤后6 h达到高峰,和正常组相比[(23.0±1.7)vs.(4.7±0.5),P＜0.01].TNFα、IL-6伤后逐渐升高,并于伤后6 h达到高峰,和正常组相比[TNF-α(173.7±12.1)vs.(30.8±1.8)pg/ml,P＜0.01;IL-6(175.5±12.5)vs.(10.4±0.7)pg/ml,P＜0.01];伤后8 h光镜下可见肝窦内淤血明显,有大量炎性细胞浸润;血清ALT、TB伤后4 h开始增高,8 h达到峰值,和创伤组相比[ALT(640.6±80.2)vs.(536.8±60.0)nmol-1·L-1,P＜0.01;TB(4.7±1.1)vs.(1.6±0.2)mol/L,P＜0.01].抑制NF-κB再致伤后,HSP70在肝组织中表达仍然较高,但在伤后各个时相点的表达均较未抑制NF-κB创伤性休克伤组明显回落;伤后6 h和创伤组相比[(16.9±4.4)vs.(23.0±1.7),P＜0.05].TNF-α、IL-6伤后各个时相点均迅速回落,伤后6 h,和创伤组相比[TNF-α(135.2±10.2)vs.(173.7±12.1)pg/ml,P＜0.05;IL-6(113.0 4±10.8)vs.(175.5±12.5)pg/ml,P＜0.05];肝脏大体淤血、肿胀明显减轻;伤后8 h光镜下可见肝细胞变性明显好转,肝窦内淤血减轻,仅见少许淋巴细胞及中性粒细胞浸润;伤后4 h,血清ALT、TB即明显下降,和未抑制组相比[ALT(540.8±66.2)vs.(640.6±80.2)nmol-1·L-1,P＜0.05;TB(2.3±0.3)vs.(4.7±1.1)mol/L,P＜0.05].结论 NF-κB、HSP70参与了严重创伤失血性休克后肝损伤与抗损伤的发生,抑制NF-κB的活性有助于减轻创伤失血性休克后肝脏的急性损害,NF-κB、HSP70可作为反映创伤休克后肝脏损害程度的重要应激指标.     

初诊活动性肺结核患者血浆IL-6，IL-17，IL-37及TIM-3水平表达及其临床意义

目的　探讨初诊肺结核患者血浆白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-37（IL-37）及T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(TIM-3)水平变化及其临床意义。方法　收集2018年1月～2020年10月百色市人民医院收治的活动性肺结核患者57例、肺炎患者50例和健康对照40例。57例肺结核患者中菌阳肺结核31例,菌阴肺结核26例。57例肺结核按病情轻重、病程长短及病变范围分为轻症组32例和重症组25例。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组血浆IL-6,IL-17,IL-37及TIM-3水平,并进行比较。结果　肺结核组血浆IL-6（41.37±13.50 pg/ml vs 26.28±9.16pg/ml,3.05±1.08 pg/ml）,IL-17（62.50±10.73pg/ml vs 30.47±7.18pg/ml,16.13±5.86pg/ml）,IL-37（14.63±4.18pg/ml vs 9.85±2.74pg/ml,4.10±1.02 pg/ml）及TIM-3（18.17±5.16ng/ml vs 11.80±3.52ng/ml,6.24±2.15 ng/ml）水平均明显高于肺炎组和对照组,差异均有统计学意义（t=7.338~13.273,均P＜0.001）。菌阳肺结核组血浆IL-6（52.60±15.71pg/ml vs 30.16±8.95 pg/ml）,IL-17（72.35±15.20 pg/ml vs 46.52±9.13 pg/ml）,IL-37（16.50±6.14 pg/ml vs 12.48±3.17 pg/ml）及TIM-3（21.70±7.93ng/ml vs 15.21±4.92 ng/ml）水平均明显高于菌阴肺结核组,差异具有统计学意义（t=8.472,10.161,6.925,9.106,均P＜0.001）。重症组血浆IL-6（56.38±17.26pg/ml vs 25.84±9.27pg/ml）,IL-17（79.50±16.38 pg/ml vs 48.20±8.74 pg/ml）,IL-37（18.48±6.20 pg/ml vs 10.82±3.26pg/ml）及TIM-3（23.26±8.15ng/ml vs 13.90±4.71ng/ml）水平明显高于轻症组,差异具有统计学意义（t=12.642,14.513,10.205,13.172,均P＜0.001）。结论　血浆IL-6,IL-17,IL-37及TIM-3水平在肺结核患者中明显升高,对判断肺结核严重程度有一定的价值。     

冠心病心绞痛患者血浆白细胞介素-6和超敏C-反应蛋白变化及其临床意义

目的 探讨白细胞介素-6(IL-6)及超敏C-反应蛋白(hsCRp)在冠心病心绞痛发病机制中的作用.方法 选择冠状动脉造影确诊的心绞痛患者150例,分为不稳定型心绞痛(UAP)组78例,稳定型心绞痛(SAP)组72例,50例冠状动脉造影正常者作为对照组.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆IL-6、免疫浊度法检测hsCRp水平.结果 UAP组血浆IL-6、hsCRP含量为(36.98±9.35)pg/L、(2.25±0.73)μg/L,显著高于SAP组的(23.19±7.35)pg/L和(1.88±0.68)μg/L(P均＜0.01),2组IL-6、hsCRP均明显高于对照组(16.93±6.15)pg/L、(1.28±0.40)μg/L(P均＜0.01).相关分析表明IL-6与hsCRP正相关,相关系数r=0.875(P＜0.05).结论 炎症反应可能参与冠心病的发病过程,血浆IL-6与hsCRP对预测冠心病心绞痛的存在和发展有重要的临床意义.     

核因子-κB、IκB在创伤失血性休克大鼠肝损伤中的作用

目的 从组织受体水平探讨核因子-κB(NF-κB)、IκB在创伤失血性休克后肝组织中的变化及其在肝损伤中的作用机制.方法 雄性健康Wistar大鼠36只,采用双侧股骨骨折伴失血性休克模型,随机分成正常对照组6只,双侧股骨骨折伴失血性休克组30只.动态观察伤后0.5、2、4、6、8 h大鼠肝组织核因子-κB、IκB、肝脏病理、肝功能、TNF-α、IL-6等变化.肝组织NF-κB采用EMSA法测定结合活性、IκB采用免疫印迹法测定其蛋白含量,并进行计算机图像分析.数据采用SPSS 12.0软件分析,两组间比较采用配对资料的t检验.结果 NF-κB的活性伤后迅速升高,伤后2 h与正常对照相比,差异具有统计学意义,[(8.4±0.7) vs (2.3±0.4),P＜0.01];伤后6 h达到高峰,和正常组相比,P＜0.01[(43.4±4.6) vs (2.3±0.4),P＜0.01].IκB伤后迅速降低,伤后2 h和正常对照相比,差异具有统计学意义[(17.0±2.0) vs (26.4±2.2),P＜0.01].伤后6 h继续下降至比较低的水平,和正常组相比,P＜0.01[(6.5±1.1) vs (26.4±2.2),P＜0.01].TNF-α、IL-6伤后逐渐升高,并于伤后6 h达到高峰:和正常组相比,P＜0.01[TNF-α,(173.7±12.1) vs (30.8±1.8)pg/ml,P＜0.01;IL-6,(175.5±12.5) vs (10.4±0.7)pg/ml,P＜0.01].光镜下伤后4～8 h肝窦内有少许淤血,有散在炎性细胞浸润;血清ALT、TB伤后4 h开始增高,和正常组相比,P＜0.01[ALT,(640.6±80.2) vs (536.8±60.0)nmol·L-1,P＜0.01;TB,(4.7±1.1) vs (1.6±0.2)mol/L,P＜0.01];白蛋白伤后4 h明显下降,和正常组相比,P＜0.01[(13.3±1.6) vs (20.6±3.4)g/L,P＜0.01].结论 NF-κB及其抑制蛋白IκB参与了严重创伤失血性休克后肝损伤的发生;且NF-κB增高越多、IκB减少越明显,肝损害越重.提示NF-κB及其IκB在严重创伤休克后肝组织细胞损伤与抗损伤机制方面起着重要作用.     

输注储存血液对黑色素瘤荷瘤小鼠辅助性T细胞1和2平衡的影响

目的探究输血对黑色素瘤荷瘤小鼠TH1/TH2平衡及其细胞因子表达的影响。方法构建黑色素瘤小鼠肿瘤模型,设新鲜血组与储存血组(30只/组):经小鼠尾静脉分别输注新鲜全血(0 d)或储存血(15 d)0.2 mL,分别在输血后15、30 min与1、4、8 h收集小鼠全血,用微量标本多指标流式蛋白定量技术(CBA)检测各时间点血浆中细胞因子TNF-α、INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10的表达水平;另设未输血组(6只/组)为对照组。结果 1)新鲜血组与对照组比较,输血后4 hTNF-α分泌水平(pg/mL)分别为9.14±0.83 vs 1.72±0.90(P0.01);储存血组与对照组比较,输血后4 h IL-4和IL-10表达水平(pg/mL)分别为1.55±0.17 vs 0.29±0.08和5.4±1.39 vs 0.2±0.08(P0.01)。2)储存血组与新鲜血组比较,输血后1 hTNF-α和INF-γ表达水平(pg/mL)分别为3.67±1.76 vs 7.64±1.04(P0.05)和0.27±0.16 vs 0.49±0.18(P0.05);输血后4 hIL-2的表达水平(pg/mL)分别为0.29±0.08 vs 0.89±0.21(P0.01);输血后4 h IL-10的表达水平(pg/mL)分别为5.40±1.39 vs 2.38±0.54(P0.01)。结论输血可促进小鼠体内TH1和TH2细胞因子的表达,而相对于输注新鲜血,输注储存血组小鼠体内TH1细胞因子表达有所降低,而TH2细胞因子表达得到进一步促进,致TH1/TH2失衡,平衡向TH2方向偏移。     

羧胺三唑对TNF-α诱导的佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞中细胞因子分泌和NF-κB活化的影响

目的 探讨羧胺三唑对TNF-α诱导的佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞分泌促炎细胞因子的影响及部分机制.方法 用弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎模型,分离培养的佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞用20 ng/ml TNF-α刺激并用不同浓度羧胺三唑（10、20、40 μmol/L）处理.ELISA法检测成纤维样滑膜细胞上清中IL-1β和IL-6含量,Western blot法检测NF-KB p65的蛋白表达.结果 经20 ng/mlTNF-α刺激后,成纤维样滑膜细胞分泌IL-1β和IL-6水平,以及细胞核中NF-KB p65的表达显著增加（P＜0.01）.羧胺三唑（20、40 μmol/L）能够显著抑制TNF-α诱导的IL-1β[（417.39 ＋29.80） pg/mlvs.（264.63±9.35） pg/ml,（186.13±25.71）pg/ml,P ＜0.01]和IL-6[（383.45±32.13） pg/ml vs.（248.39±30.51） pg/ml,（189.64±27.86） pg/ml,P＜0.01]分泌,且明显减少细胞核中NF-κB p65的表达（P＜0.01）.结论 羧胺三唑可能通过抑制NF-KB活化来减少TNF-α诱导的佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞中促炎细胞因子IL-1β、IL-6的产生.     

急性肺损伤早期前B细胞集落刺激因子水平的变化

目的 探讨胸部开放伤合并海水浸泡致急性肺损伤(AlJ)早期前B细胞集落刺激因子(PBEF)水平及意义.方法 16只犬致胸部开放伤后随机(随机数字法)分成对照组(n=8,单纯胸部开放伤)和海水组(n=8,胸部开放伤后5min内经伤口灌人海水35 mL/kg),10min内闭合伤口,制成au模型.伤后0,2,4,6,8 h取动脉和静脉血,8 h取支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本.检测血浆及BALF中总蛋白浓度、血浆渗透压和电解质浓度;ELISA方法测血浆炎症因子IL-1β、IL-8和内皮细胞损伤标志物vWF水平,以及血浆、BALF和肺组织中PBEF水平;PBEF与血浆渗透压、炎症因子行简单相关分析.采用SPSS 10.0统计软件分析数据.结果 海水组动物血浆、BALF和肺组织中PBEF水平较对照组明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01):伤后8 h海水组PBEF水平较对照组显著升高[血浆内:(3014.16±883.47)vs.(1060.94±251.08);BALF内:(1373.35±102.53)vs.(997.77±70.31);肺组织内:(1455.22±71.74)vs.(921.43±118.13),pg/mL];血浆内PBEF水平峰值海水组出现在伤后4 h(3204.56±604.21),对照组出现在伤后6 h(1220.86±191.30),且二者峰值差异具有统计学意义(P＜0.05).血浆IL-1β,IL-8和vWF水平变化与PBEF一致,海水组较对照组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).PBEF水平升高与炎症因子和血浆渗透压明显正相关(P＜0.01),其相关系数分别为0.489(PBEF vs.PPI),0.549(PBEF vs.IL-1β),0.496(PBEF vs.IL-8),0.465(PBEF vs.vWf).结论 胸部开放伤合并海水浸泡致au早期PBEF水平进行性升高,与海水高渗有关.PBEF参与au炎症病理过程,可以作为胸部开放伤海水浸泡致au早期较为敏感的监测指标之一.     

二氧化硫对脓毒症大鼠致肺损伤炎性介质的调节

目的 探索内源性二氧化硫(sulfur dioxide,SO2)对脓毒症大鼠所致急性肺损伤过程炎性介质的调节作用.方法 雄性Sprague Dawley大鼠24只随机(随机数字法)被分入假手术对照组(control组),假手术+SO2组(SO2组),脓毒症组(sepsis组),脓毒症+SO2组(sepsis+ SO2组),每组6只.通过肺组织损伤半定量评分(Index of quantitative assessment,IQA)及肺组织湿干质量比(wet/dry weight ratio,W/D)对肺损伤进行评价.检测血浆SO2、白细胞介素6、8及10(interleukins-6,IL 6、interleukins-8,IL 8、interleukins-10,IL 10)及单核细胞趋化蛋白-1(Monocytechemotactic protein-1,MCP-1)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量.结果 脓毒症大鼠IQA及W/D与对照组相比显著升高(P均＜0.01),给予SO2干预后显著降低(P均＜0.01).血浆SO2含量在脓毒症组(3.17 ±3.44)μmol/L与对照组(5.87 ±1.96)μmol/L下降,给予SO2干预后显著升高(9.78±3.26) μmol/L,P＜0.01;血浆IL 6、IL 8、IL 10及MCP-1、TNF-α含量在脓毒症组分别为(87.08 ±22.03)、(79.82±19.69)、(66.38 ±21.77)、(157.58 ±42.36)及(65.04±19.42) pg/mg,对照组分别为(47.41 ±9.64)、(42.25±8.16)、(31.96±4.63)、(67.65±10.18)及(33.83 ±5.75)相比显著升高(P均＜0.01);给予SO2干预后分别为(66.01±16.52)、(61.52±18.32)、(45.61 ±16.47)、(117.86 ±34.20)及(61.49±15.33) pg/mg降低(IL 6及IL 8,P均＜0.05,IL 10及MCP-1,P均＜0.01).结论 在脓毒症所致肺损伤的发病过程中,内源性SO2可以通过抑制MCP-1、TNF-α进而减轻炎症因子的表达起到保护作用.     

胍丁胺对酵母多糖诱导急性肺损伤的器官保护作用

目的 探讨胍丁胺(AGM)对酵母多糖(ZYM)诱导小鼠全身炎症反应和急性肺损伤(ALI)时器官的保护作用.方法 将32只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组[磷酸盐缓冲液(PBS)0.5 ml]、AGM对照组(AGM 200 mg/kg)、模型组(ZYM 500 mg/kg+ PBS 0.5 ml)、AGM治疗组(ZYM 500 mg/kg+AGM 200 mg/kg)4组,每组8只.AGM、ZYM、PBS为腹腔注射.于给药12h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清和腹腔渗出液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及一氧化氮(NO)含量;同时测定肺组织中TNF-α、IL-6、髓过氧化物酶(MPO)活性和核转录因子-kB p65(NF-kB p65)的DNA结合活性,并观察肺组织病理改变.结果 ZYM注射后12 h小鼠精神萎靡、活动减少、饮水减少;而AGM治疗组小鼠精神状况、活动、饮水均好转.AGM治疗能降低ZYM诱导的血清及腹腔渗出液的TNF-α(ng/L:252.6±32.1比421.7±76.7,295.7±78.6比592.0±84.3,均P＜0.05)、IL-6(ng/L:2 198.8±281.8比4 725.3±615.4,19 829.3±3 647.0比47 751.3±5 264.8,均P＜0.05)和NO (μmol/L:33.2±4.3比50.2±5.2,14.0±3.6比45.4±5.2,均P＜0.05)水平升高;AGM治疗也能够抑制ZYM引起的肺组织TNF-α(ng/L:245.7±39.1比378.3±67.6,P＜0.05)、IL-6 (ng/L:810.3±175.6比1 172.4±203.3,P＜0.05)、MPO活性(ng/mg:24.9±4.4比37.3±5.8,P＜0.05)和NF-kB p65(吸光度值:0.272±0.029比0.347±0.037,P＜0.05)升高.正常对照组和AGM对照组间各指标无明显差异.ZYM可导致肺组织出现严重的炎症改变,包括血管扩张、中性粒细胞浸润;AGM治疗后肺组织损伤明显减轻.结论 AGM能够缓解ZYM诱导的小鼠全身炎症反应和ALI的严重程度.     

经中心静脉途径注入腺病毒转载的核转录因子-κB抑制因子基因治疗大鼠感染性急性肺损伤

目的 观察经中心静脉途径注入腺病毒转载的核转录因子-kB(NF-kB)抑制因子(IkB)基因对感染性急性肺损伤(ALI)的治疗作用。方法 按随机数字表法将30只SD大鼠分为假手术组、ALI模型组、IkB治疗组,每组10只。IkB治疗组经中心静脉注入滴度为1×109 pfu腺病毒转载的IkB基因1 ml,假手术组和模型组注人生理盐水1 ml;然后模型组和IκB治疗组经尾静脉注入脂多糖(LPS,5 mg/kg)1ml复制ALI模型,假手术组则注入生理盐水1 ml。观察7d后大鼠的动脉血气分析,肺湿/干重(W/D)比值,血浆肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量,肺组织NF-κBp65蛋白表达及光镜下肺组织病理改变,并计算肺损伤评分。结果 模型组死亡1只大鼠,其余大鼠均存活。3组间pH值、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)比较无明显差异;动脉血氧分压(PaO2)假手术组最高,模型组最低。模型组血浆TNF-α (μg/L)、IL-6(ng/L)含量明显高于假手术组(TNF-α：5.20±1.09比3.01±0.46;IL-6:540.28±100.78比214.45±61.37,均P＜0.05);IkB治疗组血浆TNF-α和IL-6含量明显低于模型组(TNF-α.3.70±0.96比5.20±1.09;IL-6:356.49±60.58比540.28±100.78,均P＜0.05),其中TNF-α含量已恢复至假手术组水平。肺W/D比值：假手术组最低(4.49±0.36),模型组最高(5.78±0.43),IκB治疗组居中(5.33±0.38);肺损伤评分（分）：假手术组最低（0.17±0.41）,模型组最高(2.29±0.76),IκB治疗组居中（1.57±0.53）;肺NF-κB免疫组化评分（分）：假手术组最低(1.00±0.89),模型组最高(9.43±1.13),IκB治疗组居中(4.00±1.15);上述指标3组间两两比较差异均有统计学意义(均P＜0.05)。结论 经中心静脉途径注入腺病毒转载的IκB基因,可降低ALI大鼠血中炎症因子TNF-α、II-6含量,抑制NF-κB活化,减少肺水含量和肺泡塌陷以及肺实变,从而减轻肺损伤。     

高压氧对油酸诱导大鼠急性肺损伤作用的实验研究

目的 探讨高压氧(HBO)对油酸(OA)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的干预作用.方法 80只SD大鼠按随机数字表法分为4组.OA组30只,经鼠尾静脉注射OA 0.15 ml/kg制备ALI模型,分别于制模后4 h、3 d、7 d各随机活杀10只;OA+HBO组20只,在HBO治疗箱给予2.5 atm(1 atm=101.325 kPa)下单次治疗90 min,分别于HBO治疗后3 d、7 d各随机活杀10只;单纯HBO干预组20只,分别于HBO治疗后3 d、7 d各随机活杀10只;另设正常对照组10只.取腹主动脉血进行血气分析,测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6;取左肺标本,观察大体形态改变及镜下病理学改变;取右肺,测定湿/干重(W/D)比值.结果 OA组4 h后动脉血氧分压(PaO2,mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa)由107.70±5.37降至57.40±2.63;肉眼可见肺脏明显淤血、水肿;光镜下肺泡正常结构消失,间质水肿增宽,大量炎性细胞浸润,毛细血管明显扩张、透明膜形成;W/D比值较正常对照组明显增加(6.94±0.44比4.59±0.44,P<0.05),血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高[TNF-α(μg/L):18.52±1.20比5.27±0.61,IL-1β(μg/L):13.73±1.37比6.13±1.51,IL-6(μg/L):14.51±1.21比11.14±0.89].经HBO治疗3 d、7 d时PaO2(mm Hg,3 d:79.20±1.68比59.00±2.70,7 d:94.30±3.77比74.00±3.85)、肺W/D比值(3 d:7.43±0.73比9.82±0.99,7 d:6.75±1.14比8.77±1.60)均较OA组同期有不同程度改善(P<0.05或P<0.01).治疗3 d后HBO有降低血清中IL-1β(μg/L)的作用(6.46±1.99比9.09±1.09,P<0.05).结论 HBO治疗有改善ALI大鼠氧合,促进肺水吸收、抑制部分炎症介质产生的作用.     

急性呼吸窘迫综合征大鼠多器官中Gq/11蛋白表达的变化及意义

目的 探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺、脑、心、肾、肝、小肠中Gq/11蛋白表达及作用.方法 40只Wistar大鼠按随机数字表法分为5组,每组8只.由大鼠尾静脉注射油酸(OA)0.2 ml/kg复制ARDS模型,对照组从尾静脉注射等量生理盐水.模型组分别于制模后30、60、90和120 min检测血浆和各器官中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、血管紧张素转换酶(ACE);蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测各器官中Gq/11蛋白α活性亚基Gαq/11蛋白表达.结果 与对照组相比,LDH活性于30 min后在血浆和心呈进行性升高[血浆(kU/L):9.69±1.66比6.27±1.70,心(kU/g):0.81±0.12比0.59±0.09],60 min后在肺、脑、肾、小肠呈进行性升高[肺(kU/g):1.15±0.19比0.87±0.11,脑(kU/g):2.27±0.37比1.53±0.61,肾(kU/g):1.13±0.26比0.64±0.09,小肠(kU/g):0.72±0.10比0.60±0.13],90 min后在肝(kU/g)呈进行性升高(0.50±0.14比0.39±0.05,P<0.05或P<0.01);MDA含量于30 min后在心(μmol/g)呈进行性升高(2.20±0.47比1.45±0.27),60 min后在血浆、肺、肾呈进行性升高[血浆(μmol/L):3.10±0.58比2.33±0.35,肺(μmol/g):5.56±1.30比2.05±0.52,肾(μmol/g):1.61±0.27比0.98±0.42],90 min后在脑、肝、小肠呈进行性升高[脑(μmol/g):6.78±1.38比5.83±1.58,肝(μmol/g):2.58±0.68比2.11±0.42,小肠(μmol/g):2.14±0.51比0.81±0.26,P<0.05或P<0.01];ACE活性于60 min后在血浆和肺呈进行性降低[血浆(μmol·min-1·L-1):15.47±1.68比19.87±3.11,肺(μmol·min-1·g-1):20.61±1.81比26.26±1.93],在肾(μmol·min-1·g-1)呈进行性升高(15.92±1.20比13.67±2.26),90 min后在小肠(μmol·min-1·g-1)呈进行性升高(4.42±0.34比3.29±0.24,均P<0.01);Gαq/11蛋白表达于30 min后在肺、小肠呈进行性升高[肺:(119.24±2.38)%比(100.00±18.74)%,小肠:(138.91±23.03)%比(100.00±19.43)%],60 min后在脑、心、肾呈进行性升高[脑:(141.85±33.82)%比(100.00±16.81)%,心:(124.72±24.05)%比(100.00±16.04)%,肾:(123.98±25.74)%比(100.00±8.50)%],90 min后在肝呈进行性升高[(134.34±19.14)%比(100.00±13.04)%,P<0.05或P<0.01].Gαq/11蛋白表达与各器官中LDH的变化呈正相关(r=0.584,P<0.05).结论 ARDS过程中肺、脑、心、肾、肝、小肠中Gq/11蛋白表达有不同程度上调,引发肌醇磷脂信号转导通路活性异常,参与了各器官的损伤发生.     

大蒜素对脓毒症大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的 研究大蒜素对脓毒症大鼠肠黏膜屏障功能的保护作用,并初步探讨其机制.方法 24只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为假手术组、脓毒症模型组、大蒜素治疗组,每组8只.脓毒症模型采用盲肠结扎穿孔(cecum ligation and punctue,CLP),6h及12 h后用大蒜素(30 mg/kg,ip)干预,假手术组及模型组于同时间点给予等量生理盐水.24 h后处死大鼠检测血清D-乳酸、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性、荧光异硫氰酸盐葡聚糖(fluorescence isothiocyanate dextran,FITC-Dextran,FD-40)水平;检测肠组织肿瘤坏死因子[α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性,并取部分小肠组织进行组织病理学分析.统计方法采用单因素方差分析.结果 与假手术组比较,CLP组大鼠血清D[乳酸、DAO活性及FD40水平明显升高[D-乳酸(nmol/mL):(599.4±101.1) vs.(149.2±20.63),t=11.84,P＜0.01;DAO (ng/mL):(302.1±64.56)vs.(76.57±14.76),t=9.433,P＜0.01;FD-40 (ng/mL):(6664.0±1437.0)vs.(1446.0±205.0),t=9.704,P＜0.01];病理切片示CLP组大鼠肠道形态学损伤明显;肠组织中TNF-α、IL-6、MDA水平明显升高[TNF-α (pg/mL):(186.35±20.43)vs.(58.76±8.94),t=17.23,P＜0.01;IL-6 (pg/mL):(763.25±85.23)vs.(125.36±14.37),t=22.54,P＜0.01;MDA(nmol/mg prot):(29.36±3.27)vs.(7.24 ±0.85),t=16.61,P＜0.01],SOD活性降低[SOD(U/mg prot):(35.75 ±6.53)vs.(73.26±8.35),t=10.57,P＜0.01].大蒜素显著减少脓毒症诱导的血清中D哥酸、DAO活性及FD-40的升高[D-乳酸(nmol/mL):(330.1±81.77)vs.(599.4±101.1),t=7.086,P＜0.01;DAO (ng/mL):(171.8±49.70)vs.(302.1±64.56),t=5.45,P＜0.01;FD-40(ng/mL):(3349.0±1 167.0)vs.(6664.0±1437.0),t=6.165,P＜0.01];病理切片显示大蒜素减轻肠道形态学损伤;大蒜素明显抑制肠组织中TNF-α、IL-6、MDA水平[TNF-α (pg/mL):(95.37±12.68)vs.(186.35±20.43),t=12.29,P＜0.01;IL-6 (pg/mL):(354.27±46.27)vs.(763.25 ±85.23),t=14.45,P＜0.01;MDA (nmol/mgprot):(16.27±3.14)vs.(29.36±3.27),t=9.831,P＜0.01],增加SOD活性[SOD (U/mg prot):(55.35±6.23)vs.(35.75±6.53),t=5.522,P＜0.01].结论 大蒜素对CLP诱导的肠黏膜屏障功能具有保护作用,其机制可能与抑制炎症和氧化应激有关.     

山莨菪碱对急性肺损伤时肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的干预探讨

目的观察山莨菪碱(654-2)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响,探讨其对ALI治疗作用的可能机制。方法复制ALI大鼠模型。实验动物随机分为ALI模型组、654-2治疗组、对照组,进行各组大鼠动脉血气、肺湿／干(W／D）值测定及肺组织病理学光镜检查。分离培养各组大鼠肺泡巨噬细胞,采用生物活性法进行AM上清液TNF-α、IL-6测定。结果654-2治疗组大鼠AM分泌TNF-α［（38．98±4.51)KU/L］和IL-6［（20．82±6.3)kU/L］的水平明显低于ALI组［TNF-α为(68.27±9.13)kU/L,P＜0.001;IL-6为(33.84±9.02)kU/L,P＜0.01］,并能使血气改善(P＜0.05)、W／D值下降(P＜0.05),肺组织损伤程度减轻。结论654-2对ALI大鼠肺泡巨噬细胞过度活化、分泌TNF-α、IL-6具有显著抑制作用,在一定程度上防止ALI的发生和发展。