原位杂交技术测定放烧复合伤创面aFGF mRNA的表达

目的 :探讨放烧复合伤创面愈合过程中aFGF的作用。方法 :用SD大鼠制备深Ⅱ°烧伤、放烧复合伤模型 ,分别于模型后 12h和 1、3、7d取背部创面皮肤组织 ,采用原位杂交技术测aFGFmRNA的表达。结果 :烧伤组大鼠在上述 4个时相点aFGFmRNA表达明显增加 ,而放烧复合伤组仅在第 7天有少量表达 ;aFGFmRNA的表达部位位于真皮及皮下。结论 :提示aFGF有助于创伤的愈合 ;放烧复合伤创面愈合延迟与aFGFmRNA表达低下及延迟有关     

酸性成纤维细胞生长因子对大鼠创伤性脑水肿的防治作用

目的 观察酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）对创伤性脑水肿的作用。方法 大鼠脑损伤前应用aFGF持续脑室内注射12 h,观察脑含水量、病理组织学和超微结构改变。结果 脑水肿和神经细胞结构损伤明显减轻。结论 aFGF具有明显减轻脑水肿和神经细胞保护作用。     

肝星形细胞表达转化生长因子α与成纤维细胞生长因子

目的 研究肝星形细胞（ＨＳＣ）转化生长因子α（ＦＧＦα）与成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）的表达。方法 分别从正常与ＣＣＬ４肝纤维化大鼠肝脏分离ＨＳＣ,提取ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ测定ＴＧＦα和ａＦＧＦｍＲＮＡ。结果 正常ＨＳＣ表达ＴＧＦα和ａＦＧＦ,肝纤维化时ＴＧＦα与ａＦＧＦｍＲＮＡ水平均显著升高（Ｐ〈０．０５）。结论 ＨＳＣ自分泌ＴＧＦα和ａＦＧＦ,对肝纤维化具有重要促进作用。     

烫伤后创面脓毒症大鼠肝脏L-CPT 1mRNA的表达规律及意义

目的:探讨烫伤后创面脓毒症大鼠肝型肉碱棕榈酰转移酶1(liver carnitine palmitoyltransferase1,L-CPT1)mRNA的表达规律及意义。方法:60只背部30%Ⅲ度烫伤大鼠随机分为创面脓毒症组和烫伤对照组,创面脓毒症组大鼠烫伤后10min创面涂布绿脓杆菌,建立创面脓毒症模型,通过实时荧光定量PCR法测定伤前、伤后24h、48h、96h及7d的L-CPT1mRNA表达变化。结果:大鼠烫伤后肝组织L-CPT1mRNA的表达在伤后早期轻度增高,此后表达明显下调,创面脓毒症组下降趋势更明显,致伤后96h表达量降低至最低点,并显著低于对照组(P<0.05)。结论:烫伤后创面脓毒症的发生引起肝脏L-CPT1mRNA表达下调,导致脂肪酸活化产物脂酰辅酶A向线粒体内转运减少,加重了烫伤后的脂代谢紊乱。     

烫伤后创面脓毒症大鼠肝脏PPARα mRNA的表达

目的探讨烫伤后创面脓毒症大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体αmRNA的表达规律及意义。方法60只背部30%Ⅲ度烫伤大鼠随机分为创面脓毒症组和烫伤对照组,创面脓毒症组大鼠烫伤后10min创面涂布铜绿假单胞菌建立创面脓毒症模型,通过荧光定量PCR法测定伤前、伤后24h、48h、96h及7d的PPARαmRNA表达变化。结果大鼠烫伤后肝组织PPARαmRNA的表达在伤后早期轻度增强,此后表达明显下调,创面脓毒症组下降趋势更明显,致伤后96h表达量降低至最低点,并显著低于对照组（P〈0.05）。结论烫伤后创面脓毒症的发生引起肝脏PPARαmRNA表达下调,这种变化可影响肝脏脂质的代谢过程。     

三七总皂苷调节PDGF-BB/PDGFR-β的表达促进大鼠浅表Ⅱ°烧伤创面愈合

  目的  观察三七总皂苷（PNS）对大鼠浅表Ⅱ°烧伤创面的治疗作用及对PDGF-BB/PDGFR-β表达的影响，探讨PNS治疗浅表Ⅱ°烧伤的作用机制。  方法  复制大鼠浅表Ⅱ°烧伤模型，模型复制成功的大鼠用PNS治疗，分别于给药后第0、7、14、21 天活体取材，应用免疫组化（IHC），Western blot和RT-PCR检测烧伤皮肤组织中PDGF-BB/PDGFR-β蛋白和mRNA的表达变化。此外，在不同时间点宏观监测皮肤组织恢复情况。  结果  HE染色提示，模型复制是成功的。宏观监测数据显示，和模型组相比，PNS高剂量组大鼠脱痂、长毛时间均见缩短，创面愈合率提高（P < 0.05）。免疫组化，WB和RT-PCR结果显示，PNS高剂量组的PDGF-BB/PDGFR-β的蛋白和mRNA表达在第7天急剧增加，至第14天持续维持在较高水平，第21天接近正常组水平；而模型组表达高峰出现在烧伤后第21天，PDGF-BB/PDGFR-β表达升高是一个缓慢的过程。  结论  PNS能明显促进大鼠浅表Ⅱ°烧伤模型皮肤创面的愈合，其机制可能与其上调皮肤组织中的PDGF-BB/PDGFR-β的蛋白和mRNA表达密切相关。     

人酸性成纤维细胞生长因子基因重组腺病毒粘粒载体的构建

目的　构建人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)重组腺病毒粘粒载体。方法　抽取人胎脑组织mRNA ,经RT PCR获取aFGF基因 ,测序后将其插入腺病毒粘粒载体 pAxCAwt的SwaI位点。 结果　RT PCR合成的DNA片段经克隆、测序后证实为aFGF基因 ,酶切结果显示 ,aFGF腺病毒重组粘粒 (pAxCAwt aFGF)中aFGF的插入方向正确。结论　构建的aFGF腺病毒重组粘粒 (pAxCAwt aFGF)可用于进一步的基因治疗的研究中 ,为心肌缺血区促血管生长因子基因转染作准备     

改构体和野生型aFGF对肠缺血-再灌注损伤保护作用的比较研究

目的：观察外源性给予改构体酸性成纤维细胞生长因子（acid fibroblast growth factor，aFGF）后，大鼠小肠功能指标的变化规律，探讨改构体aFGF对肠缺血-再灌注损伤的影响。方法：以大鼠肠系膜上动脉（SMA）夹闭造成肠缺血-再灌注损伤模型，并将动物随机分为假手术组、生理盐水对照组、改构体aFGF治疗组和野生型aFGF治疗组。除假手术组外，其余各组动物均于缺血45min后于2、6、12、24h活杀，取血度小腑组织标本，检测血浆中D-乳酸含量度组织中增殖细胞棱抗原（PCNA）的表达特性。结果：血浆D-乳酸变化及HE染色显示，再灌注后6h屏障功能损伤最严重，而改构体aFGF治疗组损伤在伤后24h较生理盐水对照组有所减轻。PCNA的表达趋势与D-乳酸类似。结论：改构体aFGF对肠缺血-再灌注损伤具有一定保护与促修复作用。     

迪康凝胶对大鼠烫伤创面的治疗作用及可能机制研究

目的 探讨迪康凝胶对烫伤大鼠创面愈合的效果及作用机制.方法 将SD大鼠随机分为模型组、美宝烫伤膏组、迪康凝胶组,3组均采用超级控温烫伤仪,造背部深Ⅱ度烫伤.模型组不给药,其余给药1次/d,连续21 d.连续考察21 d内创面愈合情况及创面病理组织形态.ELISA法检测组织TNF-α和IL-8及Ⅰ 、Ⅲ型胶原.RT-PCR检测组织TNF-α和IL-8表达水平.结果 与模型组比较,迪康凝胶组愈合时间缩短(P<0.05,P<0.01),创伤愈合率增高(P<0.05,P<0.01),差异有统计学意义.组织学观察证明,迪康凝胶具有良好的组织损伤修复作用.ELISA检测表明,烫伤后两药物组创面组织TNF-α和IL-8含量均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);而胶原Ⅰ 、Ⅲ组织含量均高于模型组.RT-PCR检测表明,两药物组组织TNF-αmRNA和IL-8 mRNA表达水平均与其蛋白浓度水平基本一致.结论 迪康凝胶能促进大鼠皮肤烫伤后创面愈合,是治疗烫伤创面的有效药物.     

人重组aFGF对鼠胚神经上皮细胞分化及受体表达的影响

目的 观察人重组酸性成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）对原代培养鼠胚神经上皮细胞分化及受体表达的影响,方法 应用神经细胞原代培养,免疫细胞化学及图像分析。结果 ａＦＧＦ可使神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）阳性细胞数增加,胞体增大,细胞培养第７天其作用明显,ＮＳＥ免疫阳性着色发布下神经细胞胞质和突起中,在培养第３,７,１０天,ａＦＧＦ可促进其受体ｆｌｇ蛋白的表达,结论ａＦＧＦ可诱导鼠胚神经上皮细胞分化及受     

深度烧伤创面巨噬细胞与渗液sTNFR、sVCAM-I的相关分析

目的检测人不同时期烧伤创面渗液可溶性肿瘤坏死因子受体-I、II(sTNFR-I、sTNFR-II)和可溶性血管细胞黏附分子-I(sVCAM-I)与创面巨噬细胞数量,并分析相互间的关系。方法在换药时采用海绵吸取创面渗液,用免疫酶联法测定sTNFR-I、sTNFR-II、sVCAM-I,手术中取烧伤创面组织,切片HE染色和免疫组化染色标记CD68,计数巨噬细胞数量。结果烧伤创面渗液中sTNFR-I、sTNFR-II浓度及创面组织中的巨噬细胞数量在伤后的第2天显著增加,在烧伤1周后进一步提高,并在创面愈合前维持在较高水平。sVCAM-I在烧伤后即显著下降,并一直维持在低水平。创面渗液sTNFR-I、sTNFR-II、sVCAM-I浓度变化与巨噬细胞数量变化的相关系数分别为0.95、0.97、-0.37。结论sTNFR-I、sTNFR-II与巨噬细胞数量显著相关,提示深度烧伤创面愈合过程中sTNFR与巨噬细胞可能具有协同作用。     

促甲状腺素释放激素对严重烧伤大鼠组织含水量的影响

目的 探讨促甲状腺素释放激素（TRH）对严重烧伤大鼠组织含水量的影响并探讨其可能机制。方法 24只健康成年SD大鼠随机分为正常对照组、TRH治疗组和生理盐水（NS）对照组,复制大鼠40％TBAⅡ度烧伤休克动物模型,烧伤后0．5h给予TRH（5mg/kg体重）,观察烧伤前后平均动脉压的动态变化,检测烧伤后5h心、肝、肺、肾和创面含水量的改变,并观察血浆和脏器组织的超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量的变化。结果 与NS对照组相比,TRH治疗后,大鼠的血压上升并维持在高水平,烧伤创面和内脏器官含水量明显下降,同时器官组织SOD活力上升,MDA含量下降。结论 TRH能抑制烧伤大鼠水肿的形成,具有抗渗出作用,这一作用可能与抗脂质过氧化损伤有关。     

弹烧复合伤后海水浸泡对血管内皮细胞影响的实验研究

目的　探讨弹烧复合伤合并海水浸泡对血管内皮细胞损伤的原因和机制 ,为海水浸泡早期救治提供一定的理论依据。方法　建立弹烧复合伤的犬实验模型 ,致伤后将犬随机分为非浸泡组和浸泡组 ,将浸泡组犬在海水中浸泡 4h后捞出 ,然后于伤后 4、7、10、2 0、2 8h分别取血检测循环内皮细胞 (CEC)以及血管性假血友病因子 (vWF)的变化。非浸泡组除不浸泡海水外 ,余检测时相及指标同浸泡组。结果　非浸泡组于致伤后 4h和 7hCEC、vWF升高 (P <0 .0 5 ) ,而浸泡组于伤后 4、7、10、2 0、2 8hCEC和vWF均持续增高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。组间比较 :CEC从伤后 4h至伤后 2 8h ,浸泡组与非浸泡组相比有显著差异 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,vWF于伤后 7h至伤后 2 8h浸泡组与非浸泡组相比有显著差异 (P <0 .0 5 ,P<0 .0 1)。结论　弹烧复合伤合并海水浸泡伤后可引起全身EC急性损伤 ,并且这种损伤比单纯弹烧复合伤 (不浸泡 )更严重 ,更持久。     

康肤霜对糖尿病大鼠烫伤创面愈合的作用

目的观察康肤霜对糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响。方法 Wistar大鼠24只,采用尾静脉注射四氧嘧啶法制成糖尿病大鼠模型。自动控时调压烫伤仪在大鼠背部制备4个深Ⅱ度烫伤创面,将创面随机分为康肤霜组、rhEGF组、聚维酮碘组及生理盐水组,分别采用康肤霜、rhEGF、聚维酮碘及生理盐水外敷,直至创面取材或创面愈合。观察创面愈合率及愈合时间。各组大鼠于创面治疗后第7、14、21天取创面组织,苏木素-伊红(HE)染色光学显微镜下观察创面组织病理学变化,链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫组织化学法检测创面组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,以标记指数法测定PCNA阳性细胞,评估组织创面的修复情况。结果康肤霜组大鼠创面愈合时间、愈合率均优于其他3组(P<0.05)。病理检查显示康肤霜能明显减轻创面早期的炎症反应,促进创面的再上皮化和表皮各层的分化。康肤霜组大鼠创面组织中PCNA的表达水平明显高于其他3组(P<0.05)。结论康肤霜能促进糖尿病大鼠烫伤创面细胞增殖,加速创面的愈合。     

LOW MOLECULAR WEIGHT HEPARIN ENHANCES THE EFFECT OF aFGF IN ACCELERATING NEOVASCULA-RIZATION

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Thermal injuries induce gene expression of endogenous c-fos, c-myc and bFGF in burned tissues

Objective To investigate the expression sequence and distribution characteristics of the protooncogenes cfos,c-myc and endogenous basic fibroblast growth factor(bFGF) genes in burned tissues,and to explore the possible effects of changes in these genes‘ functions on wound healing.Methods Partial-thickness burns of 30% TBSA were esablished on backs of Wistar rats.In situ hybridization and histological methods were used to detect expression of c-fos,c-myc and bFGF genes in normal and burned tissue at 3h,6h,1d,3d,7d and 14 d postburn. Results Although expression of c-fos and c-myc genes and bFGF gene could be found in normal skin,the expression of all three were markedly induced by burn wounds and the expression models in sequence and distribution were quite different.Expression of c-fos gene increased and peaked at 6h.Signals were mainly localized in both nuclei of dermal fibroblasts and monocytes.The expression of bFGF gene increased at 6h and peaked at 1 d postburn,and was distributed in the cytoplasm of fibroblasts.C-myc gene peaked 3 d postburn and was also distributed in the cytoplasm of fibroblasts.Conclusions These results indicated that thermal injury could induce the expression of c-fos.c-myc and bFGF at gene level,showing phasic control and regional distribution.The phasic expression of these genes suggests that there is an interaction between protooncogenes and bFGF,which may play an important role in wound healing.The different expressions of c-fos and c-myc play an inducing role in regulating bFGF,and in turn affect wound healing.     

大鼠角膜酸烧伤对角膜内皮细胞损伤和修复的实验观察

目的研究大鼠角膜酸烧伤对内皮细胞的损伤和影响内皮修复的因素.方法建立轻、中、重度大鼠角膜酸烧伤模型,裂隙灯下动态观察角膜水肿、混浊及上皮愈合情况;各组于烧伤后不同时间点取角膜行内皮细胞台盼蓝-茜素红联合活细胞染色及HE染色,观察内皮细胞损伤、修复及白细胞浸润情况.结果轻、中度酸烧伤角膜内皮细胞未见损伤改变,角膜少量白细胞浸润,上皮愈合及水肿消退均较快;重度酸烧伤损伤区内皮细胞坏死、脱落,修复期损伤周边区内皮细胞变形、伸长,向创面移行,角膜大量白细胞浸润,角膜上皮愈合延迟,水肿消退慢.结论重度酸烧伤可直接造成角膜内皮细胞受损,继发性炎症反应参与了酸烧伤后角膜内皮细胞的损害;内皮细胞受损可使角膜溃疡及水肿迁延不愈.     

伤后24h内削痂对深二度烧伤创面生长因子释放的影响

目的 探讨伤后24 h内削痂手术对深二度烧伤创面局部表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)释放的影响。方法 12例深二度烧伤患者,伤后24 h内实施削痂手术。削痂术前先切取手术前实验区组织标本。术中部分创面保留不予手术,作为未手术实验区。伤后5～7 d行再次手术,分别切取经削痂处理和未手术区的创面组织,作为手术后和未手术实验区标本。分别检测创面组织释放生长因子EGF、FGF-2和PDGF-AB的含量,并进行组织学观察和新生肉芽形成半定量分析。结果 削痂手术创面组织局部释放EGF、FGF-2和PDGF-AB的水平较手术前和未手术创面有显著升高(P<0.05);组织形态学观察显示,削痂手术后创面新鲜肉芽组织形成较手术前和未手术创面显著(P<0.05)。结论 伤后24 h内削痂手术可以促进局部创面组织释放EGF、FGF-2和PDGF-AB,促进新生肉芽形成,有利于深二度烧伤创面愈合。     

伤后24 h内对大面积深Ⅱ度烧伤创面削痂的安全性以及促进白细胞介素-1释放的研究

目的 评价伤后24 h内削痂治疗大面积深Ⅱ度烧伤的安全性,探讨其减轻深Ⅱ度烧伤创面炎症反应,防止创面进行性损害,促进IL-1释放,加快创面愈合的作用.方法 12例大面积以深Ⅱ度烧伤为主的患者,每例患者均选择相对均匀的深Ⅱ度创面作为实验创面并分为3个研究区域:手术前、手术后和未手术实验区.伤后24 h内行削痂术,手术前标...