钙调神经磷酸酶依赖的信号通路在致心肌肥大中的作用

心肌细胞内持续的Ca2+平台激活钙调神经磷酸酶(CaN),使活化T细胞核因子c(NF-ATc)去磷酸化并进入胞核.去磷酸化的NF-ATc再与锌指转录因子(GATA4)等相互作用,活化多种心肌肥厚的相关基因,导致心肌肥厚.免疫抑制剂环胞素A(CsA)、FK506等可抑制CaN活性,消除心肌肥厚而改善心衰.     

钙调神经磷酸酶在醛固酮诱导心肌肥大中的作用

目的观察钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(Ald)诱导的心肌肥大信号转导机制中的作用及其调节.方法24只Wistar大鼠随机分为2组实验组和对照组.实验组给予醛固酮腹腔注射后,再随机分为3组,分别给予环孢霉素A、螺内酯、及生理盐水干预,对照组仅腹腔注射生理盐水.测定大鼠血浆中血管活性因子Ald、AngⅡ、ET-1与NO-3的浓度,心重/体重,心肌组织中的CaN活性;心肌组织中肥大相关基因心房利钠因子(ANF)及CaNAβ mRNA的水平,同时用免疫组化方法观察心肌胞浆中CaN的表达.结果醛固酮腹腔注射后血浆中的醛固酮水平明显增高,醛固酮腹腔注射4周可使心肌肥大相关基因ANF mRNA水平明显升高,心肌中CaN活性明显升高,心肌细胞浆中的CaN表达上调;环孢霉素A及螺内酯干预4周,可明显抑制心肌CaN活性,并下调ANF(P＜0.05)的表达.结论CaN参与了外源性醛固酮诱导的心肌肥大的信号通路,醛固酮通过活化CaN,使肥大相关基因表达增加产生心肌肥大.螺内酯通过拮抗醛固酮与受体结合抑制心肌肥大.     

钙调神经磷酸酶信号通路在心肌肥厚中的作用

心肌肥厚是许多心血管病的病理结果,可引起心力衰竭,增加猝死发生率。因此,探讨心肌肥厚发生机制,寻求延缓和治疗心肌肥厚的新途径,早已引起人们的重视。近年来,研究发现钙调神经磷酸酶(Ca2 /钙调素调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶)可通过多种信号通路参与心肌肥厚的形成。现综述钙调神经磷酸酶信号通路在心肌肥厚发展中的作用。     

钙调神经磷酸酶在醛固酮诱导心肌肥大中的作用

目的观察钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(Ald)诱导的心肌肥大信号转导机制中的作用及其调节。方法24只Wistar大鼠随机分为2组:实验组和对照组。实验组给予醛固酮腹腔注射后,再随机分为3组,分别给予环孢霉素A、螺内酯、及生理盐水干预,对照组仅腹腔注射生理盐水。测定大鼠血浆中血管活性因子Ald、AngⅡ、ET1与NO-3的浓度,心重/体重,心肌组织中的CaN活性;心肌组织中肥大相关基因心房利钠因子(ANF)及CaNAβmRNA的水平,同时用免疫组化方法观察心肌胞浆中CaN的表达。结果醛固酮腹腔注射后血浆中的醛固酮水平明显增高,醛固酮腹腔注射4周可使心肌肥大相关基因ANFmRNA水平明显升高,心肌中CaN活性明显升高,心肌细胞浆中的CaN表达上调;环孢霉素A及螺内酯干预4周,可明显抑制心肌CaN活性,并下调ANF(P<0.05)的表达。结论CaN参与了外源性醛固酮诱导的心肌肥大的信号通路,醛固酮通过活化CaN,使肥大相关基因表达增加产生心肌肥大。螺内酯通过拮抗醛固酮与受体结合抑制心肌肥大。     

钙调神经磷酸酶信号通路与心肌细胞肥大

目的　探讨不同来源的细胞内Ca2 ([Ca2 ]i)在钙调神经磷酸酶 (CaN) 活化T细胞核因子 3 (NFAT3 )介导的心肌肥大中的作用。方法　分别用血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )或雷尼丁刺激培养的大鼠心肌细胞外Ca2 跨膜内流或细胞内Ca2 释放 ,检测CaN、NFAT3、锌指转录因子 (GATA4)蛋白量、NFAT3定位以及氚 亮氨酸 (3H Leu)掺入量 ,环孢素A作为CaN特异抑制剂。结果　AngⅡ、雷尼丁刺激 1、3d ,心肌细胞CaN、NFAT3、GATA4蛋白表达及3H Leu掺入量较对照组明显增高(P值 <0 0 5或 <0 0 1)。AngⅡ和雷尼丁刺激第 1天 ,心肌细胞NFAT3表达由胞质转入胞核表达为主。环孢素A可抑制上述作用 ,与刺激组相比差异有显著性 (P <0 0 5或 <0 0 1)。结论　刺激心肌细胞Ca2 内流及Ca2 释放 ,均可激活CaN NFAT3信号通路。CaN NFAT3信号通路的激活与[Ca2 ]i增加有关 ,而与 [Ca2 ]i的来源无关。环孢素A能够抑制AngⅡ和雷尼丁介导的CaN NFAT 3 GATA 4表达的增加和蛋白质合成     

钙调神经磷酸酶信号通路与心肌重构

心肌重构是心脏对缺氧或压力负荷过重的一种适应性反应。心肌细胞适应不良性肥大和心肌细胞坏死或凋亡是心肌重构的基础改变因素。已知细胞内钙超载与心肌重构有关 ,但对其作用机制还不清楚。最近研究表明 ,由Ca2 + 活化的钙调神经磷酸酶 (CaN)在心肌重构的信号传导中起重要作用 ,其可能是Ca2 + 信号导致肥大基因活化的偶联环节。同时 ,CaN通过影响其他信号通路对细胞凋亡有调节作用 ,但对其作用机制还不清楚。应用抑制CaN活性的药物CsA及FK5 0 6可以阻滞心肌肥大的发生发展 ,提示Ca2 + CaN依赖的信号传递通路可能是介导心肌重构的一条新的、重要的通路     

钙调神经磷酸酶与心肌重构

心肌重构是心肌对多种刺激因素所产生的适应性变化。在重构过程中,心肌细胞内发生一系列信号转导方面的改变,钙调弗经磷酸酶介导的信号转导是胞外信号传递至核内的关键环节,现将阐述钙调神经磷酸酶在细胞重构、组织重构、电重构、功能重构方面的作用,及钙调神经磷酸酶的几种抑制剂,并介绍钙调神经磷酸酶通路与其他信号转导通路间联系。     

钙/钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路与T细胞活化及支气管哮喘关系的研究进展

钙/钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路作为T细胞内重要的生物信号转导通路,在T细胞活化中起到调节枢纽的作用,与Th细胞的分化及多种细胞因子的产生有密切关系;而T细胞的浸润和活化在支气管哮喘(简称哮喘)气道慢性炎症及气道重塑的发生、发展过程中具有重要的意义,因此,钙/钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路可能与哮喘的发生有密切关系,其在哮喘T细胞活化机制中的研究对于揭示哮喘的发病机制和治疗有重要的意义.     

三磷酸肌醇受体/钙调神经磷酸酶信号通路激活致心肌肥厚的研究

目的 研究激活心肌细胞三磷酸肌醇受体（IP3R）是否触发钙调神经磷酸酶（CaN)介导的心肌肥厚信号通路。方法 培养Wistar乳鼠心肌细胞检测心肌细胞蛋白和核酸合成，细胞内钙变化，CaN，活化T细胞核因子3（NFAT3）及锌指转录因子（GATA4），胚胎基因（α-actin,β-MHC）及即刻早期基因（c-fos,c-myc)表达。结果 给予IP3能时间和剂量依赖性也增加心肌细胞蛋白和核酸合成，能明显致心肌细胞内钙增加；IP3刺激心肌细胞IP3受体，能明显激活心肌细胞CaN/NFAT3/GATA4信号通路，促使心肌细胞的早期即刻基因和胚胎基因表达。结论 激活IP3R介导的CaN/NFAT3/GATA4信号通路能显地促使心肌细胞肥大，这条信号通路不同于已知的G蛋白偶联受体介导的心肌肥厚信号转导途径。     

钙／钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路与T细胞活化及支气管哮喘关系的研究进展

钙／钙调神经磷酸酶-活化T细胞核凼子信号通路作为T细胞内重要的生物信号转导通路,在T细胞活化中起到调节枢纽的作用,与Th细胞的分化及多种细胞闵子的产生有密切关系;而T细胞的浸润和活化在支气管哮喘（简称哮喘）气道慢性炎症及气道重塑的发生、发展过程中具有重要的意义,因此,钙／钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路可能与哮喘的发生有密切关系,其在哮喘T细胞活化机制中的研究对于揭示哮喘的发病机制和治疗有重要的意义。     

泛素蛋白酶体抑制剂抑制钙调神经磷酸酶依赖的心肌细胞肥大

目的 研究泛素蛋白酶体抑制剂MG262对钙调神经磷酸酶信号通路的影响,探讨其抑制心肌细胞肥大的机制。方法 在去甲肾上腺素诱导培养的乳鼠肥大心肌细胞中加入MG262,通过Phalloidin染色观察细胞的形态,RNA Dot Blot检测胚胎蛋白基因表达,Western blot检测细胞中钙调神经磷酸酶蛋白含量,免疫荧光标记观察活化T细胞核因子c4（NFATc4）蛋白在细胞内分布。结果 去甲肾上腺素使细胞面积增大近1.1倍,胚胎基因心房利钠因子（ANF）、脑钠肽（BNP）、β肌球蛋白重链（β-MHC）的mRNA表达上调,细胞核内NFATc4蛋白表达水平增加。MG262明显抑制去甲肾上腺素诱导的细胞肥大（P<0.05）和ANP、BNP、β-MHC的mRNA表达上调（P<0.05）,细胞面积下降了33%;同时MG262使去甲肾上腺素诱导的细胞钙调神经磷酸酶蛋白表达水平下降,抑制NFATc4核内转位。结论 MG262可能通过抑制钙调神经磷酸酶信号通路,减轻心肌细胞肥大。     

Ca~(2+)-CaN-NFAT信号通路在心肌肥大中的作用及研究进展

钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)是Ca2 的下游因子,在细胞内钙升高引起的心肌肥大中有重要作用。现综述Ca2 CaN及其下游因子活化T细胞核因子3(NFAT3)和锌指转录因子(GATA4)在心肌肥大中的作用及近年的研究进展。     

PTEN抑制钙/钙调神经磷酸酶信号通路、负性调控血管紧张素Ⅱ所致心肌细胞肥大

目的 观察PTEN过度表达对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激所致钙／钙调神经磷酸酶（Ca^2＋／CaN）信号通路激活的影响,探讨PTEN负性调控心肌肥厚的作用机制。方法通过携带野生型PTEN基因的腺病毒（Ad-PTEN）感染构建过度表达PTEN的原代培养心肌细胞模型,用AngⅡ作为促心肌肥厚刺激剂,Fura-2／AM比率荧光成像系统检测细胞内Ca^2＋浓度（[Ca^2＋]i）,逆转录聚合酶链反应检测受感染细胞内心房利钠因子（ANF）、β-肌球蛋白重链（B-MHC）与CaNAβ的mRNA表达,Western blot检测CaNAβ的蛋白表达,同时测定CaN活性。结果 Ad-PTEN感染后,心肌细胞内过度表达PTEN的mRNA和蛋白。PTEN的过度表达能够明显抑制AngⅡ刺激所致的心肌细胞肥大标志基因表达。AngⅡ刺激使[Ca^2＋]i、CaNAβ mRNA与蛋白表达以及CaN活性明显增高,PTEN过度表达能够明显抑制AngⅡ引起的[Ca^2＋]i、CaNAβ mRNA与蛋白表达以及CaN活性增高。结论 PTEN过度表达可能通过抑制Ca^2＋／CaN信号通路,负性调控AngⅡ刺激所致的心肌细胞肥大。     

三磷酸肌醇受体参与心肌钙调神经磷酸酶信号通路的激活

目的:研究激活心肌细胞三磷酸肌醇受体（IP3R）是否触发钙调神经磷酸酶（CaN）介导的心肌肥厚信号通路。方法:培养的乳鼠心肌细胞检测心肌细胞蛋白合成,细胞内钙变化,CaN、活化T细胞核因子3（NFAT3）及锌指转录因子（GATA4）,胚胎基因（αskeletalactin,βMHC）及即刻早期基因（cfos,cmyc）蛋白表达。结果:三磷酸肌醇（IP3）能显著致原代培养的心肌细胞时间和剂量依赖性地增加心肌细胞蛋白合成,能显著致心肌细胞的早期即刻基因和胚胎基因表达,能显著增加心肌细胞内游离钙。IP3剌激IP3受体,能显著激活心肌细胞CaN/NFAT3/GATA4信号通路,使心肌细胞早期即刻基因（cfos、cmyc）及胚胎基因（αskeletalactin,βMHC）表达增加。结论:激活IP3R介导的CaN/NFAT3/GATA4信号通路能显著地促使心肌细胞肥大,这条信号通路不同于已知的G蛋白偶联受体介导的心肌肥厚信号转导途径。     

钙调神经磷酸酶在高血压心肌肥厚发展中的作用

目的 探讨钙调神经磷酸酶（CaN）在肾血管性高血压心肌肥厚发展中的作用,以及CaN抑制剂环孢菌素A（CsA）对心肌肥厚的影响。方法 39只大鼠（造模组）采用两肾一夹法行肾血管性高血压大鼠心肌肥厚造模,2个月时处死15只（造模Ⅰ组）;余24只中,13只予生理盐水腹腔注射（造模Ⅱ组）,11只行CsA腹腔注射（造模Ⅲ组）1个月后处死。另设22只大鼠为对照组,除不放置银夹外,其他处理与造模组相同,分别于2个月（对照Ⅰ组）、3个月（对照Ⅱ组）各处死11只。观察各组大鼠心肌肥厚程度、CaNmRNA和蛋白质表达及CaN活性的改变。结果左室重量（LVW）及与胫骨长度的比值（LVW／TL）,光镜下心肌细胞横截面积（Atea）,心肌CaN mRNA和蛋白质表达及其活性在造模Ⅰ组、Ⅱ组均较对照Ⅰ组、Ⅱ组增高（P均〈0．05）,造模Ⅲ组较造模Ⅰ组、Ⅱ组均显著下降（P均〈0．05）。结论 CaN参与肾血管性高血压大鼠心肌肥厚发展;抑制CaN活性可逆转心肌肥厚。     

钙调神经磷酸酶和丝裂素活化蛋白激酶在调节心肌肥厚中的作用

钙调神经磷酸酶和丝裂素活化蛋白激酶信号系统是调节心肌肥厚发生和发展的两条重要细胞信号通道;前者在体内病理因素刺激下活性增高而导致心肌肥厚形成,后者的3个成员胞外信号调节激酶、应激活化蛋白激酶和P38丝裂素活化蛋白激酶,在调节心肌肥厚中的作用则不同。另外,两者之间并不是孤立的,而是彼此交叉、互相协调、共同调节心肌肥厚反应。     

钙调神经磷酸酶在人类心肌中的表达与分布

目的 了解钙调神经磷酸酶(CaN)在人类健康心肌和衰竭心肌中的表达与分布.方法 以12例行移植手术的终末期衰竭心脏和5例因车祸丧生的"健康供体"心脏为研究对象,分别利用免疫组化和Western blot技术对左、右心室中CaN的表达与分布进行研究.结果 CaN在心脏的心肌细胞、纤维母细胞、心外膜间皮细胞中染色阳性,且Western blot实验在后两种细胞中均检测到单一的58 000带,心肌内血管内皮细胞和平滑肌细胞中CaN染色阴性.与"供体"心肌比较,无论左心室还是右心室,衰竭心肌的CaN蛋白水平差异均无统计学意义(衰竭右心室和供体右心室电泳带强度分别为130.20±8.66和139.87±6.21,P=0.33.衰竭左心室和供体左心室电泳带强度分别为106.45和126.34±12.09),且左右心室肌CaN蛋白水平差异也无统计学意义(衰竭心肌左、右心室电泳带强度分别为96.99±10.67和104.58±13.18,P=0.63.供体心肌左、右心室电泳带强度分别为132.12和120.74).结论 CaN存在于人类心脏多数类型细胞中,包括心肌细胞、纤维母细胞和心外膜间皮细胞.心力衰竭时,CaN蛋白水平没有改变.     

压力负荷下缬沙坦对钙调神经磷酸酶介导心肌肥大通路的影响

目的 :探讨压力超负荷模型下血管紧张素 （ Ang ）受体拮抗剂缬沙坦对钙调神经磷酸酶 （ Ca N）介导心肌肥大通路的影响及 Ang 的致心肌肥厚作用。方法 :腹主动脉缩窄法建立大鼠压力超负荷模型 ,放射免疫法检测血浆、心肌 Ang 浓度 ,Western Blot检测心肌 Ca N,活化 T细胞核因子 （ NFAT3 ）蛋白表达 ,发色底物法检测 Ca N比活性 ,并测定左室重量指数。结果 :缬沙坦组血浆 Ang 浓度高于对照组 （ P<0 .0 5 ） ,心肌 Ang 浓度则相反 （ P<0 .0 5 ） ,缬沙坦组 Ca N表达及活性低于对照组 （ P<0 .0 1） ,NFAT3 表达低于对照组 （ P<0 .0 5 ） ,两组各项指标与假手术组相比均差异显著。结论 :Ang 参与激活压力负荷下钙调神经磷酸酶通路 ,缬沙坦间接干预钙调神经磷酸酶介导通路并抑制心肌肥厚的形成     

钙调神经磷酸酶信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制

目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制.方法选择慢性风湿性二尖瓣病变接受二尖瓣置换术的充血性心力衰竭患者39例,分为心功能Ⅱ级组12例,心功能Ⅲ级组15例,心功能Ⅳ级组12例;正常对照组38例(其中8例来自意外伤亡的器官捐献者,30例为健康体检者).苏木素-依红染色检查心肌组织病理变化,免疫沉淀法测心肌组织CaN、活化T细胞核因子(NFAT3)、锌指转录因子(GATA4)磷酸化及蛋白表达以及α-骨骼肌蛋白(α-skeletal-actin)表达,RT-PCR检测肌球蛋白重链信使核糖核酸(β-MHC mRNA)表达.结果充血性心力衰竭患者心肌呈典型的重塑心肌的病理改变.充血性心力衰竭患者心肌组织CaN磷酸化、GATA4磷酸化、α-skeletal-actin蛋白表达及β-MHC mRNA表达明显高于正常对照组,随心功能恶化,其表达逐渐增加(P＜0.05或0.01);NFAT3磷酸化随心功能恶化而减弱(P＜0.05或0.01).结论CaN信号通路在充血性心力衰竭患者心肌重塑机制中可能起着重要的作用.     

钙调神经磷酸酶与心肌肥厚的研究现状

心肌肥厚是临床上高血压、心肌梗死等心血管疾病共有的病理过程。初期有一定的代偿作用,晚期可以导致心律失常、猝死、心力衰竭。研究表明〔1〕:心肌肥厚的启动和发展与多条细胞信息通道有关,如钙调神经磷酸酶系统(CaN)、蛋白激酶C(PKC)系统、Wnt信号通路、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)系统、mir-RNA133和磷脂酰肌醇3(PI3K)介导的信号系统等。