应用PCR－SSCP银染技术检测胆道癌p53基因点突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测胆道癌ｐ５３基因点突变温增庆，钱光相，陈汉，吴孟超多聚酶链反应－单链构象多态性（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍＰＣＲ－ＳＳＣＰ）...     

不同肺腺癌细胞系N－ras、p53基因突变核酸测序分析

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）和ｄｓＤＮＡｃｙｃｌｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｓｙｓｔｅｍ技术对体外培养的人肺腺癌细胞系ＬＴＥｐ－ａ＿２和ｈＬＡ中Ｎ－ｒａｓ癌基因及ｐ５３抑癌基因外显子５、７进行核酸序列测定分析。结果表明Ｎ－ｒａｓ突变热点第１２、１３、６１密码子未见异常。ｐ５３抑癌基因第１５４密码子均发现ＧＧＣ→ＧＴＣ突变（Ｇｌｙ→Ｖａｌ变异）。经光盘检索（美国Ｓｉｌｖｅｒｐｌａｔｔｅｒ公司提供的ＣＯ－ＲＯＭＭＥＤＩＬＩＮＥ）分析了１９８８～１９９３年间的专题文献，尚未见肺癌ｐ５３基因第１５４密码子突变的报道。     

胰腺癌的基因诊断

用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术对２７例胰腺及其周围器官组织细针穿刺标本进行ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变检测。结果１５例胰腺癌中１４例有ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变。阳性率达９３．３％；而１１例慢性胰腺炎、胰腺囊肿、胆管炎、胆囊癌、壶腹癌及胃淋巴瘤均无ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变。本研究结果证实ＰＣＲ－ＲＦＬＰ检测胰腺ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变是诊断胰腺癌的一种快速、准确、敏感、实用的基因诊断方法。     

一氧化氮和内皮素在高血压发病中的作用

高血压发病机理尚未阐明，目前认为高血压是由多种因素致使血压调节功能失调所致。本实验探讨一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）、内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｅ，ＥＴ）在原发性高血压（ｅｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，ＥＨ）发病中作用。材料与方...     

高血压大鼠某些周缘神经节中氧化一氮合酶的分布

高血压大鼠某些周缘神经节中氧化－氮合酶的分布（北京医科大学解剖学教研室，北京１０００８３，于恩华，沈丽，杨嘉，许鹿希）氧化－氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）作为一种特殊的神经活性物质已经为人们接受，氧化－氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓ...     

不同肺腺癌细胞系N—ras,P53基因突变核酸测序分析

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）和ｄｓＤＮＡｃｙｃｌｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｓｙｓｔｅｍ技术对倍外培养的人肺腺癌细胞系ＬＴＥＰ－ａ２和ｈＬ中Ｎ－ｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因外显子５、７进行核酸序列测定分析。结果表明Ｎ－ｒａｓ突变热点第１２、１３、６１密码子未见异常Ｐ５３抑癌基因第１５４密码子均发现ＧＧＣ－ＧＴＣ突变。经光盘检索（美国Ｓｉｌｖｅｒｐｌａｔｔｅｒ公     

基因移植与进行性肌营养不良

进行性肌营养不良（ｐｒｏｇｒｅｓｉｖｅｍｕｓｃｕｌａｒｄｙｓ－ｔｒｏｐｈｙ）是一组原发性肌肉的遗传性病变，临床主要表现为进行性肌力减退和萎缩。根据其临床特点又可分为Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型（ＤＭＤ）及Ｂｅｃｋｅｒ型（ＢＭＤ）两类。ＤＭＤ属性连锁隐性遗传性肌...     

原发性食管腺癌癌基因,抗癌基因的扩增与其蛋白产物的？…

采用免疫组化和原发子杂交技术观察ｐ５３，Ｈ－ｒａｓ，ｃ－ｅｒｂＢ－２，ｃ－ｍｙｃ癌基因和抗癌基因及其蛋白产物在原发性食管腺癌（ＰＥＡ）中的联合表达情况，以探讨ＰＥＡ的发生发展机制，结果表明，ＰＥＡ中的ｐ５３表达较食管鳞癌高，ｃ－ｅｒｂＢ－２变化可能是ＰＥＡ癌变的重要分子学改变；ＰＥＡ与Ｈ－ｒａｓ与ｃ－ｍｙｃ都有基因扩增蛋白产物的过表达，显示两者在ＰＥＡ的癌变过程中有协同作用，ｐ５３，ｃ－ｅｒｂＢ－     

先天性巨结肠RET基因的突变

酪氨酸激酶受体基因（ｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｇｅｎｅ，ＲＥＴ基因）被定位于染色体１０ｑ１１．２上，其突变可导致３种多发性内分泌瘤综合征和先天性巨结肠的发生。为了探讨ＲＥＴ基因突变在先天性巨结肠发病中的作用，采用多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）及单链ＤＮＡ构象多态性分析（ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄＤＮＡｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＳＣＰ）的方法，对３４例散发先天性巨结肠基因组ＤＮＡ进行ＲＥＴ基因第６外显子突变筛查，并对电泳条带变异的ＰＣＲ产物进行了直接核苷酸序列分析。发现１例为ＧＡＣＴＣＡＧＡＣ→ＧＡＡＴＣＡＡＡＣ碱基突变，导致两个氨基酸发生改变。表明ＲＥＴ基因突变与先天性巨结肠发病有关。     

中国人中发现一例Charcot—Marie—Tooth病连接蛋白32基？…

目的 了解中国人进行性腓骨肌萎缩症（Ｃｈａｒｃｏｔ－Ｍａｒｉｅ－Ｔｏｏｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ，ＣＭＴ）连接蛋白３２（ｃｏｎｎｅｘｉｎ３２，Ｃｘ３２）基因外显子２的突变情况。方法 对６例无亲缘关系的，无重复的ＣＭＴ１患者和１０例无亲缘关系的ＣＭＴ２患者进行ＳＳＣＰ分析，对有异常者进行测序，根据突变点序列设计合适的内切酶，对５０名正常对照进行酶切分析。结果 在１例ＣＭＴ１患者发生了Ｇｌｙ２１Ａｓｐ（６２     

高血压大鼠骶髓内含氧化－氮合酶神经元的研究

高血压大鼠骶髓内含氧化－氮合酶神经元的研究（北京医科大学解剖学教研室，北京１０００８３，于恩华，沈丽，杨磊，许鹿希）近期研究证实，在某些病理条件下，氧化一氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）阳性神经元会有变化。本研究用ＮＤＰ染色法...     

文摘

文摘０３８卵巢癌中基因组不稳定性与ｐ５３移码突变的关系［英］／ＡｎｉｌＫＳ…∥ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．－１９９７，５７（６）．－１０４７～１０４９本文研究证明卵巢癌中ｐ５３移码突变是由普遍的基因组不稳定性造成的，而非其原因，提示新的ＤＮＡ错配修复基因在此...     

应用ED－PCR技术快速检测耐甲氧西林葡萄球菌

应用ＥＤ－ＰＣＲ（Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ－ｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术从临床分离的７６株葡萄球菌中鉴定出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）９株，耐甲氧西林血浆凝固酶阴性的葡萄球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｏａｇｅｌａｓｅ－ｎｅｇａｔｉｖｅｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ，ＭＲ－ＣＮＳ）１１株。此结果与药物敏感性检测结果相符。ＥＤ－ＰＣＲ法具有简便、特异、省时，耗资少等优点，宜在临床检验室推广应用。     

自发性脑卒中诱导原癌基因c－fos在大鼠脑内的表达

用免疫组织化学（ＡＢＣ）方法，对易卒中型肾血管性高血压大鼠高血压晚期自发形成脑卒中时以及高血压早期和中期脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白（ＦＯＳ）的表达进行了观察．在高血压晚期，假手术组不出现脑卒中，但个别大鼠的扣带皮质和梨状皮质出现微弱的ＦＯＳ表达；手术组都出现脑卒中，其中３例脑内未见ＦＯＳ表达，４例则于大脑皮质、海马、黑质和下丘脑等处出现程度不等的ＦＯＳ表达．高血压早期，手术组和假手术组的下丘脑、隔核、中脑中央灰质和丘脑室旁核出现分布状态和强弱都相似的ＦＯＳ表达．高血压中期，手术组和假手术组脑内未见ＦＯＳ表达．本研究结果提示：（１）高血压晚期，自发性脑卒中能诱导ｃ－ｆｏｓ在脑内的广泛表达，脑内不同部位ＦＯＳ表达的机制和功能意义不同，本文对其进行了讨论；（２）腹部手术能诱导下丘脑等与内脏功能调节有关的功能区ＦＯＳ的表达；（３）高血压早期和中期，通过ｃ－ｆｏｓ表达的方法未能发现高血压对大鼠脑功能活动的影响。     

脑膜瘤细胞和分子遗传学研究进展

脑膜瘤是中枢神经系统常见肿瘤，细胞遗传学研究已证实２２号染色体丢失为脑膜瘤克隆演化过程中最恒定的染色体异常，其它染色体丢失或重排的核型演化，可能与临床浸润过程有关。分子遗传学研究主要集中于２２号染色体长臂，推测２２ｑ１１－ｑ１２和ｑ１２．３－ｑｔｅｒ区域存在肿瘤抑制基因，其丢失或突变可能与脑膜瘤病因学相关。同时，癌基因ｃ－ｓｉｓ、ｃ－ｍｙｃ的过度表达可能参与诱发脑膜瘤。     

骨肉瘤的分子遗传学研究进展

近年来骨肉瘤的分子遗传学研究有了显著的进展。除了对以往的抑癌基因ｐ５３，Ｒｂ进行了更深入的研究外，对其它基因在骨肉瘤中的作用也进行了广泛的研究。这包括ｐ１６抑癌基因的点突变，Ｃ－ｍｙｃ，ＭＤＭ２，ＳＡＳ，ＧＬＩ等癌基因扩增以及ｒａｓ，Ｃ－ｓｉｓ，Ｃ－ｒａｆ－１，Ｃ－ｆｏｓ等癌基因的改变。     

天津地区G6PD缺陷患者常见基因突变分析

目的研究北方地区葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（ｇｌｕｃｏｓｅ－６－ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，Ｇ６ＰＤ）基因突变类型、基因突变与人口变迁。方法采用“错配引物”介导的聚合酶链反应／限制性酶切分析法和双脱氧核苷酸指纹印迹检测法，对天津地区２２例Ｇ６ＰＤ缺陷患者进行３种中国南方人群常见的Ｇ６ＰＤ基因突变的分析。结果８例患者（８／２２，３６．４％）有Ｒ４５９Ｌ（１３７６Ｇ→Ｔ）突变；７例患者（７／２２，３１．８％）有Ｒ４６３Ｈ（１３８８Ｇ→Ａ）突变；７例（７／２２）无１３７６和１３８８位点突变病例中，有３例做了Ｈ３２Ｒ（９５Ａ→Ｇ）突变分析，提示１例有该位点突变。结论北方地区也存在中国南方人群常见的３种Ｇ６ＰＤ基因突变，大多数中国北方Ｇ６ＰＤ缺陷患者是由于中国南方移民迁移造成的。     

人重组粒细胞集落刺激因子突变体的构建,表达和其 …

目的 为提高人重组炷细胞集落刺激因子（ｈｕｍａｎ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔ ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ,ｒｈＧ－ＧＳＦ）的稳定性和活性,对ｒｈＧ－ＧＳＦ进行改造和体内、外活性研究。方法 利用定向点突变技术,将人重组粒细胞集落刺激因子第１７位游离的半胱氨酸编码序列突变为丙氨酸序列,ＤＮＡ序列分析证明后,在大肠杆菌中表达突变蛋白。利用Ｇ－ＣＳＦ依赖细胞株ＮＦＳ     

自发性脑卒中诱导原癌基因c－fos在大鼠脑内的表达

用免疫组织化学（ＡＢＣ）方法，对易卒中型肾血管性高血压大鼠高血压晚期自发形成脑卒中时以及高血压早期和中期脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白（ＦＯＳ）的表达进行了观察．在高血压晚期，假手术组不出现脑卒中，但个别大鼠的扣带皮质和梨状皮质出现微弱的ＦＯＳ表达；手术组都出现脑卒中，其中３例脑内未见ＦＯＳ表达，４例则于大脑皮质、海马、黑质和下丘脑等处出现程度不等的ＦＯＳ表达．高血压早期，手术组和假手术组的下丘脑、隔核、中脑中央灰质和丘脑室旁核出现分布状态和强弱都相似的ＦＯＳ表达．高血压中期，手术组和假手术组脑内未见ＦＯＳ表达．本研究结果提示：（１）高血压晚期，自发性脑卒中能诱导ｃ－ｆｏｓ在脑内的广泛表达，脑内不同部位ＦＯＳ表达的机制和功能意义不同，本文对其进行了讨论；（２）腹部手术能诱导下丘脑等与内脏功能调节有关的功能区ＦＯＳ的表达；（３）高血压早期和中期，通过ｃ－ｆｏｓ表达的方法未能发现高血压对大鼠脑功能活动的影响。     

与线粒体基因组点突变有关的双侧感音神经性耳聋

与线粒体基因组点突变有关的双侧感音神经性耳聋Ｏｓｈｉｍａ－Ｔ，ｅｔａｌ．Ｌａｒｙｎｇｏｓｃｏｐｅ．１９９６；１０６（１ｐｔｌ）：４３～４８与感音神经性耳聋（ＳＮＨＬ）有关的线粒体ＤＷＡ〔ｍｔＤＮＡ）突变在ＭＥＬＡＳ（线粒体肌病，脑病，扎成血症和中风样...