脂蛋白和C反应蛋白对单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及其受体趋化因子受体2（CCR-2）经动脉粥样硬化相关因素刺激后表达量的变化情况。方法密度梯度离心法从健康成人外周血中分离获得单个核细胞，体外培养48h。给予氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）、C反应蛋白（CRP）及高密度脂蛋白（HDL）进行干预。干预后用实时荧光定量RT—PCR技术检测单核细胞MCP-1 mRNA和CCR2 mRNA的含量，ELISA法检测MCP-1蛋白含量。结果ox—LDL＋CRP组、ox—LDL、CRP处理组MCP-1和CCR2 mRNA表达水平和MCP—1蛋白含量明显高于对照组（P〈0．05）。而经HDL处理的单核细胞表达MCP-1和CCR2 mRNA水平下调，MCP-1蛋白含量低于对照组（P〈0．05）。结论在体外培养的条件下，CRP和ox-LDL可以促进MCP-1和CCR2 mRNA表达，继而导致MCP-1含量增加，增强炎症反应的范围和强度。HDL可以有效的抑制MCP-1的表达。     

MMP-9促进间充质干细胞穿越血脑屏障的作用研究

目的 探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）开放血脑屏障（BBB）,促进大鼠间充质干细胞（rMSCs）穿越BBB的作用.方法 构建体外BBB模型,运用Transwell细胞迁移率实验明确MMP-9对体外BBB模型的穿透效果.体内实验：4周龄SD大鼠随机分为假手术组、缺氧缺血性脑损伤（HIBD）组、MMP-9处理组及MMP-9抑制剂（TIMP-1）干预组;HE染色观察各实验组不同时间点（0.5、1、3、7、14d）的大脑皮质病理变化和检测其脑含水量,EB值法检测BBB通透性;同时采用Western Blot测定大鼠皮质中MMP-9蛋白表达和免疫组织化学法测定大脑皮质内5-溴-2-脱氧嘧啶（Brdu）标记rMSCs阳性细胞数量.结果 Transwell细胞迁移率实验显示,缺氧状态下各组穿过小室的rMSCs数量均明显高于常氧,差异有统计学意义（P＜0.01）;MMP-9处理组穿过小室的rMSCs数量明显高于阴性对照组和TIMP-1干预组,差异有统计学意义（P＜0.01）.体内实验结果表明：与HIBD组相比,MMP-9处理组脑含水量、BBB通透性增加程度均有所提高;TIMP-1干预组的相应指标均有所降低.大鼠皮质中MMP-9蛋白表达水平具有时间依赖性,MMP-9处理组1～3 d时含量达到最高,明显高于HIBD组和TIMP-1干预组,差异有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）,之后表达开始回落,但仍有稳定表达.MMP-9处理组穿越BBB的Brdu阳性细胞数比HIBD组多,差异有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）.结论 大鼠缺氧缺血后MMP-9表达升高,可介导开放BBB,促进rMSCs穿越BBB.     

靶向趋化因子受体CCR7的反义肽核酸对树突状细胞凋亡的影响

目的研究靶向趋化因子受体CCR7的反义肽核酸（PNA）对树突状细胞（DC）CCR7蛋白表达及凋亡的影响，并探讨其凋亡机制。方法体外培养大鼠骨髓来源的Dc，脂多糖（LPS）诱导成熟。设计靶向CCR7mRNA翻译起始区的反义PNA，以随机PNA和空白组为对照处理体外培养7d的未成熟Dc，脂多糖诱导48h后收集成熟Dc，免疫细胞化学染色法检测CCR7蛋白表达，流式细胞术检测细胞凋亡率，Westernblot检测磷酸化Akt和Akt蛋白表达。应用渥曼青霉素（wortmannin）抑制磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol3-kinase，P13K）／Akt信号通路进一步观察磷酸化Akt蛋白表达和细胞凋亡率的变化。结果反义PNA组DCCCR7蛋白表达明显低于随机PNA组和空白组，而细胞凋亡率却明显增高，差异有统计学意义（P〈0．05），Westernblot检测显示反义PNA组Akt蛋白磷酸化水平明显低于随机PNA组和空白组，差异有统计学意义（P〈0．05）。DC经P13K抑制剂预处理后，CCR7介导的Akt蛋白磷酸化及抗凋亡作用被阻断。结论CCR7反义PNA能够有效抑制体外培养的大鼠DC趋化因子受体CCR7的表达并导致其发生凋亡，其机制可能是阻断了CCR7介导P13K／Akt信号转导通路的活化。     

单核细胞趋化蛋白1与神经干细胞的体外迁移

背景：研究表明趋化因子基质细胞衍生因子1及血管内皮生长因子参与神经干细胞的迁移。 目的：观察趋化因子单核细胞趋化蛋白1及其受体CCR2对神经干细胞体外迁移的作用。 方法：分离培养胎鼠海马组织神经干细胞,体外传代扩增及鉴定;通过细胞免疫荧光及RT-PCR检测其受体CCR2表达情况;通过琼脂糖下细胞迁移实验观察50,100,200,300,500 μg/L 单核细胞趋化蛋白1对神经干细胞的体外趋化作用。 结果与结论：细胞免疫荧光及RT-PCR检测证实胎鼠海马来源神经干细胞表达趋化因子受体CCR2;琼脂糖下细胞迁移实验显示,体外条件下单核细胞趋化蛋白1可趋化神经干细胞迁移,且趋化迁移作用随质量浓度增加而增强,抗CCR2多克隆抗体可对抗其趋化迁移作用。     

低氧诱导肌成纤维细胞生成并通过ERK1/2途径促进Ⅰ型胶原的表达

目的：探讨低氧能否激活成纤维细胞转化为肌成纤维细胞,以及低氧环境对肾皮质肌成纤维细胞表达Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）的影响及其可能的信号通路。方法：（1）采用正常大鼠肾成纤维细胞系（NRK-49F），应用Western blotting方法检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达;比较低氧和正常氧条件下α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白水平。（2）原代培养正常大鼠肾皮质肌成纤维细胞，Western blotting方法检测低氧和正常氧条件下，HIF-1α和Ⅰ型胶原蛋白水平以及ERK1/2的活化及其特异阻断剂 PD98059的阻断效应；RT-PCR方法检测Ⅰ型胶原mRNA表达水平；细胞免疫化学法检测HIF-1α胞内表达部位的变化；明胶酶谱法检测细胞上清中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP -9）的活性。结果：（1）低氧刺激6 h，NRK-49F细胞和肌成纤维细胞胞内和核内均有HIF-1α蛋白表达，核内更明显。（2）低氧培养12 h,NRK-49F细胞表达α-SMA蛋白明显增高，是正常氧组的187%±32%（P<0.05），验证了低氧可引起成纤维细胞表型转化。（3）低氧刺激原代培养的正常大鼠肾皮质肌成纤维细胞6 h、12 h上清中Ⅰ型胶原蛋白水平增加，分别为正常氧组的171%±27%（P<0.05）和256%±61% （P<0.05）；低氧刺激4 h、6 h，Ⅰ型胶原mRNA表达增加，为正常氧组的189%±28%（P<0.05）和221%±44%（P<0.05）。（4）低氧刺激肌成纤维细胞6 h、12 h、24 h，培养上清液中MMP-9、MMP-2活性无明显变化。（5）低氧刺激肌成纤维细胞15 min 即可使ERK1/2活化，阻断实验显示，PD98059可以使低氧12 h引起Ⅰ型胶原增加（低氧刺激组为正常氧对照组的273%±51%，P<0.05)显著减少（PD98059 +低氧组为正常氧组的108%±19%，P>0.05)。结论： 低氧促肾纤维化可能与其诱导肾成纤维细胞转化为肌成纤维细胞并经ERK1/2途径增加Ⅰ型胶原蛋白的表达有关。     

核仁素在甲状腺乳头状癌中表达的临床意义

目的 探讨核仁素（NCL）在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学SP染色法检测60例正常甲状腺组织与甲状腺乳头状癌中NCL、趋化因子受体-7（CCR7）与基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达,分析NCL、CCR7与MMP-9的表达与性别、年龄、肿瘤大小与
有无转移的关系以及核仁素与CCR7、MMP-9表达的相关性。结果 NCL在正常甲状腺及甲状腺乳头状癌中的总阳性率分别为0、 100%。NCL在伴随转移组癌组织中表达于细胞核、细胞质与细胞膜;NCL在无转移组癌组织中仅表达于细胞核,差异有统计学意义（P<0.05）。不同年龄、性别、
肿瘤大小的NCL表达率间的差异无统计学意义(P>0.05)。核仁素细胞核外阳性表达与CCR7与MMP-9的阳性表达呈正相关（P<0.01）。结论 NCL在甲状腺乳头状癌中表达,表达部位在转移与非转移组明显不同,且与CCR7、MMP-9表达有密切关系。核仁素可作为区别癌转移与非转移的标志。     

前列腺间质细胞中雌二醇对MMP-2，MMP-9及其组织抑制因子表达的影响

目的： 研究雌二醇(E2)对前列腺间质细胞中基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9）及其组织抑制因子1(TIMP-1)、TIMP-2和雌激素受体α、β（ERα、ERβ）的影响。方法： 实时定量PCR法检测E2在前列腺间质细胞中对MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA水平的影响；半定量RT-PCR法检测E2对ERα、ERβ mRNA水平的影响。酶谱电泳法检测MMP-2、MMP-9的活性。Western blotting检测E2在前列腺间质细胞中对ERα蛋白水平的影响。结果： 前列腺间质细胞中有MMP-2和ERα mRNA的表达，未检测到MMP-9 mRNA；培养液中检测到MMP-2前体（pro-MMP-2），未检测到其活性形式，也未检测到MMP-9前体及其活性形式。用E2处理间质细胞后MMP-2 mRNA水平降低，pro-MMP-2蛋白量减少，雌激素受体抑制剂ICI 182.780可抑制此作用。E2对TIMP-1,2 mRNA表达无显著影响。E2能够增加前列腺间质细胞中ERα mRNA及其蛋白表达的水平。结论： E2能够通过ERα下调前列腺间质细胞中MMP-2的表达。     

ER-α36过表达促进人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移能力

 目的 探讨雌激素受体新亚型ER-α36过表达对人雌激素受体阳性乳腺癌细胞侵袭转移潜力的影响及其机制。方法 以野生型乳腺癌细胞系MCF-7/W、转染pcDNA3.1空载体的细胞系MCF-7/pcDNA3.1和转染重组载体pcDNA3.1/ER-α36的细胞系MCF-7/ER-α36为研究对象,分别用细胞粘附实验观测肿瘤细胞与细胞外基质的粘附能力、Transwell侵袭小室实验检测细胞侵袭转移能力,用Western blot法检测NF-κB P65、MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达。结果 与MCF-7/W组细胞相比,MCF-7/ ER-α36细胞的2h细胞粘附率和24h穿膜细胞数显著增加(P<0.05)。NF-κB P65、MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白的相对表达量及MMP-2/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1显著增高（P<0.05）。结论 ER-α36过表达能促进ER-α66阳性乳腺癌细胞的体外粘附能力和侵袭转移潜力,其机制可能与通过NF-κ B途径提高MMP-2、MMP-9的表达水平及打破二者与TIMP-1之间的平衡有关。     

人巨细胞病毒感染对体外培养肺成纤维细胞中明胶酶的影响

目的探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染对体外培养肺成纤维细胞（HEL）中明胶酶活性的影响。方法体外培养HEL细胞感染HCMV，分为低感染复数（MOI）组及高MOI组，每组重复6例。明胶酶谱法检测HEL细胞中MMP-2及MMP-9的明胶酶活性，用半定量RT-PCR检测各组HEL细胞中MMP-9及TIMP-1的转录水平。结果在低MOI组及高MOI组HEL细胞中MMP-9及MMP-2活性均增强（P〈0．05），高MOI组MMP-9及MMP-2活性较低MOI组显著增加（P〈0．05）。进一步检查MMP-9及TIMP-1的mRNA水平发现，正常对照组HEL细胞中MMP-9及TIMP-1的mRNA处于一个较低的水平，HCMV感染使HEL细胞中MMP-9及TIMP-1的mRNA水平均明显升高（P〈0．05），低MOI组和高MOI组差异无统计学意义（P〉0．05）。在低MOI组及高MOI组，HEL细胞MMP-9／TIMP-1的比值和正常对照组相比明显升高（P〈0．05），表明MMP-9升高更为显著。高MOI组和低MOI组中MMP-9／TIMP-1的比值差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HCMV感染可以造成MMP-9和TIMP-1转录和MMP-9／TIMP-1的失衡，同时造成MMP-9及MMP-2明胶酶活性增强，导致肺泡结构的破坏和肺纤维化的发生，这在CMV肺炎的发病机制中起着重要的作用。     

脑源性神经营养因子对细胞外蛋白水解酶激活作用的研究

 目的：研究脑源性神经营养因子 (BDNF) 对细胞外蛋白水解酶表达和激活作用的影响。 方法：体外分离并培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC），RT-PCR法检测HUVEC基质金属蛋白酶MMP-2 、MMP-9 和基质金属蛋白酶组织抑制剂TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达，明胶酶谱检测MMP-2和MMP-9蛋白酶活性，纤维蛋白酶谱检测尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）蛋白酶活性，Western blotting检测uPA、纤溶酶原激活剂抑制剂（PAI）、TIMP-1及TIMP-2表达。 结果：在对HUVEC增殖无明显促进作用的浓度范围内，BDNF可促进无血清培养的HUVEC MMP-2和MMP-9 mRNA表达,并可促进MMP-2和MMP-9酶原的激活产生活性明胶酶，BDNF对TIMP-1和TIMP-2的表达无明显影响。BDNF以浓度和时间依赖性方式上调HUVEC uPA和PAI-1的表达，并可促进uPA的活性。 结论：BDNF可激活MMPs和uPA/PAI相关的蛋白级联。     

Hypoxia suppresses the production of MMP-9 by human monocyte-derived dendritic cells and requires activation of adenosine receptor A2b via cAMP/PKA signaling pathway

The migration of dendritic cells (DCs) from the site of antigen-encounter to regional lymphoid organs is crucial for DCs to function as potent antigen-presenting cells. Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) is critically for DCs migration across extracellular matrix (ECM). We verified in previous studies that hypoxia diminished the production of MMP-9 in human monocyte-derived DCs via an unknown mechanism. In this study, we found, for the first time to our knowledge, that hypoxia altered the expression of adenosine receptors on matured DCs (mDCs) toward the predominant expression of adenosine receptor A(2b). MRS1754 (an A(2b)-receptor specific antagonist) was able to counteract the inhibition of hypoxia on MMP-9 by mDCs. We also found that forskolin (a direct adenylate cyclase activator) can mimic the action of hypoxia on the production of MMP-9 by DCs, whereas the adenylate cyclase inhibitor SQ22536 and the PKA inhibitor H89 can abrogate the inhibition of MMP-9 produce by mDCs under hypoxia. The results herein provide initial evidence that the inhibitory effect of hypoxia on MMP-9 by mDCs requires the activation of A(2b) in a cAMP/PKA-dependent pathway. These data offer new insights into our understanding of the molecular mechanisms underlying the migratory function of DCs in local-tissue hypoxic microenvironments.     

Hypoxia suppresses the production of matrix metalloproteinases and the migration of human monocyte-derived dendritic cells

As most solid tumors are hypoxic, dendritic cells (DC) in solid tumors are also exposed to hypoxia. While many adaptation responses of tumor cells to hypoxia are known, it is yet to be determined how hypoxia affects the functions of DC. To explore the effects of hypoxia on the functions of DC, we compared the expression of surface markers, cytokines, chemokine receptors and matrix metalloproteinases (MMP) of human monocyte-derived DC (hmDC) differentiated under hypoxia to those differentiated under normoxia. Both groups of hmDC expressed similar levels of surface markers and cytokines. However, expression of MMP-9 and membrane type-1-MMP, as well as migrating activity, was significantly suppressed in hmDC differentiated under hypoxia compared with their normoxia counterparts. We also demonstrated that trichostatin A restored the production of MMP-9 in hmDC, under hypoxia. Collectively, our findings show that a hypoxic microenvironment suppresses the production of MMP in hmDC, most probably through the deacetylation of promoter regions of MMP, thus suppressing the migrating activity of hmDC. Our results suggest that the hypoxic microenvironment in solid tumor tissues may suppress the function of DC.     

缺氧对肺动脉成纤维细胞MMP-2、TIMP-1表达的影响

目的：探讨缺氧对肺动脉成纤维细胞（Fpa）分泌基质金属蛋白酶（MMPs）、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）的影响。 方法： 采用酶谱法测定Fpa培养基中MMP-2的酶活性，免疫印迹法检测培养基中MMP-2、TIMP-1 的蛋白水平，免疫组化法测定细胞原位的蛋白表达， RT-PCR法检测mRNA表达量。 结果： 缺氧后Fpa分泌的MMP-2酶活性、细胞内外蛋白表达量、mRNA表达量均下降；而TIMP-1的表达则呈相反变化。 结论： 缺氧可使肺动脉成纤维细胞MMP-2/TIMP-1的表达失衡，可能参与缺氧性肺血管重建。     

低氧条件下载二甲基草酰甘氨酸电纺纤维促血管化及成骨性能研究

目的 通过聚L-丙交酯-己内酯电纺纤维（PLCL）负载二甲基草酰甘氨酸（DMOG）,研究其在低氧和常氧成骨诱导过程中对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）的血管化和体外成骨分化的作用。方法 本研究经静电纺丝技术制备PLCL电纺纤维（P）和负载DMOG的PLCL电纺纤维（PD）,通过扫描电镜观察电纺纤维形貌;通过细胞骨架染色观察BMSC在不同电纺纤维上的黏附和生长状态;通过碱性磷酸酶和茜素红染色检测在不同电纺纤维上的BMSC经常氧和低氧成骨诱导7 d后的碱性磷酸酶表达和14 d时的钙沉积情况;通过RT-PCR检测在不同电纺纤维上的BMSC经常氧和低氧成骨诱导7 d和14 d时的成骨相关基因（ALP、Runx2、Col1和OCN）和促血管化相关基因（VEGF）的表达情况。结果 扫描电镜结果表明,P和PD具有纤维状形态并呈现为多孔结构。细胞实验表明,BMSC可在P和PD表面黏附生长,且低氧条件下在PD上表现出更好的形态。与常氧条件相比,在低氧条件下,P和PD在7 d时的碱性磷酸酶表达减少。但低氧条件成骨诱导14 d时PD仍能促进钙的沉积。在常氧条件下,电纺纤维P可上调ALP、Runx2、Col1、OCN和VEGF的表达,但低氧条件下其对上述基因的上调作用不明显。而电纺纤维PD在常氧和低氧条件下均可促进ALP、Runx2、Col1、OCN和VEGF的表达。结论 本研究制备的负载DMOG的PLCL电纺纤维在低氧条件下具有良好的体外促血管化和促成骨分化性能,预期可作为一种较好的成骨修复材料。     

缺氧、复氧条件下低氧反应元件（HRE）对心肌细胞转染hVEGF165基因表达的调控作用

目的：探讨缺氧、复氧条件下，低氧反应元件(HRE)作为氧条件基因表达控制开关，对心肌细胞转染rAAV-HRE9-hVEGF165基因表达的调控作用。方法:分离新生SD大鼠心肌细胞,采用无血清培养,将在HEK293T细胞进行包装后获得的腺相关病毒转染培养的心肌细胞。实验共分为8组：Ⅰ组（空白对照组）：常氧培养 24 h（氧浓度21％）；Ⅱ组（缺氧对照组）：常氧培养16 h，缺氧8 h（氧浓度1％）；Ⅲ组（转基因对照组）：常氧培养 24 h；Ⅳ组（转基因缺氧1组）：转基因后缺氧8 h；Ⅴ组（复氧1组）：常氧培养16 h，缺氧8 h、复氧4 h；Ⅵ组（复氧2组）：常氧培养16 h，缺氧8 h、复氧8 h；Ⅶ组（复氧3组）：常氧培养16 h，缺氧8 h、复氧12 h；Ⅷ组（转基因缺氧2组）：转基因后常氧培养16 h，缺氧20 h。ELISA法测定培养液VEGF蛋白含量；细胞免疫荧光染色及RT-PCR分别检测细胞内VEGF蛋白及VEGF165 mRNA的表达。结果:95%的培养心肌细胞可见自律搏动，cTn-I染色阳性率为86%；病毒转染率约为87%。Ⅳ、Ⅴ、Ⅷ组培养液中VEGF蛋白含量显著高于其它各组（P<0.01），细胞免疫荧光VEGF蛋白染色呈阳性；RT-PCR测定显示，Ⅳ、Ⅴ及Ⅷ组可见484 bp目的条带。结论：rAAV-HRE9-hVEGF165可成功地转染原代培养心肌细胞，在缺氧环境下，受HRE的调控，VEGF165 mRNA及VEGF165蛋白可有效表达，而在常氧状态下，目的基因的表达及蛋白合成即行中止。     

罗勒多糖抗卵巢癌侵袭转移的体外实验研究

目的： 探讨罗勒多糖抗卵巢癌侵袭转移的作用机制及其肿瘤乏氧微环境对其效应的影响,为临床应用研究提供依据。方法：罗勒多糖分别在常氧（21%O2、5%CO2）和乏氧（1%O2、5%CO2和94%N2）环境中作用于人卵巢癌SKOV3细胞,形态学观察不同氧环境下各组细胞形态差异;Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭运动能力;明胶酶谱法分析各组细胞分泌的基质金属蛋白酶-2（MMP-2）活性差异;RT-PCR技术检测骨桥蛋白（OPN）mRNA表达水平;免疫细胞化学法观察各组细胞胞内OPN表达情况。结果：与对照组相比,罗勒多糖在常氧和乏氧环境下都能够降低SKOV3细胞的侵袭运动能力,抑制细胞中MMP-2的分泌,抑制人卵巢癌SKOV3细胞中OPN的表达（转录水平、蛋白水平）,且乏氧环境下罗勒多糖的上述作用更为显著。结论：低氧显著增强人卵巢癌SKOV3细胞的迁移能力,罗勒多糖可能通过下调骨桥蛋白表达及基质金属蛋白酶-2的分泌,抑制其侵袭运动能力。     

缺氧、高氧对肝星形细胞基质金属蛋白酶Ⅱ表达及活性的影响

目的　研究缺氧、高氧对肝星形细胞基质金属蛋白酶Ⅱ (MMP 2 )表达及其活性影响。方法　分离大鼠肝星形细胞 ,在缺氧或高氧条件下培养 ,以免疫细胞化学标记链霉素卵白素生物素(LSAB)法及酶联免疫吸附 (ELISA)法分别检测细胞内MMP 2、基质金属蛋白酶组织抑制因子Ⅱ(TIMP 2 )、膜型基质金属蛋白酶Ⅰ (MT1 MMP)的表达 ,和培养上清中MMP 2、TIMP 2的相对含量 ,并以酶谱法测培养上清MMP 2活力。结果　 (1)缺氧培养 12h ,MMP 2表达增高 (缺氧组阳性指数 :5 7±2 0 ;对照组 :3 2± 1 0 ,;P <0 0 1) ,TIMP 2表达则降低 (缺氧组阳性指数 :2 5± 0 7;对照组 :3 6±1 0 ;P <0 0 5 ) ;培养上清中MMP 2酶活性明显降低 (缺氧组总吸光度值 :7 334± 1 92 2 ;对照组 :17 2 77± 7 4 2 4 ;P <0 0 1)。缺氧不同时段 (6、12、2 4h)比较 ,变化以 6h段最明显。 (2 )高氧培养 12h ,上清中MMP 2、TIMP 2蛋白相对含量均高于对照组 ,TIMP 2更明显 (高氧组A450 :0 0 5 0± 0 0 14 ;对照组 :0 0 2 2± 0 0 10 ;P <0 0 1) ,酶活性亦高于对照组 (高氧组总吸光度值 :5 2 5 2± 0 771;对照组 :4 30 4± 1 0 83;P <0 0 5 ) ,高氧组MT1 MMP表达增强。结论　肝星形细胞对氧敏感。缺氧使肝星形细胞MMP 2表达增加 ,该影响在     

低氧训练时心肌组织细胞低氧诱导因子1α与凋亡相关蛋白的表达

背景：运动对心肌细胞凋亡的影响有了比较多的研究,但低氧训练对心肌细胞凋亡的研究不多见。低氧诱导因子1α是否控制了Bcl-2家族的表达而影响凋亡发生,尚未明确。 目的：分析低氧训练时心肌组织低氧诱导因子1α蛋白表达情况与凋亡蛋白的相互关系。 方法：将健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组：①对照组常温常氧下喂养,不运动。②低氧组在低氧环境下喂养,不运动。③运动组常温常氧下运动。④低住高练组常氧下居住,低氧、常氧训练交替进行。⑤高住低练组低氧下居住,常氧下训练。⑥高住高练低练组低氧下居住,低氧、常氧训练交替进行。运动组大鼠负荷跑台训练8周,训练每周6 d,运动速度和运动时间连续递增,运动速度从开始的10 m/min、持续时间为15 min递增至第8周的25 m/min、持续时间为50 min。低氧程度由开始从海拔1 500 m增加到第8周达到海拔3 600 m。训练结束后,运用苏木精-伊红染色、TUNEL法和蛋白免疫组织化学方法检测大鼠心肌组织细胞低氧诱导因子1α、Bcl-2、Bax的表达变化。 结果与结论：①常氧时低氧诱导因子1α几乎不表达,低氧可增加低氧诱导因子1α的蛋白表达,低氧复合运动,表达更多。②低氧组和低氧运动组大鼠心肌组织Bax表达变化不是很明显,但Bcl-2表达就远远低于常氧不运动组。③低氧组、运动组与低氧运动组心肌组织细胞凋亡较明显,但三者相互之间比较差别较小,说明低氧结合运动不会使细胞凋亡更加严重。结果表明各实验组Bcl-2表达显著低于对照组,Bax表达变化不明显。但低氧可增加低氧诱导因子1α的蛋白表达,低氧复合运动,表达更多。说明低氧诱导因子1α有可能调节Bcl-2、Bax的表达,从而控制细胞凋亡的发生与否。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程