JNK信号通路通过介导细胞凋亡对肺纤维化的调控作用

目的观察肺纤维化中肺组织caspase-3和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达的变化,并探讨JNK信号转导通路对肺纤维化的调控作用。方法 72只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(N组)、肺纤维化模型组(M组),肺纤维化+JNK抑制剂干预组(I组),每组24只,分别于第3、7、14、28天处死,每组6只。留取肺组织,对其行苏木素-伊红(HE)染色,观察其病理学改变,碱水解法测定其中羟脯氨酸的含量,免疫组织化学法测肺组织中caspase-3和p-JNK的变化。结果模型组早期肺泡炎症明显,后期肺组织实变,caspase-3和p-JNK蛋白表达含量均显著增加(P<0.05),14d时达峰值。干预组能明显阻断JNK的激活(P<0.05),干预组caspase-3表达较模型组显著减少(P<0.05),14d时减少最明显。结论细胞凋亡是肺纤维化的一个重要病理组织学特点。JNK信号转导通路在肺纤维化中被激活,发挥促细胞凋亡效应。     

白藜芦醇通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路抑制肺纤维化

目的观察白藜芦醇(Res)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其是否通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路起作用。方法 90只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=40)和Res组(n=40),后两组经气管内注入博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型,d 2起Res组大鼠予100 mg.kg-1Res灌胃,其余两组相同条件下给予生理盐水,模型组和Res组分别于d 7、d 14、d 28、d 56随机处死10只大鼠,而对照组于d 56全部处死作为总体对照,取出肺组织行HE染色和Masson染色,用荧光实时定量PCR和Western blot分别检测肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA及蛋白表达,分离血清,并采用酶联免疫吸附法检测血清I型前胶原羧基端前肽(PICP)和Ⅲ型前胶原氨基端前肽(PⅢNP)浓度。结果 Res组大鼠肺泡炎症和肺纤维化程度明显轻于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组肺组织ADAMTS-1 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmR-NA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度增加(P<0.05或0.01);相比于模型组同期,Res组各时间点ADAMTS-1mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmRNA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度则降低(P<0.05或0.01)。结论 Res通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路降解肺组织ColⅠ、ColⅢ发挥抗肺纤维化的作用。     

JNK信号通路参与Aβ毒性对大鼠海马神经元的损伤

目的探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)毒性对大鼠海马神经元的损伤以及JNK信号转导通路在此过程中的作用。方法应用Aβ1-40注射大鼠双侧海马CA1区建立毒性损伤模型,通过HE染色、Nissl染色、TUNEL染色、免疫组化法、透射电镜并结合图像分析技术研究海马的病理学变化以及神经元的存活与凋亡、超微结构及p-JNK阳性细胞率。结果与对照组比较,大鼠注射Aβ后,海马CA1区锥体细胞排列松散,数目减少,神经元固缩、浓染,胶质细胞明显增生,超微结构可见明显凋亡特征,TUNEL阳性细胞数明显增多(P<0.01),p-JNK阳性细胞比例明显升高(P<0.01)。结论 Aβ可明显诱导海马神经元凋亡,JNK信号转导通路参与了Aβ的神经毒性损伤作用。     

胰岛素联合利拉鲁肽对2型糖尿病外周血JNK信号通路的影响

目的 探讨胰岛素联合利拉鲁肽对2型糖尿病(T2DM)外周血c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响,为临床治疗提供参考。方法 选取2020年4月—2022年8月开封市中心医院收治的60例T2DM患者,以随机数字表法分为观察组、对照组,均30例,对照组给予胰岛素,观察组给予胰岛素联合利拉鲁肽,对比治疗前、治疗3个月后两组糖脂代谢[空腹血糖、餐后2 h血糖、高密度脂蛋白(HDL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇(TC)]水平、胰岛素功能[空腹胰岛素(FINS)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]、JNK信号通路相关蛋白表达[转录调控因子(c-Jun)、血红素氧合酶-1(HO-1)]及炎症因子[白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)]水平。结果 治疗3个月后与对照组相比,观察组空腹血糖、餐后2 h血糖、TG、LDL、TC较低,HDL水平较高(P<0.05);治疗3个月后与对照组相比,观察组FINS、HOMA-IR水平较低,HOMA-β水平较高(P<0.05);治疗3个月后观察组...     

肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子-β_1和前胶原基因的表达

急性肺泡炎是肺纤维化病变的基础,在肺泡炎形成过程中涉及炎性细胞、免疫效应细胞和细胞因子.体外试验证明肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）可上调人胚肺成纤维细胞前胶原mRNA的表达,提示急性肺泡炎时这些细胞因子与肺纤维化发生有一定的因果关系.我们用博莱霉素A5诱发大鼠肺纤维化,并制成动物模型,对大鼠肺组织中TGF-β1、前胶原Ⅰ和前胶原Ⅲ的mRNA进行观察,以探讨它们与大鼠肺纤维化的关系.     

Fstl1-TGF-β1-Smad2/3信号通路与肺纤维化的靶向治疗

肺纤维化是以上皮细胞受损、成纤维细胞增殖活化、细胞外基质聚积、肺泡不可逆破坏为特点的肺间质性疾病,其发病机制尚不十分确切,常规药物治疗疗效不显著。研究发现,转化生长因子β(TGF-β1)在肺纤维化发生发展中起到关键作用,而TGF-β1-Smad2/3通路是TGF-β1信号传导的经典通路,Fstl1-TGF-β1-Smad2/3信号通路与肺纤维化密切相关,通过某一靶点阻断其信号通路可以抑制肺纤维化的进程;而Fstl1可以通过调节TGF-β1/Smad2/3信号通路来调控成纤维细胞活化和细胞外基质合成,具有促纤维化作用。通过某一靶点阻断其信号通路可以抑制肺纤维化的进程。Fstl1-TGF-β1-Smad2/3信号的传导与调控是一个涉及多靶点的复杂过程。笔者对肺纤维化中TGF-β信号传导通路及其靶向治疗做一综述,为抗肺纤维化治疗提供参考。     

IL-0抑制转化生长因子β1诱导的大鼠肝星状细胞工型胶原合成作用观察

的探讨IL-10抗纤维化的可能机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞系rHSC-99，分别用不同浓度的IL-10、TGFβ1干预和两者共同干预，用ELISA法检测肝星状细胞（HSC）的Ⅰ型胶原合成的影响。结果TGFp1显著增强HSC的Ⅰ型胶原的合成。IL-10单独干预对HSC的Ⅰ型胶原的合成无明显影响，但IL-10可显著抑制TGFβ1促进HSC的Ⅰ型胶原的合成。结论TGFβ1显著促进HSC的Ⅰ型胶原的合成，IL-10对TGFβ1的促HSC Ⅰ型胶原合成有抑制作用，这可能是IL-10发挥抗肝纤维化作用的途径之一。     

异甘草酸镁对小鼠放射性肺纤维化的改善作用及其机制的初步研究

目的探讨异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG)对小鼠放射性肺纤维化的影响及其机制。方法 50只♀C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control组)、辐照组(RT组)、异甘草酸镁组(MgIG组)、异甘草酸镁治疗组(RT+MgIG组)和地塞米松治疗组(RT+DXM组),每组10只。除Control组和MgIG组外,其余各组小鼠均给予15Gy~(60)Coγ射线全胸单次照射。各组小鼠于辐照前2 h及辐照后每日给药:MgIG组和RT+MgIG组腹腔注射MgIG(100 mg·kg~(-1));Control组和RT组腹腔注射生理盐水(20 m L·kg~(-1));RT+DXM组腹腔注射DXM(0.5 mg·kg~(-1))。辐照后12周取材,行HE染色及Masson染色观察小鼠肺泡炎和肺纤维程度,免疫组化检测肺组织Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达。结果 RT组小鼠肺泡炎和肺纤维化程度及CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达较Control组明显增强(P<0.05),而RT+MgIG组与RT+DXM组肺泡炎、肺纤维化程度及蛋白表达相较于RT组明显降低(P<0.05)。结论异甘草酸镁可有效改善小鼠放射性肺纤维化,其机制可能与调控TGF-β信号通路有关。     

巨噬细胞分泌转化生长因子β对百草枯中毒致肺纤维化的影响

目的 研究巨噬细胞参与百草枯(PQ)致肺纤维化可能的作用机制.方法 用佛波酯(PMA)320 nmol·L-1诱导THP-1细胞24 h获得巨噬细胞.检测PQ 20,40,60,80,100,120,140,160和180μmol·L-1染毒该巨噬细胞48 h,CCK-8法检测细胞存活率.用Transwell技术构建该...     

姜黄素对机械牵张引发的Ⅱ型肺泡上皮细胞ezrin/Akt通路及炎性因子的影响

目的探讨姜黄素对机械牵张引发的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AT-Ⅱ细胞)ezrin/Akt通路及炎性因子的影响及其作用机制。方法原代培养大鼠AT-Ⅱ细胞,采用Western blot及ELISA方法检测AT-Ⅱ细胞在20%机械牵张力刺激4、8、16、24、48 h时p-ezrin、ezrin、p-Akt和Akt蛋白表达及炎性因子TNF-α、IL-1β及IL-6分泌的动态变化;并且进一步分析不同浓度姜黄素(10、20、30μmol/L)对ezrin/Akt通路蛋白及炎性因子水平的影响。结果机械牵张干预后,AT-Ⅱ细胞p-ezrin、p-Akt蛋白表达水平明显增高,且在4～16 h范围内表达水平持续增高,而ezrin、Akt蛋白表达无明显变化;AT-Ⅱ细胞TNF-α、IL-1β及IL-6分泌量在机械牵张刺激8 h内无明显变化,之后随刺激时间延长明显升高。在机械牵张刺激下,不同剂量姜黄素能够不同程度抑制p-ezrin、p-Akt蛋白表达及减少TNF-α、IL-1β及IL-6分泌。结论姜黄素对机械所致肺损伤有保护作用,其作用可能与抑制ezrin/Akt信号传导、调节炎性因子释放有关。     

肺成纤维细胞在肺纤维化进程中的作用

肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是一种严重的肺间质疾病,主要病理特点是早期的弥漫性肺泡炎,后期大量成纤维细胞病理性增殖转型及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)进行性异常积聚并取代正常的肺组织结构。其发病原因很多,如病原微生物、粉尘、药物、化学制剂等多种因素均可诱导产生肺纤维化,但发病机制尚不清楚。在其发生过程中,肺成纤维细胞(fibroblast,FB)起着重要的促进作用,主要通过自身的异常增殖与转型,大量分泌细胞外基质直接触发PF和作用于上皮细胞及一些炎症细胞间接参与PF进程。该文通过整理成纤维细胞在PF中的作用,进一步了解肺纤维化的发病机制。     

大鼠肺纤维化过程中转化生长因子-β1在不同肺组织中的表达变化及意义

目的 观察转化生长因子-β(TGF-β<,1>)在博莱霉素(BLM)所诱导的肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中的动态变化及其意义.方法 BLM制成大鼠肺间质纤维化模型,观察组13只大鼠气管注入BLM 0.2～0.3ml,对照组5只大鼠气管注入等量生理盐水,并将各组动物处死后提取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病理定量分析,检测BALF中TGF-<,1>的水平变化.结果 观察组TGF-β<,1>水平高于对照组,第7、14天比较差异有统计学意义(P<0.01).TGF-β<,1>在观察组成纤维细胞(Fb)和肺泡巨噬细胞(AM)中表达于实验第7天显著增强,于实验第14天达到高峰,至第28天有所降低,但明显高于对照组(P<0.05或P<0.01).结论 TGF-β<,1>在肺纤维化中及其病理发生发展过程中均发挥重要作用.     

罗格列酮对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β、Ⅳ型胶原的影响

目的 探讨罗格列酮对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠肾组织转化生长因子[3(TGF-β)及Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)表达的影响.方法 40只大鼠分为正常对照组(C组)、DM组和糖尿病罗格列酮治疗组(DR组).10周后观察血糖(BG)、肾脏指数(KI)、尿微量白蛋白(MAU)及肾组织形态学改变.免疫组化法观察肾皮质TGF-β及C-Ⅳ表达.结果 DM组尿素氮(BUN)、KI、MAU及肾皮质TGF-β、C-Ⅳ表达显著高于C组(P＜0.01),并出现糖尿病肾病(DN)典型的病理改变;而DR组KI、MAU及TGF-β、C-Ⅳ表达较DM组明显减低(P＜0.01).结论 罗格列酮可通过下调肾皮质中TGF-β、C-Ⅳ表达,对DN起保护作用.     

不同浓度乙醇对大鼠肺组织TGF-β1和bFGF表达的影响

目的:探讨不同浓度乙醇对大鼠肺组织中转化生长因子(TGF)-β1和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响及其与肺纤维化之间的关系.方法:雄性Wistar大鼠32只随机分成对照(C)组、3%(A3)、10%(AIO)和20%乙醇(A20)组,每组8只,A3、A10、A20饮入不同浓度的白酒,C组自由饮水.16周后免疫组化法检测TGF-β1和bFGF在大鼠肺组织中的表达,通过Masson染色观察肺间质中胶原沉积的情况.结果:(1)TGF-β1的阳性细胞数在乙醇组中增高;对照组与A20组、A10组间差别均有统计学意义(P＜0.05),但与A3组比较差别无统计学意义(P＞0.05.(2)bFGF的阳性细胞数在乙醇组中增高:随着乙醇浓度增高阳性细胞数增加,A3、A10、A20组间差异均有统计学意义(P＞0.05).Masson结果示乙醇组较对照组在肺泡间隔中胶原纤维沉积增多,以A20组最为明显.结论:肺泡Ⅱ型上皮细胞和巨噬细胞中TGF-β1、bFGF的表达随乙醇浓度的升高而增多,且一定浓度的乙醇会引起肺组织胶原沉积,提示乙醇可能是导致肺纤维化的因为之一.     

紫杉醇脂质体雾化吸入对大鼠肺纤维化的作用研究

目的 观察紫杉醇脂质体雾化吸入对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的干预作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法 将雄性SD大鼠随机分为4组：健康对照组、肺纤维化模型组、紫杉醇脂质体雾化组、紫杉醇脂质体静脉组。除健康对照组外,其他3组均用单次气管内注入博来霉素的方法复制大鼠肺纤维化模型,紫杉醇脂质体雾化组隔日雾化吸入紫杉醇脂质体,紫杉醇脂质体静脉组尾静脉注射紫杉醇脂质体,其余组隔日雾化吸入等量生理盐水,观测大鼠一般情况和肺组织病理变化,行肺纤维化Ashcroft评分及肺泡间隔厚度测定,免疫组化染色方法检测肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1的表达。结果 与模型组相比,紫杉醇脂质体雾化组肺纤维化Ashcroft评分明显降低（P<0.01）,肺泡间隔厚度明显变薄（P<0.01）,Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1表达水平均显著降低（P<0.01）。结论 紫杉醇脂质体雾化吸入对博来霉素诱导大鼠肺纤维化具有明显的保护作用,能够降低其肺泡炎、肺泡破坏程度及纤维化程度,从而降低其死亡率,并且其保护作用可能与抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1细胞因子的表达水平有关。     

丹芪护肝方对肝纤维化模型大鼠TGF-β/Smad4信号通路的影响

目的 探讨丹芪护肝方通过转化生长因子-β(TGF-β)/信号通路通用调节因子4(Smad4)信号通路对大鼠肝纤维化的保护作用。方法 取48只sqrague dawley(SD)大鼠,随机分成正常对照组、模型组、联苯双酯组和丹芪护肝方组,每组12只。腹腔注射40%四氯化碳大豆油溶液（1 ml/kg）建立大鼠肝纤维化模型。造模的同时,联苯双酯组（50 mg/kg）和丹芪护肝方组（9.14 g/kg）灌胃给药,正常对照组与模型组给予等体积生理盐水。8周后,全自动生化分析仪检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（T-Bi L）、直接胆红素（D-Bi L）;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）测定平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad4的信使核糖核酸（m RNA）及蛋白表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、T-Bi L、D-Bi L水平均升高,差异有显著统计学意义（P <0.01）,肝组织内α-SMA、TGF-β1及Smad4 m RNA和蛋白表...     

大鼠肺纤维化过程中转化生长因子-β1在不同肺组织中的表达变化及意义

目的观察转化生长因子-β(TGFβ-1)在博莱霉素(BLM)所诱导的肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中的动态变化及其意义。方法 BLM制成大鼠肺间质纤维化模型,观察组13只大鼠气管注入BLM 0.2~0.3m l,对照组5只大鼠气管注入等量生理盐水,并将各组动物处死后提取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病理定量分析,检测BALF中TGFβ-1的水平变化。结果观察组TGFβ-1水平高于对照组,第7、14天比较差异有统计学意义(P<0.01)。TGFβ-1在观察组成纤维细胞(Fb)和肺泡巨噬细胞(AM)中表达于实验第7天显著增强,于实验第14天达到高峰,至第28天有所降低,但明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 TGFβ-1在肺纤维化中及其病理发生发展过程中均发挥重要作用。     

藏药灰兜巴对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的研究灰兜巴对糖尿病肾病(DN)大鼠转化生长因子β1/细胞转导分子(TGF-β1/Smads)信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、灰兜巴提取物高剂量(200 mg·kg^-1)组、中剂量(100 mg·kg^-1)组和低剂量(50 mg·kg^-1)组,3个剂量组大鼠灌胃灰兜巴提取物,对照组灌胃生理盐水,连续灌胃20 d。采用酶联免疫吸附(Elisa)法测定转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞信号转导分子2(Smad2)、细胞信号转导分子3(Smad3)、细胞信号转导分子7(Smad7)和结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白表达,用实时荧光定量PCR(qPCR)测定TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7和CTGF的基因表达。结果藏药灰兜巴能明显降低TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7和CTGF的蛋白表达和基因表达(P<0.05)。结论藏药灰兜巴能阻断TGF-β1/Smads信号通路,对DN大鼠具有一定的保护作用。     

木犀草素对实验性肺纤维化大鼠组织中TGF-β1mRNA表达的影响

目的研究木犀草素对肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子β(TGFβ1)mRNA的表达的影响。方法大鼠气管内灌注博来霉素致大鼠肺纤维化病变,同时ig给予40mg·kg-1的木犀草素连续14d,观察肺重量指数和羟脯氨酸含量的变化;用RTPCR测定肺组织中TGFβ1mRNA表达水平。结果木犀草素可降低重量指数和羟脯氨酸含量,延缓肺纤维化进程,并抑制TGFβ1mRNA的表达。结论木犀草素抗肺纤维化作用与其抑制肺组织中TGFβ1mRNA表达有关。