不同消化性疾病患者幽门螺杆菌毒力基因类型及意义研究

目的分析用不同消化性疾病来源的幽门螺杆菌(Hp)毒力基因的检测结果及其意义。方法收集该院胃镜室于2015年1月至2016年7月采集的628例患者胃活检标本,分离培养Hp,检测其携带的毒力基因,并探讨Hp与慢性萎缩性胃炎(CAG)、慢性浅表性胃炎(CSG)、消化性溃疡(PUD)的相关性。结果 628份胃活检标本中成功分离出214株Hp,选取其中172株提取DNA,发现Hp携带cagA、vacA、dupA、iceA、oipA、luxS多种毒力基因,其中vacA s1m1是CSG的危险因素,vacA s1m2与iceA1+/iceA2+提高PUD的发生率,dupA+提高十二指肠溃疡危险度。结论不同消化性疾病与Hp感染密切相关,dupA可考虑作为Hp致十二指肠溃疡的标记基因,vacA s1m2与iceA1+/iceA2+增加了发生PUD的危险性。     

幽门螺杆菌cagA、vacA、iceA基因与儿童结节性胃炎的关系

目的：探讨幽门螺杆菌（HP）cagA、VaCA、iceA基因与儿童结节性胃炎的关系。方法：收集2007年5月-2008年1月行胃镜检查确诊Hp感染的22例结节性胃炎和22例非结节性胃炎患儿的胃粘膜组织,分别用聚合酶链反应（PCR）检测cagA、vacA和iceA基因。病理检查了解胃窦粘膜炎症程度。结果：结节性胃炎组中cagA基因单独检出率为68．2％,VaCAs1／ml单独捡出率为13．6％,vacAs1／m2单独检出率为45．5％,iceA1单独检出率为72．7％,iceA2单独检出率为18．2％．非结节性胃炎组中cagA基因单独检出率为68．2％,vacAs1／ml单独检出率为22．7％,vacAs1／m2单独检出率为27．3％。iceA1单独检出率为63．6％．iceA2单独检出率为22．7％。不同基因型菌株在结节性胃炎和非结节性胃炎中的检出率无统计学意义（P〉0．05）。在轻度、轻一中度、中度慢性结节性胃炎中,cagA型茵株检出率分别为66．7％、50％、75Voo,vacA s1／ml型菌株检出率分别为11．1％、0%、25%,VaCAs1／m2型菌株检出率分别为55．6％、25％、37．5％,iceA1型菌株检出率分别为88．9%、50％、75%．iceA2型菌株在轻度、轻一中度、中度慢性结节性胃炎中的检出率分别为0％、50％、25％,不同基因型菌株与结节性胃炎胃窦粘膜炎症的严重程度无关（P〉0．05）。结论：cagA、vacA、iceA基因与结节性胃炎、胃粘膜的炎症严重程度无关。提示除菌株因素外．宿主因素、环境因素在结节性胃炎的形成过程中可能发挥了重要作用。     

上海市崇明地区幽门螺杆菌耐药性分析及cagA基因检测

目的探讨上海市崇明地区含细胞毒素相关基因A（cagA）的幽门螺杆菌（Hp）的感染情况及cagA基因与Hp的耐药性关系。方法对150株临床分离菌株，采用PCR法检测Hp的cagA基因，同时采用纸片扩散法作药敏试验。结果崇明地区Hp对甲硝唑、替硝唑、阿莫西林、克拉霉素、阿奇霉素和呋喃唑酮的耐药率分别为32%、10、2、0、0和0。78．7％的Hp菌株含有cagA基因。结论本地区阿莫西林、阿奇霉素、呋喃唑酮可作为根除Hp的首选药物。本地区Hp感染以Ⅰ型菌株为主，含cagA基因Hp菌株对甲硝唑耐药率明显低于不含cagA基因Hp菌株。     

幽门螺杆菌感染及乳腺癌扩增1基因表达与胃癌相关性的研究

目的探讨幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）感染及乳腺癌扩增1（amplified in breast cancer1,AIB1）基因表达与胃癌的相关性。方法应用快速尿素酶法和改良吉姆萨（Giemsa）染色法检测Hp,用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测慢性浅表性胃炎组、中重度慢性萎缩性胃炎组及胃癌组中AIB1mRNA的表达水平。结果胃癌组、中重度慢性萎缩性胃炎组和慢性浅表性胃炎组Hp感染率分别为73．3％、71.4％和43．3％,AIB1mRNA表达水平分别为2．75±0．24、1.92±0．26和1．10±0．19。胃癌组及中重度慢性萎缩性胃炎组Hp感染率及AIB1mRNA的表达水平都明显高于慢性浅表性胃炎组（P〈0．05或〈0．01）。中重度慢性萎缩性胃炎组及胃癌组Hp阳性AIB1mRNA的表达水平明显高于Hp阴性（P〈0．01）。结论Hp感染可能与胃黏膜组织中AIB1mRNA的过表达有关,可能是其新的致癌机制之一。     

胃镜检查幽门螺旋杆菌相关胃病423例分析

目的了解本地农村及郊区患者幽门螺旋杆菌（Hp）感染与胃炎、消化性溃疡关系。方法将本地农村和郊区有症状并做胃镜及愿意行HP检查的患者逐个通过钳取胃窦距幽门3cm内黏膜做Hp检测。结果慢性浅表性胃炎Hp阳性率27．14％,十二指肠溃疡病患者Hp感染阳性率83．33％,胃溃疡Hp阳性率81．48％,残胃炎Hp阳性率50％,复合性溃疡Hp阳性率100％。结论Hp与胃炎、消化溃疡的发病密切相关,尤其与复合性溃疡的发生更为密切,需高度重视Hp感染的治疗。     

幽门螺杆菌感染与慢性胃病关系的检测分析

目的：了解消化性溃疡和慢性胃炎患者感染的幽门螺杆菌（Hp）cagA／vacA优势基因型及不同基因型Hp感染、混合感染与疾病的关系。方法：选择胃窦、胃体双份活检标本均培养出Hp的42例慢性胃炎（CG）和36例消化性溃疡（PU）患者作为研究对象，采用聚合酶链反应检测156份Hp分离株的cagA基因、vacA基因的信号区（s）和中间区（m）亚型，分析Hp基因型及多株Hp混合感染在CG和PU中的分布。部分优势基因型的扩增产物T—A克隆后进行核苷酸序列测定。结果：cagA基因的检测中，78例病人的胃窦标本中有？5例（96．2％）为cagA阳性，相应的胃体标本中，76例（97．4％）为cagA阳性，有1例（1．3％）患者胃窦、胃体检出cagA状态不一的Hp混合菌株。在胃窦标本的vacA基因分型中，sla／ml、sla／m2、sla／mlb、sla／mib—m．24种vacA基因型在78例患者中所占比例分别为6．4％（5／78）、55．1％（43／78）、26．9％（21／78）和1．3％（1／78），多株混合感染为3．8％（3／78）；而相应的胃体标本中，前述四种vacA基因型所占比例依次为6．4％（5／78）、53．8％（42／78）、25．6％（20／78）和3．8％（3／78），多株混合感染为5．1％（4／78）。c8gA＋sla／m2和cagA＋sla／mlb在胃窦标本中占51．3％（40／78）和26．9％（21／78），而在相应的胃体标本中占52．6％（41／78）和25．6％（20／78）。少量胃窦、胃体标本中vacA基因8区和m区不能分型，未发现8lb、82和mla型。联合胃窦、冒体标本分析，16例（20．5％）患者中检出不同基因型的多株Hp菌株，同一胃内多部位采样比单部位采样者有更高的混合感染检出率。HpcagA基因、vaeA基因型、cagA／vaeA基因组合及不同基因型菌株混合感染在CG和PU中的分布差异均无显著性（P〉0．05）。6株8h型Hp菌株的8区扩增产物与报道的ala型60190株核苷酸序列同源性为93．15—94．86％，4株n正型Hp菌株的m区扩增产物与报道的m2型87～203株核苷酸序列之间同源性为93．63—97．61％。结论：cagA＋sla／m2是本地区慢性胃炎或消化性溃疡中最主要的Hp菌株的优势基因型，其次为cagA＋sla／mlb，部分vacAsla／m2型优势分布菌株其核苷酸序列与国外报道的参考菌株比较有较高的同源性，部分患者同时感染不同基因型的多株Hp，但均与所致疾病类型和严重程度无密切相关。     

幽门螺杆菌感染与消化性溃疡患者胃泌素表达水平的关系

幽门螺杆菌可导致多种胃十二指肠疾病，是公认的慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素。1990年在悉尼第9届世界消化病学术会议上，Hp被正式确定为十二指肠溃疡的主要致病因素，以后的研究又发现根除Hp能减少消化性溃疡病的发生。胃粘膜从慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠化生、异型增生到胃癌发生这一演变过程已经明确，但Hp的致病机理尚不清楚。Hp引发消化性溃疡可能通过刺激胃泌素过度释放；降低生长抑素的浓度，从而使胃酸分泌抑制功能失调，引起胃酸分泌增加有关。本文通过研究消化性溃疡患者幽门螺旋杆菌感染状况及胃泌素基因的表达情况，来探讨Hp可能的致病机理。     

幽门螺杆菌cagA、vacA抗体与胃十二指肠疾病的相关性研究

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp)毒力基因cagA,vacA抗体与胃十二指肠疾病之间的关系。方法：采用免疫印迹法检测440例胃十二指肠疾病患者血清中的cagA,vacA抗体。结果：cagA,vacA抗体在440例患者中的检出率分别为73%，37.0%。在慢性胃炎（CG），十二指肠肠球部溃疡（DU），胃癌（GC）患者专利号，cagA,vacA抗体摄影性率分别为62.9%,76.1%,96.9%与33.0%,31.0%,62.5%；经u检验显示；慢性胃炎组与十二指肠球部溃疡组比较，无明显差异。胃癌组与慢性胃炎组，十二指肠球部溃疡组比较，有显著性差异。结论：本文通过患者血清中Hp抗体（cagA和vacA)的检测。推知其cagA和vacA抗体的表达状况，可为胃十二指肠疾病的诊断提供血清中Hp抗体（cagA和vacA)的检测，推知其cagA和vacA抗体的表达状况，可为胃十二指肠疾病的诊断提供依据。但不能作为区分Hp感染所致胃十二指肠疾病的单一指标。     

幽门螺杆菌感染与胃粘膜林巴滤泡关系探讨

目的：为了探讨含有细胞毒素相关基因A（cagA）菌株感染与胃粘膜淋巴滤泡形成之间的关系,并对胃粘膜淋巴滤泡的发生与幽门螺杆菌（Hp）感染状况的关系等进行观察。方法：我们对655例慢性胃炎,消化性溃疡的患者进行胃镜检查,取胃窦粘膜组织作Hp检测和组织病理检查,并选择70份Hp培养阳性的临床分离菌,用PCR扩增法进行cagA基因的检测。结果：Hp感染患者中胃粘膜淋巴滤泡的发生率（60.14%）显著高于非Hp感染者（17.06%）;胃粘膜淋巴滤泡在活动性胃炎比非活动性胃炎中更易检测到;在Hp相关性胃肠病中,慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠球溃这三者之间胃粘膜淋巴滤泡的发生率无显著性差异;另外,还观察到含cagA基因的Hp菌株与胃粘膜淋巴滤泡的增生两者之间无相关性。结论：胃粘膜淋巴滤泡的发生直接与Hp感染相关,并可作为一种Hp感染相关性胃肠病中一个较为恒定的形态特征;Hp作为一种抗原刺激胃粘膜产生淋巴滤泡的作用与Hp菌株的毒力（cagA基因）无关,任何Hp感染均可刺激胃粘膜产生淋巴滤泡。     

幽门螺杆菌功能性oipA基因的检测及意义

目的：评价幽门螺杆菌（Hp）oipA与消化系统疾病的关系。方法收集活检胃组织标本360份,对组织快速尿素酶实验阳性和部分阴性的活检标本进行 Hp分离培养,分离菌经革兰氏染色镜检、尿素酶实验和16SrRNA PCR鉴定后, PCR扩增其oipA和 cagA基因,测序分析oipA信号区的开关状态,分析功能性 oipA与临床疾病之间的关联性。结果组织标本分离培养获得106株 Hp,其中72株 cagA基因阳性,87株oipA信号区基因阳性,经测序分析80株 oipA基因信号区呈开放状态,1株oipA基因信号区呈关闭状态,6株开关状态不能确定;在溃疡和萎缩性胃炎中,功能性 oipA的检出率均显著高于 cagA。结论功能性oipA与严重消化系统疾病关系密切。     

Heterogeneity of cag genotypes and clinical outcome of Helicobacter pylori infection

Helicobacter pylori infecting strains may include colony subtypes with different cytotoxin-associated gene (cag) genotypes. We sought to determine whether the cag heterogeneity of infecting strains is related to the clinical outcome of infection. Gastric biopsies for culture and histologic study were taken from 19 patients infected with cagA-positive strains (6 with duodenal ulcer, 8 with atrophic gastritis, and 5 with nonatrophic gastritis). For each biopsy, DNA was extracted from 10 single colonies and from a sweep of colonies. Polymerase chain reaction (PCR) for cagA and cagE (both located in the right half of cag) and virB11 (located in the left half of cag) was performed. Random amplified polymorphic DNA PCR (RAPD-PCR) and sequencing of glmM PCR product were performed to verify strain identity of colonies with different cag genotypes. In all patients, PCR from sweeps were positive for cagA, showing that all specimens contained cagA-positive H. pylori subtypes. In 11 patients, PCR products from all colonies were positive for cagA, cagE, and virB11, but in 8 patients, PCR products from varying numbers of colonies were negative for 1 or more cag genes. RAPD-PCR and sequencing of glmM PCR product confirmed the strain identities of colonies with different cag genotypes. We detected cag deletions in 6 of 8, 2 of 5, and 0 of 6 patients with atrophic gastritis, nonatrophic gastritis, and duodenal ulcer, respectively (P = .02). In conclusion, changes in cag genotype in single colony isolates from subjects infected with cagA-positive H. pylori strains are more common in atrophic than in nonatrophic gastritis or duodenal ulcer. These findings are consistent with host-induced (acid secretion?) adaptive changes in cag genotype during infection.     

幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A、细胞毒素相关蛋白E、细胞空泡毒素A基因型与上消化道疾病的关系

目的分析幽门螺杆菌(Hp)的细胞毒素相关蛋白A(cagA)、细胞毒素相关蛋白E(cagE)、细胞空泡毒素A(vacA)基因型与上消化道疾病的关系。方法选取112例上消化道疾病患者,对其胃黏膜组织中Hp菌株的cagA、cagE、vacA基因型进行检测和分析。结果所有患者胃黏膜样本中的Hp菌株均为cagA基因和cagE基因阳性表达,阳性率均为100%。患者的vacAs1/m~2表型的阳性率最高,分别为54.1%和60.5%,其次为vacAs1/mlb表型和vacAs1/m~-表型,阳性率分别为13.2%~21.1%。消化性溃疡患者和慢性胃炎患者的Hp基因各表型的阳性率的差异均无统计学意义(P0.05)。结论上消化道疾病患者胃黏膜组织中的Hp菌株呈现cagA、cagE、vacAs1/m~2等基因亚型的优势表达,说明这些毒力因子表型在Hp引发和促进上消化道疾病的过程中具有重要的作用,但与上消化道疾病类型缺乏相关性。     

cagA vacA alelles and babA2 genotypes of Helicobacter pylori associated with gastric disease in Brazilian adult patients

Helicobacter pylori is an important human pathogen that causes chronic gastritis and is associated with development of peptic ulcer disease and gastric malignancies. The vacuolating cytotoxin (vacA), cagA gene, and babA2 gene are important virulence factor involving gastric diseases. Eighty-nine Helicobacter pylori-positive gastric biopsies were analyzed by polymerase chain reaction and Southern blotting for H. pylori detection and genotyping with primer pairs from each virulence gene. Fifty-three strains (59%) were common vacA genotype s1/m1, and only 14 (16%) were s2/m2, 12% of strains was found to have multiple infection. The cagA presence was detected in 48% (43 strains) and babA2 gene was detected in 44% of our H. pylori strains. We observed high percentage of s1/m1 strains with chronic gastritis and peptic ulcer and a significant correlation between cagA presence with the s1 allele and babA2 gene with chronic gastritis.     

胃癌前疾病患者血清胃液中三种肿瘤标志物的临床研究

目的 研究胃癌前病变血清和胃液中糖类抗原72-4(CA72-4)、糖类抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)等肿瘤标志物的水平差异.方法 采用胃镜获取胃癌患者、癌前病变(包括胃溃疡、萎缩性胃炎、十二指肠溃疡等)及良性病变患者的胃液和组织学标本,并经病理组织学证实,将83例患者分为胃癌组12例,癌前病变组44例,良性病变组(对照组,多为慢性浅表性胃炎)27例;同时采集患者静脉血,采用电化学发光免疫测定技术(ECLIA)分别检测血清和胃液内CEA、CA72-4和CA19-9的水平.结果 胃癌、癌前疾病、对照组胃液中CA72-4、CA19-9、CEA 的浓度显著高于血清(P<0.05);癌前病变组和良性病变组3种血清肿瘤标志物水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),而胃液中检测结果差异有统计学意义(P<0.05).结论 测定胃液中的CA72-4、CA19-9、CEA等肿瘤标志物较血清测定更有利于胃癌前疾病的诊断与疗效追踪.     

湖南地区幽门螺杆菌CagA基因3’端多态性与胃小二指肠疾病的关系

目的 探讨湖南地区幽门螺杆菌（Helifcobacter Hpylori）细胞毒素相关基因（CagA基因）3＇端可变区序列特征及其与胃十二指肠疾病的关系.方法 本地区有明显上消化道症状患者235例,其中慢性胃炎（CG）57例,胃溃疡（GU）62例,十二指肠溃疡（DU）70例,胃癌（GC）46例.于胃镜检查时用灭菌活检钳取胃窦组织1块,分离培养出H.pylori 89株,用PCR法对上述菌株的CagA基因扩增及测序,并通过生物信息学软件进行多重序列比对和相似性分析.结果 H.pylori培养阳性率为37.9%（89/235）,其中H.pylori CagA阳性者占91.7%（77/84）,GU组、DU组和GC组CagA阳性率高于CG组,其差异有统计学意义（P〈0.05）.77株H.pylori CagA基因3＇端均具有3个EPIYA重复序列,其中第2个EPIYA序列存在3种突变型,占18.2%（14/77）.H.pylori CagA基因3＇端序列特征以东亚型为主,占88.3%（68/77）,东亚型的CagA阳性菌株在GU组、DU组及GC组高于CG组（P〈0.05）.所有东亚型CagA阳性菌株CagA序列特征类似于Yamaoka报道的A型.结论 湖南地区H.pylori CagA阳性菌株以东亚型为主,均具有3个EPIYA重复序列,其中第2个序列存在3种突变型,其与消化性溃疡和胃癌发生有关.     

血清胃蛋白酶原在胃腺癌诊断中的临床价值

目的：探讨血清胃蛋白酶原（PG）在胃腺癌诊断中的应用价值。方法使用胶乳增强免疫透射比浊法分别检测20例浅表性胃炎、20例萎缩性胃炎、20例胃溃疡及68例胃腺癌患者的血清PGⅠ和PGⅡ含量,计算胃蛋白酶原比值（PGR）,并结合病理和病情分期进行比较和ROC曲线分析。结果胃腺癌组患者血清PG I含量和PGR显著低于浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组和胃溃疡组,差异有统计学意义（P均＜0.05）;胃溃疡组患者PG Ⅰ含量明显高于浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组和胃腺癌组,差异有统计学意义（P均＜0.05）。萎缩性胃炎组患者血清PGⅠ含量和PGR也较浅表性胃炎组和胃溃疡组明显降低,差异具有统计学意义（P均＜0.05）;而浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组、胃溃疡组和胃腺癌组患者的血清PGⅡ含量基本保持一致,差异无统计学意义（P均＞0.05）。此外,血清PGⅠ含量和PGR的ROC曲线下的面积（AUC）为0.961和0.963（P均＜0.05）;胃腺癌患者PGR水平与胃腺癌分化程度具有一定的相关性。结论血清PGⅠ含量和PGR对胃腺癌的诊断价值较高。     

Phospholipase C activity of Helicobacter pylori is not associated with the presence of the cagA gene

BACKGROUND: Knowledge about the possible role of phospholipase C (PLC) activity of microbial pathogens in the development of disease is increasing. Recently attention has focused on investigating PLC activity elaborated by Helicobacter pylori, but the role of this enzyme in H. pylori pathogenesis is still unknown. The aim of this study was to correlate PLC-activity of H. pylori on the basis of the cagA status with the clinical diagnosis of the patients. MATERIALS AND METHODS: Helicobacter pylori was isolated from patients with gastritis (G; n = 38), duodenal ulcer (DU; n = 15), gastric ulcer (GU; n = 11) and gastric cancer (GC; n = 12). Polymerase chain reaction primers DZ3/R009 which amplified a 1350-bp fragment were used to detect the cagA gene. PLC activity was determined using p-nitrophenylphosphorylcholine as substrate. RESULTS: Of the strains, 60% were cagA(+) and 40% were cagA(-). All strains showed PLC activity (2.20 +/- 0.91 U mg(-1) protein). PLC activity showed no association with the cagA status: cagA(+) (2.21 +/- 1.03 U mg(-1) protein), cagA(-) (2.18 +/- 0.79 U mg(-1) protein). Patients with GU had the highest PLC activity (2.77 +/- 1.26 U mg(-1) protein) and patients with GC had the lowest activity (1.8 +/- 0.57 U mg(-1) protein). CONCLUSIONS: Although PLC activity was present in all strains tested, it may only have pathological importance in patients with GU. However, the extent of PLC activity was independent of the presence of the cagA gene.     

Hp感染与上消化道疾病关系的初步探讨

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp）感染与各种常见上消化道疾病的关系。方法：回顾性地分析了2008年于我院采用快速尿素酶试验（RUT）检测Hp的6636例门诊及住院患者Hp感染情况,及与性别、年龄、病种的关系。结果：6636例患者中,Hp阳性3 248例,检出率为48.9%;其中男性4 391例,检出率为49.97%,女性2245例,检出率为46.9%,男性略高于女性,差异有统计学意义（P〈0.05）;20～29岁和30～39岁这两个年龄段Hp检出率最高,分别为58.4%和54.6%,〈20岁Hp检出率最低（38.8%）,各组间差异有统计学意义（P〈0.01）;各种常见的上消化道疾病,复合性溃疡和上消化道恶性肿瘤Hp检出率最高,分别为86.2%和84.1%,其次是幽门管溃疡和十二指肠溃疡,检出率分别为54.2%和51.9%,慢性胃炎、残胃炎、胃溃疡和食管静脉曲张Hp检出率分别为46.9%、40.0%、36.6%和34.2%,各组间的差异有显著的统计学意义（P〈0.005）。结论：本组资料Hp总检出率为48.9%,男性略高于女性,慢性胃炎、消化性溃疡和上消化道恶性肿瘤与Hp感染密切相关,尤以复合性溃疡和上消化道恶性肿瘤更为显著。