川芎嗪对脓毒症急性肾损伤小鼠血管内皮细胞的保护作用

目的探讨川芎嗪对脓毒症急性肾损伤（AKI）小鼠血管内皮细胞的保护作用。方法将54只C57BL/6小鼠按照随机化区组分为5组：假手术组10只,安慰剂组、川芎嗪低剂量组（10mg/kg）、川芎嗪中剂量组（30mg/kg）、川芎嗪高剂量组（60mg/kg）各11只。假手术组只做剖腹关腹,不行盲肠结扎穿刺（CLP）操作。安慰剂组先尾静脉注射0.9%氯化钠注射液0.15ml,30min后行CLP手术制作脓毒症AKI模型。川芎嗪低、中、高剂量组分别尾静脉注射10、30、60mg/kg川芎嗪（溶于0.9%氯化钠注射液0.15ml）,30min后行CLP造模。观察小鼠造模后6h、12h、24h、3d存活率,测定肾脏含水量,采用ELISA检测尿液中肾损伤分子1（Kim-1）水平,观察肾组织学改变,采用免疫组化检测肾组织中内皮细胞损伤标志物血管性血友病因子（vWF）的表达。结果CLP手术成功建立起了小鼠脓毒症AKI模型,安慰剂组和川芎嗪各剂量组小鼠均产生了不同程度的肾脏损伤。与安慰剂组比较,川芎嗪各组小鼠术后存活率提高,川芎嗪高剂量组3d存活率与假手术组相似。川芎嗪组肾脏含水量、尿液中Kim-1水平、肾组织病理损伤评分明显小于安慰剂组、vWF表达明显小于安慰剂组（均P＜0.05）。结论川芎嗪能保护脓毒症AKI小鼠血管内皮细胞,减轻脓毒症小鼠的急性肾损伤,保护肾功能,改善生存率。     

尖叶假龙胆对脂多糖诱导小鼠脓毒症性急性肾损伤的保护作用及机制研究

目的利用脂多糖(LPS)建立小鼠脓毒症性急性肾脏损伤(AKI)模型,探讨尖叶假龙胆对脓毒症性AKI的保护作用及其可能机制。方法将40只小鼠随机分为4组,分别为:对照组,模型组(LPS组),尖叶假龙胆组,阳性药组(地塞米松,dexamethasone,DEX组),每组10只。通过腹腔单次注射LPS(10 mg/kg)制备小鼠脓毒症性AKI模型;其中尖叶假龙胆组于造模前7 d,连续灌胃给药,每日1次,剂量为5 g·(kg·d)~(-1),其余各组给予等体积生理盐水;DEX组于造模前1 h尾静脉注射地塞米松,剂量为1.2 mg·kg~(-1),其余各组给予等体积生理盐水。造模后观察小鼠的一般情况,造模12 h后处死小鼠,取材,测算各组小鼠的肾脏指数,HE染色观察肾脏病理组织形态学的改变;检测各组小鼠12 h尿蛋白定量,应用酶联免疫法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)的表达水平。结果 HE染色结果显示,LPS组肾间质水肿,有大量炎性细胞浸润;与LPS组相比,尖叶假龙胆组和DEX组肾间质水肿和炎性细胞浸润情况均明显改善。与对照组相比,LPS组肾脏指数及12 h尿蛋白定量水平均显著升高(P0.05),LPS组血清TNF-α、IL-1β及Cys C水平均显著升高(P0.05);与LPS组相比较,尖叶假龙胆组和DEX组肾脏指数及12 h尿蛋白定量水平均显著下降(P0.05);尖叶假龙胆组和DEX组血清TNF-α、IL-1β及Cys C水平均显著下降(P0.05)。结论尖叶假龙胆对LPS诱导的小鼠脓毒症性急性肾损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制肾内促炎性细胞因子的释放相关。     

乌司他丁对内毒素诱导大鼠急性肾损伤NF-кB表达的影响

目的 研究核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)与内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠急性肾损伤(acute kid-hey injury,AKI)发病的关系及初步探讨乌司他丁(ulinastatin,UTI)对大鼠AKI时肾脏的保护作用.方法 健康雄性Wistar大鼠30只随机分为3组:健康对照组经尾经脉注射1 ml生理盐水;LPS组经尾经脉注射LPS 5 mg/kg体重,复制AKI模型;LPS UTI组在按与LPS组相同标准给LPS的同时给予UTI 100 kU/kg体重.观察6 h,取一侧肾组织免疫组化法检测NF-кB的含量;测定血肌酐、尿肌酐,结合尿量计算内生肌酐清除率(creatinine clearano rate,Cer);观察各组大鼠光镜及电镜下肾脏的病理改变.结果 LPS组大鼠Ccr较正常对照组和LPS UTI组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),LPS UTI组与健康对照组相比无统计学意义(P>0.05).LPS组大鼠肾组织中NF-кB的表达明显高于健康对照组(P<0.01),LPS UTI组高于健康对照组(P<0.05),但低于LPS组(P<0.01).光镜检查UTI可使肾小管上皮细胞浊肿等组织病理改变明显减轻,电镜下可见线粒体损伤亦显著减轻.结论 UTI可降低肾组织中炎性细胞因子NF-κB的水平,对LPS诱导大鼠AKI时肾脏具有保护作用.     

乌司他丁对内毒素诱导大鼠急性肾损伤NF-κB表达的影响

目的研究核因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）与内毒素（lipopolysaccharide,LPS）诱导的大鼠急性肾损伤（acute kidneyinjury,AKI）发病的关系及初步探讨乌司他丁（ulinastatin,UTI）对大鼠AKI时肾脏的保护作用。方法健康雄性Wistar大鼠30只随机分为3组：健康对照组经尾经脉注射1ml生理盐水;LPS组经尾经脉注射LPS5mg/kg体重,复制AKI模型;LPS＋UTI组在按与LPS组相同标准给LPS的同时给予UTI100kU/kg体重。观察6h,取一侧肾组织免疫组化法检测NF-κB的含量;测定血肌酐、尿肌酐,结合尿量计算内生肌酐清除率（creatinine clearance rate,Ccr）;观察各组大鼠光镜及电镜下肾脏的病理改变。结果LPS组大鼠Ccr较正常对照组和LPS＋UTI组显著降低,差异有统计学意义（P〈0.01）,LPS＋UTI组与健康对照组相比无统计学意义（P〉0.05）。LPS组大鼠肾组织中NF-κB的表达明显高于健康对照组（P〈0.01）,LPS＋UTI组高于健康对照组（P〈0.05）,但低于LPS组（P〈0.01）。光镜检查UTI可使肾小管上皮细胞浊肿等组织病理改变明显减轻,电镜下可见线粒体损伤亦显著减轻。结论UTI可降低肾组织中炎性细胞因子NF-κB的水平,对LPS诱导大鼠AKI时肾脏具有保护作用。     

极化液对脓毒症休克兔肾损害的保护作用

目的:探究静脉持续泵注极化液(GIK)对脓毒症休克兔早期肾脏损伤的保护作用.方法:30只雄性新西兰大白兔随机分为空白对照组(C组)、林格氏液治疗组(LPS组)和极化液治疗组(GIK组),每组各10只.LPS组和GIK组耳缘静脉注射脂多糖(LPS)建立脓毒症休克兔模型;C组注射等剂量生理盐水.建模成功后,GIK组采用极化液治疗;C组及LPS组采用复方氯化钠治疗.比较三组大白兔平均动脉血压(MAP)、生化指标(血糖、血钾、乳酸)水平、肾损伤指标[肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)]水平、肾脏组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-ɑ)水平、过氧化指标丙二醛(MDA)水平及肾脏组织形态学变化.结果:与LPS组相比,GIK组MAP升高(P<0.05);肌酐和胱抑素C水平下降(P<0.05);血糖、血钾、乳酸水平更加平稳(P<0.05);肾脏组织TNF-ɑ和MDA水平下调(P<0.05);肾脏组织线粒体受损减轻,HE染色显示肾脏病理损伤更轻(P<0.05).结论:极化液早期干预有利于维持脓毒症休克兔血流动力学稳定,并通过减轻微循环障碍、减少炎症因子释放、减少过量活性氧的攻击而减轻脓毒症兔肾脏上皮细胞的线粒体损伤,从而对脓毒症兔的肾脏损伤有一定的保护作用.     

盐酸戊乙奎醚对内毒素血症大鼠紧密连接蛋白表达的影响

目的 观察盐酸戊乙奎醚(PHC)对脂多糖(LPS)致大鼠急性肾损伤的作用,并探讨其对内毒素血症大鼠紧密连接闭锁小带蛋白(ZO-1)和紧密连接闭锁蛋白(Occludin protein)表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)、LPS组(LPS组)、PHC低剂量组(L-PHC)和PHC高剂量组(H-PHC),每组10只,后3组注入LPS (5.0 mg/kg),30min后,L-PHC和H-PHC组分别注入PHC 0.3、0.9 mg/kg,24h后取外周血和肾组织,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、TNF-α和IL-1β含量;蛋白免疫印迹法检测ZO-1和occludin蛋白的表达.结果 LPS组肾脏炎症明显,而L-PHC和H-PHC组肾脏炎症较弱;与C组比较,各组血浆TNF-α、IL-1β、Scr和BUN含量均显著升高(P＜0.05),而L-PHC和H-PHC组其含量比LPC组明显降低(P＜0.05);ZO-1和occludin蛋白表达水平LPS组升高,L-PHC和H-PHC组比LPS组下降(P＜0.05).结论 PHC可减轻脓毒症诱发的AKI,调控ZO-1和occludin蛋白的表达可能是其发挥保护作用的机制之一.     

内毒素休克新生大鼠肾组织内NO对第二信使的调节作用

目的探讨新生大鼠内毒素(LPS)休克时肾组织内一氧化氮(NO)对环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷(cAMP,cGMP)第二信使的调节作用.方法7日龄新生大鼠180只,分为3组.对照组(A组):腹腔注入0.1ml生理盐水;LPS组(B组):腹腔注射LPS 5 mg/kg;地塞米松组(Dex,C组):LPS 5 mg/kg Dex10mg/kg;采用硝酸还原酶法测定肾组织NO,放免法检测肾组织cAMP及cGMP浓度,动态观察0,2,4,6及24 h血气及各项指标变化和24h动物死亡率.结果B组NO于自2h起显著高于A组各点(P＜0.05～P＜0.01);C组NO 2 h也明显高于A和B组(P＜0.05),至24 h低于B组(P＜0.05),与A组无差异;B组cAMP和cGMP自2 h起显著高于A组各点(P＜0.05～P＜0.01);C组cAMP 2～24h均高于A和B两组各值(均P＜0.01),cGMP于2 h高于A和B两组各值(P＜0.01),至24 h显著低于B组(P＜0.01);B组24 h血气呈现显著代谢性酸中毒,呼吸性硷中毒伴低氧血症.24h死亡率B组为50%,C组20%,两组差异显著(P＜0.05).结论新生大鼠内毒素休克时肾脏合成过量的NO,肾脏cAMP,cGMP浓度均显著升高,伴随机体内环境紊乱和死亡率增加.Dex通过抑制肾脏NO的合成而调节第二信使信号系统,降低死亡率,对肾脏起保护作用     

度拉糖肽对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用

目的 探讨度拉糖肽对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症急性肾损伤(AKI)的保护作用。方法 24只雄性C57BL/6小鼠随机分为Control组(生理盐水)、LPS组(LPS 15 mg/kg)、LPS+Dul组(LPS 15 mg/kg+度拉糖肽0.6 mg/kg)和Dul组(度拉糖肽0.6 mg/kg),每组6只，以腹腔注射的方式给药。药物干预24 h后，记录小鼠体质量和肾脏质量，收集小鼠肾脏组织及血清标本。采用HE观察各组肾组织病理变化，试剂盒检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)的变化，qRT-PCR检测肾脏中细胞因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β水平，免疫组化检测肾脏中巨噬细胞特异性标志物F4/80和髓过氧化物酶(MPO)含量。结果 与Control组比较，LPS组小鼠体质量减轻且双侧肾脏质量增加(P<0.001),BUN和CRE升高(P<0.001,P<0.01),肾损伤评分增高(P<0.001),肾脏中IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA水平升高(P<0.05),巨噬细胞和中性粒细胞浸润增加(P<...     

替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏组织中TSP-1的影响

目的 探讨替米沙坦对糖尿病大鼠肾组织中血小板反应蛋白-1(TSP-1)表达的影响.方法 采用一次性腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg建造大鼠糖尿病模型.将实验动物随机分为正常对照组(A组)、糖尿病未干预组(B组)和糖尿病替米沙坦干预组(C组)3组.C组给予替米沙坦10/mg·kg-1·d-1灌胃,A组和B组给予等剂量生理盐水灌胃作对照.12周后,测定各组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、24 h尿蛋白及肾脏肥大指数等肾脏功能指标;RT-PCR法和免疫组化法检测肾脏TSP-1 mRNA及其蛋白的表达水平.结果 与A组相比,B组和C组24 h尿蛋白和肾脏肥大指数显著增高(P＜0.05或0.01);与B组相比,C组24 h尿蛋白和肾脏肥大指数显著降低(P＜0.05).与A组相比,B组和C组TSP -1表达显著增高(P＜0.01);与B组相比,C组TSP-1表达显著降低(P＜0.01);TSP 1蛋白表达水平与24h尿蛋白、肾脏肥大指数均呈显著正相关(P＜0.01).结论 ARB类药物对糖尿病大鼠具有肾脏保护作用,其机制可能部分与降低了肾组织内TSP-1的表达有关.     

内毒素致大鼠急性肾损伤早期NGAL和KIM-1的变化

目的研究中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）和肾损伤分子-1（KIM-1）在内毒素（LPS）致大鼠急性肾损伤（AKI）早期的表达变化。方法健康雄性Wistar大鼠32只随机分为4组。正常对照组（NC）：经尾静脉注射1ml生理盐水;LPS2、4、6h组：LPS剂量为5mg/kg体重,生理盐水稀释至1ml尾静脉注射,复制AKI模型。造模后在各时间点,ELISA法测大鼠血清和尿液中NGAL的含量及尿液中KIM-1的含量,除蛋白法测定血肌酐（SCr）值并比较各组大鼠光镜下肾脏的病理改变。结果与NC组Scr比较：LPS2h组略升高（P〉0.05）,LPS4、6h组显著升高（P〈0.01）;LPS2、4、6h组血清和尿液中NGAL及尿液中KIM-1的水平均明显高于NC组（P〈0.01）,与LPS2h组相比,LPS4h组血清和尿液中NGAL升高幅度小（P〉0.05）,而尿液中KIM-1显著性升高（P〈0.01）;光镜下,NC组肾组织结构正常,LPS2、4、6h组肾组织出现不同程度的病理改变。结论 NGAL和KIM-1在AKI早期即出现升高,可作为AKI的早期诊断指标,并且KIM-1有明显的时间依赖性,可作为病情监测指标。