中西医结合治疗对重症手足口病患儿外周血Treg/Th17平衡的调节作用研究

目的探讨中西医结合治疗对重症手足口患儿外周血中Th17与调节性T细胞(Treg细胞)及相关细胞因子水平的影响。方法将35例重症手足口患儿随机分为2组,西医组16例给予常规西医治疗,中西医结合组19例给予中西医结合治疗,采用流式细胞术检测2组患儿入院第1天及治疗第8天外周血中Th17(CD3^+CD8-IL-17^+)及Treg细胞(CD4^+CD25^+Foxp3^+)表达率,采用ELISA方法检测血清中白细胞介素-10(IL-10)、IL-17、IL-23、人转化生长因子-β1(TGF-β1)水平。结果治疗第8天,2组Th17细胞数和血清IL-17水平及中西医结合组血清IL-23水平均明显低于入院第1天(P均<0.05),Treg细胞数及血清IL-10、TGF-β1水平均明显高于入院第1天(P均<0.05),且中西医结合组血清IL-17、IL-23水平均明显低于西医组(P均<0.05)。结论中西医结合治疗重症手足口病可明显调节Treg/Th17平衡。     

温经化瘀止痛法对寒凝血瘀证痛经大鼠Th17、Treg细胞分化及其细胞因子表达的影响

目的观察温经化瘀止痛法对寒凝血瘀证原发性痛经大鼠Th17、Treg细胞分化及其特征性细胞因子(IL-17A、TGF-β)表达的影响,探讨温经化瘀止痛法治疗寒凝血瘀证原发性痛经的免疫机制。方法将50只大鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药高剂量组和中药低剂量组。除空白组外,通过寒冷刺激法联合苯甲酸雌二醇和缩宫素建立寒凝血瘀证原发性痛经大鼠模型。从造模第7天开始,分别给予中药、布洛芬和蒸馏水治疗。检测各组Th17、Treg细胞比例、IL-17A、TGF-β含量及IL-17A、TGF-βmRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组Th17细胞比例、IL-17A含量、IL-17A mRNA表达和IL-17A/TGF-β比值均升高(P0.05,P0.01);Treg细胞比例、TGF-β含量和TGF-βmRNA表达降低(P0.01)。与模型组比较,西药组和中药低剂量组Th17细胞比例降低,中药高、低剂量组IL-17A含量降低,中药高剂量组IL-17A mRNA表达降低(P0.05,P0.01);各治疗组Treg细胞比例、TGF-β含量和TGF-βmRNA表达均升高,IL-17A/TGF-β比值降低(P0.01)。中药两组间比较,中药低剂量组调节Th17、Treg细胞比例和降低IL-17A含量优于中药高剂量组(P0.01);中药高剂量组升高TGF-β含量、降低IL-17A mRNA表达优于中药低剂量组(P0.01)。结论温经化瘀止痛法调节Th17、Treg细胞比例及IL-17A、TGF-β表达可能是其治疗寒凝血瘀证PD的免疫机制之一。     

中药逐水饮对小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型积液生成及Th17免疫平衡的影响

目的观察中药逐水饮对小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型积液生成及Th17细胞免疫平衡的影响。方法小鼠随机分为正常对照组、模型组、逐水饮组、顺铂组、逐水饮+顺铂组。采用胸腔注射Lewis肺癌单细胞悬液的方法建立小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型。给药结束处死小鼠,记录模型小鼠恶性胸腔积液(MPE)体积、胸壁转移瘤计数、转移瘤质量,采用流式细胞术法检测MPE和外周血中Th17、Treg细胞百分比,ELISA法检测MPE和外周血中白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平。结果与模型组比较,逐水饮组、顺铂组和逐水饮+顺铂组小鼠MPE体积、胸壁转移瘤数目减少(P 0.05),转移瘤质量减轻(P 0.05),生存期延长(P 0.05),其中逐水饮+顺铂组变化更加明显(P 0.05)。与正常对照组比较,模型组外周血中Th17细胞百分比及IL-17、IL-23水平降低(P 0.05),Treg细胞百分比及TGF-β1水平升高(P 0.05);与模型组比较,逐水饮组、顺铂组和逐水饮+顺铂组小鼠MPE和外周血中Th17细胞百分比及IL-17、IL-23水平升高(P 0.05),MPE中Treg细胞百分比及TGF-β1水平降低(P 0.05);逐水饮+顺铂组小鼠MPE和外周血中Th17细胞百分比及IL-17/IL-23水平高于逐水饮组,Treg细胞百分比及TGF-β1水平低于逐水饮组,但差异无统计学意义(P 0.05);模型小鼠MPE中Th17、Treg细胞百分比均高于其外周血中Th17、Treg细胞百分比(P 0.05)。结论中药逐水饮能够抑制小鼠MPE生成,纠正Th17细胞失衡,减轻MPE微环境免疫抑制状态,增强小鼠对肿瘤的免疫作用。     

慢加亚急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素血症时Th17/Treg表达变化的实验研究

目的:观察Treg/Th17细胞失衡及相关细胞因子在慢加亚急性肝衰竭肠源性内毒素血症(IETM)时的表达变化,进而探讨Treg/Th17细胞对内毒素介导的炎症反应的调控作用。方法:采用牛血清白蛋白致敏建立免疫性肝纤维化大鼠模型,以腹腔注射D-Gal+LPS液(合D-Gal 400mg/kg,LPS 100μg/kg)急性攻击建立肝衰竭IETM大鼠模型。流式细胞术检测不同时间点大鼠外周血中Th17、Treg细胞频数,ELISA法测定不同时间节点大鼠结肠组织IL-10、TNF-α、IL-17A、IL-23、TGF-β水平。结果:与正常组比较,模型组Treg、Th17细胞频数在各时间节点均升高(P 0. 05),Treg、Th17细胞与前一时间节点比较均有上升(P 0. 05);与正常组比较,模型组结肠组织Treg/Th17型细胞因子IL-17A、IL-23、TNF-α、TGF-β、IL-10各时间节点表达均升高(P 0. 05),且各炎症因子与前一时间节点比较均有上升(P 0. 05);正常组大鼠IL-10、TGF-β等抑炎因子水平高于IL-17A、IL-23、TNF-α等促炎因子,模型组Th17比例高于Treg,失衡向Th17方向偏移。结论:肝衰竭IETM发生时Treg/Th17细胞失衡,向Th17方向偏移,相关抑炎、促炎因子均释放增加,加剧IETM程度。     

复发性唇疱疹实热“上火”患者免疫功能变化

目的:探讨复发性唇疱疹实热"上火"患者Th17、Treg、CD8、CD19细胞含量及Th17、Treg相关细胞因子变化,从免疫学角度探讨复发性唇疱疹实热"上火"发病机制,为该病防治提供理论基础。方法:临床上收集复发性唇疱疹实热"上火"患者28例和非疱疹人46例(正常平和质26例、非复发性疱疹阴虚和非复发性疱疹实热型10例),采用流式细胞检测仪检测外周血Th17、Treg、CD8、CD19细胞含量;采用Elisa法检测血浆中IL-4、TGF-β、IL-2、IL-10、IL-17A和GM-CSF细胞因子含量。结果:与正常平和质人相比,RHL实热患者外周血淋巴细胞中Th17细胞、CD~+_4CD~+_(25)Treg细胞、Foxp3~+Treg细胞含量显著升高(P0.05);IL-2、IL-10和TGF-β含量显著升高(P0.05)。与非复发性疱疹阴虚人相比,RHL实热患者Th17细胞和记忆B细胞(CD~+_(19))含量显著升高(P0.05),非复发性疱疹实热患者血浆TGF-β显著上升(P0.05)。与非复发性疱疹实热型相比,检测指标无统计学差异。非复发性疱疹实热外周血B细胞(CD~+_(19))细胞含量显著高于非复发性疱疹阴虚人(P0.05)。结论:复发性唇疱疹实热"上火"患者可能与免疫功能紊乱密切相关。     

滋肾育胎丸对复发性自然流产患者外周血Th17 Treg细胞及相关细胞因子表达水平的影响

目的:观察滋肾育胎丸对复发性自然流产患者外周血Th17、Treg细胞及相关细胞因子表达水平的影响。方法:60例复发性自然流产患者随机分为对照组和观察组,每组60例;对照组给予黄体酮注射液肌肉注射,每日1次,连用3个疗程;观察组在对照组治疗基础上加用滋肾育胎丸口服,连用3个月。检测治疗前后血Th17、Treg细胞表达及其相关因子IL-10(白细胞介素10)、IL-17(白细胞介素17)和TGF-β(转化生长因子β)的表达。结果:治疗后,观察组患者CD4~+IL-17~+/CD4~+T(Th17)明显降低,CD4~+Fox3~+/CD4~+T(Treg)明显升高;血清IL-10、TGF-β1表达升高,IL-17表达降低;与治疗前及对照组治疗后比较差异均具有统计学意义(P 0. 05)。结论:滋肾育胎丸能够恢复复发性自然流产患者外周血Th17/Treg细胞的平衡,调节相关炎性因子的表达,维持正常妊娠。     

清热抗毒煎剂治疗普通型手足口病临床研究

目的:观察清热抗毒煎剂治疗普通型手足口病的临床疗效。方法:选取115例手足口患儿,随机分为对照组60例和治疗组55例,治疗组给予清热抗毒煎剂治疗,对照组给予抗病毒药利巴韦林进行治疗。结果:两组有效率均为100%,在体温复常和疹退指标方面二者无显著差异(P0.05);在心肌酶指标CK、CK-MB、LDH、HBDH等方面,治疗组明显优于对照组(P0.05)。结论:清热抗毒煎剂治疗手足口病普通型有明显的退热、促进疱疹和皮疹消退、保护心肌等综合效应,疗效显著。     

养阴方对HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠Th17、Treg细胞失衡的作用研究

目的考察在热休克蛋白(HSP)65攻击下养阴方对载脂蛋白E敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)的病变及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)的影响及可能机制。方法将ApoE~(-/-)小鼠分别饲喂普通和高脂饲料,并分别sc无菌PBS或HSP65,以辛伐他汀为阳性药,研究养阴方对AS模型小鼠血脂、斑块、Th17细胞与Treg细胞比例(Th17/Treg)及相关炎症指标的影响。给药方式皆为ig给药,并以等体积生理盐水做对照。采用酯酶法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)水平;油红O染色法测定主动脉斑块面积;流式细胞术测定抗凝血中IL-17A~+CD4~+Th17及Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg细胞数量;ELISA法测定血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、IL-2、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10水平;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定脾脏中Stat3、Stat5a、Foxp3和主动脉中Stat3、Stat5a mRNA表达;Western blotting法测定脾脏中磷酸化STAT3(pSTAT3)、磷酸化STAT5(pSTAT5)、FOXP3和主动脉中pSTAT3蛋白表达。结果养阴方使小鼠血清TC、TG、LDL水平显著降低(P0.01),HDL显著升高(P0.05);主动脉斑块面积明显减小(P0.01);外周血IL-17A~+CD4~+Th17细胞显著减少(P0.05),Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg显著增加(P0.05),Th17/Treg值大幅下降(P0.01);血清IL-6水平显著下降(P0.05),IL-2(P0.01)、TGF-β(P0.05)、IL-10(P0.05)水平显著升高;脾脏pSTAT3蛋白水平下降(P0.01),pSTAT5(P0.01)和FOXP3(P0.05)蛋白水平上升;主动脉Stat3 mRNA(P0.01)和pSTAT3蛋白(P0.05)水平下降。结论养阴方能够改善HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠的高脂血症及AS,同时调节外周血中Th17/Treg的平衡和炎症因子的分泌从而改善炎症。养阴方对Th17、Treg的效应可能与减弱的IL-6/pSTAT3和增强的IL-2/pSTAT5信号有关。     

益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞的影响。方法用流式细胞仪检测18例经益气解毒方加常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(观察组)及l5例常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(对照组)外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞比例,RT-PCR法检测Foxp3 mRNA和ROR-γt mRNA转录水平,ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果观察组患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例和Foxp3 mRNA的相对表达量均低于对照组(P0.05),而Th17细胞占CD4+T细胞的数量比例和ROR-γt mRNA的相对表达量均高于对照组(P0.05);观察组患者血清IL-6水平高于对照组(P0.05),而TGF-β水平低于对照组(P0.05)。结论益气解毒方可影响中晚期鼻咽癌CD4+CD25+调节性T细胞的比例与功能,增强Th17细胞的分化,其机制可能是通过调节IL-6和TGF-β水平而逆转鼻咽癌免疫耐受。     

补肾通督胶囊对RA患者Th17/Treg平衡影响的研究

目的:观察补肾通督胶囊对肾虚寒凝型类风湿性关节炎患者外周血Th17/Treg细胞及血清白细胞介素17A(IL-17A)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、IL-10的影响。方法:入选类风湿性关节炎患者随机双盲分为治疗组(36例)和对照组(35例),治疗组口服补肾通督胶囊,对照组口服雷公藤多苷片,均服药12周,采用流式细胞术观察比较治疗前后两组患者外周血Th17/Treg及采用酶联免疫吸附法(ELISA)观察血清IL-17A、TGF-β1、IL-10的变化。结果:治疗后两组与各自治疗前相比,Th17及Th17/Treg显著降低(P0.01),Treg显著升高(P0.01);治疗后两组间比较无统计学意义(P0.05)。治疗后两组与各自组治疗前相比,IL-17A显著降低(P0.01),TGF-β1、IL-10显著升高(P0.01);治疗后两组间比较,治疗组TGF-β1与IL-10升高更加明显(P0.01),IL-17A无统计学意义(P0.05)。结论:补肾通督胶囊可以明显降低肾虚寒凝型类风湿性关节炎患者外周血Th17/Treg水平,降低血清IL-17A含量,而使血清TGF-β1、IL-10含量升高。     

乙肝相关性慢加急性肝衰竭“阳黄-阴阳黄-阴黄”不同证候分型患者Treg/Th17的表达

目的:检测乙肝相关性慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)"阳黄-阴阳黄-阴黄"不同证候分型患者外周血调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)及其相关细胞因子表达水平,探讨肝衰竭不同中医证候分型的细胞免疫学特征。方法:选择早期、中期、晚期各32例HBV-ACLF并符合"阳黄-阴阳黄-阴黄"中医证候分型的患者,采用流式细胞术检测外周血Treg/Th17细胞频数表达,流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)检测白细胞介素-10(IL-10),转化生长因子-β(TGF-β),白细胞介素-17A(IL-17A),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-23(IL-23)表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测叉状头(或)翅膀状螺旋转录因子(FoxP3),维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt) mRNA表达;采用SPSS 20.0软件进行数据统计处理,分析不同中医证候分型HBV-ACLF患者的Treg/Th17细胞及相关细胞因子的表达特点。结果:HBV-ACLF阳黄证患者主要分布在肝衰竭病程的早期,阴阳黄证主要分布于中期,阴黄证主要分布于晚期;从阳黄证、阴阳黄证到阴黄证Treg,Th17细胞频数逐渐升高,且各组间比较差异性均具有统计学意义(P<0.05);从阳黄证、阴阳黄证到阴黄证,Treg型细胞因子IL-10,TGF-β逐渐升高,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),Th17型细胞因子IL-17A,TNF-α,IL-23逐渐升高,其中IL-17A阳黄组与阴黄组、阴阳黄组与阴黄组比较均有差异性(P<0.05);从阳黄证、阴阳黄证到阴黄证,FoxP3表达逐渐下降,ROR-γt表达逐渐升高,二者组间比较其差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:HBV-ACLF患者早、中、晚期不同病程与中医证型的分布存在一定相关性,Treg,Th17细胞频数及IL-17A,TGF-β,IL-10与中医辨证分型存在相关性,提示Treg,Th17细胞对HBVACLF患者所处病期及中医证候分型辨证有一定参考价值。     

三拗汤对咳嗽变异性哮喘小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响

目的 研究三拗汤对咳嗽变异性哮喘小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响。方法 小鼠通过腹腔注射卵蛋白、氢氧化铝致敏，并吸入卵蛋白激发法建立咳嗽变异性哮喘模型，随机分为空白组，模型组，孟鲁司特钠组，三拗汤低、中、高剂量组，HE、F4/80荧光染色观察肺及支气管组织病理变化、巨噬细胞聚集情况，流式细胞术分析脾脏组织Th17、Treg细胞比例，RT-qPCR检测肺组织TGF-β、IL-6、IL-23、IL-10、IL-17A、IL-17F、IL-4、IL-13 mRNA表达。结果 与模型组比较，三拗汤各剂量组小鼠气管、支气管及血管周围炎性细胞浸润量减少，杯状细胞化减轻，上皮下纤维化和平滑肌体积增加现象缓解，F4/80荧光强度减弱；肺组织TGF-β、IL-17A、IL-17F、IL-4、IL-6、IL-13 mRNA表达降低(P<0.05);脾脏Th17细胞比例、Th17/Treg比值降低(P<0.05)。结论 三拗汤可改善咳嗽变异性哮喘小鼠气管及肺组织炎性病理变化及气道痉挛状态，其机制与调节Th17/Treg免疫平衡及相关细胞因子有关。     

维持性血液透析患者外周血辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡与动脉粥样硬化心血管疾病的相关性分析

目的:探讨维持性血液透析患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡与动脉粥样硬化心血管疾病的相关性。方法:选择2017年12月-2018年12月来本院进行维持性血液透析治疗且伴有动脉粥样硬化的心血管疾病患者40例作为观察组,选择同期健康体检者40名设为对照组。采用酶联免疫吸附测定法和SPSS Pearson相关性分析进行测算,比较两组相关细胞因子水平和相关性数据,对其评估。结果:观察组中IL-17、IL-6因子水平明显高于对照组(P0.05),TGF-β1因子水平低于对照组P0.05)。SPSS Pearson相关性分析结果表明:Th17细胞比例与IL-17、IL-6成正相关,与TGF-β1、IL-10成负相关(P0.05);Treg细胞比例与IL-17、IL-6成负相关,与TGF-β1、IL-10成正相关(P0.05);Th17/Treg比值与IL-17、IL-6成正相关,与TGF-β1、IL-10成负相关(P0.05)。结论:进行维持性血液透析治疗且伴有动脉粥样硬化心血管疾病患者,容易出现外周血辅助性T细胞17/调节性T细胞功能和数量失衡,对于动脉粥样硬化心血管疾病的发病、发展过程中可能起到重要作用。     

小鼠骨髓间充质干细胞对呼吸道合胞病毒毛细支气管炎小鼠模型的免疫调节作用

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎小鼠的免疫调节作用,为毛细支气管炎的治疗提供新的思路和依据。方法采用RSV鼻腔接种法制作毛细支气管炎小鼠模型;通过贴壁培养法体外分离纯化扩增BMSCs,使用第3代(P3)BMSCs作为实验细胞;将60只3周BALB/C小鼠随机分成模型组、BMSCs组、磷酸缓冲液(PBS)组、健康组,每组15只,BMSCS治疗组和PBS组分别经尾静脉注射BMSCs和PBS,24 h后处置,经流式细胞术检测Treg和Th17细胞百分率;收集外周血和肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测IL-4、IFN-γ、IL-10、TGF-β和IL-17细胞因子表达水平。结果与健康组相比,模型组Treg百分率降低,Th17百分率升高,差异均有统计学意义(P均0.01);与模型组相比,BMSCs组Treg百分率升高,Th17百分率下降,差异均有统计学意义(P均0.01)。模型组IL-4、IL-17水平高于健康组(P均0.05),IFN-γ、IL-10、TGF-β水平低于健康组(P均0.05);BMSCs组IL-4、IL-17水平明显低于模型组(P均0.05),IL-10、TGF-β水平明显高于模型组(P均0.05),IL-17表达水平显著高于健康组(P0.05);BMSCs组IL-10、TGF-β表达水平高于模型组(P均0.05)。结论 BMSCs对RSV毛细支气管炎小鼠模型有积极的免疫调节作用,通过纠正Th1/Th2和Treg/Th17失衡,达到治疗毛细支气管炎的作用。     

疏肝平喘方通过转化生长因子-β1/Smad信号通路对哮喘小鼠免疫平衡的影响

目的：阐明疏肝平喘方对哮喘小鼠维甲酸相关核孤儿受体γt（RORγt）/叉头框蛋白P3（Foxp3）以及辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）平衡的干预作用,对转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad信号通路的影响。方法：建立空白对照组、哮喘模型组、疏肝平喘组及地塞米松组实验动物模型。酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-17A（IL-17A）和TGF-β1水平,流式细胞仪检测肺组织中Th17/Treg细胞量,蛋白质印迹法检测肺组织中RORγt、Foxp3的蛋白表达,以及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达水平。结果：疏肝平喘方能够降低哮喘小鼠肺组织IL-6、TGF-β1,与地塞米松比较,差异均有统计学意义（均P<0.05）,调节IL-10、IL-17A,与地塞米松组相当（均P>0.05）;Th17/Treg细胞量,RORγt、Foxp3的蛋白表达量,与地塞米松相当（均P>0.05）。与哮喘模型组比较,疏肝平喘方组、地塞米松组的TGF-β1、Smad2、Smad3的mRNA表达水平下降,而Smad7的mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论：疏肝平喘方在改善气道炎症方面,和地塞米松疗效相当,是通过TGF-β1/Smad信号通路,从而调节哮喘小鼠的Th17/Treg免疫平衡。     

利肺健脾颗粒对慢性阻塞性肺疾病稳定期肺脾气虚患者 Thl7/Treg 平衡的影响

目的:探讨利肺健脾颗粒在慢性阻塞性肺疾病(COPD)免疫调节方面的潜在作用。方法:选取61例肺脾气虚型COPD稳定期患者,按随机数字表法分为治疗组31例和对照组30例,同时选取本院体检中心健康体检者20例为健康组,对照组给予噻托溴铵粉吸入剂治疗,治疗组在对照组的基础上加用利肺健脾颗粒,2组疗程均为2个月。治疗前后观察2组患者临床疗效及生活质量评分(SGRQ),并检测外周血CD4+Th17和CD4+CD25+Treg细胞,ELISA法检测转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-17 (IL-17)、白细胞介素-21 (IL-21)、白细胞介素-35 (IL-35)水平。结果:治疗前,治疗组和对照组CD4+Th17高于健康组,CD4+CD25+Treg及Th17/Treg均低于健康组,差异均有统计学意义(P 0.05)。治疗后,治疗组CD4+Th17较治疗前降低,且低于对照组;CD4+CD25+Treg及Th17/Treg较治疗前升高,且高于对照组;差异均有统计学意义(P 0.05)。治疗前,治疗组和对照组IL-17、IL-21、IL-35水平均显著高于健康组(P 0.05),TGF-β水平低于健康组(P 0.05)。治疗后,治疗组IL-17、IL-21水平较治疗前降低,且低于对照组;IL-35、TGF-β水平较治疗前升高,且高于对照组;差异均有统计学意义(P 0.05)。治疗前,治疗组和对照组圣乔治呼吸问卷总分及症状部分、活动部分、影响部分评分比较,差异均无统计学意义(P 0.05)。治疗后,治疗组和对照组圣乔治呼吸问卷总分及症状部分、活动部分、影响部分评分均较治疗前降低,且治疗组各项评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论:利肺健脾颗粒能通过调节Thl7/Treg平衡而改善COPD患者免疫相关炎症状况。     

消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg免疫平衡的影响

目的:探讨消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg细胞免疫平衡的影响。方法:将75只C57BL/6小鼠随机分为消水方(33.5 g·kg~(-1))组、顺铂(6 mg·kg~(-1))组、消水方(27 g·kg~(-1))+顺铂(6 mg·kg~(-1))组、模型组、空白组。除空白组小鼠胸腔内注射磷酸盐缓冲液(PBS)外,其余各组小鼠均采用Lewis肺癌细胞胸腔注射建立模型,连续给药10 d后各组取10只小鼠处死,采用流式细胞技术检测外周血中Th17,Treg细胞数量;流式微球阵列法(CBA)以及酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-17A(IL-17A),白细胞介素-21(IL-21),白细胞介素-23(IL-23)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脾组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt),叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA及蛋白表达。结果:各组小鼠外周血Th17,Treg细胞数量均高于空白组(P0.05,P0.01)。其中消水方+顺铂组、消水方组较模型组能明显增加Th17细胞数量(P0.05),降低Treg细胞数量(P0.01)。消水方+顺铂组IL-6,IL-17A,IL-21含量分别较其余各组均显著升高(P0.01);消水方+顺铂组较消水方组、模型组IL-23含量升高(P0.05),TGF-β1含量降低(P0.05)。与顺铂组、模型组比较,消水方+顺铂组、消水方组可上调脾组织中RORγt mRNA表达(P0.01),下调Foxp3 mRNA表达(P0.05)。与模型组比较,消水方+顺铂组可上调脾组织RORγt蛋白表达(P0.05),下调Foxp3蛋白表达(P0.01)。结论:消水方联合顺铂可能通过上调Th17细胞水平,下调Treg细胞水平,从而纠正Th17/Treg免疫失衡,发挥抑制MPE作用。     

玉屏风颗粒对过敏性紫癜患儿Th17/Treg细胞失衡的调节作用

目的观察过敏性紫癜(HSP)患儿外周血Th17细胞及其相关因子IL-17和Treg细胞的水平,探讨玉屏风颗粒在调节HSP患儿Th17/Treg细胞失衡的作用以及治疗HSP的疗效。方法将确诊为过敏性紫癜初发的50例儿童,随机分为常规治疗组和玉屏风治疗组,各25例,疗程2周。25名同年龄段儿保科健康体检儿童为健康对照组。分别抽取健康对照组、常规治疗组和玉屏风治疗组治疗前后静脉血,采用流式细胞术检测外周血CD~(4+)CD~(25+)调节性T细胞(Treg)和Th17细胞比例;ELISA法检测血浆中IL-17水平。结果常规治疗组总有效率为68%,玉屏风治疗组总有效率为96%,2组比较有显著性差异(P0.05)。常规治疗组和玉屏风治疗组患儿外周血Th17细胞数及其相关因子IL-17水平较健康对照组明显增高(均P0.05),Treg细胞数较健康对照组明显降低(均P0.05),但常规治疗组患儿Th17、Treg细胞数和IL-17水平与玉屏风治疗组患儿比较差异均无统计学意义(均P0.05)。常规治疗组治疗后Th17细胞数、IL-17水平较治疗前有所下降,Treg细胞数较治疗前有所升高,但差异均无统计学意义(均P0.05)。玉屏风治疗组治疗后Th17细胞数、IL-17水平较治疗前和常规治疗组治疗后明显下降(P0.05),Treg细胞数较治疗前和常规治疗组治疗后明显增高(P0.05)。结论 HSP患儿存在显著的Th17细胞及IL-17水平增高和Treg细胞减少。玉屏风颗粒能在一定程度上降低Th17细胞及IL-17水平,升高Treg细胞水平,增加HSP的疗效。     

复方生地合剂对MRL/lpr小鼠脾脏组织Th17/Treg平衡的影响

目的探讨复方生地合剂治疗系统性红斑狼疮(SLE)的可能作用机制。方法将30只MRL/lpr小鼠(狼疮模型鼠)随机分组为模型组、复方生地合剂组、强的松组,每组10只,另以10只C57BL/6小鼠为空白组。复方生地合剂组给予浓度为2.8g/ml的复方生地合剂人临床等效剂量18.495ml/(kg·d)灌胃,强的松组给予浓度为1.23g/ml强的松片混悬液10ml/(kg·d)灌胃,模型组和空白组给予生理盐水10ml/(kg·d)灌胃,各组均每日1次。连续灌胃8周后检测血清白细胞介素17A(IL-17A)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平,检测脾脏淋巴细胞中辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)水平和脾脏组织维甲酸相关孤核受体(RORγt)和叉头状转录因子p3(Foxp3) mRNA表达。试验期间观察各组小鼠死亡情况。结果复方生地合剂组死亡2只,强的松组死亡1只,模型组死亡3只,空白组无死亡。与空白组比较,模型组小鼠血清IL-17A水平、脾脏组织RORγt mRNA表达升高,脾脏淋巴细胞Th17/CD4~+、Th17/Treg值亦升高,血清TGF-β1水平、脾脏组织Foxp3 mRNA表达、Treg/CD4~+值降低(P0.05或P0.01)。与模型组比较,复方生地合剂组和强的松组小鼠血清IL-17A水平、RORγt mRNA表达、Th17/CD4~+、Th17/Treg值降低,血清TGF-β1水平、Treg/CD4~+值升高(P0.05或P0.01)。复方生地合剂组和强的松组各指标比较差异无统计学意义(P0.05)。结论复方生地合剂可以改善脾脏组织Th17/Treg平衡,可能是其治疗SLE的作用机制之一。     

解毒化瘀Ⅱ方对慢加急性肝衰竭患者免疫重建的影响

目的评价解毒化瘀Ⅱ方治疗慢加急性肝衰竭（ACLF）的临床疗效及对免疫重建的影响。方法将112 例 患者随机分为对照组和观察组,每组各56 例。对照组采用西医综合治疗措施;观察组在对照组的基础上加服 解毒化瘀Ⅱ方,2 组疗程均为8 周。观察两组患者治疗前后细胞免疫[T 淋巴细胞亚群（CD4+、CD8+）、调节性T 细胞（Treg 细胞）、辅助性T 细胞17（Th17）]和相关炎症因子[白细胞介素（IL）-2、IL-10、IL-17、转化生长因子 β1（TGF-β1）]的变化,评价治疗前后终末期肝病模型（MELD）评分和慢性肝衰竭联盟-慢加急性肝衰竭预后 （CLIF-CACLF）评分。结果（1）治疗后,两组患者T 淋巴细胞CD4+、Treg 细胞水平和CD4+/CD8+比值升高 （P＜0.05）,CD8+、Th17 水平和Th17/Treg 比值降低（P＜0.05）,且治疗后观察组CD4+、Treg 细胞水平和CD4+/ CD8+比值高于对照组,CD8+、Th17 水平和Th17/Treg 比值低于对照组（P＜0.05）。（2）治疗后,两组患者IL-2、 IL-17 和TGF-β1 水平降低,IL-10 水平升高（P＜0.01）;且治疗后观察组IL-2、IL-17 和TGF-β1 低于对照 组,IL-10 水平高于对照组（P＜0.01）。（3）治疗后,两组患者MELD 和CLIF-CACLF 评分均降低（P＜0.01）,且 治疗后观察组MELD 和CLIF-CACLF 评分均低于对照组（P＜0.01）。（4）观察组临床总有效率为90.20% （46/51）,高于对照组的75.00%（39/52）（χ2=4.125,P＜0.05）。结论解毒化瘀Ⅱ方联合西医综合治疗可调节 ACLF 患者免疫功能,促进免疫重建,减轻病情严重程度,临床疗效优于单纯西医治疗。