人反义c—myc重组逆转录病毒表达载体pLNC—aM2和pLNC—aM …

ｃ－Ｍｙｃ在血管平滑肌细胞增殖，迁移和表型转换中起着关键作用。为更好地调研ｃ－ｍｙｃ分子中不同区域的作用效应，了解ｃ－ｍｙｃ的转录调控机制，进而找出最佳的反义封闭靶区域，为ＶＳＭＣ增殖和其他增生性疾病的基因治疗提供依据。     

三种反义c-myc逆转录病毒表达载体的纯化、病毒包装、滴度测定及整合检测

为了增强逆转录病毒构建体对靶细胞的转染能力 ,本实验使用 Wizard TMDNA纯化系统对构建成功的三种反义 c- myc逆转录病毒表达载体进行了纯化 ,并经脂质体介导包装 PA317细胞 ,使用 NIH 3T3细胞测定了 PA317抗性细胞克隆的病毒滴度 ,用 neo基因 PCR扩增检测外源基因的整合情况。结果显示纯化后的DNA达到了真核细胞转染的要求 ,但其包装滴度的高低还受靶细胞生长状态、 PA317抽样量的高度影响 ,而neo基因 PCR检测是一种敏感、经济和可靠的基因整合检测法     

人反义c-myc重组逆转录病毒表达载体pLNC-aM2和pLNC-aM3的构建

ｃ－Ｍｙｃ在血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）增殖、迁移和表型转换（收缩型→合成型）中起着关键作用。为更好地调研ｃ－ｍｙｃ分子中不同区域的作用效应，了解ｃ－ｍｙｃ的转录调控机制，进而找出最佳的反义封闭靶区域，为ＶＳＭＣ增殖和其他增生性疾病的基因治疗提供依据，我们采用分子克隆技术，分别构建了人ｃ－ｍｙｃ第１、第２和第３外显子的反义逆转录病毒表达载体。本文将介绍第２，３外显子反义载体ｐＬＮＣ－ａＭ２和ｐＬＮＣ－ａＭ３的构建过程。     

嵌合性硫代磷酸修饰的反义c—myc寡脱氧核苷酸对动脉平滑？…

目的：血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）迁移在血管成形术后再狭窄的发生中起着关键作用。ｃ－ｍｙｃ是对多种刺激ＳＭＣ迁移的生长因子作出迅速早期反应的基因。推测采用与ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ互补的寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ）的反义战略可达到抑制ＳＭＣ迁移的目的。方法：将嵌合性硫代磷酸修饰的反义ｃ－ｍｙｃＯＤＮ通过ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ导入ＳＭＣ后,采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ ｃｈａｍｂｅｒ方法检测ＳＭＣ的迁移率。结果：反义ｃ－     

嵌合性硫代磷酸修饰的反义c—myc寡脱氧核苷酸对动脉平滑？…

探讨ｃ－ｍｙｃ基因表达在血管平滑肌细胞增殖信号传导通路中的作用和采用反义ｃ－ｍｙｃ寡脱氧核苷酸抑制血管平滑肌细胞增殖的作用。方法采用对大鼠ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ包括ＡＵＧ在内的释译起始区的前５个密码子的嵌事性硫代修饰的反义ｃ－ｍｙｃ寡脱核氧苷酸,     

c—myc的基因调节作用

ｃ－ｍｙｃ是一个在细胞生长、分化、凋亡和细胞周期中起重要作用的核内癌基因，它对自身基因有自调节作用，而且结构上的特殊性，可能还存在着自身反义调节作用。而且还可能作为复制因子影响其他基因的ＤＮＡ复制。     

大肠粘膜c—myc蛋白和增殖细胞核抗原表达的相关性…

本文ｃ－ｍｙｃ癌基因蛋白和增殖细胞核抗原免疫组织化学方法，研究了它们在正常大肠粘膜，结肠炎，腺瘤和腺癌中的表达。发现结肠炎和肿瘤ｃ－ｍｙｃ蛋白和ＰＣＮＡ阳性率较正常粘膜高。在管状腺瘤，管状绒毛状腺瘤和绒毛状腺瘤，阳性率呈进行性增加，但没有统计学意义。ｃ－ｍｙｃ蛋白和ＰＣＮＡ表达呈相关性。肿瘤中阳性细胞呈异质性，所以要得到可靠的研究结果应多点取材。     

c—myc的结构和功能

ｃ－ｍｙｃ是ｍｙｃ癌基因家族中最重要的一员，其编码产物ｃ－ｍｙｃ蛋白属核蛋白类，其基因结构具有独特性，可作为转录因子在细胞周期、细胞增殖、分化、凋亡、肿瘤发生、转移等生理病过程中发挥重要作用，近期研究还发现该基因与增生性心血管病的发生发展和肝糖酵解等代谢活动息息盯关，并可能作为复制因子影响ＤＮＡ昨制过程，业已引起学得们的广泛注意。本文就将就上述进行综述。     

淋巴组织增生性疾病组织中c—myc基因表达及其 …

目的：探讨ｃ－ｍｙｃ基因的表达与淋巴瘤发生及其与ＥＢ病毒ＬＭＰ基因的关系，方法：用免疫组织化学方法，对２１２例以前作过程ＥＢ病毒ＬＭＰ（潜伏感染膜蛋白）基因原位杂交检测的淋巴组织增生性疾病组织中，ｃ－ｍｙｃ基因的表达进行检测，结果：显示ｃ－ｍｙｃ阳性率霍奇金淋巴瘤（ＨＤ）为８３．６７％，非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）为８４．３４％，均显著高于淋巴组织良性增生病例ｃ－ｍｙｃ阳性率（５４．２８％）（Ｐ〈０．     

介导RA538与反义c—myc腺病毒对肿瘤细胞的作用及其分 …

目的 比较全反式维甲酸诱导基因ＲＡ５３８及反义ｃ－ｍｙｃ对人胃癌细胞的生物学特性，并探讨其作用的分子机理。方法 采用细胞生长曲线、ＤＮＡ梯度降解试验、原位末端标记、流式细胞仪、逆转录－聚合酶链反应、蛋白质印迹分析、裸鼠致瘤性、裸鼠皮下移植瘤模型实验等方法，对ＲＡ５３８、反义ｃ－ｍｙｃ重组腺病毒在人胃癌细胞系（ＳＧＣ７９０１）中的生物学作用及其分子机理进行体外研究。结果 ＲＡ５３８及反义ｃ－ｍｙｃ重     

逆转录病毒载体介导的HSVtk基因表达及提高重组逆转录病毒滴度的研究

目的 探讨逆转录病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSVtk)基因表达及提高逆转录病毒滴度的措施。方法 将HSVtk基因插入逆转录病毒载体pRevTRE中,构建重组逆转录病毒载体。通过微乒乓感染法导入包装细胞PA317中,以潮霉素B筛选克隆细胞,浓缩克隆细胞上清制备重组逆转录病毒。在不同时间及不同丁酸钠浓度下,检测分析经筛选获得阳性克隆靶细胞中有无HSVtk基因的表达及如何获得高滴度的重组病毒液。结果 成功构建了重组逆转录病毒载体RevTRE／tk,制备的重组病毒感染靶细胞后有HSVtk基因的表达。结论 通过微乒乓感染法在包装细胞PA317培养30h和10mmol／L丁酸钠浓度下,经冷冻超速离心能获得携HSVtk基因的高滴度逆转录病毒颗粒,为其基因治疗的应用及研究奠定了基础。     

c—myc转录的调控

ｃ－ｍｙｃ是一个结构特殊、功能众多的核内癌基因，其表达改变可导致细胞生长、增殖和分化等重要生物性状的改变。故本文对ｃ－ｍｙｃ转录和后转录的调控和影响因素作一综述，以便于了解其表达改变机理的研究进展。     

骨肉瘤N—ras,c—myc基因异常及其蛋白产物的表达

目的：探讨癌基因Ｎ－ｒａｓ，ｃ－ｍｙｃ及其蛋白表达与骨肉瘤的关系，方法：Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和免疫组织化学（ＬＳＡＢ法）同步检查９例人骨肉瘤Ｎ－ｒａｓ，ｃ－ｍｙｃ癌基因和其ｐ２１ｒａｓｃ－ｍｙｃ蛋白产物表达，结果：Ｎ－ｒａｓ基因１例有为失改变，检出率１１％（１／９），ｃ－ｍｙｃ基因有３例为扩增改变，检出率３３％（３／９），ｐ２１ｒａｓ，ｃ－ｍｙｃ基因蛋白表达阳性率分别为７８％（７例），８９％（     

食管癌变过程中p53,c—myc,bcl—2表达及其与细 …

探讨食管癌变过程中肿瘤抑制基因Ｐ５３５ 基因ｃ－ｍｙｃ，ｂｃｌ－２的变化及其与细胞凋亡的关系。方法：采用免疫组化法检测２７９例食管粘膜活检组织中ｐ５３－，ｃ－ｍｙｃ，ｂｃｌ－２的表达以及细胞凋亡的关系。结果：从食管正常上皮到基底细胞增生，间变和部，ｐ５３，ｃ－ｍｙｃ－ｂｃｌ－２免疫阳怀表达率及细胞凋亡发生率和细胞凋亡指数均呈升高趋势，而且在同一阶段病变，ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ阳性地凋亡指数高于其阴性表     

一种提高重组逆转录病毒滴度的收集法

一种提高重组逆转录病毒滴度的收集法李和伟，王志永，刘彤华（北京协和医院病理科北京１００７３０）　为提高逆转录病毒介导的基因转移效率，高滴度的重组病毒是必要条件之一。影响包装细胞分泌产生重组病毒的因素很多，本文就提高病毒滴度方面进行了研究。培养基ＩＭＤ...     

广西地区肝癌中c—myc和N—ras癌基因的原位表达？…

目的：分析了广西地区地癌中ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ癌基因的表达与乙型肝病毒（ＨＢＶ）感染的关系及其在肝癌发生中的作用。方法：应用原位ｃＤＮＡ－ＲＮＡ杂交方法和免疫组化方法检测３１例广西地区肝癌和相应癌旁组织中ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ、Ｎ－ｒａｓｍＲＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｘＡｇ。结果：肝癌及癌旁均有较高的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因的表达。检出率都在８５％以上，其在不同发化程度肝癌中的表达差异无显著性意义     

乳腺癌中凋亡与细胞增殖及Rb,bcl—2,c—myc蛋白表？…

目的：了解人乳腺癌中凋亡与细胞增殖的关系，以及与相关基因蛋白表达的关系及其预后意义。方法：用免疫组化ＬＳＡＢ法检测了９０例腺标本（包括１３例良性乳焦和７７例乳腺癌）中Ｒｂ、ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ的蛋白表达，并计数了癌组织中的凋亡指数（ＡＩ、ＴＵＮＥＬ法）和有丝分裂指数（ＭＩ）结果：ＡＩ与ＭＩ呈正相关；ＡＩ、Ｍ少Ｒｂ蛋白表达与肿瘤大小和组织学分级有关，ＡＩ、ＭＩ低和ｂｃｌ－２的高表达与５年生存率有关     

人肝癌和癌旁组织c—myc基因扩增,转录和表达的研究

应用１４例配对的肝切除标本，系统性地探讨了肝癌和癌旁组织ｃ－ｍｙｃ基因扩增，ｍＲｎａ转和ｃ－ｍｙｃ基因产物表达水平的变化。肝癌和癌旁组织未见ｃ－ｍｙｃ基因扩增，原位杂交检测可见１１例癌组织，１００例癌旁组织ｍＲＮＡ转录水平增加。