IgD的分子生物学

脊椎动物可以产生抗体对外源性物质进行应答,这种应答是由抗原特异性相同而效应功能不同的多种抗体的相继产生完成的。抗体的效应部位或种类是由其重链恒定区(C_H区)决定的。在小鼠,已发现有8种免疫球蛋白:IgM、IgD、IgG_3、IgG1、IgG2b、IgG2a、IgE和IgA、H链用相应的希腊字母表示,在12号染色体DNA上编码它们的基因依次为μ、δ、γ~3、γ~1、γ~(2b)、γ~(2a)、ε、α。轻     

儿童铁缺乏对血清IgG亚类及PnPs特异性IgG亚类抗体的影响

本文测定铁缺乏症患儿血清IgG亚类(47例)和PnPs特异性IgG_1、IgG_2抗体(18例)。发现47例缺铁儿童中28例伴IgG亚类缺陷,各亚类缺陷检出率依次为:IgG_4 27.66％(13/47)、IgG_1 21.28％(10/47)、IgG_2 14.89％(7/47)、IgG_2 2.13％(1/47)。与同龄正常儿童比较,缺铁组血清IgG_4和IgG_1均值以及PnPs特异性IgG_1、IgG_2抗体水平明显降低;缺铁患儿外周血CD~+_4细胞百分率及CD~+_4/CD~+_8细胞比值降低,IL-6活性、T淋巴细胞增殖反应减低。缺铁时反复呼吸道感染率(占63.83％)亦明显增高。提示缺铁不仅致T细胞功能受损,B细胞功能亦明显障碍。     

不同亚型磷脂抗体在人群中的诊疗价值

目的 探讨不同亚型(IgG、IgM和IgA型)抗心磷脂抗体(aCL)和不同亚型(IgG、IgM和IgA型)抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2GP1抗体)在中国人群中的诊疗价值.方法 采用病例对照研究,选取2019年3月至2020年3月在北京顺义区医院就诊患者共900例(其中抗磷脂综合征45例),40例健康对照者.采用化学发光免疫测定法(CLIA),分别采用IgG、IgM和IgA单亚型试剂检测aCL和aβ2GP1抗体,在不同人群中的分布情况.正态分布数据的结果用均值标准差表示,两组间比较采用t检验,工作特征曲线(ROC)计算曲线下面积(AUC).采用Logistic回归分析确定APS患者aPL同型阳性与临床表现之间的关系.SPSS 24.0对数据进行统计分析.结果 总体aCL患病率为9.23％,其中IgG亚型aCL最常见为8.44％,IgM和IgA亚型aCL患病率仅为2.78％和2.33％.总体aβ2GP1抗体患病率为10.1％,其中IgM亚型aβ2GP1抗体患病率最高为7.56％,其次IgG亚型aβ2GP1抗体患病率为6.11％,最低IgA亚型aβ2GP1抗体患病率为2.11％.IgG、IgM和IgA亚型单独抗体阳性率分别为57.8％、19.2％和3.61％;在aβ2GP1抗体阳性的受试者中,IgM、IgG、IgA单独阳性率分别为51.6％、20.1％和2.19％.与健康对照组相比,APS患者的aPL亚型特异性抗体阳性率明显升高.不同亚型APS抗磷脂抗体结果显示,总体PAPS和SPAPS,aCL和aβ2GP1抗体患病率分别为55.6％和57.8％,与PAPS相比SAPS患者aCL的阳性检出率更高(χ2=16.42,P<0.001;χ2=7.812,P=0.005).结论 IgG、IgM型抗心磷脂抗体和aβ2GP1抗体在诊断及判断病情程度中的应用优于其他亚型,IgA型抗心磷脂抗体和IgA抗β2糖蛋白1抗体为临床的诊疗价值极低,无论在实验室还是在临床实践中,IgA aPL的存在并没有为中国人群的APS诊断提供附加价值.     

抗恶性疟单抗独特型决定簇的第二单克隆抗体的制备和鉴定

本文以分泌抗恶性疟疾红内期抗体的小鼠杂交瘤细胞系94D1诱生的腹水,通过Protein A-Sepharose cL-4B亲和层析法,纯化IgG,并以此作为免疫原皮下多点免疫Wistar大鼠。加强免疫后3天取脾与小鼠Sp2/0瘤细胞进行异种间的细胞融合,经间接ELISA法检测筛选和5次克隆化,最终得到一株生长稳定,连续分泌特异抗体的异种杂交瘤细胞系41RF5。经过多次冷冻和复苏以及体外连续传代培养6个月,其稳定性与小鼠×小鼠杂交瘤细胞相近。选择8株单抗和Sp2/0 IgG作为包被抗原,即6株抗恶性疟单抗:21E3、92D4(IgG2b)、93A3(IgG_1)、94B5(IgG_1)、94C_3(IgG_1)和94D1(IgG2b),1株抗猪尾猴疟原虫(Plas mc-dium inui)红内期单抗32A12(IgG_1)和1株抗登革热Ⅲ型病毒单抗215D3(Ig-G2b),用间接ELISA法对41RF5特异性进行鉴定,结果显示,41RF5单抗只与94D1呈阳性反应,与其余各种包被抗原均呈阴性反应,表明41RF5具有良好的抗94D1单抗独特型决定簇的特异性,41RF5培养上清中特异的抗体效价为1:1,28O。     

Fcgr2b基因及H-2复合体对SLE模型小鼠IgG抗体产生的调节作用

目的:分析Fcgr2b基因对SLE小鼠血清总IgG抗体产生的影响;Fcgr2b基因单独及Fcgr2b基因与H-2复合体共同作用对SLE小鼠血清IgG抗DNA抗体产生的调控。方法:建立(NZB×NZW)F1×NZW回交小鼠模型,用特异性荧光抗体染色,流式细胞术检测及PCR技术进行基因分型,以ELISA法测定血清总IgG及抗DNA抗体水平进行分析比较。采用扩增片段长度多态性(AmpFLP)分析NZB,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区是否有多态性。结果:(NZB×NZW)F1×NZW回交小鼠Fc-gr2b基因B/W型组血清总IgG水平明显高于W/W型组(P<0.0001)。Fcgr2b基因独作用时,回交小鼠Fcgr2b基因B/W型组与W/W型组间血清IgG抗DNA抗体水平差异不显著(P>0.05)。Fcgr2b基因与H-2复合体共同作用时,H-2复合体为d/z型时,无论Fcgr2b基因是B/W型或W/W型,其血清IgG抗DNA抗体水平明显高于含H-2复合体Z/Z型组(P<0.01);H-2复合体为d/z型时,含Fcgr2b基因B/W型组血清IgG抗DNA抗体水平明显高于W/W型组(P<0.01)。NZB小鼠Fcgr2b基因启动子区扩增片段长度短于非自身免疫病小鼠NZW,C57BL/6及BALB/c小鼠,提示可能存在碱基缺失。结论:血清总IgG水平由Fcgr2b基因调控;IgG抗DNA抗体产生主要由H-2复合体调控,Fcgr2b基因单独作用对该抗体产生的影响不明显,但与H-2复合体具有协同作用。     

白细胞介素2和单克隆抗体联合介导的两种不同抗肿瘤活性机制

作者报道抗B cell CD_(19)抗原单抗IgG_2a亚类对裸鼠移植淋巴瘤Daudi 有抑制作用,且可由IL-2的加入而增强,但IgG_1和IgG_2b 亚类单独无抗瘤反应。若将IgG_1或IsG_2b 亚类单抗与IL-2联合应用则显示体     

抗小鼠IgGκ链免疫血清的制备及其在单克隆抗体分析测定中的应用

小鼠IgG有IgG_1、2a、2b及3四个亚类,其含量相当悬殊、但IgG的轻链95％是к型。以IgG为抗原,要制备同时含有四个亚类抗体活性的多克隆抗体是不太容易的。因而,近几年来,国外已制备出抗小鼠к型轻链的抗血清,可广泛地用于对单克隆抗体的分析、测定及纯化。目前,国内尚缺少这种试剂,国外的抗小鼠к型轻链价格昂贵,活性又低。科研和临床的需要,急待制备出高质量的抗鼠к链抗血清。     

抗CRP杂交瘤单克隆抗体的制备及研究

应用杂交瘤技术融合Sp2/0瘤细胞与CRP免疫的BALB/c小鼠脾细胞,经选择培养和细胞克隆,建立了4株抗CRP特异性单克隆抗体分泌细胞株242B3、242C4、263A5与263B5,其染色体均在Zn=62～67间,抗体Ig鉴定分别为IgG2a、IgG2a、IgG2b和IgG2b腹水抗体效价为1～3×10~(-5)。     

小鼠IgG_1抗血清的制备

<正> 小鼠IgG分有IgG_1、IgG_(2a)、IgG_(2b)和IgG_3四种亚类,现用B淋巴细胞杂交瘤所分泌的单克隆抗体(McAb),均属一定的Ig及其亚类,因此需用相应的抗血清进行鉴定。这类抗血清制备较难、国内尚无产品供应。我们利用杂交瘤细胞在培养液中分泌的McAb为原料,经纯化和免疫家兔,制得较为满意的兔抗鼠IgG_1血清,鉴于本法操作简便、经济实效,特介绍如下。     

双分沁功能IgM、IgG2a单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定

应用HB_sA_g采取两种不同的免疫方法免疫小鼠后。取免疫的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,筛选出两株抗HB_s的单克隆抗体杂交瘤细胞株。常规免疫方法获得的细胞株为WHB_s1,分泌IgG1。脾内免疫方法获得的细胞株WHB_s2,分泌IgM和IgG_(2a)抗体。经过3个月的连续培养,能稳定分泌效价高,特异性强的单克隆抗体。     

小鼠IgG亚类抗血清的制备

<正> 近年来,国内应用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)的工作迅速开展,急需鉴定小鼠 Ig 类及其亚类。我室在制备成功小鼠 IgG_1抗血清的基础上,相继制备成功成套的抗小鼠 IgG_1、IgG_(2a)、IgG_(2b)、IgG_a 四种抗血清。现简介如下。     

三种类型CpG-ODN作为蛋白亚单位疫苗佐剂的比较研究

目的 比较A、B和C3种类型CpG-ODN在动物模型中的疫苗佐剂活性,为设计高活性的新型人用疫苗佐剂提供理论基础.方法 用不同CpG-ODN刺激体外培养的小鼠脾细胞,检测上清中的IFN-γ和IgM,从而确定3种类型的CpG-ODN.以基因工程乙肝表面抗原(HBsAg)为模型抗原、不同类型CpG-ODN为佐剂免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测被免动物血清中抗原特异性ISG、IgG1和IgG2a抗体.结果 小鼠免疫结果表明,与Al(OH),对照组相比,3种类型CpG-ODN均具有良好的疫苗佐剂活性,但B和C型CpG-ODN诱生的抗原特异性IgG和IgG2a抗体水平远高于A型CpG-ODN.虽然A型CpG-ODN也能够显著增强总抗体水平,但并不改变IgG1和IgG2a抗体亚型的比值.这与B和C型CpG-ODN能够极大地促进TH1类免疫应答并降低IgG1/IgG2a比值明显不同,提示不同类型CpG-ODN可能通过不同机制起到疫苗佐剂作用.结论 不同类型CpG-ODN具有不同疫苗佐剂活性,B和c型CpG.ODN在小鼠体内的体液免疫佐剂效果优于A型CpG.ODN.     

弗氏佐剂与氢氧化铝佐剂对诱导小鼠获得性免疫应答作用的比较

为研究、比较不同佐剂对诱导小鼠产生获得性免疫应答的不同作用,以卵清白蛋白(OVA)为抗原,分别混合完全弗氏佐剂(CFA)或Al(OH)3佐剂,对C57BL/6小鼠进行常规免疫,采用流式细胞技术对细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4进行检测;ELISA方法对特异性抗OVA抗体滴度及抗体亚型进行了检测。结果显示在免疫后CFA组产生以IFN-γ为主的细胞因子而Al(OH)3组产生以IL-4为主的细胞因子;两组中均产生特异性抗OVA IgG抗体,但CFA组以IgG2a亚型为主,而Al(OH)3组则以IgG1亚型为主,不产生IgG2a亚型抗体。实验表明,经CFA加抗原免疫后机体产生的免疫应答以Th1型细胞免疫为主,抗体类型为IgG2a;而Al(OH)3佐剂则诱导机体产生Th2型细胞免疫应答,抗体类型为IgG1。     

抗福氐2a志贺氐菌单克隆抗体的抗原特异性鉴定

本文报道以BALB/c小鼠分别用f2a全菌,粗制外膜蛋白(OMP)及进一步提纯的OMP免疫。从获得的杂交瘤中选出4株,分别命名为:3A6(全菌免疫,IgG_3),C5(粗制OMP免疫,IgG_1),1A1(精提OMP免疫,IgG_1),2A3(精提0MP免疫,IgG)。 玻片凝集试验和间接免疫荧光试验:McAb 3A6 C5均与f2a菌呈强阳性反应,与其他     

免疫球蛋白G亚类缺陷病

采用单克隆抗体酶联免疫吸附试验,对5例2～8(10/12)岁反复呼吸道感染患儿的血清免疫球蛋白(Ig)G亚类作了测定,21例同龄健康儿童作为对照组。结果发现IgG_1缺乏症2例;IgG_2-G_4/IgG_2缺乏症2例;另1例血清总IgG、IgM和IgA均下降,IgG亚类呈比例降低,诊断为常见变异型免疫缺陷病(CVID)。     

大肠癌单克隆抗体对体外培养人大肠癌细胞的影响

本文研究了五种小鼠抗人大肠癌单克隆抗体:Ga_3(IgG_(2a))、Aa_2(IgG_(2b))、Hb_3、Cb_5、CC-1(IgM)对体外培养人大肠癌细胞株HRT-18的影响。结果发现在没有补体及效应细胞存在的情况下,Ga_3、CC-1、Cb_5三种抗体能不同程度地抑制靶细胞生长,其中Ga_3作用较强,且呈剂量依赖型。Ga_3还能单独抑制靶细胞在软琼脂中形成瘤落,且同样与剂量相     

异种胸腺修饰对大鼠抗豚鼠天然抗体产生的影响

为观察异种胸腺修饰对大鼠抗豚鼠天然抗体产生的影响 ,将供体豚鼠和受体SD大鼠随机分成对照组 (a组 )、全身照射组 (b组 )、照射 +胸腺注射组 (c组 ) ,a组大鼠腹腔内注射经处理的豚鼠脾淋巴细胞 (5× 10 6个 ) ,7d后流式细胞仪法检测抗豚鼠IgM及IgG类天然抗体水平的变化 ,b、c组在腹腔注射异种抗原前 17d接受全身照射 ,c组大鼠另在全身照射后 3d接受胸腺内豚鼠脾淋巴细胞注射。结果表明 :a组和b组中 ,腹腔注射后两类天然抗体的水平均明显上升 (P <0 0 1) ,c组中 ,腹腔注射后IgM类的水平亦明显上升 (P <0 0 1) ,而IgG类上升受抑。提示异种胸腺修饰能抑制IgG类天然抗体的生成 ,但对IgM类天然抗体的产生无明显影响。     

豚鼠过敏抗体的分离纯化及在PCA试验中作用规律的初步研究

目的 建立豚鼠Ⅰ型过敏反应模型,对致敏血清中过敏抗体(IgE、IgG)进行初步分离纯化,并探讨过敏抗体的作用特点.方法 以卵白蛋白(OVA)和Al(OH)_3作为免疫原制备豚鼠Ⅰ型过敏反应模型,ELISA法检测抗体含量,用饱和硫酸铵沉淀、Protein A柱亲和层析的方法 对致敏血清中IgE、IgG抗体进行初步分离纯化,以豚鼠连续被动皮肤过敏试验分别观察两种抗体在致敏后不同时间激发时引起皮肤蓝斑的变化情况.结果 模型组和对照组血清中IgE抗体含量分别为719.3750ng/ml、2.5250 ng/ml,IgG抗体吸光度(A)值分别为0.9921、0.0174,模型组两种抗体含量均比对照组显著升高(P<0.05).豚鼠9 d连续被动皮肤过敏试验中,IgE抗体在5 d PCA时产生的蓝斑直径达到最大,之后持续存在;IgG抗体在2 d PCA时产生蓝斑直径最大,之后迅速下降.结论 成功将致敏血清中两种过敏抗体进行了初步分离纯化,IgE和IgG抗体均参与了豚鼠Ⅰ型过敏反应,IgG抗体较IgE抗体可能作用更为迅速、短暂,有可能成为疫苗Ⅰ型过敏反应毒理学评价的另一主要指标.     

抗磷脂抗体与狼疮性肾炎的相关性研究北大核心CSCD

目的:探讨抗心磷脂抗体(aCL)IgG、IgM、抗β2-糖蛋白1(β2-GP1)抗体IgG、IgM及其他指标与狼疮性肾炎(LN)和系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法:检测LN及无肾脏累及的SLE患者aCL(IgG、IgM)、抗β2-GP1抗体(IgG、IgM)、C3、C4、抗ds-DNA抗体、肌酐、尿蛋白等指标,判断其与LN和SLE疾病相关程度。结果:LN组与无肾脏累及的SLE组患者肌酐、尿蛋白定量和IgG型抗β2-GP1差异有统计学意义(P=0.005、P=0.000、P=0.003);IgG、IgM型aCL、IgM型抗β2-GP1抗体阳性率、抗ds-DNA抗体、C3、C4水平差异无统计学意义(P>0.05)。进一步对SLEDAI评分分组,LN组IgG型aCL(P=0.048,r=0.318)与LN疾病活动呈弱正相关,而C3(P=0.005,r=-0.439)与LN疾病活动呈中等程度的负相关;LN组IgM型aCL、IgG、IgM型抗β2-GP1抗体浓度、尿蛋白定量、抗ds-DNA抗体、C4、肌酐水平与疾病活动程度无相关性(P>0.05)。无肾脏累及的SLE组以上各项指标与疾病活动程度均无相关性(P>0.05)。结论:LN患者血清中C3、IgG型aCL与疾病进展相关,可作为LN疾病诊治过程中的辅助诊断指标。     

安泰吉(北京)生物技术有限公司

<正>大鼠、小鼠抗体亚型快速检测卡媲美ELISA灵敏度,用于检测杂交瘤培养上清和纯化抗体的重链亚类和轻链亚型。小鼠亚型检测卡可鉴定IgG1、IgG2a、IgG2b、Kappa、Lambda和IgM。大鼠亚型检测卡可鉴定IgG1、IgG2a、lgG2b、IgG2c、Kappa、Lambda、IgA和IgM。