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小鼠凋亡相关新基因TFAR19 cDNA的克隆化和序列分析 总被引:16,自引:0,他引:16
目的:了解一个细胞凋亡相关新基因TFAR19在不同种属间的序列同源性。方法:利用表达序列标签(expresedsequencetag,EST)拼接技术、RTPCR、DNA序列测定技术及计算机分析技术。结果:首次成功进行了小鼠TFAR19cDNA编码区的cDNA克隆化和序列分析,发现小鼠和人TFAR19在核苷酸水平上有81.4%的同源性,在氨基酸水平上有高达96%的同源性。功能区分析发现,小鼠TFAR19cDNA序列含编码126个氨基酸的开放性读码框架,含1个可能的cAMP和cGMP依赖的蛋白激酶磷酸化位点,4个可能的PKC磷酸化位点。其C端的“EDDADY”序列与人DNA拓扑异构酶I141147位残基序列完全相同。结论:小鼠TFAR19是与人TFAR19高度同源的新基因,与DNA拓扑异构酶I可能有功能相关性。 相似文献
2.
人高亲和力IgE受体 (FcεR1)由 1条α链、1条 β链和两条γ链构成。我们建立的编码膜外区α链的膜外区α链 (αtcDNA)与文献对比[1 ,2 ] ,有两处发生碱基置换 ,该置换是否会导致αt蛋白的抗原表位改变 ,是否会影响与IgE的结合 ,为此我们进行了抗原表位预测。1 方法 人FcεR1膜外区α链氨基酸序列见图 1,αtk代表Kochan分离克隆的cDNA推导出的氨基酸序列[2 ] ;αts表示由我们克隆的cDNA序列推导出的氨基酸序列[1 ] 。划横线代表两处由碱基置换所致的氨基酸替换 ,分别为 13 4位的组氨酸→精氨酸 (H… 相似文献
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小鼠凋亡相关新基因TFAR19 cDNA的克隆化和序列分析 总被引:8,自引:0,他引:8
目的;了解一个细胞凋亡相关新基因TFAR19在不同种属间的序列同源性。方法;利用表达序列标签小鼠TFAR19 cDNA拼接技术,RT-PCR,DNA序列测定技术及计算机分析技术。结果:首次成功进行了小鼠TFAR19 cDNA编码区的cDNA克隆化和序列分析,发现小鼠和人TFAR19在核苷酸水平上有81.4%的同源性,在氨基酸水平上有高达96%的同源性。功能区分析发现,小鼠TFAR19 cDNA序列 相似文献
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人干细胞因子在大肠杆菌中的表达研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 经过改造重组人干细胞因子(human stem cell factor,hSCF),提高其表达量。方法 应用人工合成寡核苷酸引物及PCR技术,改变人工干细胞因子hSCF cDNA起始密码子ATG与SD序列之间的距离及在翻译起始区(即N端氨基酸)部分采用大肠杆菌(E.coli)喜用型密码子的策略,使重组表达质粒pBV220-hSCF在E.coli中获得高效稳定表达。结果 DNA序列测量证明基因 相似文献
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目的:获取有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白受体5(human monocyte chemotactic receptor 5,huCCR5)。方法:从人PBMC中提取总RNA和poly(A)^+RNA,而后经反转录合成cDNA第一链,再以PCR扩增出huCCR5 cDNA并插入融合表达载体pcDNA3.0的BamHⅠ和HindⅢ位点,转化大肠杆菌TG-1,挑取克隆,酶切鉴定,序列分析。结果:克隆出长度为1056bp,编码352个氨基酸的huCCR5 cDNA。并分析证明与该基因超家族氨基酸有80%同源性,与国外发表资料比较有3个碱基突变。结论:克隆出人单核细胞趋化蛋白5受体,为今后基础研究提供了较有用的材料。 相似文献
6.
目的:克隆可表达人胶质细胞源性神经营养因子的基因。方法:从脑胶质细胞瘤患者术后的脑瘤组织中提取总RNA,以RTPCR方法扩增出了一段约558bp的cDNA片段,将这一片段克隆于pUC18载体中,进行全序列分析。结果:证实该研究所克隆的cDNA是编码正确的人GDNF基因。与发表于GeneBank上的序列相比,发现该研究克隆的基因有一段78bp的核苷酸序列缺失,但不影响密码子的阅读框。结论:克隆到了编码正确的人GDNF的cDNA全序列,对帕金森病基因治疗的基础研究及临床应用具有重要意义。 相似文献
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采用PCR二段扩增法,从酵母基因组中获取635bp完整的MFα(α-mating factor)基因及180bp的UASPGK(3-磷酸甘油酸激酶基因的上游激活序列)DNA片段。首先,将430bp的MFα基因启动子和信号序列与180bpUASPGK片段分别克隆到PUC18载体上;然后,从含有MFα基因启动子和信号序列的阳性重组子pMFα1与含有UASPGK阳性重组子pUAS8质粒中,分别获得MFα 相似文献
8.
目的:对由PCR扩增的血管内皮细胞生长因子(VEGF165)cDNA编码N-24位氨基酸错误配对的密码子ACG(应为AGC丝氨酸)进行校正。方法:用一个化学合成的寡聚脱氧核苷酸片断作为诱变引物对VEGF165)cDNA编码N-24位氨基酸错误配对的密码子进行体外定点突变。转化子经打点杂交及温度梯度洗膜,筛选出突变子,再DNA序列分析。结果:VEGF165cDNA编码N-24位氨基酸错误配对的密码子变为AGC(丝氨酸)。结论:该突变方法可靠,省时,实用。 相似文献
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遗传性因子Ⅶ缺乏症一家系基因分析 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 鉴定遗传性凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺乏症一家系的FⅦ基因突变。方法 应用聚合酶链反应(PCR)分段从基因组DNA扩增出先证者及正常人的FⅦ基因各显子DNA片段,经PCR产物直接测序法,分析各片段序列;采用PCR结合限制性内切酶HgiC Ⅰ酶切分析先证者及其家系成员的FⅦ基因组DNA片段。结果 先证者的FⅦ基因第329密码子存在TGT→GGT错义突变;限制性内切酶酶切的结果确证先证者为C329G纯合型突变,家系中有3个成员为C329G杂合型突变。结论 在国内外首次发现存在于遗传性FⅦ缺乏性患者的FⅦ基因第329密码子TGT→GGT突变,导致所编码的半胱氨酸被甘氨酸替代;PCR结合限制性内切酶HgiC Ⅰ酶切分析可用于该突变的快速诊断。 相似文献
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大鼠肝再生增强因子编码区的cDNA克隆和原核表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:克隆大鼠肝再生增强因子(ALR)编码区cDNA并进行原核表达。方法:提取新生大鼠肝脏总RNA为模板,以寡聚dT为引物逆转录合成第一链cDNA,再以我们设计的PCR引物进行PCR扩增获取大鼠肝再生增强因子编码区双链cDNA;以基因重组技术构建大鼠ALR的原核表达质粒,然后将重组表达质粒转化至大肠杆菌内以IPTG诱导表达。结果:成功克隆出大鼠肝再生增强因子编码区cDNA,其序列与以前报道的完全一致;构建的大鼠ALR原核表达重组质粒在大肠杆菌内高效表达rALR融合蛋白,其表达量占菌体蛋白30%。结论:大鼠肝再生增强因子编码区cDNA的克隆及其在大肠杆菌的高效表达为ALR的深入研究奠定了基础。 相似文献
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[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。 相似文献
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醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。 相似文献
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报告20例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。17例男性,3例女性。年龄7~56岁。痊愈19例,另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理,诊断和合并畸形的处理进行了讨论。 相似文献
15.
目的以研究方法LiPA(Line Probe Assay)分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果(1)87位患者以sic(88.5%)和m2a(63.2%)分布为主,未发现s1b和s2;(2)混合菌株感染率为41.4%,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高(62.5%),与北京(41.0%)和南宁(20.8%)相比具有显著性差异,P〈0.01;(3)北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;(4)溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。 相似文献
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以^3氢-胸腺嘧啶核苷放射自显影法及HE染色,观察并分别测定了18例正常子宫内膜增殖中期,15例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示:子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之LI均明显高于增殖中期。同时,增殖晚间质细胞之MI也明显高于增殖中期,即此两种细胞在增殖晚期中增生明显,其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。 相似文献
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《中国现代医生》2019,57(36):77-79
目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月~2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1~4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。 相似文献
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阴道炎1236例病原检查分析 总被引:1,自引:0,他引:1
对1236例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查;结果,细菌感染900例,念珠菌234例,滴虫102例。900例细菌经鉴定;葡萄球菌300例,阴道加特纳菌276例,淋病奈瑟菌170例,其它细菌124例。结果表明,葡萄球菌,阴道加特纳菌,淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。 相似文献
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目的 讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法 分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果 术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论 颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率 相似文献
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碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法:通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果:碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论:碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。 相似文献