5μg／L碱性成纤维细胞生长因子促脂肪来源干细胞的增殖

背景：碱性成纤维细胞生长因子作为一种具有强烈促进新生血管生成和脂肪细胞增殖分化作用的细胞因子,在临床上广泛应用于自体脂肪移植术。目的：观察不同质量浓度的碱性成纤维细胞生长因子对脂肪来源干细胞促增殖的影响,分析促进脂肪来源干细胞增殖的适合浓度。方法：从抽脂术得到的脂肪组织当中分离培养脂肪来源干细胞,观察细胞形态及生长情况。分别配制含有0,5,10,20,40,80,60μg／L碱性成纤维细胞生长因子的培养液培养脂肪干细胞。连续7d应用MTT法检测脂肪来源干细胞的增殖。结果与结论：碱性成纤维细胞生长因子有明显促进脂肪来源干细胞增殖的作用,第3天开始出现明显的促增殖作用,第5,6天达到高峰。实验组各质量浓度之间对脂肪来源干细胞的促增殖作用无明显差异,周围环境中碱性成纤维细胞生长因子的质量浓度达到5μg／L即可对脂肪来源干细胞起到明显的促进作用,增加剂量促增殖作刚无明显改变。     

碱性成纤维细胞生长因子影响脂肪干细胞的血管内皮迁移

背景：良好血运机制的建立是工程化组织成功植入的关键。 目的：观察外源性碱性成纤维细胞生长因子对植入小鼠皮下的人脂肪来源干细胞-透明质酸钠复合物中人脂肪来源干细胞向血管内皮迁移情况的影响。 方法：由吸脂术所得的脂肪组织中分离提取人脂肪来源干细胞进行培养传代,取第3代人脂肪来源干细胞进行cm-dil荧光标记后制成 5×10^9 L-1的细胞悬液,碱性成纤维细胞生长因子配成2 mg/L的工作液。将由0.25 mL透明质酸钠凝胶、0.2 mL细胞悬液和0.05 mL工作液/DMEM混合制成的碱性成纤维细胞生长因子组/对照组移植物分别植入小鼠背部左右两侧皮下作自身对照,6周后取材,行苏木精-伊红染色和免疫荧光标记血管内皮细胞进行观察分析。 结果与结论：植入处未出现结节、坏死及液化,取材时无凝胶残留。苏木精-伊红染色见标本性质多为脂肪组织及疏松结缔组织。荧光显微镜下仍可见标记人脂肪来源干细胞的cm-dil荧光,其与标记小鼠血管内皮的FITC荧光重合数碱性成纤维细胞生长因子组多于对照组（P〈0.05）。提示碱性成纤维细胞生长因子促进透明质酸钠支架中的人脂肪来源干细胞向血管内皮迁移、分化。     

碱性成纤维细胞生长因子与不同来源间充质干细胞的调控

4 体外培养条件下人骨髓间充质干细胞碱性成纤维细胞生长因子基因的转染与鉴定郑有华（中山大学光华口腔医学院口腔颌面外科,广东省广州市510055）     

碱性成纤维细胞生长因子与表皮生长因子对神经干细胞增殖与分化的影响

目的:如何促进神经干细胞的增殖并诱导其向目的细胞类型分化是神经科学界研究的热点。本文就碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子在神经干细胞增殖、分化中的调节作用进行综述。资料来源:应用计算机检索PUBMED1998-01/2006-03期间的相关文章,检索词为“bFGF,EGF,nerve stem cells”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库2000-01/2006-03期间的相关文章,检索词为“碱性成纤维细胞生长因子,表皮生长因子,神经干细胞”,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与碱性成纤维细胞生长因子/表皮生长因子在神经干细胞增殖、分化中的调节作用研究相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到78篇相关文献,32篇文献符合纳入标准,排除的46篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的32篇文献中,8篇涉及神经干细胞的研究现状,10篇涉及碱性成纤维细胞生长因子对神经干细胞增殖、分化的作用及其机制,4篇涉及表皮生长因子对神经干细胞增殖、分化的作用及其机制,8篇涉及碱性成纤维细胞生长因子与表皮生长因子合用对神经干细胞增值、分化的影响,5篇涉及碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子对神经干细胞作用的比较。资料综合:①神经干细胞具有自我更新能力,在不同微环境中可增殖、分化为不同干细胞以及不同类型的成熟组织细胞,微环境中的多种细胞因子对其分化方向起着决定性的作用。②碱性成纤维细胞生长因子具有强大的促神经干细胞增殖作用,可激活中枢神经系统不同区域的神经元前体细胞潜在的再生能力,细胞增殖或分化呈碱性成纤维细胞生长因子浓度依赖性。③表皮生长因子既能促进神经干细胞的生长,也可促进其分化为神经元及神经胶质细胞。表皮生长因子促细胞增殖作用也呈浓度依赖性。④大多神经干细胞培养中都联合应用碱性成纤维细胞生长因子与表皮生长因子,从而提高神经干细胞增殖和分化的效率。⑤目前对表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的作用差异认识不统一。结论:碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子都具有较强的促进神经干细胞增殖和分化的作用,均属于神经干细胞培养中重要的神经促生长因子,其促细胞增殖和分化作用呈浓度依赖性。     

碱性成纤维细胞生长因子对胚胎干细胞来源集落形成细胞的作用

背景:有研究表明,在卵黄囊造血、胎肝造血和在胚胎干细胞向造血干细胞分化过程中,碱性成纤维细胞生长因子可强烈表达.目的:在拟胚体培养阶段施加碱性成纤维细胞生长因子,验证碱性成纤维细胞生长因子对集落形成细胞产生的调控作用.方法:购买小鼠胚胎干细胞D3细胞系,取第3～5代小鼠原代胚胎成纤维细胞,加入新配制含丝裂霉素C的DMEM生长培养基孵育2.5 h,使饲养层细胞失去增殖能力;加入胰酶消化适度,离心后制成单细胞悬液,以10×104/cm2的密度种至用明胶包被的培养瓶中,放入孵箱内培养24 h之后使用.复苏胚胎干细胞D3细胞并将其接种于饲养层细胞之上.在拟胚体培养阶段按培养基成分不同分为2组:对照组(标准培养基+血管内皮生长因子+干细胞因子组)、实验组(标准培养基+血管内皮生长因子+干细胞因子+碱性成纤维细胞生长因子组).各组于培养3,6d时分别计数克隆形成数,通过免疫荧光法检测Flk-1+细胞表达情况,并用IMAGE-PRO PLUS图像分析系统统计阳件细胞数及平均吸光度值.结果与结论:与对照组比较,在拟胚体培养阶段加入碱性成纤维细胞生长因子可显著增加集落形成细胞的数量(P＜0.01),Flk-1阳性细胞数及平均吸光度值也显著增加(P＜0.01).证明碱性成纤维细胞生长因子能够有效地促进胚胎体的扩增以及成血管血液干细胞的产生与增殖.     

碱性成纤维细胞生长因子促神经再生的实验研究

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对神经再生的影响。方法:用硅胶管桥接大鼠坐骨神经6mm长的缺损,管内注入生理盐水稀释的bFGF,对照组注入等量的生理盐水,分别于术后1、3、5周作神经电生理检查及组织形态学检查。结果:bFGF组运动神经传导速度、复合肌肉动作电位振幅、神经纤维密度、轴突直径、髓鞘厚度均优于对照组。结论:bFGF能促进神经再生。     

国产碱性成纤维细胞生长因子对人神经干细胞体外增殖分化的影响

目的：探讨国产碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factoy，bFGF)对体外培养人神经干细胞增殖、分化的影响，以期寻找一种简便、经济、可靠的人神经干细胞体外培养、增殖的方法。方法：实验于2003—06／2004—03在安阳肿瘤医院临床实验室进行。机械分离8—16周胎龄水囊引产新鲜人胚胎纹状体区脑组织，用DMEM／F12无血清培养基进行培养，加不同剂量的国产bFGF刺激细胞增殖、传统方法进行传代培养，免疫组化染色对培养的细胞进行鉴定。结果：培养体系中加人终浓度28Au／mL的国产bFGF时，神经干细胞生长旺盛，形成大量悬浮状态的神经球，而且形成的神经球经多次传代仍呈悬浮球生长，绝大多数表达神经上皮干细胞蛋白(Nestin)。结论：用廉价的国产bFGF作为丝裂原体外培养人胚胎纹状体区脑组织，能获得大量神经干细胞，可以为中枢神经系统疾病神经干细胞移植治疗提供经济、可靠的细胞来源。     

国产碱性成纤维细胞生长因子对人神经干细胞体外增殖分化的影响

目的:探讨国产碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfac-tor,bFGF)对体外培养人神经干细胞增殖、分化的影响,以期寻找一种简便、经济、可靠的人神经干细胞体外培养、增殖的方法。方法:实验于2003-06/2004-03在安阳肿瘤医院临床实验室进行。机械分离8～16周胎龄水囊引产新鲜人胚胎纹状体区脑组织,用DMEM/F12无血清培养基进行培养,加不同剂量的国产bFGF刺激细胞增殖、传统方法进行传代培养,免疫组化染色对培养的细胞进行鉴定。结果:培养体系中加入终浓度28Au/mL的国产bFGF时,神经干细胞生长旺盛,形成大量悬浮状态的神经球,而且形成的神经球经多次传代仍呈悬浮球生长,绝大多数表达神经上皮干细胞蛋白(Nestin)。结论:用廉价的国产bFGF作为丝裂原体外培养人胚胎纹状体区脑组织,能获得大量神经干细胞,可以为中枢神经系统疾病神经干细胞移植治疗提供经济、可靠的细胞来源。     

碱性成纤维细胞生长因子在人体脂肪移植中的应用

目的:碱性成纤维细胞生长因子可促进再血管化过程,有利于脂肪细胞的成活。观察碱性成纤维细胞生长因子在自体脂肪移植治疗面部凹陷畸形中的作用效果。方法:选择2001-11/2006-03于南昌大学第二附属医院整形美容科采用自体脂肪移植治疗面部凹陷畸形的患者60例,共73个部位,所有患者均排除器质性病变且知情同意。按随机数字表法分为2组,每组30例。取出的脂肪经过清洗、过滤备用。①碱性成纤维细胞生长因子组在要移植的脂肪中加入10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子和庆大霉素液,每100mL脂肪颗粒中加入庆大霉素8万单位及碱性成纤维细胞生长因子2万单位。②对照组只加入庆大霉素液不加碱性成纤维细胞生长因子。术后半年随访,观察一次注射后的治疗效果。评估标准:凹陷充填后丰满平坦,双侧对称满意者为优;凹陷充填后较丰满平坦,双侧基本对称较满意者为良。结果:①术后半年随访,本组60例患者均使凹陷部位得到不同改善,无一例发生感染、液化及干酪样坏死等并发症。②术后半年碱性成纤维细胞生长因子组优良率为87%,对照组优良率为57%,两组相比差异具有显著性意义(P<0.05)。结论:碱性成纤维细胞生长因子可以促进人体移植脂肪的存活,改善面部凹陷畸形脂肪移植的术后效果。     

载碱性成纤维细胞生长因子纳米缓释系统与骨髓间充质干细胞的增殖

背景：课题组运用发酵技术开发出了一种新型多聚羟基烷酸——羟基丁酸与羟基辛酸共聚物,不仅具有聚羟基烷酸的通性,而且其柔韧性与加工性能得到较大改善。目的：检测羟基丁酸与羟基辛酸共聚物载碱性成纤维细胞生长因子纳米微球对骨髓间充质干细胞增殖活性的影响。方法：采用W1/O/W2超声乳化法制备羟基丁酸与羟基辛酸共聚物载碱性成纤维细胞生长因子纳米微球,采用全骨髓法培养骨髓间充质干细胞,按照培养液中所含成分不同分为3组：碱性成纤维细胞生长因子组、纳米微球组、对照组,其中前两组碱性成纤维细胞生长因子的有效质量浓度分别设为10,20,50μg/L。结果与结论：共培养第1,3天,碱性成纤维细胞生长因子组与纳米微球组吸光度值比较差异无显著性意义（P〉0.05）,但吸光度值显著高于对照组（P〈0.05）,即碱性成纤维细胞生长因子对骨髓间充质干细胞具有明显促增殖作用;第5,7天纳米微球组吸光度值高于碱性成纤维细胞生长因子组（P〈0.01）,即纳米微球缓慢释放碱性成纤维细胞生长因子,明显提高生物利用度;第10天纳米微球组细胞仍然有较强的增殖能力,与其他2组比较差异有显著性意义（P〈0.01）,而此时碱性成纤维细胞生长因子组、对照组间差异已无显著性意义（P〉0.05）。结果说明纳米微球对碱性成纤维细胞生长因子具有良好的缓释作用,能发挥较为持久的生物学效应,可以持续促进骨髓间充质干细胞增殖。     

碱性成纤维细胞生长因子的成骨细胞增殖和分化的影响

目的：明确外源性碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对成同细胞生长的影响。方法：用体外培养的SD大鼠的成骨细胞，加入不同浓度的bFGF（10－100ng/ml)，培养24h后，通过MTT检测法，增殖细胞核抗原免疫组化分析及细胞碱性磷酸酶量的测定观察bFGF对成骨细胞的增殖和分化的影响。结果：bFGF在此浓度范围内能明显促进成骨细胞生长，细胞内ALP含量下降，结论：bFGF可以明显刺激成骨细胞的增殖，对细胞的分化无促进作用。     

碱性成纤维细胞生长因子促进猫角膜内皮细胞的增殖作用

背景:有实验报道,碱性成纤维细胞生长因子能改变角膜内皮细胞形状、促进其分裂和趋化,刺激活体和体外角膜内皮细胞的损伤修复.目的:观察碱件成纤维细胞生长因子对猫角膜内皮细胞增殖的影响.设计、时间及地点:细胞肜态学观察实验,2005-01/2006-12在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成.材料:家猫购买自青岛大学医学院附属医院动物实验中心.方法:猫角膜内皮细胞原代培养,行NSE免疫组织化学染色鉴定细胞的类型、纯度及生理特性.传1代后,分别在培养液中加1,10,100 μ L的碱性成纤维细胞生长因子,继续卵化1～5 d.主要观察指标:加药后第1,3,5天分别利用MTT法测定在490 nm处的吸光度值来判断角膜内皮细胞增殖情况;同时应用倒置相筹显微镜观察细胞形态及透射电镜检测细胞超微结构.结果:碱性成纤维细胞生长因子作用组加药后1,3,5 d,MTT法测定猫角膜内皮细胞在490 nm处的吸光度值明显高于对照组,其中10 μ g/L作用组差别最显著.结论:碱性成纤维细胞生长因子作用能促进猫角膜内皮细胞的增殖,相对有效浓度为10 μ g/L.     

碱性成纤维细胞生长因子影响成骨细胞黏附与增殖的实验

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞黏附性与成骨细胞DNA合成的影响。方法：实验于2004-08／12在广州军区广州总医院中心实验室完成。取2只健康新西兰大白兔骨髓基质细胞来源的成骨细胞体外培养。①光镜下观察成骨细胞形态。②进行不同浓度碱性成纤维细胞生长因子（0．1，1，10，100mg／L）诱导成骨细胞，设空白对照，于1，2，4，8h共4个时间点采用体视学计量黏附细胞数量。③流式细胞仪进行细胞DNA含量分析。结果：①成骨细胞特性观察：光镜下成骨细胞呈多角形或梭形表达出高碱性磷酸酶活性。②碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞黏附性的影响：碱性成纤维细胞生长因子浓度为1．0-10mg／L时细胞黏附数呈剂量依赖性，达到100mg／L时，细胞黏附数反而下降，时间到8h后，与对照组间无明显差异。③碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞DNA合成的影响：增殖指数显示碱性成纤维细胞生长因子浓度为1.0～10mg／L时呈剂量依赖性，到100mg／L时，指数略有下降，但仍显著高于对照组。结论：①碱性成纤维细胞生长因子浓度在1.0-10mg／L时可提高成骨细胞的黏附性。②碱性成纤维细胞生长因子浓度在1.0～10mg／L时可促进成骨细胞DNA合成，到100mg／L作用减弱。③碱性成纤维细胞生长因子可调节成骨细胞的黏附与增殖。     

碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞增殖和分化的影响

目的 :明确外源性碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对成骨细胞生长的影响。方法 :用体外培养的SD大鼠的成骨细胞 ,加入不同浓度的bFGF( 10～ 10 0ng/ml) ,培养 2 4h后 ,通过MTT检测法、增殖细胞核抗原免疫组化分析及细胞碱性磷酸酶量的测定观察bFGF对成骨细胞的增殖和分化的影响。结果 :bFGF在此浓度范围内能明显促进成骨细胞生长 ,细胞内ALP含量下降。结论 :bFGF可以明显刺激成骨细胞的增殖 ,对细胞的分化无促进作用     

碱性成纤维细胞生长因子影响成骨细胞黏附与增殖的实验

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞黏附性与成骨细胞DNA合成的影响。方法:实验于2004-08/12在广州军区广州总医院中心实验室完成。取2只健康新西兰大白兔骨髓基质细胞来源的成骨细胞体外培养。①光镜下观察成骨细胞形态。②进行不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(0.1,1,10,100mg/L)诱导成骨细胞,设空白对照,于1,2,4,8h共4个时间点采用体视学计量黏附细胞数量。③流式细胞仪进行细胞DNA含量分析。结果:①成骨细胞特性观察:光镜下成骨细胞呈多角形或梭形表达出高碱性磷酸酶活性。②碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞黏附性的影响:碱性成纤维细胞生长因子浓度为1.0～10mg/L时细胞黏附数呈剂量依赖性,达到100mg/L时,细胞黏附数反而下降,时间到8h后,与对照组间无明显差异。③碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞DNA合成的影响:增殖指数显示碱性成纤维细胞生长因子浓度为1.0～10mg/L时呈剂量依赖性,到100mg/L时,指数略有下降,但仍显著高于对照组。结论:①碱性成纤维细胞生长因子浓度在1.0～10mg/L时可提高成骨细胞的黏附性。②碱性成纤维细胞生长因子浓度在1.0～10mg/L时可促进成骨细胞DNA合成,到100mg/L作用减弱。③碱性成纤维细胞生长因子可调节成骨细胞的黏附与增殖。     

碱性成纤维细胞生长因子与不同来源间充质干细胞的调控：本刊中文部

1碱性成纤维细胞生长因子与猴骨髓间充质干细胞增殖及向神经元前体细胞分化：不同质量浓度对诱导剂隐丹参酮作用有差异吗？     

酸性成纤维细胞生长因子促血管内皮细胞增殖的实验研究

目的：探讨酸性成纤维细胞因子（aFGF）对体外培养的大鼠主动脉内皮细胞生长的影响。方法：通过组织块培养法获取主动脉内皮细胞。将aFGF(10ng/ml）加入内皮细胞的培养液中作为实验组，不加aFGF的作为对照组。分别在24、48和72小时行细胞计数。结果：从大鼠主动脉成功地获取了内皮细胞。3天内，实验组和对照组的主动脉内皮细胞都有不同程度地增殖，24小时内两组无明显区别，48小时和72小时两组相比有非常明显的统计学差别（P＜0．01）。结论：aFGF有非常明显的促进血管内皮细胞生长的作用，可能对缺血性心脏病的促血管形成治疗有较大的帮助。     

碱性成纤维细胞生长因子基因转染免骨髓间充质干细胞

背景:碱性成纤维细胞生长因子对于创伤修复具有明显的促进作用,但局部应用难以持久地发挥作用.目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染至兔骨髓间充质干细胞后的表达情况.设计、时间及地点:细胞基因学体外观察,于2009-03/08在云南大学生命科学院完成.材料:日本大耳白兔1只,购于昆明医学院动物科.pCDNA3.1质粒为美国Invitrogen产品.方法:抽取兔髂前上棘骨髓,采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,待细胞融合至培养瓶底80%时消化传代.参考GeneBank碱性成纤维细胞生长因子cDNA序列设计合成基因,电泳纯化后xhol I、BamH I双酶切回收凝胶,以限制性核酸内切酶对PcDNA Vector质粒进行酶切、电泳和凝胶回收,连接碱性成纤维细胞生长因子DNA与PcDNA Vector质粒,构建pCDNA-碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体,运用脂质体转染法将重组体转染至兔骨髓间充质干细胞中,并筛选稳定转染株.主要观察指标:骨髓间充质干细胞表面抗原的表达,Western blot法检测目的蛋白的表达.结果:流式细胞仪检测结果示所培养细胞表面抗原呈CD90,CD44阳性,CD45呈阴性;免疫组化检测结果示骨髓间充质干细胞血管源性细胞表面抗原CD34呈阴性,而相对特异性标记物CD44呈阳性.转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞提取的细胞裂解液中,在M_r 23 000处有一条明显阳性杂交带;而转染pCDNA3.1(-)空载体的骨髓间充质干细胞提取蛋白未见阳性条带.结论:实验成功地将碱性成纤维细胞生长因子基因转染至兔骨髓间充质干细胞,该目的基因可稳定表达.     

碱性成纤维细胞生长因子的生物活性分析

目的 探讨生物提取及重组碱性成纤维细胞生成因子（bFGF)的生物学活性。为进一步进行基础与临床研究提供依据。方法 将bFGF作用于体外原代培养人脐静脉血管内皮细胞，利用噻唑蓝（MTT）方法，观察对DNA合成的影响。利用鸡胚绒毛囊膜体内试验，观察bFGF对活体血管新生的影响。结果 体外和体内活性试验均证实：当bFGF&;gt;10ng/ml时，细胞生长呈明显的抑制状态，而bFGF＜0．01ng/ml呈现明显生长不良状态。结论 bFGF具有广泛的生物学功能，其生物活性的测定为基础与临床的研究提供了实验室依据。     

碱性成纤维细胞生长因子的生物活性分析

目的探讨生物提取及重组碱性成纤维细胞生成因子(bFGF)的生物学活性。为进一步进行基础与临床研究提供依据。方法将bFGF作用于体外原代培养人脐静脉血管内皮细胞,利用噻唑蓝(MTT)方法,观察对DNA合成的影响。利用鸡胚绒毛囊膜体内试验,观察bFGF对活体血管新生的影响。结果体外和体内活性试验均证实:当bFGF>10ng/ml时,细胞生长呈明显的抑制状态,而bFGF<0.01ng/ml呈现明显生长不良状态。结论bFGF具有广泛的生物学功能,其生物活性的测定为基础与临床的研究提供了实验室依据。