4种媒介蚊种的氨基酸代谢

为观察蚊细胞系在生长、繁殖过程中氨基酸的代谢，用国内常见蚊虫细胞系Ｃｐｐ５１２、Ａａｌｂ１０５、Ａｎｓｏ２４２及Ａｎａ１０４作１８种氨基酸代谢动态观察。结果表明，除Ａａｌｂ１０５外，其它３种地谷氨酸和谷氨酰胺需量特别大。亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸等则变化不明显，而丝氨酸、甘氨酸和组氨酸均有些增加。天门冬氨酸在Ａａｌｂ－１０５、Ｃｐｐ５１２和Ａｎｓｏ２４２培养液中为下降，而在Ａｎａ１０４中为增高。苏氨酸在Ａｎａ１０４和Ａｎｓｏ２４２培养液中含量增高明显，而在Ｃｐｐ５１２中却下降。鸟氨酸和脯氨酸在Ａｎｓｏ２４２培养液中含量增高明显。苯丙氨酸含量在Ａｎａ１０４和Ａｎｓｏ２４２培养液中呈下降趋势，而在Ａａｌｂ１０５和Ｃｐｐ５１２中变化不显著。这些代谢特点造就了它们各自生理、生态、遗传和传病等方面的特征，也为更合     

中华按蚊卵巢细胞系的建立和特征

体外培养的蚊细胞不仅可用以从细胞水平上研究蚊虫的生理、生化、遗传、毒理及与病原体之间的关系,而且在蚊虫的防治研究中越来越发挥着重要的作用。转基因蚊虫的研究须在蚊细胞水平上的基因表达和调控研究为基础。最近还从Sidbis病毒构建了蚊细胞基因转移载体,正用于发展超级蚊虫病毒杀虫剂。同时亦为蚊细胞用于基因工程产业打下了基础。目前,按蚊中已建立4种蚊细胞系,但都以新孵幼虫为材料,我们建立了按蚊中第一个卵巢细胞系——中华按蚊卵巢细胞系,命名为Anso242。材料和方法     

两种按蚊细胞的游离氨基酸代谢的研究

蚊虫的组织和血淋巴中含有比哺乳类动物高得多的游离氨基酸,这些氨基酸除作为合成蛋白质的单位外,还参与渗透压的调节、形态变异和生殖过程,并且与蚊媒对疟原虫的敏感性有关。蚊虫的游离氨基酸检测在分类学、毒理学及宿主与病毒的关系研究中都具有意义。蚊体内氨基酸的研究受多种复杂因素的影响,应用蚊细胞系在细胞水平上     

大链壶菌感染对致倦库蚊幼虫体内蛋白质及游离氨基酸的影响

目的 从生物有机化学的角度探讨大链壶菌的灭蚊机制。方法 采用生物分析化学技术测定正常蚊幼虫（蚊幼）与感染大链壶菌后不同时期蚊幼组织中蛋白质含量和26种游离氨基酸的变化。结果 正常蚊幼体内蛋白质随时间延长明显增加，而实验组蚊幼在被感染后24h和48h其体内蛋白质增加的幅度明显低于对照组，游离氨基酸测定结果显示，感染开始时，感染组蚊幼体内丝氨酸（Ser)含量明显低于对照组，组氨酸（His)含量明显高于对照组；感染24h,Ser,牛磺酸（Tau)，苏氨酸（Thr)，谷氨酸（Glu)，谷氨酰胺（Gln)，丙氨酸（Ala)，甲硫氨酸（Met)。酷氨酸（Tyr)，γ-氨基丁酸（Gaba)含量明显低于对照组，半胱氨酸（Cys)。瓜氨酸（Cit),His含量明显高于对照组；感染48h，羟脯氨酸（HyP)，胱硫醚（Hcy)，异亮氨酸（Ile)。亮氨酸（Leu)。苯丙氨酸（Phe),Gaba,His含量与对照组差异不明显，Cys,γ-氨正己酸（Aad),Cit明显高于对照组，其余氨基酸含量明显低于对照组，结论 大链壶菌感染引起蚊幼体内蛋白质及多种游离氨基酸含量的变化，导致体内营养代谢与生理功能紊乱，阻碍了蚊幼的正常发育和生命活动，是造成蚊幼死亡的重要原因。     

大链壶菌感染对致倦库蚊幼虫体内蛋白质及游离氨基酸的影响

目的　从生物有机化学的角度探讨大链壶菌的灭蚊机制。　方法　采用生物分析化学技术测定正常蚊幼虫 (蚊幼 )与感染大链壶菌后不同时期蚊幼组织中蛋白质含量和 2 6种游离氨基酸的变化。　结果　正常蚊幼体内蛋白质随时间延长明显增加 ,而实验组蚊幼在被感染后 2 4 h和 4 8h其体内蛋白质增加的幅度明显低于对照组。游离氨基酸测定结果显示 ,感染开始时 ,感染组蚊幼体内丝氨酸 (Ser)含量明显低于对照组 ,组氨酸 (His)含量明显高于对照组 ;感染 2 4 h,Ser、牛磺酸 (Tau)、苏氨酸 (Thr)、谷氨酸 (Glu)、谷氨酰胺 (Gln)、丙氨酸 (Ala)、甲硫氨酸 (Met)、酪氨酸 (Tyr)、γ-氨基丁酸(Gaba)含量明显低于对照组 ,半胱氨酸 (Cys)、瓜氨酸 (Cit)、His含量明显高于对照组 ;感染 4 8h,羟脯氨酸 (Hyp)、胱硫醚(Hcy)、异亮氨酸 (Ile)、亮氨酸 (L eu)、苯丙氨酸 (Phe)、Gaba、His含量与对照组差异不明显 ,Cys、γ-氨正己酸 (Aad)、Cit明显高于对照组 ,其余氨基酸含量明显低于对照组。　结论　大链壶菌感染引起蚊幼体内蛋白质及多种游离氨基酸含量的变化 ,导致体内营养代谢与生理功能紊乱 ,阻碍了蚊幼的正常发育和生命活动 ,是造成蚊幼死亡的重要原因     

三种按蚊血淋巴元素含量的比较

应用ＩＣＡＰ－９０００型等离子原子发射光谱仪检测嗜人按蚊、中华按蚊和斯氏按蚊的初羽化和吸血后５ｄ蚊血淋巴元素含量，比较了１２种元素含量的差异。结果表明，嗜人按蚊与中华按蚊相比，２种元素有显著性差异，１０种元素为非常显著性差异；嗜人按蚊与斯氏按蚊相比，１２种元素均有非常显著性差异；中华按蚊与斯氏按蚊相比，初羽化蚊有１种元素有显著性差异，１１种元素有非常显著性差异，吸血后蚊１２种元素均有非常显著性差异。提示不同蚊种其血淋巴元素含量亦明显不同。     

肝脏衰竭中的氨基酸

全肝缺失时血浆直链氨基酸进行性增加,但支链氨基酸轻度降低。在人类慢性肝脏衰竭时可观察到类似的异常。血浆浓度最高者为蛋氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、门冬氨酸和谷氨酸,升高2～4倍。急性暴发性肝脏衰竭中,除支链氨基酸外,血浆中全部氨基酸的浓度均有相当的增高,以蛋氨酸增高最显著,可高至27倍。在脑脊液中,谷氨酰胺最为突出,其绝对浓度至少为任何其它的氨基酸的20倍。但在急性肝昏迷中,蛋氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和脯氨酸相对增高多一些。     

抗纹媒中肠抗体对冈比亚按蚊生殖率和死亡率影响的研究

目的 探讨冈比亚按蚊中肠抗原抗媒介免疫的作用。进一步研究抗媒介疫苗抗原。方法 解剖室内饲养的冈比亚按蚊雌蚊中肠，立即置于冷的pH7.4PBS溶液中，用SDS-PAGE方法获得分子质量为43ku中肠蛋白抗原，皮下注射免疫大白兔3次，获得的免疫血浆膜饲冈比亚按蚊成蚊，与对照组比较，观察其对冈比亚按蚊死亡率和生殖率的影响。结果 膜饲免疫血浆的冈比亚按蚊的死亡率与对照组相比显著增高，死亡率增加56%，生殖率明显下降，实验组蚊虫平均产卵率为71.4个，对照组为88.1个，下降18.7%。结论 采用有效的方法分离蚊媒中肠的关键性抗原一中肠蛋白抗原可能成为抗蚊媒和其它抗媒介疫苗的靶抗原。     

斯氏按蚊配子体激活因子活性变化与产卵的关系

目的探讨斯氏按蚊唾液腺中疟原虫配子体激活因子的变化趋势与蚊卵发育及产出的关系。方法应用体外雄配子体出丝观察方法检测雌性斯氏按蚊唾液腺抽提物及卵巢匀浆上清中配子体激活因子对伯氏疟原虫雄配子体出丝诱导活性的动态变化;分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Bradford蛋白分析法检测两器官蛋白成分或含量的变化。结果吸血后按蚊唾液腺抽提物的出丝诱导活性显著下降,未产卵组和产卵组按蚊的活性分别于吸血后第8日和第4日恢复到吸血前水平;卵巢匀浆上清的诱导活性亦在吸血后下降,吸血后第2日显著升高,未产卵组保持该活性水平至吸血后第8日,产卵组诱导活性于吸血后第4日(产卵翌日)回落。两组按蚊唾液腺蛋白组成未见明显区别;吸血后第2日,卵巢的蛋白含量达到峰值,未产卵组按蚊卵巢蛋白含量维持在高水平直至吸血后第6日,而产卵组按蚊卵巢蛋白含量在吸血后第4日则恢复到吸血前的水平。结论按蚊唾液腺中配子体激活因子的消长与雌蚊体内蚊卵的发育、成熟及产出之间存在某种内在的生理联系。     

体外培养蚊细胞的生长条件及蚊细胞系的建立

蚊细胞系的建立对于深入研究蚊及其传播的病原体具有重要意义。二十多年来,国内外已从十多种蚊建立了近四十个细胞系。本文对体外培养蚊细胞的生长条件及建立蚊细胞系的方法作了概述。蚊细胞在体外的生长需要碳水化合物(常用葡萄糖,或果糖、海藻糖等)、脂类(固醇、脂肪及脂肪酸等)、氨基酸(较蚊本身需求更多,包括15种必需氨基酸)及其它微量物质等营养成分,同时也需要相对稳定的渗透压及适宜的温度和pH值。在培养细胞的标准化方面,目前倾向于以化学成分明确的哺乳类细胞培养基取代化学成分不明确的无脊椎动物细胞培养基,以无血清或低血清培养基取代含血清的培养基。目前,蚊细胞系的建立及保存已成为标准化的技术程序。在原代培养阶段,合理选择消毒剂及消毒时间,尽量使组织少受伤害而保持最大活力,是细胞系建立的关键。传代可根据不同蚊种的不同组织细胞采用机械吹打或胰酶消化法分散细胞。冷冻蚊细胞一般以含10～20％保护剂(二甲基亚砜或甘油)的培养基制备细胞悬液(200～600万个细胞/毫升),保存于液氮(-196℃)中。通过快速升温复苏。