miR-18b对胃癌细胞凋亡的影响

目的 探讨微小RNA( microRNA,miRNA)-18b(miR-18b)对胃癌细胞系SGC-7901凋亡的影响,并对其机制进行初步研究.方法 miR-18b inhibitor对SGC-7901细胞进行转染;流式细胞仪进行细胞凋亡检测;Western blot检测P53、Bcl-2的表达变化.结果 在SGC-7901细胞中抑制miR-18b的表达,能够促进细胞凋亡,并能降低凋亡相关蛋白P53、Bcl-2的表达.结论 miR-18b在胃癌的发生、发展中起一定作用,其可能通过调节P53、Bcl-2的表达而影响细胞凋亡.     

甲醛致肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡作用

目的 研究甲醛诱导肾上腺嗜铬细胞损伤特征及机制。方法 将肾上腺嗜铬细胞瘤细胞与不同浓度甲醛(20,40,80,160μmol/L)共培养,24h以后用四甲基偶氮噻唑蓝比色法检测细胞活力;Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡;分光光度法检测乳酸脱氢酶漏出量;硝酸还原酶法检测细胞上清液一氧化氮含量;生化法检测总一氧化氮合酶活性和诱导型一氧化氮合酶活性;磷酯酰丝氨酸结合蛋白-异硫氢酸荧光素/碘化丙啶双染法、流式细胞仪分析细胞死亡;免疫着色实验技术检测半胱氨酸蛋白酶-3前体表达。结果 20～160μmol/L甲醛诱导细胞死亡,低剂量甲醛(<80μmol/L)主要诱导凋亡,高剂量甲醛(>80μmol/L)主要诱导细胞坏死;细胞乳酸脱氢酶漏出量具有甲醛浓度依赖性,从(374.04±15.64)U/L增加至(800.18±24.84)U/L,且一氧化氮含量逐渐升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。甲醛浓度依赖性诱导总一氧化氮合酶及型一氧化氮合酶活性表达增加,半胱氨酸蛋白酶-3前体蛋白酶原表达随甲醛浓度逐渐增强;氨基胍保护组细胞损伤明显减轻。结论 甲醛呈浓度依赖性诱导肾上腺嗜铬细胞瘤细胞死亡;机制与半胱氨酸蛋白酶激活有关;氨基胍对细胞损伤有保护作用。     

腹腔镜与开放手术治疗肾上腺嗜铬细胞瘤的临床对照研究

目的 探讨腹腔镜与开放手术治疗肾上腺嗜铬细胞瘤的疗效是否不同,及腹腔镜治疗肾上腺嗜铬细胞瘤的有效性及安全性.方法 将60例拟诊为肾上腺嗜铬细胞瘤需行手术治疗患者,按手术方式不同分组,腹腔镜手术治疗者32例为腹腔镜组,开腹手术治疗者28例为开放组,比较两组疗效.结果 术后病理检查均确诊为肾上腺嗜铬细胞瘤,侵犯包膜者5例,腹腔镜组无一例中转开腹.开放组术中收缩压震幅、手术时间、术中出血量、术中输血量、切口长度、术后引流时间、术后引流量、术后住院时间分别为(25.21 ±9.42) mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)、(127.38±16.40) min、(420.48±185.62) ml、(238.20±68.39) ml、(13.23±1.14) cm、(7.26±1.20)d、(326.50±96.48) ml、(9.31±1.89)d,腹腔镜组分别为(10.42±8.89) mm Hg、(76.29±24.61) min、(120.54±104.28) ml、(86.49±36.53)ml、(8.44±1.03) cm、(5.47±1.55)d、(180.32±100.52)ml、(7.21±1.30)d,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);两组肿瘤最大直径比较差异无统计学意义(P＞0.05);两组并发症发生率、复发率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 腹腔镜与开放手术治疗肾上腺嗜铬细胞瘤疗效均较好,安全性较高,腹腔镜手术相对创伤较小,利于患者恢复,对无腹腔镜治疗禁忌证患者可首选腹腔镜手术治疗.     

牛磺酸对锰染毒大鼠纹状体神经组织细胞损伤影响

目的 探讨不同剂量牛磺酸对锰染毒大鼠纹状体神经组织细胞损伤的影响.方法 SD健康雄性大鼠162只,随机分为对照组,10、15、20 mg/kg 3个剂量的染锰组和9个牛磺酸干预组,每组12只大鼠,余6只用于对照组、染锰组、牛磺酸干预组作电镜观察.干预12周后,开颅分离出大鼠纹状体,分别进行Tunel染色、透射电镜观察、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)水平测定.结果 染锰组和牛磺酸干预组纹状体细胞凋亡指数均高于对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05);150、200 mg/kg牛磺酸干预对10、15、20 mg/kg染锰组大鼠纹状体细胞凋亡指数有降低作用,差异有统计学意义(P＜0.05);大鼠纹状体透射电镜观察可见,15 mg/kg染锰组部分神经细胞出现核固缩等细胞凋亡的特征性改变,200 mg/kg牛磺酸干预可减轻其细胞凋亡程度;染锰组大鼠纹状体DA、5-HT水平均低于对照组(P＜0.05),150、200mg/kg牛磺酸对10 mg/kg染锰组大鼠纹状体DA和5-HT水平增加效果显著(P＜0.05).结论 锰可致大鼠纹状体神经组织细胞出现程度不同的细胞凋亡,降低纹状体中DA和5-HT的水平.牛磺酸在一定程度上对锰诱导的大鼠纹状体神经组织细胞凋亡及DA和5-HT的减少有保护作用.     

miR-125b对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨miR-125b对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法培养乳腺癌MCF-7细胞,用miR-125b模拟物和miR-125b抑制物转染乳腺癌MCF-7细胞,检测miR-125b表达,乳腺癌MCF-7细胞活力、凋亡情况、细胞周期及Cyclin A1、Cyclin D1、Bcl-2及Bax蛋白表达水平。结果 miR-125b模拟物和miR-125b抑制物转染乳腺癌MCF-7细胞1、2、3、4 d后,乳腺癌MCF-7细胞活性均显著降低(均P0. 05)。miR-125b模拟物组乳腺癌MCF-7细胞凋亡率均显著低于miR-125b抑制物组(均P0. 05); miR-125b抑制物组细胞周期G1期显著长于miR-125b模拟物组(P0. 05)。两组Cyclin A1、Cyclin D1、Bax及Bcl-2表达水平比较,差异均有统计学意义(均P0. 05)。结论 miR-125b抑制剂可显著抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

18例肾上腺外嗜铬细胞瘤的诊断与治疗的研究

目的探讨肾上腺外嗜铬细胞瘤的诊断和治疗方法.方法回顾性分析18例本病患者的临床资料.结果肾上腺外嗜铬细胞瘤18例,占同期嗜铬细胞瘤的26.1%,15例有高血压的症状,无症状3例.手术切除肿瘤17例,无严重手术并发症.结论血和尿儿茶酚胺及其代谢产物测定对本病定性和监测有很高的诊断价值,定位诊断通过B超和CT检查.术前使用肾上腺素能受体阻滞剂控制血压和心率,并扩充血容量,是非常重要的.     

肾上腺嗜铬细胞瘤5例的围术期护理

嗜铬细胞瘤90%发生在肾上腺髓质,10%发生在肾上腺外的交感神经细胞,由于肿瘤能自主分泌儿茶酚胺包括肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺,致心血管系统病变和代谢紊乱,临床主要表现:高血压和代谢紊乱[1].我院1999-08-2003-10共收住5例肾上腺嗜铬细胞瘤患者,通过充分术前准备、手术治疗、精心护理,均获得满意效果,现将护理体会介绍如下.     

后腹腔镜下肾上腺嗜铬细胞瘤术后并发症的观察与护理要点分析

目的：探讨护理干预在预防后腹腔镜下肾上腺嗜铬细胞瘤切除术后并发症方面的应用价值。方法：30例肾上腺嗜铬细胞瘤患者进行分组研究,患者均接受后腹腔镜下肿瘤切除术进行治疗,对照组患者治疗期间接受常规手术护理措施进行干预,观察组患者接受有针对性的护理措施进行干预治疗,观察2组患者手术情况、术后恢复情况以及并发症情况。结果：观察组与对照组相比,明显缩短患者手术时间及术后恢复时间,且减少术中出血量,且患者发生并发症的几率（6.7%）明显低于对照组（33.3%）,p<0.05。结论：在对肾上腺嗜铬细胞瘤患者行后腹腔镜下肿瘤切除术治疗,同时围术期给予患者有针对性的护理措施进行干预治疗,可明显缩短患者手术时间,减少患者出血量,促进患者术后迅速恢复,同时减少术后并发症情况,预后效果佳,值得临床推广。     

腹腔镜与开放手术治疗肾上腺嗜铬细胞瘤的回顾性对比研究

目的比较腹腔镜与开放手术治疗肾上腺嗜铬细胞瘤的临床效果,评价腹腔镜。肾上腺嗜铬细胞瘤切除术的临床应用价值。方法回顾性分析嗜铬细胞瘤101例的临床资料,其中腹腔镜组49例,开放组52例,比较2组的手术时间、术中出血量、输血率、术后拔管时间、术后肠功能恢复时间、术后住院时间、并发症等。结果与开放组相比,腹腔镜组手术时间短[（99．3±36．2）minVS（154．5±75．0）min,P〈0．01];术中出血量少[（50／100—20）mlV8（300／587．5—200）ml,P〈0．01];输血率少[8．2％（4／49）VS30．8％（16／52）,P〈0．01];术后引流管留置时间短[（3．08±1．47）dVS（4．98±2．13）d,P〈0．01];术后肠功能恢复时间短[（2．20±0．68）dVS（3．63±1．20）d,P〈0．01];术后住院时间短[（5．79±1．89）dVS（10．84±4．63）d,P〈0．01]。在并发症方面,两组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤切除术是微创、安全、有效的。     

微囊藻毒素-LR对人肝癌HepG2细胞活性氧生成和脂质过氧化的影响

目的 观察非细胞毒性剂量的微囊藻毒素-LR(MC-LR)对人肝癌HepG2细胞活性氧(ROS)生成和脂质过氧化的影响。方法 调整HepG2细胞的密度为1×104/孔,分别加入终浓度为0（溶剂对照,0.1％ DMSO）、3、10、30、100 μmol/L的MC-LR溶液染毒4、24h。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检...     

高功率微波对大鼠免疫组织活性氧水平的影响

目的观察高功率微波辐照对大鼠免疫组织细胞内活性氧水平的影响。方法采用DCFH-DA分子探针结合流式细胞仪检测大鼠免疫组织细胞内经0、10、30、50mW/cm2微波辐照后不同时间活性氧水平的变化。结果①骨髓、淋巴结在0～30mW/cm2范围内活性氧水平出现规律性增高,在50mW/cm2时有所降低;脾脏在0～50mW/cm2范围内呈剂量依赖性增高;而胸腺组织虽有增高但未见明显的量效关系。②照后1d活性氧水平升高最为显著,3d出现明显降低,除骨髓高于对照组外,脾脏、淋巴结基本恢复正常。7d时全部恢复到对照水平。结论微波辐照可诱导大鼠免疫组织细胞内活性氧水平升高,在一定剂量范围内呈较好的量效和时效关系。     

微囊藻毒素-LR对活性氧产生及细胞色素P450各亚型表达的影响

[目的]探讨低剂量微囊藻毒素-LR（MCLR）诱导细胞内活性氧（ROS）产生的潜在来源。[方法]采用转染有机阴离子转运多肽OATP1B3的人胚肾细胞株HEK293-OATPIB3,设3个浓度的MCLR处理组（10、20、50nmol／L）和未处理对照组（0．1％二甲基亚砜）。染毒4、24h后,测定乳酸脱氢酶（LDH）漏出率,用荧光探针法检测细胞内ROS水平,采用实时荧光定量聚合酯链反应检测细胞色素P4501A1（CYP1A1）、1A2、2E1 mRNA的表达水平。[结果]低浓度（10-50nmol／L）的MCLR作用HEK293-OATP1B3细胞4h未产生明显细胞毒性;24h后,LDH漏出率随着处理浓度的增加而增加。50nmol／LMCLR处理细胞4h后引起ROS水平明显升高（P〈0．01）。同时,MCLR还上调了CYP2E1的mRNA表达水平（P〈0．01）;但未影响CYP1A1 mRNA的表达;对照组和MCLR处理组的CYP1A2 mRNA表达水平均非常低。[结论]低剂量MCLR可诱导细胞内ROS产生和上调CYP2E1 mRNA表达,提示CYP2E1可能是MCLR诱导ROS产生的一个潜在来源。     

Reactive Oxygen Species and Antioxidants in Signal Transduction and Gene Expression

Reactive oxygen species (ROS) are produced by cellular metabolic reactions, and have been implicated in the pathogenesis of several diseases, including atherosclerosis, cancer, and Alzheimer's disease. Interestingly, clinical and epidemiologic studies have, in some cases, indicated that antioxidant nutrients may be effective in disease prevention. However, the efficacy of specific antioxidants in disease prevention is often both controversial and inconclusive. In an effort to elucidate the role of ROS and antioxidants in disease development and prevention, the chemistries of ROS and antioxidants have been examined extensively. Recently, molecular and cellular approaches have demonstrated that ROS and antioxidants can directly affect the cellular signaling apparatus and, consequently, the control of gene expression. This new research provides the link between ROS and antioxidant chemistries and the mechanisms of disease processes and prevention. This review illustrates how ROS function as potential intracellular and extracellular signaling molecules and how antioxidants can affect this process.     

PM10诱导人胚肺成纤维细胞自由基产生与其凋亡的作用

目的 以人胚肺成纤维细胞（HLF）为模型,探讨大气可吸入颗粒物（PM10）诱导细胞超氧阴离子和羟自由基产生以及二者与细胞凋亡的关系及低聚壳聚糖（COS）对PM10抗性作用.方法 用高铁细胞色素C还原法和细胞色素C氧化法分别测定超氧阴离子和羟自由基,用Annexin V/PI双染测定细胞凋亡.结果 PM10能诱导HLF细胞产生超氧阴离子和羟自由基,随PM10浓度增加,二者的产生量增加,均存在明显的剂量-反应关系（P＜0.01）;加入COS后两种自由基产生量明显低于不加者（P＜0.05）,说明自由基可被COS所淬灭;PM 10可诱导HLF细胞凋亡增加,但COS对PM10诱导HLF凋亡和死亡未见明显的保护作用（P＞0.05）.结论 PM10能诱导HLF产生超氧阴离子和羟自由基增加,可能通过多种途径诱导HLF凋亡,其机制还有待进一步研究.     

软骨藻酸诱导PC12细胞凋亡及对活性氧的影响

[目的]研究软骨藻酸诱导PC12细胞凋亡及对活性氧的影响. [方法]流武细胞仪法测定0、0.01、0.1、l μmol/L软骨藻酸作用PCI2细胞24h后,对细胞凋亡、细胞周期和活性氧生成的影响. [结果]软骨藻酸可诱导PC12细胞凋亡的发生,与对照组(凋亡率为0.250±0.053)相比,所有染毒浓度组PCI2细胞凋亡率均上升且差异有统计学意义;并将PC12细胞阻滞于细胞周期中的G2/M期,0.1、1 μmol/L组中处于G2/M期的PC12细胞数量与对照组相比,差异具有统计学意义;所有浓度组均可使PC12细胞的活性氧分子(reactive oxygen species,ROS)平均荧光强度增加(0.01 μmnol/L组为187.140±3.629,0.1 μmol/L组为206.023±5.277,1 μmol/L组为348.915±3.343),与对照组(163.660±4.059)相比,差异均具有统计学意义.[结论] 软骨藻酸能诱导PC12细胞凋亡的发生,将PC12细胞阻滞于细胞周期中的G2/M期,并使得细胞内的ROS产生增加.     

硫酸铟对V79细胞内活性氧和线粒体膜电位的影响

[目的]观察硫酸铟对中国仓鼠肺纤维细胞（V79细胞）内活性氧（ROS）和线粒体膜电位的影响。[方法]不同浓度硫酸铟（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mmol/L）染毒体外培养的V79细胞,MTT法检测细胞存活率;以2’,7’-荧光素乙二酯和碘化四氯代四乙基苯咪唑羰花青为探针,采用流式细胞术,检测经不同浓度硫酸铟染毒12h后V79细胞内ROS和线粒体膜电位的水平。[结果]硫酸铟能明显降低V79细胞的存活率;不同浓度硫酸铟作用于V79细胞12h后,细胞内的平均荧光强度从21.60增加到31.10,线粒体膜电位从0.1913降低到0.1090,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]硫酸铟能增加V79细胞内ROS的释放、降低线粒体膜电位,影响细胞的正常代谢功能,对细胞造成损伤。     

Piperlongumine Induces Apoptosis in Human Melanoma Cells Via Reactive Oxygen Species Mediated Mitochondria Disruption

Malignant melanoma is a devastating skin cancer due to its severe drug resistance and prompt metastasis. Piperlongumine is an anti-inflammation and tumor-suppressing natural product with defined structure. While numerous studies revealed exceptional inhibitory effects of piperlongumine on several carcinomas, few investigations were performed on melanoma. Therefore, the present study investigated the anti-tumor effects of piperlongumine on human melanoma cells in vitro, and explored the mechanisms of action. Results from cytotoxicity and proliferation studies demonstrated that piperlongumine inhibited cell growth in melanoma cell lines A375, A875, and B16-F10 in a dose- and time-dependent manner. Flow cytometric analysis showed that piperlongumine obstructed cell cycle progression at G2/M phase and induced apoptosis in A375 cells. Mechanistic investigations illustrated that piperlongumine promoted reactive oxygen species production and decreased mitochondrial membrane potential. In addition, piperlongumine was reported to interfere with the expression of p21, p27, cleaved caspases-3, Bax, Bcl-2, and p-Jun N-terminal kinase (JNK), which are typical regulators associated with cell proliferation, intrinsic apoptosis, and JNKs pathway. Taken together, these results strongly suggested that piperlongumine inhibits cell growth and induces apoptosis in human melanoma cells via ROS mediated mitochondria disruption and JNKs pathway, and piperlongumine may exert promising potential for patients suffering from malignant melanoma.     

活性氧在P，P’-DDE诱导大鼠睾丸支持细胞凋亡中的作用

[目的]研究活性氧在2,2-双-（对氯苯基）-1,1-二氯乙稀（P,P’-DDE）诱导大鼠睾丸支持细胞凋亡中的作用。[方法]从大鼠睾丸组织中分离支持细胞进行离体原代培养3d,用0、10、30、50μmol／L的p,p＇-DDE及加有300μmol／L的抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）的P,P’-DDE（50μmol／L）继续培养24h,应用流式细胞仪测定细胞内活性氧（ROS）水平、线粒体膜势能（Aym）、凋亡发生率。[结果]50μmol／L的P,P’-DDE可以诱导支持细胞ROS显著升高,10、30、50μmol／LP,P’-DDE处理组的线粒体膜势能下降,30、50μmol／L的P,P’-DDE可以诱导支持细胞凋亡,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;NAC有效抑制了ROS升高,削弱线粒体膜势能下降,减少了凋亡发生率,与50μmol／L的P,P’-DDE处理组相比,差异有显著意义（P〈0．05）。[结论]P,P’-DDE可以诱导大鼠睾丸支持细胞凋亡,ROS产生可能是其重要原因之一。     

Reactive Oxygen Species Abrogate the Anticarcinogenic Effect of Eicosapentaenoic Acid in Atm-Deficient Mice

Recent studies have demonstrated that n-3 polyunsaturated fatty acids such as eicosapentaenoic acid (EPA) are able to suppress cell proliferation and inhibit tumor growth. The objective of our study was to investigate the influence of a high dose EPA on the development of the tumor phenotype in ataxia-telangiectasia mutated (Atm)-deficient mice, a genetic cancer model that is associated with increased levels of oxidative stress. We analyzed toxicity, proliferation, cell-cycle progression, and apoptosis of EPA in vitro and latency to tumorigenesis in vivo. Because of the impact of reactive oxygen species (ROS) on the tumor incidence in ataxia telangiectasia (AT), we further analyzed the effect of EPA on the generation of ROS and oxidative DNA damage (ODD). EPA effectively inhibited proliferation, altered cell-cycle progression, and induced apoptosis of tumor cells (AT-4). EPA showed no effect on the latency to tumorigenesis in Atm-deficient mice. EPA treatment was accompanied by a significant increase of ROS and ODD. Our results demonstrate the antiproliferative effect of EPA on tumor cells by alteration of cell-cycle progression and induction of apoptosis in vitro. On the other hand, EPA treatment of Atm-deficient mice led to the formation of ROS and accumulation of ODD that might have abrogated the anticarcinogenic effect caused by EPA.