小剂量多巴胺对大鼠颅脑创伤后水通道蛋白4表达的影响

目的观察小剂量多巴胺对大鼠颅脑创伤后水通道蛋白4（AQP4）表达的影响。方法49只成年雄性wistar大鼠,随机分为对照组（7只）、创伤组（21只）及多巴胺干预组（21只）,多巴胺干预组小剂量多巴胺5μg（kg·min）持续给药．创伤组给予等量的生理盐水,对照组不予处理。分别予伤后0．5h、2h、6h、12h、24h、48h、72h断头取脑．采用半定量反转录聚合酶链反应（RT—PCR）检;刚脑组织AQP。1mRNA表达及其变化规律。结果创伤组脑组织AQP4mRNA在伤后0．5h开始表迭上调,2h、6h、12h依次增高,24h达到峰值后回落。多巴胺干预组AQP4mRNA在伤后0．5h表达上调,12h达到峰值,后逐渐回落。与创伤组相比,多巴胺干预组在相应时间点AQP4tuRNA表达减少（P〈0．05）,并使AQP4mRNA峰值提前。结论小剂量多匕胺可以减少AQP4mRNA在大鼠颅脑创伤后的表达,减轻创伤后脑水肿．加快脑水肿的恢复,具有脑保护作用。     

孕酮对脑损伤大鼠海马CA1区细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

108只雄性SD大鼠随机分为假手术组、损伤组、孕酮（PROG）治疗组,各36只。用改进的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型。伤后6、12、244、8、72和144 h各组分别取6只大鼠麻醉后取其脑组织,用Tunel法和免疫组化法检测海马CA1区凋亡细胞及其Bcl-2蛋白。结果显示,假手术组未见神经细胞凋亡及Bcl-2蛋白阳性细胞;PROG治疗组各时间点凋亡细胞数较损伤组减少,伤后244、8和72 h,PROG治疗组凋亡细胞数与损伤组相比,P均〈0.05;伤后12、24、48和72 h,PROG治疗组海马CA1区的Bcl-2蛋白阳性细胞数高于损伤组,两组相比,P均〈0.05。认为脑损伤后应用PROG可以上调脑组织Bcl-2蛋白表达,抑制神经细胞凋亡。     

AG490对大鼠脑损伤后CD40和CD45表达及神经功能的影响

目的 探讨AG490对大鼠创伤性脑损伤后脑组织CD40、CD45表达以及神经功能状态的影响.方法 取健康雄性SD大鼠180只,随机分为假手术组、创伤组和AG490干预组,每组大鼠60只;各组根据脑损伤时间再分为6、12、24及72 h亚组（各15只）.应用液压冲击法制备大鼠脑损伤模型,采用流式细胞术检测脑组织CD40、CD45的表达,采用大鼠神经功能缺损评分系统对神经功能状态进行评估.结果 ①创伤组伤后各时间点神经功能缺损评分均高于假手术组（P〈0.05或P〈0.01）,其中6 h为高峰期,后呈现逐渐下降趋势.AG490干预组大鼠神经功能缺损评分均较创伤组低,24和72 h时间点差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）.②创伤组脑组织CD40表达水平逐渐升高,24 h达高峰,然后开始降低;CD45表达持续增高,72 h最高.与假手术组比较,各时间点CD40 、CD45表达差异均有统计学意义（P〈0.01）.AG490干预组各时间点CD40 、CD45表达水平均低于创伤组,差异均有统计学意义（P〈0.01）.结论 创伤性脑损伤后,AG490可能通过降低脑组织CD40、CD45的表达促进神经功能的恢复.     

蛋白酶激活受体_1在高压氧预处理诱导大鼠脑出血后脑保护中的作用

目的探讨蛋白酶激活受体-1（PAR-1）在高压氧预处理（HBOP ）诱导的大鼠脑出血后神经保护中的作用。方法（1）SD大鼠接受连续5次HBOP或假预处理（SP）,预处理结束24h后,建立基底节区脑出血模型,72h后处死,观察脑水含量,神经功能评分,TUNEL法检测血肿周围神经细胞凋亡,免疫组化方法检测血肿周围组织PAR-1的表达。（2）SD大鼠HBOP预处理前基底节区给予PAR-1激动剂（PAR-AP）或生理盐水,接受连续5次HBOP ,预处理结束24h后,建立基底节区脑出血模型,72h后处死,观察脑水含量、神经功能评分,血肿周围神经细胞凋亡和PAR-1的表达。结果高压氧预处理减轻大鼠脑出血后72h血肿周围脑组织水肿[（81.4±0.8）％ vs （80.2±0.6）％,P＜0.01],改善神经功能评分,减少血肿周围神经细胞凋亡,HBOP降低了血肿周围组织PAR-1的表达（ P＜0.05）。HBOP前给予PAR-AP激活PAR-1受体,消除了HBOP诱导的神经保护作用。结论高压氧预处理通过减轻脑组织水肿,减少神经细胞凋亡起到神经保护作用,下调PAR-1的表达是可能的作用机制之一。     

大鼠脑出血后脑组织MMP-9、Omi的表达及意义

目的观察大鼠脑出血（1CH）后脑组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的动态变化及其与线粒体促凋亡因子（Omi）的关系。方法将120只雄性SD大鼠随机分为假手术组和ICH1组（用于检测MMP-9）、ICH2组（用于检测OmimRNA）。在脑立体定向仪下采用自体动脉血注入尾状核法制备ICH模型。于造模后3、6、12、24、48、72、120h及7d用干湿重法测量脑含水量，免疫组化法及RT—PCR法检测脑组织中MMP-9的表达，RT-PCR法检测Omi mRNA的表达。结果ICH组脑含水量各时间点明显高于假手术组（P均〈0．05），术后48h达高峰；ICH后MMP-9表达在6h开始上升，24—48h达高峰，72h时开始下降；Omi mRNA表达在3h开始上升，24—48h达高峰，72h时开始下降。两者表达呈正相关（r=0．995，P〈0．05）。结论MMP-9参与了ICH后灶周围组织神经元凋亡及组织水肿的过程，诱导或加重了神经元凋亡及脑水肿。     

大鼠颅脑创伤后脑红蛋白的动态变化及对神经元的保护作用

目的探讨颅脑创伤后脑红蛋白(NGB)动态变化及其神经保护作用。方法构建大鼠颅脑创伤模型,在大鼠颅脑创伤后0.5、1、3、6、12、24、48、72、96 h取大鼠脑组织,免疫组化观察各时间点大鼠脑组织中NGB、Bax和Bcl-2的动态变化,计算Bax/Bcl-2比值的动态变化。结果成功构建了大鼠颅脑创伤模型,大鼠脑组织中皮质神经元中NGB的含量较多,大鼠在颅脑损伤后NGB的表达水平急剧上升,在损伤后3 h脑组织中的NGB的表达水平达到高峰,随后出现缓慢下降;损伤后72 h NGB的表达出现又一高峰,之后下降;96 h时NGB的表达水平仍然高于对照组。大鼠颅脑创伤后3 h,皮质神经元中Bcl-2的表达水平达到高峰,随后开始缓慢下降;在创伤后24 h,Bcl-2的表达水平又出现一个高峰,之后开始逐渐下降;创伤后96 h皮质神经元中Bcl-2的表达水平仍然高于对照组。大鼠颅脑创伤后,皮质神经元中Bax的表达量急剧上升,在大鼠颅脑创伤后3 h,皮质神经元中Bax的表达水平达到高峰,之后逐渐下降;在48 h时Bax的表达量稍有升高,后又开始缓慢下降;创伤后96 h皮质神经元中Bax的表达水平仍然高于对照组。大鼠颅脑创伤后Bax/Bcl-2比值迅速增加,在创伤后6 h出现高峰,之后逐渐下降;在48 h时又出现缓慢增加,之后又逐渐下降;在创伤后96 h,Bax/Bcl-2的比值与对照组差异不显著(P>0.05)。结论大鼠颅脑创伤后脑红蛋白表达增多,可以拮抗神经元细胞的凋亡,起到保护神经的作用。     

脑挫裂伤后脑组织中AQP4的表达变化及意义

目的观察人脑创伤后挫裂伤脑组织中水通道蛋白4（AQP4）的表达变化,探讨其与脑水肿变化的关系。方法对20例颅脑损伤患者,于伤后2 h～5 d手术时取挫裂伤脑组织和非功能区正常脑叶（脑减压）组织（3例,为正常对照）,采用免疫组化法检测所有标本中AQP4,同时观察血脑屏障（BBB）指数及脑水肿的变化。结果颅脑损伤后2 h～5 d,脑挫裂伤区域脑水肿进行性加重,AQP4表达进行性升高,伤后24～72 h达高峰,二者呈正相关（P〈0.05）;正常脑叶组织中AQP4表达较挫裂伤区各时点均低（P均〈0.05）;伤后2～24 h AQP4表达与BBB指数呈正相关（P〈0.05）,余时点无相关性。结论颅脑外伤后脑挫裂伤组织AQP4表达上调,AQP4可能参与其脑水肿的形成过程。     

大鼠脑出血后脑红蛋白在脑组织中的表达及其对细胞凋亡的影响

目的 研究实验性大鼠脑出血后脑组织中脑红蛋白的表达及其对细胞凋亡的影响.方法 随机将86只大鼠分为正常对照组、假手术组及脑出血组,应用立体定向技术,将自体未抗凝血注入大鼠基底节区制备脑出血模型.分别在造模后6、24、48、72小时断头取脑制作标本,采用TUNEL染色检测脑组织中细胞凋亡、荧光定量RT-PCR检测脑红蛋白mRNA表达、免疫组化分析脑红蛋白的表达.结果 脑出血后6h血肿周围脑组织脑红蛋白及TUNEL染色阳性细胞表达升高,其中脑红蛋白48h达高峰,72h开始下降,而细胞凋亡72h达高峰,表达均明显高于假手术组和正常对照组,差异有统计学意义（P ＜0.05,＜0.01）;脑红蛋白的表达与细胞凋亡数呈正相关（r=0.51,P＜0.05.结论 脑出血后脑红蛋白表达上调,可能对脑出血继发神经损伤起重要的保护作用.     

SA脂质体介导人白介素-10基因转染对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的影响

将48只SD大鼠随机分为正常对照组、缺血对照组（缺血组）、空质粒组和白介素（IL）-10基因转染组（转染组）,后三组采用Longa法建立局灶脑缺血再灌注损伤（MCAO）模型。造模成功后转染组及空质粒组分别于侧脑室注射SA脂质体/pcDNA3．1-IL-10,SA脂质体／pcDNA3,1（＋）。各组大鼠于预定时间处死制作脑组织标本,采用RT-PCR法检测IL-10基因表达情况;观察海马CA1区神经元损伤情况,测定脑梗死体积并进行神经行为学评分。结果转染组再灌注72h时大脑皮层及海马中均能检测到IL-10 mRNA表达,其余三组均无表达。转染组海马CA1区神经元损伤程度明显轻于缺血组及空质粒组,脑梗死体积和神经行为学评分亦低于缺血组及空质粒组（P均〈0．05）。证实SA脂质体介导人IL-10基因转染能减轻大鼠局灶脑缺血再灌注损伤。     

二甲双胍下调水通道蛋白4表达改善大鼠颅脑创伤早期脑水肿的研究

目的探讨二甲双胍对大鼠液压冲击伤后脑组织水通道蛋白4（AQP4）表达的影响及其与颅脑创伤（TBI）后脑水肿的关系。 方法96只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组，每组24只。假手术对照组（SO组）行颅骨开窗，不进行液压冲击；单纯脑损伤组（BI组）制备大鼠侧位中度液压冲击脑损伤模型；生理盐水对照组（NS组）在液压冲击伤后30 min腹腔注射0.9%氯化钠注射液；二甲双胍治疗组（MT组）大鼠液压冲击伤后30 min腹腔注射100 mg/（kg·d）的二甲双胍。4组大鼠分别于24、48和72 h进行神经功能评分，并测定脑组织含水量及AQP4蛋白和mRNA表达。 结果BI组、NS组及MT组大鼠在24、48和72 h的神经功能评分均低于SO组，差异具有统计学意义（P<0.05）。BI组大鼠在24、48和72 h脑含水量、AQP4蛋白和AQP4 mRNA表达均高于SO组、MT组，差异均具有统计学意义（P<0.05），与NS组比较差异无统计学意义（P>0.05）。MT组和SO组24 h时的脑含水量、AQP4蛋白和AQP4 mRNA表达比较，差异无统计学意义（P>0.05），48、72 h时均高于SO组，差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论二甲双胍干预可明显降低TBI后脑组织AQP4蛋白和AQP4 mRNA的表达，减轻早期脑水肿，改善大鼠神经功能障碍。     

促红细胞生成素与粒细胞集落刺激因子联合应用对创伤性脑损伤大鼠神经再生的影响

目的探讨促红细胞生成素(EPO)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联合治疗对创伤性脑损伤(TBI)大鼠神经功能恢复及神经细胞再生的影响。方法将125只雄性Wistar大鼠随机分成假手术对照组(Sham组)、脑创伤模型组(TBI组)、EPO治疗组(T+E组)、G-CSF治疗组(T+G组)、EPO和G-CSF联合治疗组(T+E+G组),然后再按照1、3、5、7、14 d随机分为5个亚组,每个亚组5只。用Feeney法制备脑创伤模型,各治疗组大鼠均于造模后立即给予相应的干预措施,共3 d。各组大鼠分别于术后1、3、5、7、14 d进行神经功能缺失评分(mNSS),并处死大鼠取脑组织行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)单标及BrdU/神经元核抗原(NeuN)、BrdU/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)双标免疫荧光染色检测新生增殖细胞数量及其分化方向。各组大鼠mNSS评分、血液学指标及免疫荧光染色结果的差异用单因素方差分析,两两比较用LSD-t检验。结果 (1)各治疗组在用药后5、7、14 d时mNSS评分明显低于TBI组(P0.05),T+E+G组mNSS评分又明显低于单独治疗组。(2)T+E+G组从第3天开始创伤周围脑组织BrdU阳性细胞数明显高于其他各组(P0.05),于7 d时达高峰;对比各组7 d时脑组织BrdU/NeuN和BrdU/GFAP双阳性细胞数,T+E+G组均明显高于其他各组(P0.05),两单独治疗组也明显高于Sham组和TBI组(P0.05)。结论联合应用EPO和G-CSF能明显改善TBI后大鼠神经功能症状,促进创伤周围脑组织神经细胞再生,并向神经元和星形胶质细胞方向分化。     

重度创伤性脑损伤致应激性肝损伤大鼠肝组织细胞色素P4502El水平变化

目的研究重度创伤性脑损伤（TBI）诱导的应激性肝损害（HSI）大鼠肝组织细胞色素P4502El（CYP2E1）的变化。方法取40只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术（A组）和TBI组,采用改良的Feeney自由落体撞击法建立TBI大鼠模型;于颅脑致伤后6、12和24 h,检测各组血清ATL、AST水平和丙二醛（MDA）水平变化,在光镜下观察肝脏组织学改变,采用RT-PCR和Western blot法分别检测各组肝组织CYP2E1 mRNA和蛋白表达。结果在TBI后6和24 h,各组大鼠血清ALT较基线水平[（42.2±8.1）U/L]明显升高[分别为（83.0±10.3）U/L和（1204.5±146.6）U/L,P〈0.01）];伤后12 h血清AST较基线[（44.0±7.2）U/L]升高[（280.4±53.3）U/L,P〈0.01）],于24 h达峰值[（790.3±114.5）U/L];伤后6 h MDA较基线[（5.2±0.2）nmol/mg]明显升高[（14.2±0.2）nmol/mg,P〈0.05],24 h达峰值[（56.3±0.5）nmol/mg];伤后24 h肝组织损伤最严重,可见肝小叶结构不清,肝窦明显扩张,散在肝细胞点状坏死,大量炎细胞浸润;伤后6 h肝组织CYP2E1 mRNA和蛋白表达水平较基线水平[分别为（0.28±0.02）和（61.68±0.60）]明显增加[（0.89±0.05）和（120.24±1.22）,P〈0.05],在24 h达峰值[分别为（1.50±0.02）和（200.40±2.61）,P〈0.01]。结论 CYP2E1可能参与了TBI诱导的氧化应激反应,从而引起HSI。     

亚低温下温敏型骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠颅脑创伤

目的 观察在亚低温条件下,向颅脑创伤（TBI）大鼠颅内移植温度敏感型骨髓间充质干细胞（tsSV40LTag-BMSCs）对受损神经功能恢复的影响.方法 将54只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、亚低温组、亚低温移植组,每组18只.使用溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）标记tsSV40LTag-BMSCs.使用液压冲击脑损伤仪制备大鼠TBI模型,将对照组大鼠进行常规处理,对亚低温组、亚低温移植组进行亚低温治疗;采用立体定向引导,向亚低温移植组大鼠颅内进行多点移植标记后的tsSV40LTag-BMSCs;分别于伤后第1、7、14、21、28天,对实验组大鼠进行神经运动功能评分.结果 ①制备TBI模型后,各实验组大鼠死亡率比较,差异无统计学意义（χ2=0.477,P=0.788）;TBI后第1天进行评分,3组大鼠神经运动功能评分比较,差异无统计学意义（F=0.435,P〉0.05）.②在TBI后第7、14、21、28天,亚低温组、亚低温移植组的神经运动功能评分高于对照组;亚低温移植组的神经运动功能评分高于亚低温组,差异均有统计学意义（P〈0.05）.3）3组大鼠的神经运动功能评分均随损伤后时间的延长而升高,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 在亚低温条件下,移植tsSV40LTag-BMSCs治疗TBI大鼠,能够明显改善大鼠脑创伤所致的神经运动功能障碍.     

牛磺酸对重度颅脑创伤大鼠脑组织AQP4/牛磺酸转运体基因的影响

目的研究牛磺酸（Tau）对重度颅脑创伤（TBI）大鼠脑组织的脑组织含水量、水通道蛋白-4（AQP-4）/Tau转运体（TAUT）基因表达的影响。方法按随机数字表法将84只雄性SD大鼠分为7组：假手术组（Sham组）、脑外伤组（TBI组）、Tau治疗组（Tau组）,Tau预防组（Pre-Tau组）、β-丙氨酸组（β-Ala组）、维生素C组（Vc组）、叶酸组（Fa组）,每组12只。后6组均采用液压打击制作重度TBI模型。造模成功后即刻尾静脉给药200 mg/kg。Sham组和TBI组给予相同量等渗盐水,24 h后取脑。采用HE染色法观察TBI后各组脑组织形态学变化、测定脑组织含水量,用荧光定量RT-PCR方法检测AQP-4/TAUT基因表达。结果形态学检查：TBI 24 h后,神经细胞肿胀,细胞丢失,细胞核固缩,突起短小消失,坏死灶边缘可见炎性细胞浸润,β-Ala组同TBI组。但与TBI组比较,Tau组、Vc组、Fa组、Pre-Tau组形态上无显著改善;脑组织含水量：与Sham组相比,TBI组、β-Ala组伤后24 h显著升高（P〈0.05）。而Tau组、Vc组、Fa组明显降低,与Sham组无统计学差异;Pre-Tau组显著低于Sham组（P〈0.05）。基因表达：与Sham组相比,TBI组脑组织AQP-4 mRNA表达量显著升高（P〈0.05）,Fa组TAUT mRNA表达量显著升高（P〈0.05）。结论 Tau、Vc、Fa及Tau预防性治疗均可以显著降低脑水肿和AQP-4基因表达,对TBI后脑水肿有较好的治疗作用,但Tau、Vc对TBI早期的TAUT无调节作用,其对脑组织含水量的有效性并不是通过调节TAUT实现的。     

Edaravone对DBI大鼠脑组织超微结构及神经功能的影响

目的研究弥漫性脑创伤（DBI）后依达拉奉（Edaravone）对大鼠脑组织超微结构及神经功能的影响。方法将雄性sD大鼠随机分为假手术组、创伤组、Edaravone治疗组。Marmarou’s法建立大鼠DBI损伤模型。术后24、48、72h取大脑海马组织做电镜观察;术后24、48、72h对大鼠学习记忆功能（水迷宫法）和综合运动功能（转棒法）进行评定。结果电镜下Edaravone治疗组中神经元细胞核、线粒体受损程度均低于创伤组;水迷宫实验显示创伤组大鼠搜索安全岛潜伏期（230．9±20．9）s,假手术组为（50．7±4．9）s,Edaravone治疗组为（70．6±8．7）S,三组比较,P均〈0．05;创伤组综合运动能力评分为（79．1±24．5）s,假手术组为（278．6±32．7）s,Edaravone治疗组为（130．0±30．8）8,三组比较,P均〈0．05。结论Edaravone可改善DBI后学习记忆功能和综合运动功能,减轻海马神经元超微结构损害程度。     

不同LOX-1基因型急性心肌梗死患者血清6种微小RNAs的表达特点

目的探讨急性心肌梗死患者的6个微小RNA(microRNA,miRNA):miRNA-1、miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-208、miRNA-499的表达水平及其在不同凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(lectin-likeoxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)基因型患者的表达特点。方法采用新型分子信标探针和实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测120例急性心肌梗死患者和80名正常健康人血清中以上6个miRNAs的表达水平;采用实时荧光定量PCR技术检测LOX-1基因,并进行各基因型以上miRNAs表达水平的比较;利用多指标同步分析(flexible multi-analyte profiling,xMAP)液态芯片技术验证以上6个miRNAs的表达水平。结果 LOX-1 GG基因型的血清miRNA-208在急性心肌梗死发生后50 min表达升高,miRNA-21、miRNA-133、和miRNA-199在急性心肌梗死发生后2 h表达升高,血清miRNA-499在急性心肌梗死发生后4 h表达升高,各自在不同时间下降,低水平表达维持到急性心肌梗死发生后69 h。携带LOX-1N基因型的急性心肌梗死患者的miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-208、miRNA-499表达下调,miRNA-1表达上调。新型分子信标实时荧光定量PCR技术和xMAP液态芯片技术检测的miRNA-21(r=0.810,P<0.05),miRNA-208(r=0.717,P<0.05),miRNA-133(r=0.631,P<0.05),miRNA-499(r=0.604,P<0.05)表达呈正相关。结论miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-208、miRNA-499在急性心肌梗死患者的异常表达可作为早期诊断心肌梗死的生物标志物,为早期诊断心肌梗死提供新的检测手段。     

银杏叶提取物对大鼠脑缺血-再灌注损伤诱导型一氧化氮合酶和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物(EGb761)对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 将80只清洁级雄性SD大鼠制作大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型.随机分为两组:对照组(A组,给予生理盐水治疗,40只),银杏叶提取物干预组(B组,给予等量的银杏叶提取物,40只),每组再分4个亚组,即再灌往后1、3、6及24 ...