岳麓区大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况初步调查

目的 初步调查湖南省长沙市岳麓地区不同乡镇大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况,为制定防治措施提供科学依据.方法 于2010年11月采集长沙市岳麓区境内散养的鸡、鸭、猪、牛等家畜家禽粪便标本33份,按国标常规培养法检测大肠埃希菌O157∶H7,并对数据进行统计分析.结果 33份标本中共检出阳性标本4份,总阳性率为12.1％ (4/33),其中散养的鸡的粪便中大肠埃希菌O157∶H7阳性检出率为13.6％ (3/22);在4份散养的鸭子粪便中,检出1份阳性.结论 长沙市岳麓地区已存在大肠埃希菌O157∶ H7感染,应引起足够重视.     

江苏省1999年大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况调查

目的　了解江苏省不同地区大肠埃希菌O15 7∶H7宿主动物带菌情况及其毒力基因阳性率。方法　在不同流行强度的地区分别设立监测点 ,采集猪、鸡、羊、牛等家畜家禽粪便标本 ,用免疫磁珠法进行病原菌分离培养 ,并用多重引物聚合酶链反应进行毒力基因分析。结果　 6个监测点共采集猪、鸡、羊、牛等家畜家禽粪便标本 176 7份 ,共检出大肠埃希菌O15 7∶H7170株 ,总带菌率为 9.6 2 %。其中 ,以牛、羊带菌率较高 ,分别为 19.0 5 %和 12 .0 1%。对 85株菌进行SLT1、SLT2、eaeA和hly 4种毒力基因的检测 ,5 6 .4 7%的菌株毒力基因阳性 ,且以同时带有SLT2、eaeA和hly 3种毒力基因最为常见 ,占带毒菌株的 79.17%。结论　宿主动物带菌率与当地疾病流行强度有关 ,即有确诊病人的地区宿主动物带菌率及菌株毒力基因阳性率最高 ,其次为仅有零星病例的地区 ,而无相关病例的地区最低。提示加强宿主动物大肠埃希菌O15 7∶H7监测 ,对疫情的分析和疫情预测具有重要意义     

浙江省肠出血性大肠杆菌O_(157)∶H_7动物宿主带菌情况调查

目的了解浙江省肠出血性大肠杆菌O157∶H7在动物宿主中的带菌情况。方法采集浙江省2006-2008年监测点的动物粪便进行病原菌培养和毒力基因及耐药性检测。结果共采集动物粪便3915份,检出肠出血性大肠杆菌O157∶H7阳性20份,带菌率为0.51%,其中以羊和牛的带菌率最高,分别为1.46%和1.43%,散养动物带菌率高于圈养动物(χ2=5.771,P=0.016)。阳性菌株stx2、hly和eaeA3种毒力基因均呈阳性,stxl均呈阴性。对红霉素和利福平耐药,耐药率达90%以上,对其他受试抗生素敏感。结论浙江省动物宿主有一定的带菌率,且菌株具有毒力基因,散养动物的带菌率高于圈养动物,应进一步加强监测,防止O157∶H7引起人群的爆发流行。     

安徽省肠出血性大肠杆菌O157:H7宿主动物监测研究

目的了解安徽省肠出血性大肠杆菌O157:H7在宿主动物中的分布及其毒力基因携带状况,为控制O157:H7感染提供依据。方法用免疫磁珠分离法(IMS)对安徽省3个监测点的宿主动物粪便标本进行0157:H7的分离培养,并用多重引物PCR方法(MPCR)检测分离菌株的毒力基因。结果采集宿主动物粪便标本5 560份,检出O157:H737株,阳性率为0.7%,其中牛的阳性率最高,为1.1%。106株O157:H7菌株经过毒力基因测定,65.1%的菌株携带SLT、hly基因。O157:H7感染性腹泻的发病与家禽家畜的带菌正相关(R=0.87,P=0.01)。结论安徽省宿主动物中能检出肠出血性大肠杆菌O157:H7,且菌株携带毒力基因。提示要加强对宿主动物进行O157:H7的流行病学调查和监测工作。     

郯城县O157大肠杆菌动物宿主带菌情况调查

[目的]了解郯城县O157大肠杆菌动物宿主带菌情况。[方法]标本直接接种mEC肉汤增菌液,先用免疫金标法筛选,后用免疫磁珠富集分离山梨醇麦康凯、麦康凯琼脂平板,点种CHROMagar O157显色琼脂平板,纯化菌进行生化反应、血清学等检测。[结果]入户采集牛、驴、羊、猪、鸡等新鲜粪便275份,共检出4株O157：H7,6株O157：H-,2株O157：H38,1株O157：H19,1株O157：H45,共计14株。[结论]2000年调查的动物粪便带菌率为5.09%。     

江苏省1999年大肠埃希菌O157：H7宿主动物带菌情况调查

目的 了解江苏省不同地区大肠埃希菌O157：H7宿主动物带菌情况及其毒力基因阳性率。方法 在不同流行强度的地区分别设立监测点，采集猪、鸡，羊，牛等家畜家禽粪便标本，用免疫磁珠法进行病原菌分离培养，并用多重引物聚合酶链反应进行毒力基因分析。结果 6个监测点共采集猪、鸡、羊、牛等家禽粪便标本1767份，共检出大肠埃希菌O157：H7170株，总带菌率为9.62%。其中，以牛、羊带菌率较高，分别为19.05%和12.01%。对85株菌进行SLT1、SLT2、eaeA和hly4种毒力基因的检测，56.47%的菌株毒力基因阳性，且以同时带有SLT2、eaeA和hly3种毒力基因最为常见，占带毒菌株的79.17%。结论 宿 主动物带菌率与当地疾病流行强度有关，即有确诊病人的地区宿主动物带菌率及菌株毒力基因阳性率最高，其次为仅有零星病例的地区，而无相关病例的地区最低，提示加强宿主动物大朦胧怕埃希菌O157：H7监测，对疫情的分析和疫情预测具有重要意义。     

郑州市腹泻患者、宿主动物及食品中肠出血性大肠埃希菌O157∶H7监测

为了解郑州市腹泻患者、宿主动物及食品感染或污染O157：H7状况，建立全市流行病学监测网，在辖区内采集动物（牛、羊、猪、鸡、狗等）、门诊腹泻患者粪便及市售食品进行监测。     

山东省2000年大肠埃希菌O157动物宿主带菌调查

我们在 2 0 0 0年 5～ 10月选择枣庄市 ,金乡、郯城两个县对部分医院肠道门诊病人及家畜、家禽等动物进行粪便采样监测 ,现将动物带菌情况报道如下。1.材料与方法 :①检测点的选择与标本采集 :在枣庄市台儿庄区、金乡县及郯城县选择 2 0个乡镇、2 6个自然村 ,入户采集牛、羊、猪、鸡等新鲜粪便 2～ 3g直接接种到 18ml的EC肉汤中 ,送实验室 37℃ 6h增菌。②实验材料 :培养基为EC肉汤、山梨醇麦康凯琼脂、麦康凯琼脂 ,由北京陆桥公司生产 ;CHROMagarO15 7显色琼脂由法国CHROMagar公司生产 ,生化反应培养基按常规方法制备并应用。③实验…     

2011-2019年东台市肠出血性大肠杆菌O157∶H7宿主粪便检测结果

目的 了解东台市动物宿主、腹泻病人粪便中肠出血性大肠杆菌O157∶H7检出情况,为制定预防措施提供科学依据.方法 2011-2019年,每年5月、7月、9月,采集肠道门诊腹泻病人粪便样本,并于流行前期(5月)和流行后期(9月)采集牛、羊、鸡、猪粪便样本.采用EC肉汤加新生霉素增菌、免疫磁珠富集法浓缩、科马嘉平板分离,经...     

怀远县动物宿主O157：H7感染状况调查

O157:H7是肠出血性大肠杆菌(EHEC)中最常见的致病性大肠杆菌血清型,它能引起人类腹泻、出血性肠炎、溶血性尿毒综合征及血栓性血小板减少性紫癜等,曾在日本等国家引起大流行.为了解怀远县EHEC在动物宿主中的分布特征,以制定较为有效的防制方案及措施,2000年8月下旬在怀远县开展了动物宿主O157:H7感染状况调查. 1 调查方法与检验 采取入户调查法,制定统一调查表,培训调查员,统一调查及采样方法,随机抽取8个乡镇,采集牛、羊、猪、鸡等宿主动物粪便、现症腹泻病人粪便进行病原学分离,采集现症腹泻病人血清开展O157:H7溶血素(或脂多糖)抗体检测,各类病原学检测标本总计在900份左右.用免疫磁珠法进行病原学检测,分离EHEC,采用免疫印迹法进行血清检测.检验由省、市、县卫生防疫站共同完成.     

食品中肠出血性大肠埃希菌O157:H7的PCR检测

目的建立快速准确检测食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7的方法。方法采用多重聚合酶链式反应技术（MPCR）特异性扩增肠出血性大肠埃希菌O157：H7的STX、rfbE、fliC基因。结果分别在228，378，709bp处扩增出3个目的基因片段，且只有肠出血性大肠埃希菌O157：H7获得扩增，其他菌种扩增均呈阴性。结论PCR方法比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便，为食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7的快速检测提供了新的手段。     

大肠埃希菌O157:H7在8种食品中存活力观察

目的　探讨肠出血性大肠埃希菌 (EHEC)O157:H7在不同食品中的存活力。方法　采用EHECO157:H7933第 5代菌株人工污染 8种食品 ,染菌量为 7log10cfu/ml·g ;对该菌在 4、2 5℃条件下的存活力进行实验观察。 结果　EHECO157:H7在全奶、奶粉、鱼肉香肠及猪肉松 4种动物性食品中存活较长时间 ( 70d以上 ) ,且存活菌量呈先升后降的变化趋势 ,在 2种温度条件下均能增殖 1～ 2log10cfu/ (ml·g) ,到达高峰后呈对数衰减趋势 ,4 2d后仍有 3～ 6log10cfu/ml·g活菌量 ;在橙汁汽水和乳酸菌饮料中存活时间相对较短 ,分别为 2～ 5d和 10～ 2 7d ,4℃橙汁汽水和 2 5℃乳酸菌饮料在衰减至 4log10cfu/ (ml·g)后急剧下降 :在草莓酱和苹果酱中 ,两种温度条件下EHECO157:H7均呈间断性检出。结论　EHECO157:H7在常见食品中的存活能力强。加强食品特别是动物性食品及饮料的卫生管理是预防和控制该菌感染的重要措施     

大肠埃希菌O157:H7志贺毒素Ⅱ变种的分布

目的 了解徐州地区E.coli O157：H7分离菌析Stx2毒素变种Stx2vha在人及畜禽中的携带分布情况。方法 用特异性探针Southern杂交检测菌株中是否携带Stx2vha毒素变种。结果 66株分离株中35株为Stx2vha毒素变种阳性，占53%，13株为Stx2原互不素阳性，占19.7%，17株为Stx2毒素阴性，占25.8%，另有1株不同于其它菌株是否可为新的毒素变种需进一步确证。35株Stx2vha毒力基因菌株是徐州地区O157：H7菌株的优势菌型，主要宿生动物为羊。     

2005-2009年河南省肠出血性大肠埃希菌O157：H7监测分析

目的监测河南省肠出血性大肠埃希菌O157∶H7在腹泻患者和宿主动物中带菌及毒力基因情况,探索疾病发生的原因和相关因素。方法对2005-2009年河南省监测点所送可疑菌株进行血清学和PCR复核,对确认菌株进行stx1、stx2、eaeA、hlyA毒力基因测定。结果河南省2005-2009年共监测各类标本10 732份,检出O157∶H7菌株255株,检出率为2.38%;其中动物粪便标本的检出率为6.31%,检出率最高的为羊粪（8.04%）,其次为牛粪（7.20%）;各年份菌株检出率之间有一定差异;河南省肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的产毒株主要来自于羊、牛、鸡粪便及蝇类和生肉标本;毒株类型主要为stx2、eaeA、hlyA组合型。结论河南省肠出血性大肠埃希菌O157∶H7在人群和各类动物中均存在,最重要的动物宿主是羊和牛;部分食品在加工环节有可能被污染,存在引起暴发的危险性。     

河北省食品中大肠杆菌O157：H7分布及毒力研究

目的:掌握河北省食品中大肠杆菌O157:H7分布状况及菌株的毒力研究。方法:运用免疫磁珠富集进行分离培养,并用PCR进行毒力基因分析。结果:共采集食品530份,检出O157:H7大肠杆菌5株,总检出率为0.9%。其中,以生牛、羊肉检出率较高,分别为6.7%和4.4%。5株O157:H7菌株中,4株带有SLT2、eae和H ly 3种毒力基因,1株带有SLT1、SLT2、eae和H ly 4种毒力基因。结论:掌握食品中O157:H7分布及生物学特性对预防食源性疾病暴发有重要意义。     

2007年浙江省衢州地区动物中产志贺毒素大肠埃希菌O157:H7感染状况

目的:了解2007年浙江省衢州地区产志贺毒素大肠埃希菌O157:H7在动物中的分布情况及其耐药性、PFGE分型及毒力基因携带状况。方法:按全国O157:H7监测方案于5~10月份肠道传染病高发季节,在衢州地区采集各种动物粪便/肛拭,用免疫磁珠富集后进行O157:H7分离培养、鉴定,可疑菌株以PCR法检测O、H抗原及志贺样毒素(SLT1和SLT2)、粘附抹平因子(eaeA)及溶血素(hly)4种毒力基因。用脉冲场凝胶电泳(pulse field gel electrophoresis,PFGE)方法进行同源性分析,同时选择14种抗生素进行药敏试验,分析分离所得菌株的耐药状况。结果:共监测动物粪便标本300份,分离得产志贺毒素大肠埃希菌O157:H7菌株16株,分离率为5.33%。16株O157:H7菌株,毒力基因Hly、eaeA、SLT2均阳性,SLT1均阴性。脉冲场凝胶电泳分型显示,16株O157:H7菌株可分2个PFGE基因型,型间差异较小。耐药性分析显示这些菌株对红霉素、利福平的耐药率最高,达100.0%,对其他受试抗生素均敏感。结论:该地区动物中产志贺毒素大肠埃希菌O157:H7带菌率较高,所分离菌株主要携带SLT2基因,因此推测该地区存在发生产志贺毒素大肠埃希菌O157:H7感染暴发或流行的潜在危险,需增加对动物源性O157:H7的监测力度。     

出血性大肠杆菌O157∶H7的脉冲场凝胶电泳分型方法研究

目的应用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对肠出血性大肠杆菌O157:H7进行基因分型,了解不同来源分离株的相关性。方法选择在广西食品污染物检测地区食品样本中分离到的7株出血性大肠杆菌O157:H7,采用琼脂糖包埋胶块法制备基因组DNA,以XbaⅠ限制性内切酶进行酶切,选定脉冲电泳参数进行脉冲场凝胶电泳,照相记录结果;Nei的公式计算相似性和遗传距离,并用PHYLIP程序非加权成对算术平均法聚类分析。结果PFGE可生成14~18条清晰条带的分离株DNA指纹图谱,由聚类分析树状图可将7株分离株分为6个基因群。结论广西不同地区食品分离O157:H7血清型菌株存在多个分子亚型,提示不是一个克隆株,研究发现脉冲场凝胶电泳分型技术重复性高,在分子流行病学研究中有较大的应用前景。     

熔解曲线分析方法甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7

目的:采用熔解曲线分析技术,建立一种快速、简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7方法。方法:选取肠出血性大肠杆菌O157:H7编码脂多糖基因(rfbE)和编码鞭毛抗原基因(fliC)作为检测靶基因,建立荧光PCR反应体系。结果:通过多种标准菌株试验,结果显示所建立的熔解曲线分析法可特异性地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7;纯培养的灵敏度达到2.8×101cfu/ml;检测108例临床样本,其中18例肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性,3例为肠出血性大肠杆菌O157:非H7阳性,与常规培养方法的符合率达到100%。结论:本方法可简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7,结果可靠,通过进一步增加反应体系中引物的数量可同时对肠出血性大肠杆菌其他血清型进行鉴定。