1,25-二羟维生素D3对胃癌细胞增殖和TNF-α表达的影响

摘要：目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对胃癌SGC-7901 细胞增殖和细胞周期的影响,以及对细胞因子TNF-α
mRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度1,25(OH)2D3处理胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞
仪检测细胞生长周期;RT-PCR和Western blotting分别检测TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果1,25(OH)2D3对胃癌
SGC-7901细胞增殖有抑制作用（P<0.05）,并呈时间剂量依赖性。经1,25(OH)2D3处理72 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的动
力学改变（F=9.81,P<0.05）。TNF-α mRNA及蛋白的表达水平均呈剂量依赖性减少（P<0.05）。结论1,25(OH)2D3可抑制胃癌
细胞增殖,且与其抑制TNF-α的表达可能有相关性。
     

1,25-二羟维生素D_3对人胃腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法:1,25-二羟维生素D3作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定细胞周期。结果:1,25-二羟维生素D3作用后胃腺癌细胞生长受抑制,细胞集落形成率明显下降(P<0.05);处理48 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变。结论:1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞有抑制增殖、诱导分化作用。     

1,5-二羟维生素D3对棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D₃（1,25（OH）₂D₃）对棕榈酸（PMA）诱导THP-1巨噬细胞炎症因子表达的影响及其机制。方法用1,25（OH）₂D₃（10 nmol/L）和/或PMA（250μmol/L）处理THP-1巨噬细胞6 h,采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法（ELISA）法检测肿瘤坏死因子α（TNFα）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6和IL-10的表达水平;用1,25（OH）₂D₃和/或PMA处理THP-1巨噬细胞60 min,采用免疫印迹（Western-blot）法检测AMPKα1和磷酸化AMPKα1（p-AMPKα1）水平。结果 1,25（OH）₂D₃（10μmol/L）)明显抑制PMA（250μmol/L）作用下THP-1巨噬细胞TNFα、IL-1β和IL-6的表达,并上调IL-10的表达;1,25（OH）₂D₃显著上调THP-1巨噬细胞AMPKα1的磷酸化水平。结论 1,25（OH）₂D₃抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子表达,该效应可能与其激活AMPKα1有关。     

1,25-二羟维生素D3的免疫调节机理及其应用进展

1,25-二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]不仅具有调节钙磷代谢的作用,还可影响多种细胞的生长和分化,具有调节免疫系统的作用.该文综述1,25（OH）2D3的免疫调节机制,为进一步开发更安全有效的类似物,并作为新兴的免疫调节剂应用于临床提供理论依据.     

1,25二羟维生素D3靶控VDRE-ERα表达载体对MDA-MB-231细胞周期的影响

目的探讨1,25二羟维生素D1靶控的雌激素受体α表达载体（VDRE—Tk—ERα）对雌激素受体阴性的MDA—MB-231乳腺癌细胞周期进程的影响及其机制。方法利用MTT法检测1,25二羟维生素D,联合他莫两芬对转染VDRE—Tk—ERα表达载体的MDA—MB-231细胞增殖能力的影响,通过流式细胞仪法检测1,25二羟维生素D,联合他莫西芬对转染该表达质粒的MDA—MB-231细胞周期相的分布。用RT—PCR、Westernblot和免疫沉淀法检测细胞Rh及其磷酸化水平、CyclinD1、CDK4的表达以及CyclinD1／CDK4激酶复合物的结合力变化。结果1,25二羟维生素D,联合他莫西芬能够有效抑制转染该质粒的MDA—MB-231细胞的增殖活性并将其细胞周期进程阻遏于G0／G1期。与此同时,CyclinD．的表达则显著降低,其与CDK4的结合力亦显著降低。Rb的表达虽无显著变化,但其磷酸化水平显著下降。结论1,25二羟维生素D3可通过靶控MDA—MB-231细胞内外源性雌激素受体α的表达进而对G．／S期相关分子的表达和活性进行调控从而阻止雌激素受体α阴性的乳腺癌细胞的周期进程并恢复对他莫两芬的化疗敏感性。     

维生素D及其活性形式1,25-二羟维生素D_3与糖尿病的关系

糖尿病的发病机制正在研究中,近些年的研究发现,维生素D及其活性形式1,25-二羟维生素D3除传统的调节钙、磷代谢的作用外,还通过刺激胰岛素分泌和减少细胞因子介导的β细胞凋亡途径,在糖尿病的发生、发展中起着关键作用。     

1,25-二羟基维生素D3对鼠宫颈癌免疫作用的研究

目的探讨1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)对裸鼠宫颈癌移植瘤生长的抑制作用。方法制备BALC/c裸鼠皮下宫颈癌模型20只,随机分为4组:1,25-(OH)2D3组、单纯放疗组、1,25-(OH)2D3+放疗组及对照组,每组5只。观察各组裸鼠肿瘤的生长情况、裸鼠的一般情况,测量肿瘤直径并计算瘤体积。断颈处死裸鼠,天平称量肿瘤的重量。测定引流淋巴结中单个核细胞中CD4+、CD4+CD25+含量。结果 1,25-(OH)2D3组及单纯放疗组对肿瘤生长均有抑制作用,二者联合作用抑制更显著。1,25-(OH)2D3组、单纯放疗组及1,25-(OH)2D3+放疗组抑瘤率分别为34.8%、52.1%、54.1%。1,25-(OH)2D3干预后CD4+、CD4+CD25+含量与对照组及放疗组差异无统计学意义,而CD4+CD25+/CD4+在1,25-(OH)2D3组与对照组相比差异显著(P<0.05),1,25-(OH)2D3+放疗组与对照组相比差异显著(P<0.01)。结论 1,25-(OH)2D3+放疗对对裸鼠移植瘤宫颈癌生长有显著免疫抑制作用,为宫颈癌的综合治疗提供了实验依据。     

1,25-二羟维生素D3联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株HS578T增殖的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株HS578T生长的影响.方法 采用四唑氮蓝比色(MTT)法检测细胞增殖,免疫组化法检测Ki-67表达变化.结果 10-7mol/L、10-8mol/L的1,25(OH)2D3及塞莱昔布(50μmol/L)均可抑制乳腺癌细胞增殖,呈时间...     

原发性高血压患者肾素、脂联素、1,25-二羟维生素D3水平变化的研究

目的探讨原发性高血压患者肾素、脂联素、1,25-二羟维生素D3水平与高血压的相关性。方法选取原发性高血压患者(观察组)与体检正常中老年人(对照组)各80例,分别检测肾素、脂联素、1,25-二羟维生素D3水平。结果观察组肾素高于对照组(P<0.01),脂联素和1,25-二羟维生素D3均低于对照组(P<0.01);II~III级高血压患者肾素高于I级患者(P<0.01),脂联素和1,25-二羟维生素D3均低于I级患者(P<0.01)。结论原发性高血压患者表现为肾素活性升高,脂联素、1,25-二羟维生素D3水平降低,以上因子与高血压的发生及高血压严重程度关系密切。     

1,25-二羟维生素D3对慢性哮喘小鼠气道重塑中MMP-9及NF-κB表达的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对慢性哮喘小鼠气道重塑模型肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及核转录因子κB(NF-κB)活化的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组及VD组。卵白蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘气道重塑模型。HE染色及Masson染色观察各组气道结构及上皮下纤维化,并用计算机图像分析系统评价各组气道重塑;蛋白免疫印记法检测肺组织NF-κB p65的核移位;蛋白免疫印记法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测IκBα的表达水平;明胶酶谱法及RT-PCR法检测MMP-9的活性及mRNA表达。结果哮喘组出现炎性细胞浸润增多、上皮下纤维化及平滑肌细胞层增厚等气道重塑的结构改变,而1,25-(OH)2D3的干预可有效减轻上述病理改变。VD组肺组织MMP-9活性为对照组的(3.46±0.57)倍,而哮喘组为对照组的(7.87±0.89)倍(P<0.05);VD组MMP-9 mRNA相对含量为(3.16±0.09),显著低于哮喘组(5.74±0.13)(P<0.05),但仍高于对照组(0.57±0.08)(P<0.05)。1,25-(OH)2D3显著抑制哮喘肺组织中NF-κB p65的核移位并上调IκBα的表达。结论 1,25-(OH)2D3能抑制哮喘肺组织中NF-κB的活化并减少MMP-9表达,进而干预慢性哮喘气道重塑过程。     

1,25-二羟维生素D3及其类似物对免疫系统的调节作用

1,25-二羟维生素D3是维生素D的活性形式,是一种第二类固醇类激素,和维生素D受体（VDR）结合发挥作用。VDR是核受体超家族中的一员,这一核受体超家族还包括类固醇激素受体,甲状腺激素受体和维甲酸受体。1,25-二羟维生素D3调节钙磷代谢,控制细胞的增殖和分化,产生免疫调节作用。对1,25-二羟维生素D3及其类似物功能研究的进展和免疫调节机制的新认识,提示它们在治疗自身免疫性疾病和诱导同种异体移植耐受上可有广泛的应用。1,25-二羟维生素D3及其类似物除了直接作用于T细胞外,还通过各种机制调节抗原呈递细胞的表型和功能,尤其是树突细胞。体内和体外实验都已证明1,25-二羟维生素D3及其类似物诱导树突细胞获得致耐受性,这一特性可被用于人类自身免疫性疾病及同种异体移植排斥的治疗。作者就1,25-二羟维生素D3及其类似物功能研究的新进展和免疫调节机制的新认识作一综述。     

1,25-二羟维生素D3与小儿呼吸系统疾病研究进展

1,25-二羟维生素D3除调节人体内钙磷平衡外,在呼吸系统还具有重要作用。临床研究发现,1,25-二羟维生素D3缺乏可使罹患支气管哮喘、反复呼吸道感染、肺炎、肺结核、肺癌危险性增高。其在呼吸系统疾病中的作用机制可能包括以下四方面:对免疫细胞的作用;对细胞周期的作用;对细胞凋亡的作用;对生长因子和癌基因的影响。     

1,25-二羟维生素D_3对棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D_3(1,25(OH)_2D_3)对棕榈酸(PMA)诱导THP-1巨噬细胞炎症因子表达的影响及其机制。方法用1,25(OH)_2D_3(10 nmol/L)和/或PMA(250μmol/L)处理THP-1巨噬细胞6 h,采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法(ELISA)法检测肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10的表达水平;用1,25(OH)_2D_3和/或PMA处理THP-1巨噬细胞60 min,采用免疫印迹(Western-blot)法检测AMPKα1和磷酸化AMPKα1(p-AMPKα1)水平。结果 1,25(OH)_2D_3(10μmol/L))明显抑制PMA(250μmol/L)作用下THP-1巨噬细胞TNFα、IL-1β和IL-6的表达,并上调IL-10的表达;1,25(OH)_2D_3显著上调THP-1巨噬细胞AMPKα1的磷酸化水平。结论 1,25(OH)_2D_3抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子表达,该效应可能与其激活AMPKα1有关。     

1,25-二羟维生素D3治疗IgA肾病的临床观察

目的 观察1,25-二羟维生素D3治疗IgA肾病的疗效及其安全性.方法 将30例IgA肾病患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组各15例.两组均用双嘧达莫150 mg/d、厄贝沙坦150～300 mg/d,观察组加用1,25-二羟维生素D3 0.25～0.5 μg/d,观察8周.检测治疗前后尿蛋白、肾功能、血钙.结...     

胃癌组织中1,25-二羟维生素D3、TGF-β1和Smad2蛋白的表达

目的:探讨1,25-二羟维生素D3及TGF-β/Smads信号通路与胃癌的关系。方法:收集93例胃癌组织和30例正常胃黏膜组织,采用免疫组化染色法检测1,25-二羟维生素D3及TGF-β1、Smad2蛋白的表达。结果:胃癌组织中1,25-二羟维生素D3表达水平低于正常胃黏膜组织(t=133.850,P<0.001),TGF-β1、Smad2表达水平高于正常胃黏膜组织(t=71.502、35.988,P<0.001)。1,25-二羟维生素D3、TGF-β1和Smad2的表达水平与胃癌的分化程度、临床分期、浸润深度及淋巴结转移关系密切(P<0.001)。胃癌组织中1,25-二羟维生素D3与TGF-β1、Smad2的表达呈负相关(r=-0.583,-0.462,P<0.001),TGF-β1与Smad2的表达呈正相关(r=0.425,P<0.001)。结论:1,25-二羟维生素D3可能通过调控TGF-β/Smads信号通路参与了胃癌的发生发展。     

1,25-二羟维生素D_3对大鼠肾间质纤维化的作用研究

目的：研究1,25-二羟维生素D3〔1,25-（OH）2D3〕对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的影响。方法：45只大鼠随机分为假手术组（n=15）、UUO组（n=15）和1,25-（OH）2D3干预组（n=15）,建立UUO大鼠肾间质纤维化模型,干预组于术后第1天起每天腹腔注射1,25-（OH）2D3,假手术组及UUO组腹腔注射等量生理盐水。分别于术后第3天、第7天和第14天处死大鼠,每次5只,取梗阻侧肾脏行HE、Masson染色及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫组化标记,观察肾损伤程度和肾间质纤维化程度;取血测定肌酐和尿素氮水平观察肾功能;处死前1天收集24 h尿液,检测尿中蛋白含量。结果：与假手术组相比,UUO组和干预组各时间点HE、Masson染色和α-SMA表达变化明显,呈逐渐加重趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）;肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白含量术后第3和第7天时表现为升高,术后第14天时出现下降,差异有统计学意义（P〈0.05）。与UUO组相比,干预组各时间点各项指标变化明显改善,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：1,25-（OH）2D3可抑制UUO大鼠肾间质纤维化进程,改善肾功能。     

1,25-二羟维生素D3对人胃黏膜上皮细胞恶性转化过程的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3(骨化三醇)在化学致癌剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的恶性转化过程中对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞生长、凋亡及Shh、Gli1基因表达的影响. 方法 MNNG诱导GES-1细胞作为对照组,诱导后用不同浓度(10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L)1,25-二羟维生素D3干预(实验组),采取四甲基固氮唑盐(MTT)检测实验组和对照组细胞增殖并确定实验组最佳药物浓度.分为GES-1细胞组、对照组和实验组,流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测各组细胞Shh、Gli1 mRNA基因的表达. 结果 MTT法显示,对照组细胞出现大量死亡,实验组给予10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L的1,25-二羟维生素D3干预后存活细胞较对照组增多(P＜0.05).取最佳药物作用浓度10-6 mmol/L为实验组,FCM测各组细胞7d的凋亡率分别为实验组(45.73±2.08)％、对照组(85.23±2.08)％、GES-1细胞组(4.9±0.91)％.与对照组相比,实验组细胞凋亡明显减少(P＜0.05).RT-PCR显示Shh mRNA在实验组(0.674 7±0.011 6)、对照组(0.661 6±0.0095)均表达(P＞0.05),Gli1 mRNA实验组(0.338 2±0.015 0)表达低于对照组(0.532 8±0.011 5)(P＜0.05). 结论 1,25-二羟维生素D3有阻止GES-1细胞恶性转化的作用,从而可达到延缓或阻止细胞恶变的目的.其机制可能与通过阻断Sonic Hedgehog(SHH)信号通路有关.     

糖尿病肾病患者血清1,25-二羟维生素D_3水平变化

目的观察血清1,25-二羟维生素D_3[1,25-(OH)_2D_3]水平在糖尿病肾病(DN)进展中的变化。方法选择2013年8月至2015年5月深圳市龙岗中心医院收治的2型糖尿病患者157例,按照Mogensen分期标准将患者分为单纯糖尿病(DM)组(n=36)、早期DN(EDN)组(n=38)、临床DN(CDN)组(n=42)和DN终末期(ESDN)组(n=41),另选择同期体检健康者36例作为对照组。对5组受试者的尿白蛋白排泄率(UAER)、肾小球滤过率(GFR)及血清1,25-(OH)_2D_3水平进行比较。结果对照组与DM组患者UAER、GFR比较差异均无统计学意义(P>0.05);EDN组、CDN组和ESDN组患者UAER显著高于对照组和DM组(P<0.05),EDN组、CDN组和ESDN组患者GFR显著低于对照组和DM组(P<0.05);CDN组和ESDN组患者UAER显著高于EDN组(P<0.05),但CDN组与ESDN组患者UAER比较差异无统计学意义(P>0.05);ESDN组患者GFR显著低于EDN组和CDN组(P<0.05),但EDN组与CDN组患者GFR比较差异无统计学意义(P>0.05)。DM组、EDN组、CDN组和ESDN组患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著低于对照组(P<0.05),EDN组、CDN组和ESDN组患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著低于DM组(P<0.05),CDN组和ESDN组患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著低于EDN组(P<0.05),ESDN组患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著低于CDN组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,糖尿病患者血清1,25-(OH)_2D_3水平与GFR呈正相关(r=0.389,P<0.001),与UAER呈负相关(r=-0.450,P<0.001)。结论 DN患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著降低,检测血清1,25-(OH)_2D_3水平可能对早期发现DN及其病情判断有积极意义。     

1,25-二羟维生素D3对实验性变态反应性脑脊髓炎外周血单个核细胞免疫功能的影响

目的研究1,25-二羟维生素D3对豚鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）外周血单个核细胞分泌细胞因子（CK）能力的影响,探讨1,25-二羟维生素D3防治EAE的免疫调节机制。方法采用粗制碱性髓鞘蛋白（MBP）加福氏完全佐剂皮下注射的方法建立EAE模型。将50只豚鼠随机分成5组：正常对照组、EAE对照组、EAE低剂量治疗组、EAE中剂量治疗组和EAE高剂量治疗组,每组10只,造模前3d正常对照组和EAE对照组每天灌喂0.4ml花生油,EAE低剂量、中剂量、高剂量治疗组分别在造模前3d开始灌喂含1,25-二羟维生素D30.5μg·kg^-1·d^-1、1.25μg·kg^-1·d^-1、2.5μg·kg^-1·d^-1的花生油0.4ml,直至整个实验结束。酶联免疫吸附（ELISA）法测定正常对照组和EAE模型组发病高峰期外周血单个核细胞分泌的细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10、TNF-α的水平。结果EAE对照组外周血单个核细胞分泌IL-4、IL-10的能力较正常对照组明显降低（P〈0.05）,EAE高、中、低剂量治疗组外周血单个核细胞分泌IL-4、IL-10的能力较EAE对照组明显增强（P〈0.05）。EAE对照组外周血单个核细胞分泌IFN-γ、TNF-α的能力较正常对照组明显增强（P〈0.05）,EAE高、中、低剂量治疗组外周血单个核细胞分泌IFN-γ、TNF-α的能力较EAE对照组明显减弱（P〈0.05）。结论EAE存在明显免疫功能紊乱,1,25-二羟维生素D3防治EAE的免疫机制作用可能是通过抑制IFN-γ、TNF-α产生及促进IL-4、IL-10而产生。     

1,5二羟维生素D3对哮喘大鼠气道重塑及纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

目的 观察1,25二羟维生素D3(VD)对哮喘大鼠气道重塑及其肺组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1( PAI-1)表达和血浆中PAI-1含量的影响.方法 30只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、VD干预组,每组各10只.卵蛋白致敏和激发复制慢性哮喘模型.VD干预组每次激发前给予VD 干预.用免疫组化检测肺组织PAI-1的表达,酶联免疫法测血浆中PAI-1含量,采用图像分析进行图像分析.结果 (1)哮喘组支气管管壁厚度较对照组和VD干预组显著增加(P＜0.01).(2)哮喘组PAI-I在大鼠肺组织的表达程度较对照组和VD干预组显著增加(P＜0.01).(3)哮喘大鼠血浆中PAI-1含量较对照组和VD干预组明显增加(P＜0.01).(4)直线相关性分析显示,哮喘组支气管管壁厚度与大鼠肺组织中PAI-1表达水平呈正相关(r=0.822,P＜0.01);哮喘组支气管管壁厚度与大鼠血浆中PAI-1含量呈正相关(r=0.942,P＜0.01).结论 1,25二羟维生素D3干预可明显减轻慢性哮喘气道重塑的病理改变,并可通过部分抑制PAI-1的表达来延缓气道重塑.