特发性脊柱侧凸椎旁肌组织钙调蛋白和神经元型一氧化氮合酶表达的研究

目的通过比较特发性脊柱侧凸患者胸弯顶点处凸侧、凹侧椎旁肌的钙调蛋白(CaM)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的差异,探讨椎旁肌在脊柱侧凸中可能的作用机制。方法本研究选择了2001年8-12月期间北京协和医院收治的胸椎侧凸畸形患者10例,手术中取脊柱侧凸患者顶椎凸侧、凹侧椎旁肌肉组织各1块,采用免疫组织化学和Western杂交检测脊柱侧凸椎旁肌组织中CaM和nNOS基因的表达,采用HE染色和SA染色检测椎旁肌组织肌纤维形态。结果HE染色和SA染色显示脊柱侧凸患者凸侧肌纤维比其凹侧及正常对照的肌纤维明显变细。免疫组织化学和Western杂交显示凸侧肌肉组织CaM和nNOS的表达量明显降低。结论脊柱侧凸患者双侧椎旁肌CaM和nNOS表达不均衡,可能在特发性脊柱侧凸发生发展中发挥作用。     

腺苷受体A3在特发性炎症性肌病中的表达

目的探讨腺苷受体A3(A3AR)在特发性炎症性肌病(IIMs)发病机制中的作用。方法收集IIMs患者骨骼肌活检组织标本30例,其中皮肌炎(DM)患者15例、多发性肌炎(PM)患者11例、包涵体肌炎(IBM)患者4例;正常对照标本12例。在冰冻切片上行组织化学染色和A3AR抗体免疫荧光染色。结果 A3AR抗体免疫荧光染色阳性见于骨骼肌2型肌纤维胞浆,1型肌纤维胞浆呈阴性;与正常对照比较,30例IIMs患者中22例2型肌纤维胞浆荧光增强。肌纤维膜荧光染色在正常对照呈阴性,而19例IIMs患者呈阳性。血管平滑肌和部分坏死肌纤维A3AR抗体免疫荧光染色呈强阳性。结论人骨骼肌2型肌纤维表达A3AR;特发性炎症性肌病患者A3AR表达增加,可能对肌纤维的修复和凋亡起双向调节作用。     

抗信号识别颗粒抗体肌病5例

收集中南大学湘雅医院老年神经内科2015年12月至2018年6月诊断为抗信号识别颗粒抗体肌病的患者5例。 患者均亚急性或慢性起病，临床表现为逐渐进展的对称性肢体近端无力，血清肌酸肌酶明显增高，血清抗信号识别 颗粒抗体阳性，肌电图提示肌源性损害。肌肉活检病理表现为变性坏死伴再生，可见萎缩及肥大肌纤维，伴结缔组 织增生及少量炎性细胞浸润；免疫组织化学染色可见CD4及CD8阳性淋巴细胞、CD68阳性巨噬细胞浸润；未见CD20 阳性淋巴细胞及CD303阳性树突细胞浸润；其中2例患者少量毛细血管C5b-9表达阳性；全部患者的抗肌聚糖蛋白染 色、抗Dysferlin染色、抗dystrophin染色连续强阳性表达。患者均对糖皮质激素治疗有效，部分患者需联合免疫球蛋白 及免疫抑制剂治疗。     

皮肌炎的微血管免疫病理改变

目的 探讨皮肌炎患者骨骼肌内微血管的免疫病理改变规律。方法 对12例皮肌炎患者进行肌肉活检。选择10例非皮肌炎患者作为对照,进行常规组织学和酶组织化学和针对血管的免疫组织化学染色,第一抗体包括抗血管性血友病因子（vWF）抗体、抗血栓调节蛋白（TM）抗体和抗内皮细胞一氧化氮合酶（eNOS）抗体。结果 所有患者出现束周分布的肌纤维变性和肌束衣内小血管周围不同程度的炎细胞浸润,非特异性酯酶染色显示肌纤维间毛细血管深染。免疫组化染色显示毛细血管的vWF、TM和eNOS在束周区域分布显著减少,肌束衣处的微小动脉和静脉的TM和eNOS也减少。结论 皮肌炎的血管内皮细胞损害除毛细血管外,可以出现在其他微血管。TM以及eNOS在血管内皮细胞减少提示血管的抗凝和舒张功能下降。皮肌炎是一种弥漫性炎性血管内皮细胞病。     

PKC/CUGBP1信号通路与强直性肌营养不良骨骼肌病理特征的关系

目的探讨强直性肌营养不良(DM)骨骼肌中蛋白激酶C/CUG三联体重复RNA结合蛋白(PKC/CUGBP1)信号通路与骨骼肌纤维病理特征的关系。方法选取11例DM患者(DM组)与11例无肌不良骨折患者(正常组),均行肌肉活检病理检查;组织化学染色(HE、MGT、NSE、NADH-TR、ACP、ATP)观察病理特征;免疫印迹检查肌肉组织中PKC/CUGBP1信号通路关键蛋白PKCδ、p-PKCδ、CUGBP1的表达,并分析PKCδ、p-PKCδ、CUGBP1蛋白表达水平与DM患者病理特征的相关性。结果组织化学染色显示,DM患者骨骼肌出现大量肌纤维异常、肌纤维核内移;DM组肌肉组织中p-PKCδ、CUGBP1蛋白表达水平均明显高于正常组(t=-23.907、-36.743,均P<0.001),且均与肌纤维萎缩、肌纤维肥大、肌纤维核内移发生率呈正相关(均P<0.05)。结论PKC/CUGBP1信号通路在DM中的活性与患者骨骼肌发生肌纤维异常、肌纤维核内移的病理特征存在相关性。     

克山病心臟組織化學的初步觀察(摘要)

用5例克山病患者尸检材料及5例其他疾患尸检材料,取心脏进行三磷酸腺苷酶(ATPase)及脱氧核糖核酸(DNA)的组织化学检查,在克山病心脏中呈颗粒变性的心肌纤维对ATPase染色反应不稳定,有时阳性,有时为阴性,肌溶坏死部分ATPase染色呈弥散性反应,瘢痕部分ATPase染色旧阴性,小血管在新解瘢痕中者呈阳性反应,陈瘢痕中者呈阴性反应,单核细胞反应区亦呈阴性反应,结构正常的心肌纤维中ATPaso     

晚发型酸性麦芽糖酶缺陷病的肌肉酶组织化学和超微结构

目的 :探讨酸性麦芽糖酶缺陷病的肌肉酶组织化学和超微结构特点。方法 :用酶组织化学方法观察快速冷冻后的肌肉组织切片 ,用透射电镜观察其超微结构。结果 :①光镜下见大量空泡肌纤维 ,空泡内可见嗜碱性絮状或粗颗粒状物质 ,形成镶边空泡 ;②ATP酶染色示空泡主要累及Ⅱ型肌纤维。空泡化肌纤维的酸性磷酸酶活性明显增强 ,PAS阳性物质轻度增多 ;③电镜观察发现肌原纤维间大量糖原及髓样结构 ,外包单位膜。含变性线粒体及糖原颗粒的自噬空泡多见。在肌间毛细血管的周细胞和间质成纤维细胞内发现多个糖原积聚区。结论 :肌活检超微病理观察和酶组织化学检测对酸性麦芽糖酶缺陷病有明显的特异性 ,对本病的诊断有重要价值。     

实验性酒精中毒性肌病组织病理学研究

目的了解酒精中毒性肌病的组织病理变化特征.方法建立慢性酒精中毒性大鼠肌病模型,观察动物染毒后不同时期和不同部位肌肉组织病理改变.结果 (1)酒精染毒动物肌纤维有变性、坏死、肌纤维萎缩、炎细胞浸润和肌纤维再生现象.(2)酒精染毒后,Ⅱ型肌纤维较Ⅰ型肌纤维病理损害更严重,Ⅱb型肌纤维萎缩是较突出的病理改变.(3)酒精染毒后,不同部位的肌肉病理改变程度存在差异,对酒精中毒的易感性依次为跖肌、腓肠肌和比目鱼肌.(4)酒精染毒后各型肌纤维的构成比无明显变化.结论酒精中毒性肌病肌肉组织病理改变形式多样,Ⅱ型肌纤维选择性易损是其特征.     

特发性脊柱侧凸椎旁肌组织bcl-2等蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的本研究通过比较脊柱侧凸患者胸弯顶点处凸侧、凹侧椎旁肌的bcl-2、Caspase-3及bcl-x表达的差异,以从分子生物学角度探讨椎旁肌在脊柱侧凸中可能的作用机制.方法选择2001年8月至2001年12月间于我院收治的胸椎侧凸畸形患者10例,采用免疫组织化学和Western杂交检测脊柱侧凸凸侧、凹侧椎旁肌组织中bcl-2、Caspase-3及bcl-x基因的表达,采用HE染色和SA染色检测椎旁肌组织肌纤维形态,TUNEL原位检测椎旁肌肌细胞的凋亡情况.结果脊柱侧凸患者凸侧肌肉组织bcl-2、Caspase-3及bcl-x蛋白的表达量均降低,以bcl-2降低最为明显.脊柱侧凸患者及正常对照椎旁肌肉组织均存在个别细胞的凋亡,二者无明显差异.凸侧肌纤维比其凹侧及正常对照的肌纤维明显变细.结论神经-肌肉异常所致的椎旁肌的不对称有可能是特发性脊柱侧凸发生发展的一个重要因素,而这种不对称很可能与bcl-2、Caspase-3及bcl-x的表达不对称相关.     

YAP在特发性膜性肾病中的表达及其对C5b-9诱导足细胞损伤的作用

目的 在特发性膜性肾病(IMN)中探究转录共激活因子Yes相关蛋白(YAP)的表达及其在膜攻击复合物C5b-9诱导足细胞损伤的作用。方法 免疫组织化学染色检测YAP蛋白在IMN患者肾组织及正常对照肾组织中的表达;选用亚溶解剂量的膜攻击复合物C5b-9(以下简称C5b-9)在体外建立人足细胞系MPC5的损伤模型,Western blot检测随C5b-9刺激时间的延长,足细胞中YAP蛋白的表达变化;使用siRNA瞬时转染技术,靶向沉默足细胞中YAP基因表达,qRT-PCR及Western blot检测转染效率;按足细胞处理的不同将其分为4组,正常培养的Control组,经C5b-9处理的C5b-9组,C5b-9处理转染si-NC或si-YAP的的C5b-9+si-NC组与C5b-9+si-YAP组;应用CCK-8实验检测上述各组细胞的增殖活力,Anenxin V-FITC双染色联合流式细胞数检测各组细胞的凋亡发生率,DCFH-DA法检测细胞中活性氧(ROS)含量,Western blot检测各组细胞中足细胞标志性蛋白Nephrin、WT1与紧密连接蛋白ZO-1、表型转换蛋白Snail及纤连...     

程序化细胞死亡分子5及其他凋亡调控蛋白在线粒体病患者骨骼肌中的表达

目的 检测程序化细胞死亡分子5(PDCD5)、半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)、Bax和Bcl-2蛋白在线粒体脑肌病伴随乳酸血症和卒中样发作(MELAS)、肢带型线粒体肌病(LGMM)及慢性进行性眼外肌瘫痪(CPEO)患者骨骼肌中的表达情况,探讨细胞凋亡与线粒体病发病机制之间的关系.方法 选择经临床、病理及基因检查诊断的3例MELAS、2例LGMM和6例CPEO患者,对骨骼肌进行PDCD5、Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白免疫组织化学染色,以11例非骨骼肌疾病患者的肌肉标本进行对照.结果 PDCD5和Caspase-3在个别破碎红纤维(RRF)膜下和少数毛细血管高表达,在对照无表达;Bcl-2在病例组和对照组的许多小血管中表达,在病例组的许多RRF和毛细血管表达增强;Bax在正常对照和患者组的肌纤维和毛细血管未见表达.结论 线粒体病患者的骨骼肌内存在细胞凋亡过程的异常调节,PDCD5、Caspase-3、Bcl-2和Bax参与其中.     

Radioimmunoassay and immunohistochemical study of myoglobin in neuromuscular diseases]

The localization of myoglobin (Mb) in skeletal muscle was studied by an immunoperoxidase technique and the serum Mb was measured by radioimmunoassay in 38 patients with various neuromuscular diseases. The positive rate of Mb immunoreactivity was significantly different between the muscular disorders and the motor neuron diseases. It was 44-77% in Duchenne dystrophy and polymyositis, and was 90-99% in motor neuron diseases. Serum myoglobin was markedly elevated in all the patients with muscular disorders, especially Duchenne dystrophy and polymyositis at the level of 329-330 ng/ml. It was found to increase slightly or normally in motor neuron diseases. Marked decrease or loss of Mb immunoreactivity was observed in muscle fibers with hyaline degeneration or floccular necrosis. It suggested that the elevation of serum Mb in patients with these diseases was ascribable to its leak through the injured plasma membrane of diseased muscle fibers or release from the necrotic muscle fibers.     

主要组织相容性抗原-Ⅰ表达在多发性肌炎诊断中的作用

目的探讨主要组织相容性抗原-Ⅰ（MHC-Ⅰ）表达在多发性肌炎诊断中的作用。方法收集进行肌肉活检的54例患者临床资料,活检肌肉组织进行常规病理检查及MHC-Ⅰ免疫组织化学染色,以评价MHC-Ⅰ表达在多发性肌炎诊断中的价值。结果在16例多发性肌炎患者中,炎细胞浸润阳性率63％,MHC-Ⅰ表达阳性率94％;在19例进行性肌营养不良患者中炎细胞浸润阳性率5％;MHC-Ⅰ表达阳性率11％;在19例其他肌病及非肌病患者均未发现MHC-Ⅰ表达和炎性细胞浸润。结论MHC-Ⅰ表达作为多发性肌炎的组织学诊断指标,灵敏度、特异度及阴性似然比均较为理想,是一个合适的指标。     

MMPs及VEGF在颅内多发动脉瘤壁表达及意义的初步研究

目的：初步探讨基质金属蛋白酶2和9（MMP-2、9）及血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor ,VEGF）在颅内囊性动脉瘤表达及意义。方法：采用免疫组化方法检测正常脑血管和颅内囊性动脉瘤中MMP-2,9及VEGF的表达情况;通过透射电镜观察正常脑血管及颅内囊性动脉瘤超微结构变化。结果：观察组MMP-2、9及VEGF表达较对照组显著增高(P<0．05),免疫阳性产物主要分布于动脉瘤壁的中膜层,同时, 观察组的内皮细胞变性脱落,胞浆内出现肿胀的线粒体和大小不等的空泡,瘤壁可见形态异常的平滑肌细胞和成纤维细胞,增多的胶原纤维排列紊乱。结论:MMP-2、9及VEGF过度表达可能与血管退行性变、颅内囊性动脉瘤瘤体的形成、扩大、破裂有重要关系。在颅内多发囊性动脉瘤更具重要意义。     

鼻中隔偏曲下鼻甲肥大组织病理学观察

目的 :观察并比较鼻中隔偏曲伴偏曲对侧减充血剂敏感的粘膜性下鼻甲肥大病人两侧下鼻甲固有层血管的结构特点。方法 :对 4 0例该病病人行中隔矫正术前 ,在鼻内窥镜下于两侧下鼻甲前 1 3处切取组织。采用光镜、透射电镜 ,观察下鼻甲固有层血管的结构特点。结果 :光镜 :偏曲对侧较同侧下鼻甲粘膜固有层窦状隙数目相对增多 ,血管壁平滑肌细胞密度相对增加。透射电镜 :偏曲对侧较同侧下鼻甲粘膜固有层结缔组织胶原纤维明显增多。粘膜上皮下毛细血管及腺体周围毛细血管的内膜具有窗格样空隙 ,小静脉内皮基底膜及平滑肌细胞呈高度多孔性 ;窦状隙为排列不规则的血管间平滑肌纤维围绕。粘膜上皮下毛细血管及腺体周围毛细血管内皮细胞及窦状隙平滑肌细胞内线粒体肿胀、基质变少 ,出现空泡 ,嵴少而短 ,甚至消失。结论 :窦状隙及血管间平滑肌纤维可能与粘膜性下鼻甲肥大的发生有关     

成人炎症性肌肉病的临床病理特点:诊断标准及分类的新认识

目的 依据新的欧洲神经肌肉疾病中心和美国肌病研究协作组(ENMC)关于炎症性肌肉病的诊断标准和分类,总结成人炎症性肌肉病患者的临床、电生理和骨骼肌病理改变特点.方法 回顾性分析北京大学第三医院53例成人炎症性肌肉病患者的临床、电生理特点,及肌肉、皮肤、神经活检的病理特点.结果 53例患者肌肉病理为肌源性损害伴炎性细胞浸润,其中,多发性肌炎19例,皮肌炎12例,包涵体肌炎6例,免疫介导性坏死性肌肉病4例,非特异性肌炎12例;其中5例患者伴发结缔组织病(系统性硬化症伴干燥综合征1例,系统性硬化症1例,干燥综合征3例),4例伴发恶性肿瘤(贲门癌2例,肺癌2例).结论 炎症性肌肉病的病理改变在全身骨骼肌中的分布是不一致的,在一块骨骼肌内的分布也是不一致的.故小的组织块可能错过典型的病理改变.ENMC诊断标准中的拟诊多发性肌炎、皮肌炎和包涵体肌炎,有助于早期诊断和治疗;ENMC诊断标准中新加入的免疫介导性坏死性肌肉病和非特异性肌炎均对临床诊治有利.ENMC标准更具科学性和临床实用性.     

慢性酒精中毒性肌病的临床及病理特点研究

目的探讨慢性酒精中毒性肌病患者的临床表现、骨骼肌活检病理特点。方法总结12例临床确诊的酒精中毒性肌病患者的临床资料,对确诊病例行骨骼肌活检,行组织化学染色,光镜下观察、摄片,进行病理分析。结果慢性酒精中毒肌病患者以肌无力、肌萎缩为主要表现,辅助检查无明显特异性;肌肉病理可见坏死、萎缩肌纤维,以Ⅱ型肌纤维萎缩为主,可见不整红边纤维（RRF）。结论慢性酒精中毒性肌病的病理变化多样,综合病史、病理检查,完善相关辅助检查是诊断该病的关键。