ELISA法测定混合饲料多种霉菌毒素污染的研究

目的研究ELISA法检测饲料中伏马菌素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素的可行性,并对深圳市售玉米混合饲料污染状况调查。方法采用竞争ELISA法,检测玉米混合饲料中伏马菌素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素污染状况。结果伏马菌素浓度为0．25～5．0mg/kg之间的变异系数（CV,％）为1．0-7．0;黄由霉毒素浓度为1．0～20．0μg／kg之间的变异系数（CV,％）为1．0-7．5;赭曲霉毒素浓度为2．0～40．0μg／kg之间的变异系数（CV,％）为2．0-7．5;脱氧雪腐镰刀菌烯醇浓度为0．25～5．0mg／kg之间的变异系数（CV,％）为1．0～8．0;T-2毒素含量浓度为75．0～500．0μg／kg之间的变异系数（CV,％）为2．0-7。结论ELISA法检测玉米混合饲料中几种毒菌素的污染,显示方法灵敏度高、干扰少、测定步骤简便、快速、操作安全、测定结果准确可靠。建议日常工作中先用ELISA法快速筛选检测,阳性样品再用液相色谱-质谱联用仪分析法、薄层法进行确证实验。     

ELISA法测定发酵茶和植物香料真菌毒素的污染

目的探讨以ELISA法检测发酵茶、植物香料中玉米赤霉烯酮、伏马菌素、黄曲霉毒素（AFB1）、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）、T-2毒素的可行性及污染状况。方法采用竞争酶联免疫吸附法,检测发酵茶、植物香料中玉米赤霉烯酮、伏马菌素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素。结果玉米赤霉烯酮浓度为40.0～1 000.0μg/kg之间的变异系数为1.5%～6.5%,回收率为87.5%～111.1%,r=0.998;伏马菌素浓度为0.25～5.0mg/kg之间的变异系数为2.0%～6.5%,回收率为90.0%～107.2%,r=0.992;黄曲霉毒素浓度为1.0～20.0μg/kg之间的变异系数为2.2%～7.8%,回收率为85.0%～115.0%,r=0.997;赭曲霉毒素浓度为2.0～40.0μg/kg之间的变异系数为1.8%～7.0%,回收率为87.5%～120.0%,r=0.998;脱氧雪腐镰刀菌烯醇浓度为0.25～5.0 mg/kg之间的变异系数为1.5%～8.0%,回收率为90.0%～110.0%,r=0.996;T-2毒素含量浓度为75.0～500.0μg/kg之间的变异系数为2.8%～7.5%,回收率为86.6%～106.6%,r=0.996。结论ELISA法检测发酵茶、植物香料中玉米赤霉烯酮、伏马菌素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素简便快速。建议日常工作中先以ELISA法筛选,阳性样品再以液相色谱—质谱联用仪分析法、薄层法进行确证实验。     

用高效液相色谱法测定粮食样品中的赭曲霉毒素A

目的：建立用高效液相色谱仪测定赭曲霉毒素A（ochratoxinA,OA)的方法，对沈阳地区小麦，水稻中OA的污染情况进行检测。为评价我国粮食中OA的污染现状提供科学依据。方法：用高效液相色谱法，荧光检测器检测，激发波长为338nm，发射波长为455nm。流动相为乙腈-0.008mol/L磷酸（56：44，V/V）。结果：在35份小麦样品和27份水稻样品中有一份小麦样品OA阳性，方法回收率在80%以上，最低检测限为0.5μg/kg。结论：建立的方法简便，经济、可靠，检测结果提示沈阳地区小麦和水稻的OA污染率较低。     

广州市市售粮油食品中黄曲霉毒素B1的污染调查分析

目的对2016-2017年广州市市售粮油食品中黄曲霉毒素B1进行监测,为广州市市售粮油食品黄曲霉毒素B1风险评估工作提供基础数据。方法在广州市11个区随机采集粮油样品五大类共550份,按照GB/T 18979-2003《食品中黄曲霉毒素B1的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》进行检测。检测结果依据GB 2761-2017进行评价。结果 550份样品中共有74份检出黄曲霉毒素B1,检出率为13.4%,总体超标率为0.9%。结论广州市市售五大类粮油食品黄曲霉毒素B1污染水平不高,但花生油黄曲霉毒素B1检出率较高,非正规厂家生产的花生油黄曲霉毒素B1含量超标率比正规厂家生产的花生油高。     

山东省淄博市1088份市售食品监测结果分析

目的了解淄博市食品中污染物及有害因素的污染状况,确定高风险食品,为执法部门加强监管提供科学依据。方法按照《2016年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》等相关方法对淄博市食品中污染物及有害因素进行检测。结果 2016年全年共检测各类食品样品1 088份,超标111份,超标率为10. 20%。其中化学污染物及有害因素监测样品数量672份,超标率为1. 34%(9/672),超标指标包括玉米面中的玉米赤霉烯酮及赭曲霉毒素、海燕鱼鱼干中的镉、绿豆芽中的吲哚乙酸;微生物及其致病因子检测416份,超标率为24. 52%(102/416),其中水产品中的致病性弧菌及肉与肉制品中的沙门氏菌检出率较高。结论淄博市食品安全状况整体优良,但食品中食源性致病菌污染较为严重,应加强针对性监管,防止食品安全事故发生。     

氮化碳纳米片耦合适配体的赭曲霉毒素荧光检测新方法研究

目的建立快速测定药材外源性有害成分赭曲霉毒素（OTA）的含量,为药材快速质控技术提供前期基础。方法制定一段一端标记有羧基荧光素（FAM）荧光团的赭曲霉毒素DNA适配体序列片段:5’-GAT-CGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-FAM-3’,在20 mM Tris-HCl缓冲液（包含100 mM NaCl、5.0mM KCl、5.0 mM MgCl2,pH 7.4）中,以氮化碳纳米片（g-C3N4nanosheets,CNNS）为荧光淬灭基质,利用CNNS对游离态DNA和OTA-DNA复合态的吸附差异和其对FAM的荧光淬灭作用,实现对OTA的检测。结果该传感器对OTA的检测线性范围为1～100 nM,检测限为0.7 nM,且10倍浓度的赭曲霉毒素B和黄曲霉毒素B1均不会对检测结果有明显影响。结论氮化碳纳米片耦合OTA适配体的荧光检测方法具有较高的选择性和灵敏度,且操作简单,有望成为中药材中赭曲霉毒素含量测定的新方法。     

深圳市售热加工食品中呋喃污染状况调查

目的了解深圳市售热加工食品中呋喃的污染状况。方法应用稳定同位素稀释技术结合顶空气相色谱-选择离子监测（SIM）质谱法检测购于深圳市场的热加工食品中呋喃含量。结果共检测热加工食品样品156份,呋喃的检出率为67.3%（定量检出限为2.0μg/kg）,105份阳性样品中呋喃的污染水平为2.2～896μg/kg,其中咖啡、酱油、婴幼儿食泥及部分零食中呋喃含量的平均值为18.3～482μg/kg。结论深圳市售热加工食品中广泛存在呋喃,其中咖啡、酱油、脆香米面制零食和婴幼儿食泥是呋喃摄入的重要来源。     

毛细管电泳法测定玉米赤霉烯酮及其代谢物

目的 建立粮食样品中玉米赤霉烯酮及其代谢物的毛细管电泳测定方法。方法 样品经液－液超声波提取，C18小柱净化后，胶束电动毛细管电泳（MEKC）测定。结果 玉米赤霉烯酮（Zeralenone,ZON),α-Zearalenon (α-ZOL)，β-Zearalenol(β-ZOL），黄曲霉B1（Aflatoxin B1,FT B1)，赭曲霉A（Ochratoxin A,Och A)的检出限分别为：0.0084,0.081,0.14,0.0016,0.031μml。样品加标回收率77．9％－103．1％，相对标准偏差0．63％－1．98％。结论 该法灵敏，准确，可用于粮食样品中玉米赤霉烯酮等真菌毒素的测定。     

河北省市售玉米面中玉米赤霉烯酮和伏马菌毒素B_1、B_2污染状况调查

目的了解河北省市售玉米面中玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)和伏马菌毒素B1(fumonisin B1,FB1)、B2(fumonisin B2,FB2)的污染情况,评估污染带来的安全风险,进一步为食品安全的监管提供依据。方法采集河北省11个地市市售玉米面共80份,用液相色谱串联质谱仪(LC-MS/MS)检测ZEN和FB1、FB2的污染水平,并对其污染现状进行分析。结果 35份样品检测出ZEN,检出率为43.75%;5份样品检测出FB1,检出率为6.25%;4份样品同时检测出ZEN和FB1,检出率为5.00%。全部样品均未超出国家限量标准和国际推荐限量标准。结论河北省2014年市售玉米面中ZEN和FB1均有检出,且ZEN的检出率较高。应加强对市售玉米面及其相关食品中ZEN和FB的长期监测,以对消费者健康起到积极的保护作用。     

深圳市售发酵食品中氨基甲酸乙酯污染状况的调查

目的了解深圳市售发酵食品中氨基甲酸乙酯(EC)的污染状况,对葡萄酒中EC进行危险性评估。方法试样中加入d5-EC氘代同位素内标,采用基质固相分散萃取(MSPD)和固相微萃取(SPME)进行样品前处理,经DB-WAX毛细管柱气相色谱分离,选择离子监测(SIM)的质谱扫描模式定量分析样品中EC。结果共检测了来自于深圳市场的发酵食品样品87份,EC的阳性检出率为51%,44份检出样品中EC的污染水平为11.2～156.8μg/kg,其中葡萄酒中EC的污染水平为11.2～65.1μg/kg,平均摄入量1.8ng/kg.bw/day,患癌症的MOE为167000;EC的较高摄入量(97.5百分位)为13.8ng/kg.bw/day,患癌症的MOE为21700。结论部分发酵食品和酒精饮料中均存在EC的污染,对我国食品中EC的暴露应给予关注。     

城乡居民经饮食日摄入铅量对血铅含量影响的分析

为分析城乡居民经饮食铅的摄入量与血铅的关系,选择城乡成年女性居民各５０例,按食物复制法,收集每例２４ｈ摄取的食物和主粮样品,结果表明农村居民经饮食日摄入铅量平均为４５．８μｇ,其血铅含量平均为５０．２μｇ／Ｌ,明显高于城市居民铅的日摄入量２５．８μｇ和血铅３５．３μｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。测得４种主粮样品中铅含量,小米和玉米中分别含铅为４３．３ｎｇ／ｇ、４６．９ｎｇ／ｇ,高于面粉（２６～３０ｎｇ／ｇ）和大米（２０～２１ｎｇ／ｇ）中含铅量。提示农村居民血铅含量高于城市居民,可能与农村居民常年摄取较多含铅量高的玉米和小米食物有关。     

HPLC法同时测定小鼠血浆中3种银杏酸单体的浓度

目的: 建立小鼠血浆中银杏酸（ginkgolic acid,GA) 3种主要单体GA 13∶0,GA 15∶1和GA 17∶1的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法: 以制备的GA 13∶0,GA 15∶1和GA 17∶1单体为标准品,采用外标法建立标准曲线。采用乙腈预处理样品以沉淀其中蛋白质。采用SinoChrom ODS AP C18色谱柱 (250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-3%醋酸(92∶8)为流动相,流速1.0 mL· min^-1,检测波长为310 nm。结果： GA 13∶0,GA 15∶1和GA 17∶1标准曲线分别在0.135～20μg·mL^-1,0.129 ～20μg·mL^-1和0.211～22μg·mL^-1范围内线性关系良好（r均＞0.999 0）;回收率均＞70.2% (n=5),测定准确度为95.2%~101.5%;日内相对标准偏差≤6.2%,日间相对标准偏差≤9.5%。结论：成功建立测定GA 13∶0,GA 15∶1和GA 17∶1单体的HPLC方法,其灵敏度高,重现性、精密度和准确性好。     

Drop-off微滴式数字PCR检测急性髓系白血病NRAS基因突变及其临床应用

目的： 建立检测急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）神经母细胞瘤RAS病毒癌基因同源物（NRAS）基因突变的drop-off微滴式数字PCR（droplet digital PCR,ddPCR）方法,并评价该方法的临床应用价值。方法: 针对NRAS G12和G13突变位点设计特异性drop-off ddPCR引物和探针,建立最佳反应体系,并对该方法进行性能验证。应用该方法对140例临床样本进行初筛,其检测结果与Sanger测序进行比较,并用二代测序（next generation sequencing,NGS）进行验证。结果:建立drop-off ddPCR检测NRAS基因G12/G13突变的方法,灵敏度达0.158%,重复性、线性良好,其空白限为5.40拷贝数/μL,最低检测下限为15.84拷贝数/μL。在140例初诊AML患者中,drop off ddPCR检出NRAS突变28例（20%）,其突变负荷为0.26%~52.85%（中位2.14%）;而Sanger测序仅检出7例（5%）阳性,为进一步验证,将21例Sanger测序结果阴性而drop off ddPCR检测阳性的样本进行NRAS基因NGS,检出14例阳性,而另外7例NGS阴性的样本,其drop-off ddPCR检测突变频率为0.53%~1.50%（中位1.10%）。结论: 建立了drop-off ddPCR技术检测AML患者中NRAS基因突变的方法,该方法灵敏度高,可用于对NRAS基因G12/G13突变进行定量检测,有望可用于AML患者预后判断和疾病监测。     

2009-2011年广州市番禺区水产品污染状况分析

目的分析番禺区水产品污染状况,为食品安全监管提供依据。方法在番禺区各水产交易市场、肉菜综合市场和餐饮单位随机采集鲜活鱼(淡水鱼、海水鱼)、虾蟹、贝类、冰鲜、生吃水产品等水产品进行重金属、抗生素、农药、致病菌、肝吸虫等项目检测。结果各类水产品均存在镉超标,总超标率为5.2%。虾蟹类镉平均含量为0.516mg/kg,最高含量为14.300mg/kg;贝类、海水鱼、淡水鱼的镉超标率分别为4.5%、3.7%、2.5%。铅合格率为99.5%,汞和无机砷均未超标。部分水产品中检出四环素、土霉素、金霉素超标,超标率在8.3%～14.3%。各类水产品中六六六、DDT的含量均未超标。冰鲜水产品中甲醛合格率为98.1%。222份水产品中副溶血性弧菌检出率为18.5%(41/222),其中检出率最高的是虾蟹类为41.7%,贝类为33.3%。淡水鱼、海水鱼、虾蟹类、贝类等4类水产品的副溶血性弧菌检出率差异有统计学意义(P<0.05),淡水鱼与海水鱼的副溶血性弧菌检出率差异无统计学意义(P>0.05)。所有样品均未检出沙门菌和霍乱弧菌。生吃水产品未检出致病菌和肝吸虫。结论番禺区水产品镉污染情况较为突出,水产品中副溶血性弧菌检出率较高,水产养殖和销售中存在不按规定使用抗生素的情况。     

酒石酸布托菲诺和舒芬太尼应用于显微喉镜手术的麻醉效果比较

 目的    比较酒石酸布托菲诺和舒芬太尼应用于显微喉镜手术的麻醉效果。方法    选取86例择期行显微喉镜手术的患者,ASA Ⅰ-Ⅱ级,年龄18~65岁,随机分为酒石酸布托菲诺组(N组,n=43)和舒芬太尼组(S组,n=43)。两组患者麻醉诱导均给予丙泊酚2 mg/kg+琥珀胆碱1.5 mg/kg+瑞芬太尼1.5 μg/kg;外科悬吊喉镜前N组患者给予酒石酸布托菲诺0.02 mg/kg,S组给予舒芬太尼0.1 μg/kg,术中麻醉维持采用七氟烷1.3 MAC+瑞芬太尼微量泵输注。记录患者围术期生命体征变化;记录苏醒期拔管时间、镇静-躁动评分和拔管时呛咳评分;记录术后咽痛评分,恶心呕吐、头晕、嗜睡、肌痛等不良反应。结果    两组患者围术期生命体征、苏醒期拔管时间、苏醒期镇静-躁动评分、拔管时呛咳评分和术后咽痛评分差异无统计学意义(P>0.05);但N组术后3 h头晕发生率高于S组(P<0.05),术后3 h和8 h嗜睡发生率也高于S组(P<0.05)。 结论    酒石酸布托菲诺和舒芬太尼均可为显微喉镜手术麻醉提供良好的镇痛,但使用酒石酸布托菲诺术后短时间内伴有轻微头晕和嗜睡现象。     

不同剂量的盐酸帕罗诺司琼预防眼球摘除加义眼植入术后恶心呕吐(PONV)的效果

 目的  观察3种不同剂量的盐酸帕罗诺司琼预防眼球摘除加义眼植入术后恶心呕吐(postoperative nausea and vomiting,PONV)的效果及其安全性。方法  择期全麻下行眼球摘除加义眼植入手术的患者75名,ASA Ⅰ或Ⅱ级,年龄18~70岁,随机分为3组:A组,帕洛诺司琼2.5 μg/kg (n=25);B组,帕洛诺司琼5 μg/kg (n=25);C组,帕洛诺司琼7.5 μg/kg (n=25)。均予麻醉诱导前静注不同剂量的帕洛诺司琼,观察术后0~4 h、4~24 h、24~48 h和48~72 h的PONV严重程度。结果  3组患者24~48 h恶心评分的差异有统计学意义(P<0.05),C组的评分均显著低于A组和B组(P<0.05),A、B两组之间的差异无统计学意义(P>0.05),其余时段各组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。3组呕吐发生率均低于32%,而各时段呕吐评分的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论  7.5 μg/kg的盐酸帕洛诺司琼预防眼球摘除加义眼植入PONV效果最佳。     

NAD对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的   探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 对血管紧张素II（AngII)诱导的大鼠心肌成纤维细胞I型胶原mRNA表达的作用。方法   提取新生Wistar大乳鼠原代心肌成纤维细胞,传代培养,采用2~4代细胞。实验分为空白对照组,AngII (0.01、 0.1、 1μmol／L)组,NAD(250μmol／L)组, AngII(1μmol／L)+ NAD (250μmol／L )组,FAM组,Sirt1-siRNA+AngII(1μmol／L)组,Sirt1-siRNA 组,Sirt1-siRNA+ NAD（250μmol／L）组,Sirt1-siRNA+Ang II(1mol／L)+NAD（250μmol／L）组。刺激24h后,提取总RNA, Real time RT-PCR法分别检测SIRT1和I型胶原mRNA的表达。结果   心肌成纤维细胞I型胶原mRNA的表达随着AngⅡ浓度升高明显增加(P＜0.05),呈浓度依赖性。与空白对照组比较,NAD（250μmol／L）组SIRT1 mRNA表达增高(P＜0.05)。与AngⅡ（1μmol／L）组比较,AngII (1μmol／L)+ NAD(250μmol／L )组I型胶原mRNA的表达明显减少(P＜0.01)。相对于FAM组,Sirt1-siRNA转染后各组SIRT1 mRNA的表达减少(P＜0.05),而心肌成纤维细胞I型胶原mRNA表达增多(P＜0.05)。结论   NAD可以抑制心肌成纤维细胞 I型胶原mRNA的表达,SIRT1影响I型胶原mRNA的表达,它们对Ang II诱导的心肌纤维化有保护作用。     

氨基酸分析仪法批量测定小鼠皮质和海马中氨基酸类神经递质和牛磺酸的含量

目的：建立一种简单、准确可靠、可批量检测小鼠皮质和海马内氨基酸类神 分析方法。 方法：采用 A300 氨基酸分析仪，使用 10% 磺基水杨酸进行蛋白沉淀，锂盐试剂为流动相，茚三酮显 色，检测波长为 570 nm，对该方法的分离效果、线性范围、检出限及定量限、日内精密度和回收率、日间精密度进 行测定；选择同日龄的 SPF 级 KM 小鼠分为雌雄两组，每组断头处死 3 只，每只均于冰上分离出皮质和海马，经 匀浆、离心、蛋白沉淀、稀释、过膜等过程制成小鼠脑组织游离氨基酸样品，分别测定雌雄小鼠皮质和海马内天冬 氨酸（aspartic acid，Asp）、谷氨酸（glutamic acid，Glu）、甘氨酸（glycine，Gly）、 γ - 氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid，GABA）4 种氨基酸类神经递质的含量和牛磺酸（taurine，Tau）的含量。 结果：标准样品、雌雄小鼠皮质样品 和海马样品中的 5 种目标氨基酸分离度好，在 8~400 μmol·L -1 的浓度范围内，线性良好（R ≥0.999），检测限为 1.29~1.86 μmol·L-1 ，定量限为 4.29~6.20 μmol·L-1 ，日内精密度良好（标准样品相对标准偏差 (relative standard deviation，RSD)<2.23%，脑组织样品 RSD<2.76%），脑组织样品的加标回收率为 91.52%~102.51%，采用绘制标 样峰面积曲线的方法准确获取样品中的 5 种氨基酸含量，实验用雌雄小鼠之间未发现明显统计学差异（P>0.05）。 结论：该方法简便、准确可靠，适用于小鼠皮质和海马组织中游离氨基酸含量的批量检测。     

济南市体检人群脂肪肝检出率及危险因素

目的了解济南市体检人群脂肪肝患病情况,探讨其主要危险因素,为脂肪肝一级预防提供依据。方法2011年3月对济南市2 162名18岁以上体检人员进行调查,分析其年龄、身高、体质量、行为习惯及肝功、血脂、空腹血糖等血清学指标,同时行肝脏超声检查。结果济南市体检人员脂肪肝检出率为20.3%,男性检出率高于女性(P<0.05),男性40～岁组检出率最高,女性50～岁组检出率最高。Logistic回归分析显示,性别、体质量指数、腰围、血压、空腹血糖水平、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、饮酒等与脂肪肝密切相关。结论济南市成人脂肪肝检出率较高,且以中老年多见。男性、肥胖、高血压、高脂血症、高血糖、饮酒等是脂肪肝患病的危险因素。     

辛伐他汀对谷氨酸损伤的大鼠海马组织中AMPA受体GluR2表达的影响

目的 研究辛伐他汀对谷氨酸损伤的大鼠海马组织中AMPA受体GluR2表达的影响。  方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、谷氨酸损伤组、辛伐他汀10 mg/kg组和20mg/kg组。连续灌胃给药10d后,麻醉状态下对大鼠行侧脑室注射,假手术组大鼠给予注射4μL生理盐水,其余组大鼠给予注射等体积谷氨酸溶液,2h后,每组取5只大鼠,断头取脑,分离海马组织,采用RT-PCR方法观察大鼠海马组织中GluR2的mRNA表达情况;其余大鼠用多聚甲醛灌流后取出海马组织做病理切片,采用免疫组织化学方法观察其蛋白表达情况。  结果 与假手术组相比,谷氨酸损伤组大鼠海马组织中GluR2在mRNA和蛋白水平的表达均降低(P＜0.01);辛伐他汀(10、20mg/kg)组大鼠海马组织中GluR2的mRNA和蛋白水平的表达均明显升高。  结论 影响AMPA受体GluR2的表达可能是辛伐他汀抗谷氨酸损伤作用的机制之一。