羟基磷灰石纳米粒子对HL-60细胞增殖抑制作用的研究

目的:探讨羟基磷灰石(HAP)纳米粒子对HL60细胞的生长抑制作用。方法:采用体外细胞培养和四甲基氮唑蓝(MTT)测定等方法。将不同浓度的HAP纳米粒子(0001~002)mg/mL分别加入HL60细胞培养液中,置37℃、5%CO2培养48h。结果:1)不同浓度HAP对HL60细胞增殖均可产生影响,在倒置显微镜下,可见全部测定孔细胞增殖均较对照孔低下,且呈明显量效关系。2)不同浓度HAP对HL60细胞生长抑制率呈明显正相关性,在浓度为10、50、100、150、200时,抑制率相应为1680、3920、5360、6420、7500。结论:HAP纳米粒子明显抑制HL60细胞生长,具有细胞毒和基因毒作用。HAP纳米粒子对白血病及肿瘤的治疗将具有良好的开发应用前景。     

羟基磷灰石纳米粒子对人白血病细胞K562毒性作用的研究

目的:探讨羟基磷灰石(HAP)纳米粒子体外抑制人白血病细胞K562的生长增殖作用。方法:采用MTT法检测HAP和联合应用化疗药物对K562细胞的增殖抑制及化疗增敏作用。结果:(1)HAP和抗癌药物对K562细胞增殖均有抑制作用;(2)K562细胞生长抑制率与HAP的浓度和作用时间呈明显正相关性;(3)HAP与化疗药物合用具有更良好的抑癌效果。结论:HAP纳米粒子明显抑制K562细胞生长,具有体外抗白血病作用和化疗增敏作用。     

羟基磷灰石纳米粒子对人白血病细胞K562毒性作用的研究

目的:探讨羟基磷灰石(HAP)纳米粒子体外抑制人白血病细胞K562的生长增殖作用.方法:采用MTT法检测HAP和联合应用化疗药物对K562细胞的增殖抑制及化疗增敏作用.结果:(1)HAP和抗癌药物对K562细胞增殖均有抑制作用;(2)K562细胞生长抑制率与HAP的浓度和作用时间呈明显正相关性;(3)HAP与化疗药物合用具有更良好的抑癌效果.结论:HAP纳米粒子明显抑制K562细胞生长,具有体外抗白血病作用和化疗增敏作用.     

羟基磷灰石纳米粒子抑制胃癌细胞生长的体内外实验研究

目的：观察羟基磷灰石纳米粒子（Hydroxyapatite nanoparticles,Nano—HAP）对胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MKN-28体外生长的影响及其对SGC-7901细胞皮下移植瘤裸鼠的抗瘤作用和药物毒性。方法：以不同浓度的Nano—HAP分别作用三种胃癌细胞48小时,MTT法检测其对胃癌细胞增殖的影响;以细胞划痕实验、黏附测定观察Nano—HAP对胃癌细胞侵袭力的影响;建立SGC-7901细胞皮下移植瘤裸鼠模型30只,随机分为对照组、Nano—HAP组和5-Fu组,观察每组移植瘤生长情况。结果：Nano—HAP可明显抑制胃癌细胞的增殖和生长,且呈剂量效应关系,并能降低胃癌细胞的体外侵袭和运动能力（P〈0．05）;同时可显著抑制SGC-7901细胞皮下移植瘤的生长,Nano—HAP组肿瘤体积明显小于对照组（P〈0．05）,肿瘤生长抑制率达47．96％;5-Fu组抑瘤率达54．30％,但表现出明显不良反应。结论：Nano—HAP在体外和体内均可显著抑制胃癌细胞生长,并降低胃癌细胞体外侵袭和运动能力。     

阿斯匹林抑制白血病细胞增殖的实验研究

目的以人急性髓细胞性白血病细胞系HL-60为模型,研究非甾体类抗炎药阿斯匹林(ASA)对HL-60细胞生长的影响.方法利用MTT法测定ASA对HL-60细胞的抑制率,并分析剂量反应曲线;通过流式细胞仪(FCM)了解其对细胞周期的影响.结果(1)ASA在浓度为(2.5～10.0)mmol/L作用72h后,HL-60细胞增殖抑制随浓度增加而增加,其IC 50值为8.97mmol/L;并且2.5mmol/L ASA与100μg/ml Ara-c有协同作用;(2)ASA处理后HL-60细胞G0/G1期细胞减少,S期细胞增多.结论结果提示一定浓度ASA在体外能抑制HL-60细胞增殖,抑制率与ASA剂量相关;ASA抑制HL-60细胞增殖可能与其干扰细胞周期有关.     

山楂酸、科罗索酸及其衍生物抑制HL-60细胞增殖和诱导其分化的研究

目的研究山楂酸、科罗索酸及其衍生物对HL-60细胞的增殖抑制作用及诱导分化的作用。方法体外培养人早幼粒白血病细胞HL-60,四氮唑蓝比色(MTT)法观察化合物对HL-60细胞的抑制率,采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测化合物对细胞的毒性,硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验检测化合物对NBT还原能力的影响。结果 4个化合物对HL-60细胞生长具有抑制作用,并呈浓度依赖关系;而对细胞释放的LDH含量无明显影响;NBT阳性细胞率增高。结论化合物可能通过诱导HL-60细胞分化,从而抑制HL-60细胞增殖。     

苦参碱联合高三尖杉酯碱抑制急性髓系白血病HL-60细胞增殖的研究

目的 探讨苦参碱(MAT)联合高三尖杉酯碱(HHT)对人急性髓系白血病(AML)HL-60细胞增殖的抑制作用,寻找经济有效的抗白血病中药.方法 应用CCK8法检测HHT、MAT单药对HL-60细胞的增殖抑制情况,以低于50％抑制浓度(IC50)的HHT与低于10％抑制浓度(IC10)的MAT联合用药,检测联合用药对HL-60细胞的增殖抑制情况.结果 HHT、MAT单独用药时,随着药物浓度增加,对HL-60细胞增殖抑制作用逐渐增强,与剂量呈依赖关系,与对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).HHT、MAT对HL-60细胞IC50分别为0.042、780 mg/L.MAT对HL-60细胞IC10是32 mg/L,与各相应浓度HHT单独用药比较,不同浓度(0.002 5、0.005 0、0.010 0、0.020 0、0.040 0 mg/L)HHT与MAT(25 mg/L)分别联合用药对HL-60细胞增殖的抑制率均升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 中药提取物HHT、MAT有抑制HL-60细胞增殖作用,联合用药能增强抑制作用.     

地西他滨联合柔红霉素对HL-60细胞株凋亡作用的探讨

目的观察小剂量地西他滨（DAC）单用或联合柔红霉素（DNR）对白血病细胞株HL-60的凋亡作用及对抑癌基因PTENmRNA表达的影响。方法以不同浓度的DAC、DNR单药及联合处理HL．60细胞株,应用四甲基偶氮唑蓝（M1Tr）法、流式细胞术检测不同时相药物对细胞的凋亡作用;采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）技术检测不同浓度组中HL-60细胞PTENmRNA表达。结果DAC、DNR单药对HL-60细胞的生长抑制作用呈剂量、时间依赖性,联合用药组的抑制作用则更为明显[72h抑制率为（80．23±1．71）％,P〈0．001];5．0μmol／LDAC联合1．0μmol／LDNR作用72h细胞凋亡率最高,抑制作用均较DAC和DNR单药组明显（F=30．199,P〈0．001）;不同浓度DAC与DNR联用后,细胞PTENmRNA表达量增加,呈浓度依赖性,明显高于对照组及DNR单药组（F=578．218,P〈0．001）。结论DAC能显著抑制HL-60细胞的增殖并诱导其凋亡,与DNR联合对HL-60细胞增殖抑制作用有协同效应,其机制可能与DAC的去甲基化作用使PTENmRNA的表达量增加有关。     

苯丙氨酸解氨酶诱导人白血病HL-60细胞凋亡的初步研究

目的：研究笨丙氨酸解氨酶(L-Dhenvlalanine ammonia—lvase，PAL)对白血病HL-60细胞生长的抑制作用，探讨其作用机制。方法：应用MTT比色法观察PAI．对HL-60细胞的生长抑制作用．应用倒置显微镜和DNA琼脂糖凝胶电泳技术分析细胞凋亡。结果：PAL与HL-60细胞共育时，能明显抑制细胞生长，半数抑制浓度(IC50)为3．02U／mL；细胞呈典型的凋亡形态学改变，细胞皱缩，染色质凝集，沿核膜内侧分布，可见新月形；细胞DNA裂解成180～200bp及其倍数的片段．电泳得到特有的梯形条带，凋亡率与PAL剂量和作用时间呈依赖关系。结论：PAL能抑制HL-60细胞的生长，诱导细胞凋亡是其抗肿瘤的作用机制之一。     

大黄素对人肺腺癌A-549细胞增殖周期影响的实验研究

目的：观察大黄素对人肺腺癌A-549细胞增殖及周期的影响。方法：设计空白对照组及不同浓度的大黄素溶液作用于A-549细胞，MTT比色法测定A-549细胞生长的抑制率；流式细胞仪分析A-549细胞增殖周期的变化。结果：大黄素对人肺腺癌A-549细胞有明显的生长抑制作用，其抑制作用呈浓度依赖性，其抑制率随药物浓度升高而增加。400mg／L时达到83．33％，实验组与对照组之间差异有统计学意义，P=0．000；对A549细胞具有细胞周期阻滞作用，可将其阻滞于G0／G1期，阻止细胞进入S期。结论：大黄素对人肺腺癌A549细胞的增殖生长具有显著的抑制作用；并可使A-549细胞增殖周期停滞于G0／G1期，而阻止其进入S期。     

水杨酸钠对HL—60／VCR细胞多药耐药的部分逆转

目的：研究水杨酸钠(Na-Sal对HL-60／VCR细胞多药耐药的部分逆转作用。方法：采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术等方法，观察非甾体抗炎药Na-Sal对HL-60／VCR细胞多药耐药的部分逆转作用。结果：Na-Sal对HL-60／VCR细胞的生长具有抑制作用并表现出剂量依赖性，1mmol/L的非细胞毒剂量的Na-Sal和化疗药物联合应用可以提高多种化疗药物的细胞毒性作用，逆转倍数为1．01-3．26，相对逆转效率为0．52％-73．62％。流式细胞仪测定细胞内柔红霉素(DNR)浓度发现，Na-Sal并不增加HL-60／VCR细胞内DNR浓度。结论：Na-Sal能有效地部分逆转HL-60／VCR细胞的多药耐药性。     

羟基磷灰石纳米粒子对人肝癌细胞增殖及细胞周期的作用研究

目的：研究羟基磷灰石(HAP)纳米粒子体外抗肝癌作用的机理。方法：采用形态学观察和MTT法检测HAP纳米粒子作用于人肝癌细胞系Bel-7402的量效和时效关系。流式细胞仪分析细胞周期的时相变化。结果：HAP纳米粒子在体外对人肝癌细胞系Bel-7402具有明显的抑制作用，并呈现良好的量效和时效关系。肝癌细胞的生长阻滞于G1期。结论：HAP纳米粒子具有体外抗肝癌作用，细胞增殖阻滞于G1期，阻断细胞周期的进展，导致癌细胞胀亡。     

黄芪多糖对HL-60细胞端粒酶活性的作用

目的研究黄芪多糖对人早幼白血病HL-60细胞端粒酶活性的作用。方法不同浓度的黄芪多糖作用HL-60细胞后，MTT法测定细胞活性，计算细胞生长抑制率；TRAP-PCR—ELISA法测定端粒酶活性。结果黄芪多糖能抑制HL-60细胞的增殖，降低HL-60细胞的端粒酶活性，这两种作用均呈浓度和时间依赖性。结论黄芪多糖降低HL-60细胞端粒酶活性，可能是其诱导HL-60细胞凋亡的机制之一。     

TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡及TIEG1,Bcl-2/Bax的表达变化

目的:研究TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡后TIEG1及Bcl-2/Bax的表达变化。方法:用不同浓度的TGF-β1处理HL-60细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率。用10.4 ng/ml TGF-β1处理HL-60细胞,以流式细胞仪检测细胞凋亡,以RT-PCR方法检测TIEG1、Bcl-2及Bax的表达。结果:TGF-β1对HL-60细胞具有增殖抑制作用,其抑制效应呈时间及剂量依赖性。10.4 ng/ml TGF-β1增殖抑制作用较为明显。在细胞凋亡过程中,TIEG1、Bax表达呈升高趋势,而Bcl-2呈下降趋势。结论:TGF-β1可以抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡,且呈时间、剂量依赖性。在TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡的过程中,TIEG1表达逐渐加强,与HL-60细胞凋亡呈负相关。Bcl-2/Bax与TGF-β1诱导HL-60细胞的凋亡相关,且与TIEG1的表达有相关性。     

1,25二羟基维生素D3对体外培养的HL-60细胞的作用

[目的]研究1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对人HL-60细胞株生长、分化、凋亡及对维生素D受体(VDR)蛋白表达的影响.[方法]在体外用不同浓度的1,25(OH)2D3作用于对数生长期的HL-60细胞.甲基噻唑基四唑(MTT)比色法分析细胞增殖抑制作用,硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验法分析HL-60细胞的分化指标,末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记染色法(TUNEL)检测细胞晚期凋亡的变化,免疫细胞化学法检测VDR蛋白表达.[结果]不同浓度的1,25(OH)2D3作用后均可抑制HL-60细胞的生长,呈剂量和时间依赖性;可诱导HL-60细胞向成熟粒细胞分化并促其凋亡.1,25(OH)2D3作用前后HL-60细胞均表达VDR蛋白,药物作用后VDR蛋白表达上调.[结论]1,25(OH)2D3在一定浓度范围内可抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞分化及凋亡,使VDR蛋白表达上调.     

三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡效应及抑制细胞ERK的活性

目的:初步探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)促进HL-60细胞凋亡及其可能机制.方法:不同浓度的As2O3(0、2.5、5、10 μmol/L)作用于HL-60细胞24h后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Caspase-3活化、ERK活性和cyclinD1蛋白的表达,RT-PCR法检测cyclinD1 mRNA的表达.结果:As2O3可抑制HL-60细胞增殖,诱导HL-60细胞的凋亡,并呈浓度依赖性 (P<0.05);As2O3可使HL-60细胞Caspase-3激活,并抑制ERK活性,但不能下调cyclinD1的表达(P>0.05).结论:As2O3能抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡,其效应可能与As2O3抑制HL-60细胞ERK活性有关.     

羟基磷灰石纳米粒子体外抗肝癌的实验研究

[目的]研究羟基磷灰石（HAP）纳米粒子对肝癌细胞和肝细胞的选择性作用。[方法]以细胞系Bel-7402人肝癌细胞和大鼠肝细胞为对象,倒置显微镜下观察细胞的生长状态,应用活细胞计数法绘制生长曲线。[结果]经HAP纳米粒子（1.4×10-4mol/L）作用的肝癌细胞与其对照组相比,细胞数量逐渐减少,胞质空泡样变,二者存在显著性差异（P<0.01）。而加入不同浓度HAP纳米粒子的肝细胞组,存活细胞数量明显增多,与对照组之间无明显差异。[结论]HAP纳米粒子有明显的体外抗肝癌作用,而对正常肝细胞影响轻微。     

黄芪多糖对HL-60细胞端粒酶活性的作用

目的研究黄芪多糖对人早幼白血病HL-60细胞端粒酶活性的作用。方法不同浓度的黄芪多糖作用HL-60细胞后,MTT法测定细胞活性,计算细胞生长抑制率;TRAP-PCR-ELISA法测定端粒酶活性。结果黄芪多糖能抑制HL-60细胞的增殖,降低HL-60细胞的端粒酶活性,这两种作用均呈浓度和时间依赖性。结论黄芪多糖降低HL-60细胞端粒酶活性,可能是其诱导HL-60细胞凋亡的机制之一。     

三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡效应及抑制细胞ERK的活性

目的：初步探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）促进HL-60细胞凋亡及其可能机制。方法：不同浓度的As2O3（0、2.5、5、10μmol/L）作用于HL-60细胞24h后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Caspase-3活化、ERK活性和cyclinD1蛋白的表达,RT-PCR法检测cyclinD1mRNA的表达。结果：As2O3可抑制HL-60细胞增殖,诱导HL-60细胞的凋亡,并呈浓度依赖性（P〈0.05）;As2 O3可使HL-60细胞Caspase-3激活,并抑制ERK活性,但不能下调cyclinD1的表达（P〉0.05）。结论：As2 O3能抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡,其效应可能与As2 O3抑制HL-60细胞ERK活性有关。     

姜黄素对急性早幼粒白血病细胞增殖分化及cofilin表达的影响

目的 探讨姜黄素对急性早幼粒白血病HL-60细胞(以下简称“HL-60细胞”)增殖、分化及丝切蛋白(cofilin)表达的影响.方法 以不同浓度(6.25 μmol/L、12.5 μmol/L、25 μmol/L)姜黄素作用于HL-60细胞,同时设立空白对照组.作用24 h后,采用MTT法检测姜黄素对细胞增殖能力的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞仪检测细胞周期变化,双向电泳与质谱分析检测cofilin蛋白表达.结果 不同浓度姜黄素作用24 h后,空白对照组细胞生长抑制率为0,6.25 μmol/L组、12.5 μmol/L组和25 μmol/L组分别为(6.46±0.73)％、(9.79±1.36)％和(79.48±7.99)％,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),且随药物浓度递增,抑制作用逐渐增强,呈浓度依赖性(P＜0.05);倒置相差显微镜观察可见典型细胞生长阻滞的形态改变;流式细胞仪检测发现当姜黄素浓度为12.5 μmol/L时,细胞阻滞在G2/M期;双向电泳与质谱分析发现姜黄素可下调HL-60细胞cofilin的表达.结论 姜黄素可在体外抑制急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖,具有浓度依赖性,且在一定血药浓度时可使细胞周期发生阻滞,从而阻滞细胞分化,其作用机制可能与姜黄素下调细胞内cofilin的表达有关.