IL-10对脂多糖诱导Ana-1细胞的MyD88/核因子κB活性影响的研究

目的探讨IL-10对小鼠巨噬细胞髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)炎症信号活化的影响。方法将小鼠巨噬细胞Ana-1分为脂多糖(LPS)组和LPS+IL-10组,分别于0.5、1及2h收集巨噬细胞和细胞培养上清液,Western blot检测细胞MyD88与胞浆、胞核NF-κBp65亚基表达,ELISA法检测培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果在0～2h,LPS组细胞MyD88表达显著持续上升,LPS+IL-10组于LPS刺激后上升,0.5h达峰值,2h恢复至正常水平,1h和2h相对含量均低于LPS组(11.6±1.3比17.5±0.7,8.8±0.3比21.4±1.8,P0.05);总NF-κB表达量在两组间无明显差异。NF-κB核浆比变化趋势与MyD88类似,LPS+IL-10组1h及2h相对含量亦均低于LPS组(1.1±0.1比2.4±0.4,0.6±0.7比3.1±0.6,P0.05);相应的,LPS+IL-10组1h和2hTNF-α含量亦低于LPS组[(222.5±33.5)pg/mL比(365.2±22.7)pg/mL,(212.7±15.9)pg/mL比(566.2±31.5)pg/mL,P0.05]。结论 IL-10通过抑制减少MyD88/NF-κB信号通路活化,降低TNF-α表达,从而下调炎症反应强度。     

TLR9、MyD88及NF-κB在过敏性紫癜中的表达及意义

目的 探讨免疫上游因子TLR9、MyD88、NF-κB及免疫下游细胞因子IL-6、TNF-α在HSP组与正常对照组间的差异及相关性。方法 采用实时荧光定量PCR检测HSP患儿外周血单核细胞TLR9、MyD88及NF-κB mRNA表达量,ELISA法检测血浆IL-6、TNF-α水平。结果 1HSP患儿外周血单核细胞TLR9、MyD88及NF-κB mRNA表达均显著高于正常对照组;2HSP组血浆IL-6、TNF-α水平较对照组水平显著增高;3HSP组中TLR9与MyD88、TLR9与NF-κB、MyD88与NF-κB、NF-κB与IL-6以及NF-κB与TNF-α均存在线性正相关关系。结论HSP患儿TLR9、MyD88、NF-κB、IL-6、TNF-α水平均较正常儿童显著升高。TLR9-MyD88-NF-κB信号通路参与HSP发病,并在其中起重要作用。     

趋化因子FKN对外周血单个核细胞NF-κB和TNF-α表达的影响及卡托普利的干预作用

[目的]通过研究趋化因子(fractalkine,FKN)对单个核细胞合成核因子-κB(nuclearfactor-κappaB,NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响,探索了FKN-CX3CR1可能存在的信号传导机制及在动脉粥样硬化形成中的作用,并探讨了卡托普利在这其中可能的干预作用.[方法]①抗凝血用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞.②将每份提取的单个核细胞分3组分别为:空白对照组、FKN组、卡托普利组.③应用免疫细胞化学法检测各组单个核细胞中NF-κB表达情况.④应用酶联免疫法检测各组培养液中TNF-α的表达水平.[结果]①FKN诱导组NF-κB(34.80±2.69)%和TNF-α(1506.1±69.3)pg/mL较空白组NF-κB(3.80±0.95)%和TNF-α(80.5±5.5)pg/mL表达显著增多(P＜0.05).②卡托普利干预组NF-κB(27.55±1.96)%和TNF-α(1119.3±116.2)pg/mL较FKN组NF-κB(34.80±2.69)%和TNF-α(1506.1±69.3)pg/mL表达显著减少(P＜0.05).[结论]FKN-CX3CR1有增加单个核细胞表达NF-κB、TNF-α的作用;而卡托普利可通过减弱FKN-CX3CR1诱导的单个核细胞合成NF-κB、TNF-α,抑制炎症反应.     

银翘柴桂Ⅱ号方对H1N1感染小鼠腹腔巨噬细胞MyD88-IRF7信号通路的影响

【目的】探讨银翘柴桂Ⅱ号方对H1N1感染小鼠腹腔巨噬细胞Ana-1中MyD88-IRF7信号通路的影响。【方法】应用银翘柴桂Ⅱ号方对H1N1感染小鼠腹腔巨噬细胞Ana-1干预24 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测骨髓样分化因子88(MyD88)、核因子kappa B(NF-κB)、干扰素调节因子7(IRF7)蛋白表达水平,采用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测白细胞介素1受体相关激酶4(IRAK4)m RNA表达水平。【结果】与H1N1感染组比较,银翘柴桂Ⅱ号方能显著下调Ana-1细胞IL-6、TNF-α水平(P0.01),降低MyD88、NF-κB蛋白的表达水平(P0.05或P0.01),上调IRAK4 mRNA表达水平(P0.01)。【结论】银翘柴桂Ⅱ号方可抑制H1N1所诱导的小鼠腹腔巨噬细胞My D88-IRF7信号通路以及NF-κB信号通路的活化,下调IL-6、TNF-α表达水平,发挥抗流感病毒的作用。     

早期胰岛素治疗对糖尿病大鼠骨骼肌核因子κB炎症通路的影响

目的 探讨早期胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠骨骼核因子(NF)-κB炎症信弓通路的影响.方法 建立高脂喂养联合小剂馈链脲佐菌素诱导的2型糖尿病SD大鼠模型.糖尿病大鼠随机分为早期和晚期治疗组:早期治疗在血糖升高后3 d 开始,给予中效胰岛素或格列奇特治疗3周;晚期治疗在血糖升高后4周开始,给予中效胰岛素治疗3周.血糖控制目标足随机血糖<8 mmol/L.通过实时定量PCR和Western印迹检测骨骼肌葡萄糖转运子4(Glut4)基因和蛋白表达,胞质IkBα蛋白表达,肿瘤坏死因子(TNF)-αoL、白细胞介素(IL)-6、IL-1β基因表达,ELISA测定NF-κB P65 DNA结合活性.结果 糖尿病大鼠骨骼肌Glut4 mRNA表达水平比正常对照下降59%,膜上Glut4蛋白水平下降69%.与未治疗组比较胰岛素和格列奇特治疗使Glut4 mRNA表达增加了17%和13%,膜上蛋白表达增加23%和10%(0.12±0.02 vs 0.21±O.07和0.16±0.03,P<0.05),并且使胞质内Glut4蛋白水平降低.糖尿病大鼠骨骼肌IκBα蛋白比正常对照降低(0.28±0.02 vs 0.36±0.06,P<0.05);NF-κB P65 DNA结合活性增加,TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达上调.早期胰岛素和格列奇特治疗使IκBα蛋白比未治疗组表达增加(0.41±0.06和0.39±0.05 vs 0.28±0.02,P<0.05),NF-κBP65 DNA结合活性下降,骨骼肌TNF-α.基因表达下降.结论 早期胰岛素治疗可抑制2型糖尿病大鼠骨骼肌细胞活化的NF-κB信号通路和炎症因子,其机制和早期代谢控制改善糖脂毒性有关.     

NF-κBp65、TNF-α在妊娠期糖尿病患者中高表达

目的探讨核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在妊娠期糖尿病患者中的表达水平及意义。方法收集张家港市中医医院分娩的250例孕产妇的临床资料,将合并有妊娠期糖尿病的97例患者作为研究组,153例正常孕妇作为对照组,对两组孕妇血清和脐血中NF-κBp65、TNF-α的表达水平及在胎盘组织中的阳性率进行对比分析。结果研究组血清和脐血中NF-κBp65水平为(875.66±148.67)、(880.72±151.57)ng/L,明显高于对照组的(312.39±95.38)、(327.84±94.23)ng/L;且研究组血清和脐血中TNF-α水平为(7.72±0.23)、(8.17±0.36)ng/L,亦明显高于对照组的(5.54±0.59)、(5.79±0.43)ng/L,差异均有统计学意义(P0.05)。两组胎盘组织中均可见NF-κBp65和TNF-α阳性颗粒表达,研究组NF-κBp65和TNF-α阳性率分别为92.78%和95.88%,明显高于对照组22.88%和13.73%(P0.05)。结论妊娠期糖尿病孕妇NF-κBp65和TNF-α炎症因子的表达阳性率较正常孕妇高,提示二者对妊娠期糖尿病发生有一定的促进作用。     

天名精根提取物调控TLRs信号抑制RAW264.7细胞炎症的研究

[目的]阐明天名精根提取物对RAW264.7细胞炎症反应的影响及其机制。[方法]采集野生天名精全株,处理得天名精根粉末,制备天名精根乙醇和石油醚提取物,并以高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测其中主要成分;采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、灭活的金黄色葡萄球菌(heat-inactivated preparations of Staphylococcus aureus pathogens,SAC)刺激RAW264.7细胞,构建体外炎症模型。以MTT法检测细胞增殖,qPCR检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Toll样受体-2(Toll-like receptor-2,TLR-2)、TLR-4、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response 88,MyD88)、核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)m RNA表达,Western blot检测NF-κB p65蛋白表达。[结果]与正常对照组比较,LPS或SAC刺激后RAW264.7细胞IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达增加(P0.01),NF-κB蛋白与mRNA表达增加(P0.01);LPS刺激后TLR-4、MyD88 m RNA表达增加(P0.01,P0.05),SAC刺激后TLR-2、MyD88 m RNA表达增加(P0.01)。天名精根提取物干预后,与LPS组或SAC组比较,RAW264.7细胞IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达减低(P0.01),同时NF-κB m RNA和NF-κB p65蛋白表达也减低(P0.01);TLR-4和MyD88 m RNA表达明显低于LPS组(P0.01,P0.05),TLR-2和MyD88 mRNA表达表达明显低于SAC组(P0.01,P0.05)。[结论]天名精根提取物可以抑制由LPS和灭活的金黄色葡萄球菌引起的RAW264.7细胞炎症反应,其机制可能与抑制TLRs-NF-κB信号通路有关。     

高糖状态下晚期糖基化终产物诱导NRK-52E细胞氧化应激及普罗布考干预研究

目的 探讨高糖状态下晚期糖基化终产物(AGEs)诱导大鼠肾小管上皮细胞株NRK-52E氧化应激及普罗布考干预作用.方法 作用72 h后,用Western Blot检测空白对照组(0 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、AGEs组(100 mg/L AGEs)、高糖AGEs组(100 mg/L AGEs加25 mmol/L葡萄糖)、普罗布考预处理高糖AGEs组(100 μmol/L普罗布考加100 mg/L AGEs加25 mmol/L葡萄糖)中核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在NRK-52E细胞的表达.用CM2H2 DCFDA试剂检测活性氧(ROS)含量.结果 高浓度葡萄糖及AGEs均上调NF-κB及TNF-α表达.普罗布考显著抑制调高浓度葡萄糖状态下AGEs 诱导NF-κB及TNF-α表达,以及抑制ROS生成.结论 普罗布考能抑制高浓度葡萄糖状态下AGEs诱导细胞氧化应激.     

瑞马唑仑对颅脑损伤大鼠脑组织损伤及TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响

目的:探讨瑞马唑仑(Rem)对颅脑损伤(BI)大鼠脑组织损伤及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法:构建BI大鼠模型;将所有大鼠分为对照组(Control组)、颅脑损伤组(BI组)、瑞马唑仑低、中、高剂量组(Rem-L、Rem-M、Rem-H组)、瑞马唑仑高剂量+TLR4激活剂LPS组(Rem-H+LPS组);检测大鼠脑组织含水量;ELISA检测大鼠脑组织中的炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色观察大鼠脑组织的形态学变化;TUNEL法检测脑组织神经元凋亡情况;Western blot法检测大鼠脑组织TLR4、MyD88、NF-κB、p-NF-κB p65、Bax、Bcl-2蛋白表达情况。结果:与Control组相比,BI组大鼠脑组织神经元变性坏死,数量减少,体积缩小,损伤严重,神经功能评分、脑组织含水量、神经元凋亡率和TNF-α、IL-1β、IL-6水平及Bax、TLR4、MyD88、NF-κB、p-NF-κB p65表达升高,Bcl-2表达降低...     

西之达（辛伐他汀）治疗高脂血症的临床观察

目的：观察西之达（辛伐他汀）调血脂的临床疗效与不良反应。方法：高脂血症１６５例,男８５例,女８０例。平均年龄（５８．９±　９．２）岁（３５岁～７５岁）。治疗前平均血清总胆固醇（ＴＣ）（７．００±　０　８８）ｍｍｏｌ／Ｌ,低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）（　４．４５－１．１２）ｍｍｏｌ／Ｌ,甘油三脂（ＴＧ）（２．１３±０．８７）ｍｍｏｌ／Ｌ。试验组１０３例,口服西之达（辛伐他汀）（浙江瑞邦大药厂生产）。对照组６２例,口服力旨平（中国药科大新药开发中心广州威平曼药业有限公司）。试验组剂量１０ｍｇ／ｄ;对照组每日３次,１００次,２周后改维持量１００ｍｇ／ｄ,疗程均　８周。结果：治疗后两组血清　ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＴＧ及ＡＰＯＢ均明显降低（Ｐ＜０．０１）。试验组血清ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＴＧ分别下降２６．８％、３４．４％、１７．７％;对照组分别下降２５．０　％、２７．６％、２４．６％。治疗前后两组血清ＨＤＬ－ＡＰＯＡ１无差异。试验组不良反应发生率为（０．５－０．９）％,主要为疲乏无力、腹胀、头疼,停药后很快恢复正常;对照组（０．５－　２）％,主要为消化道反应、皮疹、肌肉酸疼和转氨酶升高。两组未发现严重的毒副作用。结论：西     

促红细胞生成素联用缬沙坦治疗慢性心力衰竭临床观察

目的:探讨重组人促红细胞生成素(EPO)和缬沙坦联用改善慢性心力衰竭(CHF)患者心功能的临床疗效.方法:将入选的156例患者随机分为治疗组和对照组.对照组(常规治疗组)78例,给予洋地黄制剂、利尿剂、血管扩张剂、血管紧张素转换酶抑制剂或β受体阻滞剂等常规药物;治疗组(EPO联用缬沙坦组)78例,在常规药物治疗基础上加用EPO治疗.结果:治疗组心功能改善的临床显效率和总有效率均较对照组显著提高(P<0.01),且无明显的不良反应出现.治疗前后血红蛋白(HB)浓度显著增高,心功能分级、左室射血分数、左室舒张末期内径、左室舒张末容积、左室收缩末容积、室间隔厚度、脑钠肽均有显著改善(P<0.01),两组比较差异有极显著性(P<0.01).结论:EPO联用缬沙坦治疗CHF是一种比较安全有效的方法,能显著升高HB浓度,改善心功能.     

贝伐单抗联合化疗治疗恶性胶质瘤患者的MRI研究

复发性胶质瘤患者（n=14）接受贝伐单抗联合卡铂、伊立替康或依托泊苷治疗。首次用药后2～6周时对患者进行MRI扫描随访。7例患者的对比一增强MRI显示肿瘤缩小，明显的缩小最早出现在首次治疗后2周。该治疗方案对不均匀对比增强肿瘤的疗效较对比均匀增强肿瘤的疗效更好。     

辛伐他汀联合胺碘酮治疗阵发性心房颤动的临床观察

目的：探讨辛伐他汀联合胺碘酮预防阵发性心房颤动（房颤）复发的作用。方法：选择频繁发作的阵发性房颤患者78例，随机分成两组，Ⅰ组（仅给予胺碘酮治疗）和Ⅱ组（给予胺碘酮＋辛伐他汀治疗），随访1年，观察治疗前后C反应蛋白（CRP）变化及房颤复发率。结果：治疗前后，Ⅰ组CRP（mg/L）分别为3.24±0.12和3.20±0.13（P〉0.05），Ⅱ组分别为3.22±0.13和2.15±0.11（P〈0.05）。Ⅰ组和Ⅱ组的房颤复发率分别为42.11％和23.68％（P〈0．05）。结论：辛伐他汀联合胺碘酮可以减少阵发性房颤的复发，可能与其抗感染作用有关。     

精神分裂症与抑郁症患者血清胆碱酯酶水平变化的探讨

目的 探讨精神分裂症与抑郁症患者血清胆碱酯酶(ChE)水平变化的差异.方法 对首次发病的68例精神分裂症患者与50例抑郁症患者分别于入院第2天、治疗后第12周检测血清ChE水平,并与70例健康体检者进行对比分析.对精神分裂症患者采用阳性和阴性症状量表(PANSS)、抑郁症患者采用汉密顿抑郁量表(HAMD)评定疗效.结果 治疗前精神分裂症、抑郁症、健康对照组平均血清ChE水平分别为(9 061.06±2 284.88)、(6 114.35±1 949.44)、(8 286.75±1 744.95)U/L,精神分裂症与抑郁症患者组间血清ChE水平比较差异有统计学意义(P＜0.05),精神分裂症患者血清ChE水平高于健康对照组,抑郁症患者血清ChE水平低于健康对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).治疗后精神分裂症患者血清ChE水平为(7 998.34±2 099.31)U/L,较治疗前下降;抑郁症组血清ChE水平为(7 427.37±1 826.13)U/L,较治疗前升高,差异有统计学意义(P＜0.05).精神分裂症组治疗后PANSS量表阳性症状分、阴性症状分、精神病理分及总分较治疗前均有不同程度减少,差异均有统计学意义(P＜0.05);抑郁症组治疗后HAMD量表评分较治疗前减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 精神分裂症患者血清ChE水平明显升高,抑郁症患者明显降低,经治疗后两组血清ChE水平均有不同程度的恢复.     

阿托伐他汀联合胺碘酮治疗特发性阵发性心房颤动的研究

目的 探讨阿托伐他汀预防心房颤动(房颤)复发的作用.方法 选择频繁发作的特发性阵发性房颤患者54例,随机分成两组,Ⅰ组(仅给予胺碘酮治疗)和Ⅱ组(给予胺碘酮 阿托伐他汀治疗),随访1年,观察治疗前后C反应蛋白(CRP)变化及窦性心律维持率.结果 治疗前后,Ⅰ组CRP(mg/L)分别为3.21±0.13和3.14±0.12(P＞0.05),Ⅱ组分别为3.23±0.11和1.16±0.10(P＜0.05).Ⅰ组和Ⅱ组的窦性心律维持率分别为56.34%和70.87%(P＜0.05).结论 阿托伐他汀治疗可以减少阵发性房颤的复发,且与其抗炎作用相关.     

伊班膦酸钠治疗22例晚期恶性肿瘤骨转移疗效分析

目的：观察伊班膦酸钠联合化疗或单用伊班膦酸钠对恶性肿瘤骨转移的止痛效果和不良反应。方法：将22例晚期恶性肿瘤患者分为A、B两组,A组予行化疗,于化疗间歇期加用伊班膦酸钠4mg静脉滴注,每4周为1周期,连用2周期评定疗效;B组单用伊班膦酸钠,剂量和用法同A组。结果：A、B组止痛有效率分别为72．7％（8／11）和63.6％（7／11）,经统计学分析无显著性差异（P〉0．05）。A组不良反应较B组多,主要是化疗后骨髓抑制及消化道反应。结论：对恶性肿瘤骨转移所致疼痛采用伊班膦酸钠治疗可获得较好的镇痛效果,若加化疗并不能进一步提高近期镇痛效果。     

增生硬化性IgA肾病伴贫血患者的临床病理特征及预后研究

目的　分析增生硬化性IgA肾病（IgAN）伴贫血患者的临床病理特征及预后。方法　选取2012年1月—2016年6月在郑州大学第一附属医院行肾脏穿刺活检诊断为增生硬化性IgAN的患者261例为研究对象。按照贫血的诊断标准,将患者分为贫血组（100例）和非贫血组（161例）。收集患者一般资料、实验室检查结果、肾组织病理检查指标,以肾活检日期为起点,随访至2017-06-01。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,进行Log-rank检验;采用多因素Cox比例风险模型分析贫血对增生硬化性IgAN患者预后的影响。结果　贫血组患者估算肾小球滤过率（eGFR）、清蛋白、血钙低于非贫血组,尿素、血肌酐、血磷、24 h尿蛋白定量、肾小球总硬化比例、肾小管萎缩/间质纤维化≥25%发生率高于非贫血组（P<0.05）。中位随访时间为11（6,21）个月,两组患者生存曲线比较,贫血组患者肾脏累积生存率低于非贫血组（χ2=30.307,P<0.001）。CKD3期不同贫血程度患者肾脏累积生存率比较,差异有统计学意义（χ2=22.066,P<0.001）。多因素Cox比例风险模型分析显示,贫血〔HR=2.864,95%CI（1.611,5.093）〕、24 h尿蛋白定量〔HR=1.164,95%CI（1.065,1.272）〕、肾小球总硬化比例〔HR=3.858,95%CI（1.120,13.290）〕、肾小管萎缩/间质纤维化〔HR=1.902,95%CI（1.070,3.383）〕是增生硬化性IgAN进展至终末期肾脏病（ESRD）的危险因素（P<0.05）。结论　增生硬化性IgAN伴贫血患者的临床病理表现相对较严重,肾脏累积生存率较低,且贫血是增生硬化性IgAN病情进展的独立危险因素。     

系统性红斑狼疮患者血清白细胞介素-37水平的变化及其临床意义

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血清白细胞介素‐37（IL‐37）水平的变化及其相应的临床意义。方法采用ELISA方法测定74例SLE患者和51例健康者（对照组）血清IL‐37水平,比较SLE患者和对照组IL‐37水平,分析SLE患者IL‐37水平与白细胞介素‐6（IL‐6）水平、α干扰素（INF‐α）水平、补体C3、补体C4、SLE疾病活动度指数（SLEDAI）的相关关系,检测糖皮质激素治疗前后14例SLE患者血清IL‐37水平。结果与对照组比较,SLE患者血清IL‐37水平明显升高,差别有统计学意义;SLE患者血清IL‐37、IL‐6及INF‐α水平存在正相关关系,但与C3、C4、SLEDAI无显著相关;14例SLE患者经过糖皮质激素治疗后,其IL‐37水平显著降低。结论 SLE患者血清IL‐37水平高于健康人;经过糖皮质激素治疗后,SLE患者的血清IL‐37水平下降。