马尔尼菲青霉菌鉴定要点及该菌酵母相体外药敏分析

目的了解马尔尼菲青霉菌(PM)鉴定要点及该菌酵母相体外药敏结果,以指导临床合理用药。方法收集某院2009—2016年23例PM感染患者血或骨髓的分离株,观察其菌落形态,采用E-test法分析酵母相PM对伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、氟康唑的药物敏感性。结果 PM形态:组织标本瑞氏染色直接镜检,可见典型卵圆形或圆形有明显横隔的孢子,常位于巨噬细胞内;血培养标本革兰染色镜检,可见菌体两端钝圆略弯曲呈腊肠样,偶有分枝状,可见有横隔。PM为双相型真菌,28°C为菌丝相,产生红色色素扩散入培养基中;35°C为酵母相,并有各自典型的菌落形态特征。伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、氟康唑对酵母相(35°C)PM的最低抑菌浓度(MIC)范围分别为0.002~0.016、0.012~0.125、0.002~0.500、0.500~16.000μg/m L。结论 PM的特征性菌落形态,以及骨髓和外周血发现的真菌孢子对该菌有诊断价值。该菌对伊曲康唑敏感性最强,其次是伏立康唑、两性霉素B,而氟康唑敏感性相对较弱。     

艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染的实验室检测

目的 明确从AIDS患者血液、骨髓中检出的病原体为马尔尼菲青霉菌.方法 取患者血液、骨髓于血培养瓶中置Bacter/Alert 3D血培养仪中培养,待血培养仪报阳性即作革兰染色,并转种至马铃薯斜面培养基于27℃和37℃孵育,观察真菌生长情况及菌落形态,并作乳酸棉兰染色于显微镜下观察菌体特征.结果 该菌为一双相真菌,27℃见菌丝相,呈淡黄色绒毛样,并产生酒红色色素,镜下可见典型的帚状枝及孢子链;37℃见酵母相,不产生特征性色素,镜下见酵母样细胞.结论 从体内分离出马尔尼菲青霉菌,即可诊断为马尔青霉菌病,也可排除组织胞浆菌感染.     

艾滋病合并播散性双相型真菌感染的真菌培养及鉴别

〔目的〕提高对艾滋病合并播散性荚膜组织胞浆菌病、马尔尼菲青霉菌病的实验诊断水平。〔方法〕取患者血液置于Bact alert12 0血培养仪配套培养瓶培养 ,然后转种哥伦比亚血平板、沙保劳琼脂平板 ,观察荚膜组织胞浆菌、马尔尼菲青霉菌分别于 2 5℃及 3 7℃孵育时的菌落特征、镜下形态特点。〔结果〕荚膜组织胞浆菌及马尔尼菲青霉菌均为双相型真菌 ,2 5℃培养为霉菌相。荚膜组织胞浆菌 ,无色素 ,生长缓慢 ,7-10d后可见白色绒毛样或棉花团样菌落 ,镜下可见特征性的齿轮状或棘状大分生孢子 ;3 7℃培养时为酵母相 ,镜下可见圆形、卵圆形 2 -4 μm的芽生孢子。马尔尼菲青霉菌 2 5℃培养 3 -4d为白色绒毛样菌落 ,菌落周围出现水溶性的葡萄酒样红色色素 ,镜下可见特征性的帚状枝 ;3 7℃孵育时为白色酵母样菌落 ,无色素 ,镜下可见圆形、卵圆形及特征性腊肠样孢子。〔结论〕艾滋病患者对荚膜组织胞浆菌、马尔尼菲青霉菌易感 ,易至播散性感染 ,从患者体内检出荚膜组织胞浆菌、马尔尼菲青霉菌是诊断荚膜组织胞浆菌病、马尔尼菲青霉菌病的金标准。     

马尔尼菲青霉菌培养与鉴定

目的 提高马尔尼菲青霉菌(PMA)培养鉴定在基层实验室的诊断水平.方法 取患者血液或骨髓液置于BacT/Alert 3D血培养仪系统配套的成人中和抗生素培养瓶,经培养提示阳性,取阳性培养物和淋巴结组织涂片、革兰染色镜检见病原体有细长分枝、分隔菌丝、腊肠形菌体,转种到哥伦比亚血平板、萨布罗琼脂及CHROMagar假丝酵母菌显色培养基,观察25℃和35℃孵育时的菌落形态及镜下菌体特征;测试相关生化反应,观察其结果.结果 PMA培养鉴别依据:是双相型真菌,25℃培养为真菌相,35℃培养为酵母相,均能产生葡萄酒红色色素;显微镜下菌体形态:25℃培养有典型的帚状枝,35℃培养可见圆形、卵圆形、两端钝圆略弯曲呈腊肠形有横隔菌体;生化结果:都能同化和发酵葡萄糖产酸,脲素酶阳性,都能被放线菌酮环己酰亚胺抑制,不能同化发酵乳糖.结论 PMA适宜的培养基是萨布罗培养基,菌体形态结构适宜的染色是乳酸棉兰染色、革兰染色,适宜基层实验窀开展.     

艾滋病并发马尔尼菲青霉病的真菌培养与鉴定

目的：明确并检出继发于艾滋病的马尔尼菲青霉病的病原体马尔尼菲青霉（Penicillium marneffei,PM）。方法：取患者骨髓、血液、皮损分泌物等接种于沙保弱培养基上，分别于25℃和37℃孵育，观察PM生长情况及菌落形态，并涂片、固定、染色，显微镜下观察菌体特征。结果：PM为双相性真菌，于25℃为青霉相，产生具有特征性的红色可溶性色素弥散于基质中，镜下可见典型的帚状枝；37℃为酵母相，无色素产生，镜下可见酵母样孢子，形似腊肠。本菌株与国际标准株ATCC24100扩增片段相同。结论：马尔尼菲青霉病诊断的金标准是从患者体内分离出PM，关注艾滋病与马尔尼菲青霉病的相关性，对及时确诊艾滋病具有重要意义。     

儿童马尔尼菲青霉病分析

目的 了解儿童马尔尼菲青霉病的临床表现及实验室诊断特点.方法 对3例马尔尼菲青霉病患儿的临床资料和实验室检查进行分析.结果 马尔尼菲青霉菌常首先在血液或骨髓中检出.真菌检查可见明显特征:涂片镜下可见细胞内外有腊肠样菌体,部分有横隔;真菌培养表现为双相菌,25℃为真菌相,底部产生特征性红色素,35℃为酵母相,无色素,有酵母样菌体.结论 儿童马尔尼菲青霉菌感染主要因免疫功能不完善引起,容易误诊和漏诊,预后凶险,应加强认识,早期诊断、及时治疗有利于取得良好的预后.     

消炎痛抑制白色念珠菌菌丝生长的小鼠模型试验

目的:探讨消炎痛对白色念珠菌性阴道炎的治疗作用。方法:建立小鼠白色念珠菌阴道炎动物模型后,连续7天小鼠阴道内注入2 mmol/L的消炎痛100μl后,进行灌洗液涂片镜检,阴道灌洗液真菌荷载量菌落计数及阴道组织病理学检查。结果:消炎痛组仅见少量炎性细胞浸润(HE染色),阴道粘膜未见菌丝,仅见少量孢子(PAS染色);阴道灌洗液真菌载量计数有较低水平的CFU计数;灌洗液涂片镜检仅见少量孢子,未见菌丝。结论:消炎痛能抑制体内白色念珠菌菌丝生长和孢子增殖生长,对模型小鼠白色念珠菌性阴道炎具有显著的治疗作用。     

急性播散性组织胞浆菌病1例报告

1 病例资料 患者男性,有2月余无明显诱因发热入院。体温在38～41℃之间波动,肺部感染,肝脾肿大,呈慢性消耗病容。使用多种抗菌素治疗无效。检查 Hb90～100g/L ,WBC4.5～7.1×10~9/L,取静脉血及骨髓涂片检查,从中检出组织胞浆菌孢子(Histoplasmosis),明确诊断后,分别经大蒜素。两性霉素B、酮康唑(Ketoconazole,又名Nigoral)为广谱抗真菌药。治疗2月余,痊愈后出院。2 检验方法 抽取静脉血2ml离心沉淀出白细胞层,取出涂片,骨髓常     

56例真菌性胸水腹水微生物学及临床分析

真菌感染性疾病在临床中的发病比例一直很低 ,但是近年来真菌感染呈现日益增加的趋势[1] ,这对临床诊断和治疗提出了新的要求和挑战。作者收集了5 6例真菌性胸腹水 ,对其进行微生物学及临床分析 ,现报道如下。1　材料与方法1·1　标本来源　我院住院病人及门诊病人。1·2　培养基　沙氏培养基和血液琼脂按规程配制[2 ] ,高渗培养基和厌氧培养基自研自配 ,ＹＢＣ卡为生物梅里埃公司产品。1·3　分离方法　先将临床胸腹水标本离心后取沉渣接种沙氏培养基 ,35℃培养 2 4ｈ后如生长经涂片染色为酵母孢子 ,再进一步鉴定。每隔 2 4ｈ观察 1次 ,7ｄ…     

马尔尼菲青霉菌的分离鉴定与耐药性分析

目的分析马尔尼菲青霉菌(PMA)在无基础疾病低龄患儿的感染状况及耐药性,为马尔尼菲青霉菌病(PSM)患儿选择及时、有效的抗真菌治疗提供依据。方法收集2006年1月-2014年12月23例马尔尼菲青霉病患儿血液和骨髓标本中分离的PMA,从细菌学检验、骨髓像染色检查、组织病理学常规染色和特殊染色检查鉴定PMA,并且采用Rosoo纸片扩散法进行马尔尼菲青霉菌药物敏感性试验。结果 BACT/ALERT 3D120全自动血液培养仪提示有菌生长;糖同化试验均阳性;组织病理学常规染色显示为肉芽肿病变,中心坏死,并见典型细胞为腊肠形孢子,长形、、粗细均匀、两头钝圆、中央有一横隔;23株马尔尼菲青霉菌对5种抗真菌药物抗菌活性均较好,两性霉素B、伏立康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑的耐药率分别为13.0%、8.7%、4.3%、4.3%。结论马尔尼菲青霉菌已严重危害免疫力低下的低龄儿童,需严防漏检而贻误治疗时机,尤其重视降低基层医院的马尔尼菲青霉菌病的误诊率,因氟康唑敏感性高、能透过血脑屏障、不良反应小、治疗费用较低,所以在马尔尼菲青霉病患儿治疗上推荐首选药物为氟康唑。     

供受体混合骨髓移植GVHD反应的动物实验研究

目的 观察混合骨髓移植的GVHD反应。方法 以急性放射病BALB/C小鼠(H-2d)为受鼠,C57BL/6(H-2b)小鼠为供鼠。供体鼠骨髓和脾细胞中混合一定比例的受体鼠脾脏细胞,进行混合骨髓移植。观察移植后小鼠死亡率、白细胞系造血重建、脾结节、体内混合淋巴细胞培养、嵌合体及病理学改变,观察混合骨髓移植方式的GVHD反应。结果 异基因骨髓移植组发生明显的GVHD反应。供受鼠脾脏3:1混合骨髓移植不能明显降低GVHD反应,供受鼠脾细胞比例1:1和2:1移植组可以明显减轻GVHD反应。表现为外周血白细胞及骨髓造血恢复快,体内混合淋巴细胞反应降低及嵌合体百分率升高。结论 混合骨髓移植方式可以降低GVHD反应,并与同基因和异基因脾细胞比例有关。     

Dietary fish oil decreases the proportion of classical monocytes in blood in healthy mice but increases their proportion upon induction of inflammation

Fish oil can have beneficial effects in health and disease. In healthy individuals, reduction of the inflammatory status may be of benefit, whereas in patients with systemic inflammation, such as sepsis, it is important to diminish the immunosuppression that is thought to contribute to poor outcome. The objective of this study was to determine the effects of dietary fish oil on monocytes/macrophages in blood, bone marrow, spleen, and peritoneum and chemokine concentrations in blood and peritoneum in healthy mice and mice with endotoxin-induced inflammation. Mice were fed a Western-type diet without fish oil (C) or with 2.8% fish oil (FO) for 6 wk and then either killed (healthy mice) or injected i.p. with endotoxin (LPS) and killed after 3, 8, 12, 24, or 48 h. Blood, bone marrow, spleen, and peritoneal lavage were collected. Expression of cell surface molecules and chemokine receptors was analyzed by flow cytometry and chemokine concentrations measured by ELISA. Healthy mice in the FO group had lower proportions of classical monocytes in blood than healthy mice in the C group. LPS administration increased the proportion of classical monocytes in blood in mice in the FO group but not in those in the C group. Healthy mice in the FO group had lower serum concentrations of CCL2 than mice in the C group, but in inflamed mice, CCL2 concentrations were higher in the FO group than in the C group. These results indicate that dietary fish oil can attenuate the inflammatory status in homeostasis but intensify the immune response upon inflammation.     

湖北省汉族女性亚甲基四氢叶酸还原酶和甲硫氨酸合成酶还原酶基因多态性分布研究

目的:分析湖北省汉族女性亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)C677T、A1298C及甲硫氨酸合成酶还原酶(methionine synthase reductase,MTRR)A66G基因多态性的分布特征。方法:采用横断面调查研究方法,以湖北省2 899例汉族女性为对象,采集口腔黏膜上皮细胞提取基因组DNA,采用Taqman-MGB技术进行MTHFR和MTRR基因多态性检测,统计分析基因多态性的分布特征并与已报道的其他地区的数据进行比较。结果:湖北省汉族女性的MTHFR 677TT纯合突变基因型频率为16.0%,高于海南省,低于山东省和河南省(P<0.01),与四川省的差异无统计学意义(P>0.05)。MTHFR 1298CC纯合突变基因型频率为4.5%,高于河南省,低于四川省和海南省(P<0.05),与山东省的差异无统计学意义(P>0.05)。MTRR 66GG纯合突变基因型频率为6.2%,低于海南省(P<0.01),与山东、河南和四川省的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:湖北省汉族女性有不同于其他地区的MTHFR和MTRR基因多态性分布特征。     

The influence of DDT analogues (nuarimol and fenarimol) on the frequency of occurrence of micronuclei in erythrocytes of bone marrow and spleen in mice]

The clastogenic potential of the two DDT analogues: fenarimol and nuarimol was investigated, and the usefulness of the mouse spleen cells for this purpose was evaluated. Nuarimol and fenarimol were administered per o to 8-10 weeks old male mice (Swiss) according to the following protocol: nuarimol 100 and 200 mg/kg b.w. and fenarimol 50 and 100 mg/kg b.w. twice during 24 hours. Mitomycin C (2 and 4 mg/kg b.w.) and cyclophosphamide (25 and 75 mg/kg b.w.) were administered to the positive control mice. After 30, 48, 72 hours following the first administration the animals were killed and the number of micronuclei were calculated in spleen and bone marrow polychromatic and normochromatic erythrocytes. The results show that the spleen could be regarded as an appropriate tissue for the evaluation of micronuclei induction. Fenarimol and nuarimol did not cause micronuclei induction in the bone marrow and spleen erythrocytes.     

湖北省HIV-1分子流行病学研究

目的了解湖北省HIV-1基因型分布特征。方法对湖北省HIV-1主要流行区域进行流行病学调查，应用巢式聚合酶链反应对其中102例HIV-1感染者的env基因V3～V4区、gag基因P17/P24区和tat基因第一外显子区进行扩增，对各基因区阳性扩增样本进行序列测定，并对各基因区核苷酸进行序列分析。结果所有目标人群中共存在B^＋、C2种亚型以及CRF08-BC和CRF01-AE2种重组毒株，B^＋亚型在人群和地域上分布最广，涉及献血员、受血者以及二者的配偶和性乱人群，主要分布既往有偿献血员集中的地区。CRF08-BC、CRF01-AE重组主要涉及性乱人群，分布于经济发达的城市或地理位置偏南方的地区。C亚型为离散病例，主要涉及静脉毒品注射者。结论湖北省已由既往单一HIv-1 B^＋亚型转变为多种亚型、重组亚型流行的复杂局面，各亚型在省内高危人群和地域分布不平衡，各有特点，从总的亚型流行特征来看，HIV-1在湖北省有加快流行和进一步复杂化的趋势。     

Role of pyruvate dehydrogenase kinase 4 in regulating PDH activation during acute muscle contraction

The oxidation of carbohydrates in mammals is regulated by the pyruvate dehydrogenase (PDH) complex, which is covalently regulated by four PDH kinases (PDK1-4) and two PDH phosphatases (PDP1-2) unique to the PDH complex. To investigate the role that PDK4 plays in regulating PDH activation (PDHa) during muscle contraction, mouse extensor digitorum muscle was removed from wild type (WT) and PDK4-knockout (PDK4-KO) mice after a 24?h fast and stimulated for 3?min either at 10?Hz (low-intensity contraction), 40?Hz (moderate-intensity contraction), or allowed to rest. Force was recorded and muscle PDHa activity and metabolite concentrations were measured. PDHa activity was ～2.5-fold higher at rest in PDK4-KO mice than WT mice (P?=?0.009) and ～2-fold higher in PDK4-KO mice at both 10?Hz (P?相似文献   

乙基亚硝基脲诱发转基因小鼠体内基因突变及微核形成

目的 用致突变剂乙基亚硝基脲（ＥＮＵ）验证基于ＰＵＣ１１８质粒的转基因小鼠用于体内诱变研究的可行性。方法 用酶切、环化方法从经过和未经过ＥＮＵ诱变处理的ｘｙｌＥ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ基因小鼠脾脏组织ＤＮＡ中重新分离ｐＵＣ１１８ＮＸ质粒,使其转化ＤＨ１０Ｂ宿主菌并铺氨苄青霉素抗性平板培养后洒邻苯二酚溶液,通过菌落颜色不同筛选突变体,并对突变靶基因,ｘｙ／Ｅ测序分析以确定突变类型。同时取该转基因小鼠外周血     

湖北省2004—2006年流感流行株监测分析

目的通过流感病原学监测结果，为控制湖北省流感流行提供依据。方法采集病人鼻咽拭子，MDCK细胞接种，培养分离和鉴定流感病毒。结果湖北省2004—2006年分别分离出H1N1、H3N2“O”、Yamagata“B”、Victoria“B”流感病毒株。结论4种亚型流感病毒株流行优势交叉出现，打破以往一种流感病毒亚型毒株呈现单一周期性流行规律。     

套式-聚合酶链反应在山东省恙虫病检测中的应用

目的 :利用分子生物学手段对山东省部分地区的人和鼠进行调查 ,了解恙虫病在山东省的感染情况。方法 :采用套式 -聚合酶链反应 (nested- PCR)技术 ,对在山东省 6个市 (县、区 )捕获的野鼠或家鼠的肝、脾、肾组织标本 ,以及临床诊断为恙虫病的病人血标本进行检测。结果 :共检测鼠脏器标本 198份 ,阳性 8份 ,阳性率为 4 .2 4 % ;共检测临床诊断恙虫病病人血标本 14份 ,阳性 7份 ,阳性率为 5 0 %。结论 :首次在山东省黄河以北地区捕获的鼠体内检测到恙虫病东方体 ,其中两只鼠为褐家鼠 ,表明山东省广泛存在恙虫病的自然疫源地