TLR2/MyD88信号系统在大鼠角膜移植术后排斥反应中的作用

目的 探讨Toll样受体2(Toll like receptor,TLR2)/MyD88信号系统在大鼠角膜移植术后排斥反应中的作用.方法 取14只SD大鼠为供体,28只Wistar大鼠为受体,建立28个同种异体穿透性角膜移植模型.建模后分为同种异体角膜移植组14只(6只用于术后观察排斥情况),同种异体角膜移植TLR2单克隆抗体组14只(6只用于术后观察排斥情况).另选16只Wistar大鼠,分为同种自体角膜移植组8只,正常对照组8只.3个手术组大鼠分别行穿透性角膜移植术.术后TLR2单克隆抗体组给予0.5 g·L-1TLR2单克隆抗体,分别于术后0d、2d、4d、6d、8d分5次经球结膜下注射给药.正常对照组、同种自体角膜移植组及同种异体角膜移植组给等量生理盐水.术后每天于裂隙灯下观察角膜透明度、新生血管,并用排斥反应指数评分.第9天取材,行HE、免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测.结果 术后随时间变化各手术组角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊和新生血管生长,以同种异体角膜移植组最为明显.HE染色结果显示在同种异体角膜移植组,角膜基质层出现水肿、大量炎症细胞浸润和新生血管,而在同种自体角膜移植组和TLR2单克隆抗体组中炎症反应较轻.免疫组织化学检测结果:TLR2和MyD88分子在正常对照组、同种自体角膜移植组及TLR2单克隆抗体组的角膜上皮中均有微量表达,同种异体角膜移植组角膜上皮、基质细胞中TLR2和MyD88分子的表达明显增多,尤以基质层明显.实时荧光定量PCR结果显示同种异体角膜移植组角膜组织TLR2 mRNA、MyD88 mRNA的表达较同种自体角膜移植组(P =0.000、0.004)和正常对照组(P=0.000、0.000)显著增加,两者的表达亦较TLR2单克隆抗体组显著增加(P =0.000、0.003).结论 TLR2单克隆抗体抑制TLR2及其下游信号分子MyD88的表达;TLR2/MyD88信号系统参与了角膜移植术后排斥反应,影响了角膜植片的转归.     

全角膜移植术后免疫排斥反应的探讨

目的：评价对严重全角膜病变行带环形板层巩膜瓣全角膜移植术（CST）后免疫排斥反应的临床疗效。方法：对用药无法控制的严重全角膜病变患者10例进行回顾性研究，其中化脓性角膜溃疡9例，大泡性角膜病变伴全角膜白斑1例，全部病人均行CST。结果：随访1-23个月，平均10.2个月，10例视力均有不同程度提高；8例植片透明，2例植片半透明；5例术后3-4个月出现角膜新生血管（其中2例植片半透明）；2例术后半年出现免疫排斥反应。结论：CST是治疗严重角膜病变的有效方法，不但挽救眼球且能恢复一定的视力。     

角膜移植术后免疫排斥反应的探讨

目的：为有效控制角膜移植术后免疫排斥反应的发生，探讨角膜移植术后免疫排斥反应发生的因素。方法：对角膜手术后发生排斥反应者进行分析，总结发生的原因、时间，程度等，结果：123眼中发生免疫排斥反应46眼（37．4％），其中17眼发生不可逆的排斥反应，占排斥反应的36．96％；有角膜新生血管发生排斥反应41眼，占89．13％，内皮型排斥反应20眼，上皮型12眼，基质型3眼，混合型11眼，排斥反应发生时间为术后3周－3年，术后3－6月发生率最高，占46．48％，结论：免疫排斥反应的发生是多因素参与的复杂过程，与角膜新生血管的数量，角膜受损及感染的程度，植片的大小，手术的次数以及手术的时机和方式密切相关。     

角膜移植术后角膜免疫排斥反应的临床探讨

目的 探讨角膜移植术后角膜免疫排斥反应的有效防治方法。方法 对穿透角膜移植术后发生角膜免疫排斥反应的68例(68眼)进行回顾性总结。 结果 经统计学分析结果表明:角膜化学烧伤、角膜新生血管、大植片移植、术前活动性角膜炎症、再次移植等均为穿透角膜移植术后免疫排斥反应的主要因素。 结论 免疫排斥反应的发生与术前高危角膜移植有着非常密切的关系。     

纤维介素蛋白2（FGL-2）在大鼠角膜移植排斥反应中的作用

目的　研究纤维介素蛋白２（ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ-ｌｉｋｅｐｒｏｔｅｉｎ２,ＦＧＬ-２）在大鼠角膜移植排斥反应发生发展过程中的作用及糖皮质激素对其表达的影响。方法　６０只成年雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为正常对照组、自体角膜移植组、同种异体角膜移植组和糖皮质激素组。正常对照组大鼠未行任何手术,自体角膜移植组、同种异体角膜移植组及糖皮质激素组均行穿透性角膜移植术。术后裂隙灯显微镜下观察术眼角膜炎性反应情况,按照Ｌａｒｋｉｎ的标准进行排斥反应评分,计算排斥反应指数,并在术后９ｄ和１４ｄ分别取眼球制备角膜组织切片,行组织病理学检查和免疫组织化学检测,观察角膜组织的炎性反应和ＦＧＬ-２在角膜组织中的表达;采用实时荧光定量ＰＣＲ法检测ＦＧＬ-２ｍＲＮＡ在大鼠角膜植片中的相对表达量。结果　术后９ｄ内各组角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊及新生血管生长。同种异体角膜移植组大鼠平均在角膜移植术后９．８ｄ发生排斥反应并获病理学支持;自体角膜移植组和糖皮质激素组大鼠术后排斥反应计分均未达到诊断标准。免疫组织化学结果显示,不同时间点同种异体角膜移植组炎性细胞明显多于自体角膜移植组和糖皮质激素组。术后３组手术干预组角膜ＦＧＬ-２ｍＲＮＡ的表达均增加,在术后９ｄ和１４ｄ时同种异体角膜移植组均较自体角膜移植组和糖皮质激素组高,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ＦＧＬ-２可能参与角膜移植免疫排斥反应,糖皮质激素可能通过降低其表达发挥抗排斥作用。     

角膜移植术后免疫排斥反应临床研究

确立角膜移植术后免疫排斥反应的有效防治策略。方法对穿透性角膜移植术后发生免疫排斥反应的８６例进行回顾性总结。结论从分子水平减少供受体间的抗原差异,研制新一代高效安全的免疫抑制剂,创造免疫耐度的理论环境可能是控制高角角膜移植免疫排斥反应的有效措施。     

FasL抑制剂对大鼠角膜移植术后角膜细胞凋亡及Treg的影响

目的：探索大鼠角膜移植术后玻璃体腔内注射FasL抑制剂对角膜细胞凋亡,角膜Fas、FasL表达,全血和颈部淋巴结中Treg数量及排斥反应指数的影响。

方法：将24只SD大鼠24眼行穿透性角膜移植术,术后随机分为玻璃体腔内注射PBS组(12只12眼)、FasL抑制剂组(12只12眼),每周记录角膜排斥反应指数,术后1、3、5wk取全血、颈部淋巴结检测Treg数量,取角膜组织测Fas、FasL表达及凋亡细胞数量。

结果：FasL抑制剂组角膜Fas、FasL表达较PBS组明显下降(均P<0.05); FasL抑制剂组角膜细胞凋亡较PBS组明显减少,FasL抑制剂组术后5wk凋亡最少; 术后3wk开始FasL抑制剂组Treg数量较PBS组明显升高(均P<0.05),FasL 抑制剂组角膜移植排斥反应评分明显低于PBS组(均P<0.05)。

结论：大鼠角膜移植术后玻璃体腔内注射FasL抑制剂可减少角膜各层细胞凋亡,增加全血、颈部淋巴结中Treg的数量,减轻排斥反应。     

穿透角膜移植术后植片的免疫排斥反应

本文对角膜移植术后免疫排斥反应的发生率,危险因素,临床表现,以及发生机制和治疗一综述。     

穿透性角膜移植联合扇形角膜缘移植术的观察

目的　观察穿透性角膜移植联合扇形角膜缘移植术的临床疗效。方法　将 61例 (61眼 )患者分为两组 ,一组 3 0例 (3 0眼 )进行部分穿透性角膜移植 (PKP)术 ,另一组 3 1例 (3 1眼 )进行穿透性角膜移植联合扇形角膜缘移植 (PKP +LKP)术 ,比较其临床疗效。结果　PKP组中有 12例的植片发生了免疫排斥反应 ,其中 2例 (2眼 )因植片血管化而导致植片浑浊。PKP+FLT组穿透植片 4例发生排斥反应。两组进行 χ2 检验 ,P <0 0 5。结论　对于合并有局部新生血管的角膜白斑患者 ,PKP+FLT术较传统的PKP术有更好的临床效果。     

角膜移植术后免疫排斥反应34例分析

目的 探讨角膜移植术后发生排斥反应的相关因素。方法 我院1999年5月～2003年5月间行角膜移植手术80例(84只眼)，对术后发生排斥反应的34例(36只眼)进行回顾性总结分析。结果 84只眼中发生排斥反应36只眼(42．5％)。角膜新生血管者为20只眼，儿童患者4只眼。发生排斥反应的时间为术后20天～2年。术后3～6月发生率最高。上皮型10只眼，上皮下型1只眼。基质型8只眼，内皮型17只眼。角膜移植片透明愈合28只眼，半透明愈合6只眼，移植片完全混浊2只眼。结论 高危角膜移植、儿童术后随诊不及时、用药不科学等，都是角膜移植病人术后发生排斥反应的因素。     

Ocular refraction after penetrating keratoplasty with infant donor corneas

Five adult patients underwent penetrating keratoplasty in which corneal tissue from donors 3 months old or younger was used. In each case, a large myopic shift in refraction was found after surgery (mean, 9 diopters). The average postoperative spherical equivalent was -7.35 diopters. This resulted from the extremely steep curvature of the infant donor cornea (mean keratometric value, 57.67 diopters). The induced anisometropia and steep corneal topography of the infant donor cornea prevented visual rehabilitation with spectacles or contact lenses in four of five patients. Our findings suggested that corneal tissue from donors 3 months old or younger may be unsuitable for penetrating keratoplasty in emmetropic adults or anisometropic patients undergoing surgery in the more myopic eye.     

霉酚酸酯对大鼠角膜移植术后排斥反应的抑制

目的研究霉酚酸酯(MMF)对大鼠角膜移植术后临床参数变化的影响.方法建立大鼠穿透性角膜移植排斥反应的动物模型,观察MMF对大鼠角膜植片存活和各排斥反应临床指数的影响,并与阴性对照组和环胞霉素A(CsA)治疗组相比较.结果阴性对照组角膜植片平均存活时间为11.375±1.685天,CsA治疗组为18.625±1.598天,MMF治疗组为16.500±1.852天,CsA±MMF组为24.500±1.773天,均比阴性对照组显著延长(P＜0.05);阴性对照组排斥反应指数(RI)、浑浊、水肿三项临床指标明显高于各用药组(P＜0.05),但新生血管指数与MMF组、CsA组相比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论MMF对大鼠穿透性角膜移植排斥反应具有明显的抑制作用,显著地延长角膜植片的存活时间,降低角膜植片浑浊、水肿的程度.     

抗树突状细胞单克隆抗体对大鼠角膜移植术后植片内IFN-γmRNA表达和血清IL-2水平的影响

目的用抗树突状细胞单克隆抗体（anti—dendritic cell monoclonal antibody，DC—McAb）抑制树突状细胞（dendritic cell，DC），观察其对大鼠角膜移植排斥反应及植片内IFN-γ mRNA的表达、血清IL-2水平的影响。方法以Wistar大鼠为供体，SD大鼠为受体，分A：对照组：A0：阳性对照组；B：腹腔给药组；C：结膜下给药组；D：保留受体上皮瓣组。A、A0、B、C组予常规穿透角膜移植术．D组保留受体上皮瓣。每组术前3d及术日，术后第1、第2、第3、第5、第7、第9、第11天给药，A组：腹腔注射灭菌注射用水0．5ml，A0组：腹腔注射小鼠抗大鼠IgG 0．1ml＋灭菌注射用水0．4m1．B、D组：DC—McAb 0．1ml＋灭菌注射用水0．4ml，C组：结膜下注射DC—McAb 0．05ml。术后裂隙灯显微镜观察排斥反应情况，记录各组角膜发生排斥反应的时间。A、B、C、D组分别于术后第3、第7、第14和第21天采血清．ELISA法测IL-2水平。A、B组术后第7天取角膜植片，RT—PCR法检测IFN-γmRNA的表达情况。结果A组术后（7．63±0．74）d出现排斥反应，A0组（7．50±0．54）d，与A组相比差异无显著性（P〉0．05）；B组（17．11±1．17）d、C组（13．86±0．69）d、D组（17．88±0．84）d，与A组相比差异有显著性（P〈0．01）；C组与B、D组相比，差异有显著性（P〈0．01）；B组与D组相比，差异无显著性（P〉0．05）。A组角膜植片IFN-γmRNA可检测到有较高表达，B组的表达量很少或检测不到，两组之间的差异较为明显。正常SD大鼠血清IL-2浓度为（35．18±2．59）pg／ml，移植术后3d略有升高，7d时明显升高，14d时IL-2的水平达高峰，21d时下降，B、C、D组升高幅度与A组相比明显减少（P〈0．05），C组与B、D组相比升高幅度较大（P〈0．05），B、D两组之间无明显差异（P〉0．05）。结论抗树突状细胞单克隆抗体可抑制大鼠角膜移植排斥反应，延?     

Results of penetrating keratoplasty in vascularized corneas.

A retrospective longitudinal study of 105 penetrating keratoplasties for vascularized corneal opacities was done. The results of cases with an etiology of healed trachoma or healed corneal ulcers were compared. The vascularization was graded from Grade I to V depending on the quadrant and type of vascularization. Graft clarity of 2+ or more in cases of trachomatous opacity was achieved in 93% of cases and that after postinfectious opacity in 71.8%. Prognosis was poor in cases where deep vascularization was present in more than two quadrants or more than 180 degrees.     

Eosinophils in corneas removed by penetrating keratoplasty.

One hundred consecutively submitted corneas removed by penetrating keratoplasty were studied histologically to determine the frequency in which eosinophils are found. In 20 corneas eosinophils occurred in densities ranging from 0.2 to more than 50 per high power field (HPF), and accounted for 1.5% to 100% of the total leucocytes counted. More than half of the corneal specimens containing eosinophils, including six of seven corneas having the highest eosinophil concentrations, were failed grafts. Because the concentration of eosinophils was in many cases beyond that attributable to non-specific vascular permeability, the existence of eosinophil chemotaxic substances in the cornea is postulated.     

Outcomes of penetrating keratoplasty with imported donor corneas

PURPOSE: To analyze factors influencing the surgical success of penetrating keratoplasty and long-term graft survival when using imported donor corneas. METHODS: Sixty-three donor corneas imported to Taipei from the Cincinnati Eye Bank from July 1992-June 1993 were used for penetrating keratoplasty. The corneal endothelium was examined using specular microscopy on arrival in Taiwan. The endothelial morphology and endothelial cell density (ECD) were compared with the photograph of the same cornea taken in the United States. The relationships of the surgical success rate with donor age, death to enucleation time, death to surgery time, and ECD were analyzed. The long-term graft survival and ECD of clear grafts were analyzed 4 years after surgery. RESULTS: On specular microscopic examination. the imported corneas showed diminished endothelial reflection, blurred cellular borders, and increased dark areas, which were markedly different from the pictures of the corneal endothelium taken in the United States. The average ECD before transportation was 2,525+/-267/mm2 and decreased to 1,934+/-250/mm2 after transportation (p < 0.001), with an average endothelial cell loss of 590+/-247/mm2. The overall surgical success rate was 89% and did not correlate with any of the donor factors tested except death to surgery time. The surgical success rate decreased when the time from death to surgery was >7 days (p = 0.05), mainly because of poor reepithelialization. Four years after surgery, 24 grafts remained clear. The ECD had decreased by 72+/-5% in the clear grafts. CONCLUSIONS: Our findings show that endothelial changes in imported donor corneas do occur after transportation, but the surgical success rate may not be influenced significantly if the penetrating keratoplasty is performed within 7 days after donor death. However, the ECD in the clear grafts 4 years after surgery is low.     

IL-1RA对大鼠角膜移植免疫排斥反应的抑制作用

目的研究白细胞介素－１受体拮抗剂（ ＩＬ－ＩＲＡ）对大鼠角膜移植排斥反应的防治作用。方法建立大鼠穿透角膜移植排斥反应的动物模型,观察ＩＬ－ＩＲＡ对大鼠角膜植片存活和排斥反应指数（ ＲＩ）的影响,并与阴性对照组和环抱霉素 Ａ（ＣｓＡ）治疗组相比较。结果阴性对照组角膜植片平均存活时间为 １２． ２３５天± １． ６７４天,而 ＣｓＡ治疗组为１７．６７６天±１．５２８天,ＩＬ－１ＲＡ治疗组为１９．２５０天±１．４５６天,均比阴性对照组显著延长（Ｐ＜０．０１）;ＩＬ－１ＲＡ治疗组角膜植片新生血管指数明显低于对照组和ＣｓＡ治疗组（Ｐ＜０．０１）。结论ＩＬ－１ＲＡ能抑制大鼠穿透角膜移植免疫排斥反应,显著地延长角膜植片的存活时间,并具有抑制角膜植片新生血管生长的作用。     

对大鼠角膜移植免疫排斥反应的抑制作用

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