烧伤大鼠早期胃肠喂养的实验研究

目的：探讨严重烧伤后早期胃肠性喂养的作用及方法。方法：对伤后２小时既开始喂养的严重烧伤大鼠进行血浆蛋白监测,并与正常大鼠及伤后禁食大鼠作对比。结果：喂养组大鼠伤后７天血浆球蛋白明显上升至接近正常,胃肠粘膜病理变化减轻。结论：早期喂养有减轻胃肠及全身损害的作用。     

严重创伤患者早期凝血功能变化及与血浆血栓调节蛋白、蛋白C的关系

目的 探讨严重创伤患者早期凝血功能变化及与血浆血栓调节蛋白(thrombomodu1in,TM)、蛋白C水平的关系及其临床意义. 方法 选择早期多发伤患者64例,按严重创伤程度评分( ISS)分为重伤组(ISS≥16分)和轻伤组(ISS＜ 16分),比较分析各组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)变化,同时检测血浆TM和蛋白C水平,分析与凝血功能变化的相关性.另选择30例健康人为正常对照组.比较分析死亡和生存患者血浆TM和蛋白C水平的变化. 结果 重伤组PT和APTT较轻伤组及正常对照组明显延长(P＜0.05),与血浆TM和蛋白C的水平变化均有明显的相关性(P＜0.05).死亡患者血浆TM水平明显高于生存患者,蛋白C明显低于生存患者. 结论 严重创伤患者早期出现凝血功能异常,与血浆TM和蛋白C的活化相关,血浆TM和蛋白C水平对预后有重要的预测价值.     

烧伤后小鼠类固醇受体辅活化子的表达变化

目的 观察小鼠烧伤后早期类固醇受体辅活化子(SRC)蛋白表达的时相变化,初步探讨烧伤早期糖皮质激素抵抗的分子机制.方法 将30只健康C57/129雄性小鼠随机分为正常对照组与烧伤组,烧伤组给予背部TBSA 15%～20% Ⅲ°烧伤.分别于伤后1、6、12、24小时采用Western blot测定肝、脾组织SRC家族(SRC-1、GRIP-1、NCOA-3)蛋白表达水平的变化.结果 烧伤组肝组织SRC-1蛋白表达水平在烧伤后1小时即显著降低,6小时降至最低,以后逐渐恢复,至24小时与正常对照组相比无显著差异;正常脾组织SRC-1蛋白表达水平较低,测定结果无统计学意义.烧伤组肝组织GRIP-1、NCOA-3蛋白表达水平在烧伤后显著升高,12小时达到高峰,24小时仍显著高于正常对照组;烧伤组脾组织GRIP-1、NCOA-3在烧伤后1小时显著升高,GRIP-1在烧伤后6小时达到高峰,24小时与正常对照相比差异不显著;而NCOA-3在烧伤后12小时达到高峰,24小时显著高于正常对照组.结论 小鼠烧伤后早期SRC-1显著降低,GRIP-1、NCOA-3显著升高,烧伤后糖皮质激素抵抗的发生发展可能与SRC家族成员表达变化有关.     

舱室内颅脑爆炸伤早期血浆S100B蛋白及脑水肿的变化及意义

目的 观察舱室内大鼠颅脑爆炸伤早期血浆S-100B蛋白含量的变化及其意义.方法 采用自制舱室内大鼠颅脑爆炸伤模型,于伤后1、3、6、12、24、72小时取血,运用双抗体夹心法(ELISA法)检测S-100B蛋白含量,取脑组织测含水量并观察伤后病理变化.结果 伤后S-100B蛋白随时问延长而逐渐增高,24小时达高峰,72小时仍高于正常;脑含水量随时间延长而逐渐增加,6小时达高峰,之后逐渐下降,24小时内仍高于正常,72小时接近正常.结论 舱室内颅脑爆炸伤模型稳定可靠,早期检测血S-100B蛋白有助判断舱室内颅脑爆炸伤.     

严重烧伤特定蛋白动态联检及其临床意义

严重烧伤后血浆特定蛋白浓度发生明显改变,通过对29例TBSA30～97％（平均50．03±21．16）严重烧伤病人10项特定蛋白C3（补体C3）、C4（补体C4）、IgA（免疫球蛋白肋、IgM（免疫球蛋白M）、ALB（白蛋白）、PAB（前清蛋白）、TRF（转铁蛋白）、CER（铜兰蛋白）、HAP（结合珠蛋白）、AAT（α－1抗胰蛋白酶）,分四个时相（2、7、14、21天）,用法国赛诺菲集团生产的QM300全自动特定蛋白分析系统进行动态联检,观察严重烧伤后血浆特定蛋白的代谢变化及其临床意义,数据经多元方差分析,t检验,正常人对照组作为各项指标伤前对照。C3、C4、PAB、ALB、TRF、CER降低非常显著（P＜0．001）,C3、C4恢复较慢且与烧伤严重程度呈负相关;CER、TRF、PAB、ALB伤后一周内降低非常显著（P＜0．001）,在14-21天开始恢复且伤情愈重,恢复愈慢。IgA、IgM在伤后2天时降低非常显著（P＜0．001）,IgM随之逐渐回升,IgA可持续一周,AAT各时相均呈非常显著升高（P＜0．001）,同组各时相间差异不显著,伤情愈重,升高愈剧;HAP在伤后7天升高显著（P＜0．05）,组间及各时相间差异不显著。严重烧伤后这些特定蛋白总的变化趋势,认为严重烧伤后在内稳态失恒的状态下,血浆蛋白的变化,直接影响到血浆蛋白的免疫、载运、营养、     

烧伤后大鼠不同类型骨骼肌蛋白降解率的变化规律及其与糖皮质激素间的关系

为了解烧伤后不同类型骨骼肌蛋白降解率和血浆中糖皮质激素含量的变化 ,比较不同类型骨骼肌对烧伤刺激的反应 ,分析烧伤后骨骼肌萎缩的调节因子 ,应用 30 %Ⅲ度烫伤大鼠模型 ,借助骨骼肌充分氧供离体孵育系统 ,采用氨基酸全谱分析仪测定大鼠伤后不同时间点伸趾长肌和比目鱼肌蛋白降解率 ,用放射免疫分析测定大鼠血浆中糖皮质激素含量。结果发现 :烧伤后大鼠伸趾长肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率均明显增加 ,以烧伤后 12h和 2 4h为著 ,其中肌纤维蛋白降解率增幅明显 ;比目鱼肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率烧伤后均无显著变化 ;烧伤后不同时间点血浆糖皮质激素含量较正常对照组均显著增加 (P <0 0 1) ;伸趾长肌蛋白降解率与血浆糖皮质激素增加密切相关。说明烧伤后骨骼肌萎缩主要是由于肌纤维蛋白大量降解所致 ,快白肌比慢红肌对烧伤刺激敏感 ;糖皮质激素可能是导致骨骼肌蛋白降解增强的重要调节因子。     

髓过氧化物酶在严重烧伤后早期心肌损伤中的变化规律及意义

目的：观察心肌髓过氧化物酶（MPO）在严重烧伤后大鼠中的变化规律，并探讨其与烧伤早期心肌损伤的关系。方法：采用大鼠20% TBSAⅢ度烧伤模型，动物随机分为正常对照组及烧伤组。检测各组心肌组织MPO含量及血清CK-MB、心肌肌钙蛋白T（cTn-T）含量的动态变化。结果：烧伤后2小时心肌MPO及血清cTn-T水平明显增高，至伤后镐、72小时仍保持高水平，而血清CK-MB于伤后4小时方明显升高，至伤后24、48小时已表现出下降趋势，至72小时己接近正常水平。相关分析显示，心肌MPO水平升高与血清cTn-T水平呈正相关。结论：心肌组织MPO水平的显著增高与心肌损害的水平密切相关，表明中性粒细胞在心脏组织中的长时间聚集可能与大面积烧伤后早期的心脏损害有密切关系；同时利用心肌组织MPO水平的检测有助于研究预防烧伤后早期心肌损害的有效治疗方法。     

大鼠高原(3480m)严重烧伤后动脉血气动态分析

目的 :研究和证实高海拔地区严重烧伤后早期存在的血氧分压 (PO2 )显著增高的特珠现象 ;材料和方法 :在 3 480m高海拔地区成功复制 3 0 %Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,84只大鼠随机分为烧伤组和对照组 ,在伤后不同时相点观察动脉血气变化 ;结果 :烧伤组PO2 在伤后 3h至 2 4h均显著高于正常组 (P <0 .0 1 ) ,然后逐渐下降并接近正常 ;但伤后二氧化碳分压 (PCO2 )则立即下降 ,伤后 72h显著低于正常组 (P <0 .0 1 ) ;烧伤组和正常组的血氧饱和度则无显著差别 (P >0 .0 5) ;结论 :我们认为烧伤后PO2 和PCO2 下降均是由于过度换气所致 ,增高的PO2 并不意味着组织氧供充足 ,因pH值显著下降 (P <0 .0 1 ) ,提示存在混合型酸碱平衡失调 ,主要以代谢性酸中毒为主     

严重烧伤后大鼠胃粘膜细胞胞液中糖皮质激素受体变化对胃粘膜屏障功能的影响

目的　了解大鼠严重烧伤后胃粘膜细胞胞液中糖皮质激素受体变化对胃粘膜屏障功能的影响。方法　观察大鼠严重烧伤后不同时期胃粘膜细胞胞液糖皮质激素受体的动态变化及胃粘膜电位差变化。结果　严重烧伤后 3小时 ,大鼠胃粘膜组织皮质醇含量明显升高 ,1 2小时达高峰 ,而胃粘膜细胞胞浆内糖皮质激素受体的最大结合容量 (R0 )显著下降 ,平衡解离常数 (KD值 )明显增大 ,伤后 1 2小时、2 4小时胃粘膜电位差显著下降。结论　糖皮质激素受体水平降低可能是严重烧伤后急性胃粘膜屏障功能受损的重要原因之一。     

大鼠高原严重烧伤后早期肺损伤的病理变化及复方红景天参芪花粉对其的保护作用

目的：探讨高海拔地区大鼠严重烧伤后肺脏病理改变以及复方红景天参芪花粉对其影响；方法：180只大鼠随机分为烧伤试验组(红景天组)、烧伤对照组和正常组，试验组伤前用RACC4ml灌胃给药，对照组及正常组生理盐水4ml灌胃，伤后不同时相点剖腹取肾组织，10％福尔马林固定，石蜡包埋切片，HE染色；结果：伤后3小时，对照组肺泡即发生严重损伤，持续(6—24)小时加重，而实验组则损伤轻微；结论：大鼠高原严重烧伤后，早期肺损伤严重，复方红景天参芪花粉对肺损伤确有保护作用。     

Protein carbonyls are acutely elevated following single set anaerobic exercise in resistance trained men

The purpose of this investigation was to determine if a single set of strenuous squat exercise would result in an acute oxidative stress, as demonstrated previously by a single sprint. Thirteen resistance trained men performed one set of 15 repetitions of barbell squats using 70% of one repetition maximum and a 30 s maximal cycle sprint on two different occasions. The total work performed was calculated for each exercise bout. Heart rate, perceived exertion, blood lactate, protein carbonyls, 8-hydroxydeoxyguanosine, and malondialdehyde were measured before and within 1 min following exercise. No differences were noted between the squat and sprint tests for total work, heart rate or perceived exertion. An exercise test by time interaction was evident for blood lactate with values greater following sprinting compared to squatting (P = 0.0005). Postexercise protein carbonyls were not different between exercise tests but were elevated above rest (P = 0.04) by 111% and 74% following sprinting and squatting, respectively, while 8-hydroxydeoxyguanosine and malondialdehyde were relatively unaffected by either exercise test. These data indicate that a single bout of strenuous squatting and sprinting performed by resistance trained men results in elevated protein carbonyls, while having little impact on 8-hydroxydeoxyguanosine or malondialdehyde during the immediate postexercise period.     

悬吊对大白鼠骨骼肌蛋白质和核酸含量的影响

本实验以大白鼠躯体悬吊作为模拟微重力的动物模型,通过观察大白鼠骨髂肌蛋白质和核酸的含量变化研究低负荷/运动减退对骨骼肌的影响实验结果表明大白鼠悬吊14天后,后肢比目鱼肌和趾长伸肌都明显萎缩,尤以前者萎缩严重;萎缩的骨骼肌蛋白质相对含量和绝对含量降低,DNA和RNA 含量降低。本文对这些变化的机制进行了讨论。     

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响

目的 探讨醛糖还原酶抑制剂Sorbinil对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响。方法 采用腹腔内注射链脲菌素法制作糖尿病大鼠模型，将大鼠分为模型组、Sorbinil组、格列喹酮 苯那普利组和正常对照组。8周后处死大鼠，分离肾小球，分别测定各组肾小球细胞浆和细胞膜蛋白激酶C活性。结果 糠尿病模型组细胞浆蛋白激酶C活性显著降低，细胞膜蛋白激酶C活性显著升高。用两组西药治疗后，苯那普利 格列奎酮组无明显改善，而Sorbinil组可显著提高细胞浆蛋白激酶C活性、降低细胞膜蛋白激酶C活性。结论 Sorbinil可通过改善多元醇代谢而降低蛋白激酶C活性，同时，亦或存在其他途径如直接对蛋白激酶C的抑制作用等等。Sorbinil通过调节多元醇代谢等途径间接或直接降低蛋白激酶C活性，是其治疗糖尿病肾病的作用机理之一。     

Effect of ionizing radiation on liver protein oxidation and metabolic function in C57BL/6J mice

Abstract

Purpose: Protein oxidation in response to radiation results in DNA damage, endoplasmic reticulum stress/unfolded protein response, cell cycle arrest, cell death and senescence. The liver, a relatively radiosensitive organ, undergoes measurable alterations in metabolic functions following irradiation. Accordingly, we investigated radiation-induced changes in liver metabolism and alterations in protein oxidation.

Materials and methods: C57BL/6 mice were sham irradiated or exposed to 8.5 Gy ⁶⁰Co (0.6 Gy/min) total body irradiation. Metabolites and metabolic enzymes in the blood and liver tissue were analyzed. Two-dimensional gel electrophoresis and OxyBlot? were used to detect carbonylated proteins that were then identified by peptide mass fingerprinting.

Results: Analysis of serum metabolites revealed elevated glucose, bilirubin, lactate dehydrogenase (LDH), high-density lipoprotein, and aspartate aminotransferase within 24–72 h post irradiation. Liver tissue LDH and alkaline phosphatase activities were elevated 24–72 h post irradiation. OxyBlotting revealed that the hepatic proteome contains baseline protein carbonylation. Radiation exposure increased carbonylation of specific liver proteins including carbonic anhydrase 1, α-enolase, and regucalcin.

Conclusions: 8.5 Gy irradiation resulted in distinct metabolic alterations in hepatic functions. Coincident with these changes, radiation induced the carbonylation of specific liver enzymes. The oxidation of liver enzymes may underlie some radiation-induced alterations in hepatic function.     

无POU域八聚体结合蛋白基因的克隆及其在Hepa1-6细胞内的表达

目的构建小鼠无POU域八聚体结合蛋白(non-POU-domain-containing,octamer binding protein,NonO)真核表达载体并在小鼠Hepa 1-6肝癌细胞内表达,观察NonO胞内表达、定位及脂多糖(LPS)对其定位的影响。方法提取小鼠肝组织总RNA,RT-PCR扩增小鼠NonO基因的蛋白编码序列。采用基因重组技术将其亚克隆至pcDNA3-HA真核表达载体中,将该载体瞬时转染Hepa1-6细胞,通过细胞免疫荧光方法观察NonO的胞内表达及LPS对其定位的影响。结果酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;细胞免疫荧光可见NonO在Hepa 1-6细胞内表达、分布于细胞核,LPS刺激后NonO分布无明显变化。结论成功构建NonO真核表达载体,为研究NonO在基因表达调控中作用及其生物功能提供了重要载体。进一步证实NonO为定位于细胞核的核蛋白。     

蛋白激酶C抑制剂Ro 31—8220对Hep 3B细胞产生纤维蛋白原的抑制作用

目的研究蛋白激酶C抑制剂Ro 31-8220对纤维蛋白原的作用.方法辣根过氧化酶标记纤维蛋白原,以酶联免疫方法测定Hep 3B细胞上清中纤维蛋白原含量.结果 LPS诱导的巨噬细胞条件培养基能刺激Hep 3B细胞分泌纤维蛋白原,蛋白激酶C抑制剂Ro 31-8220(10～1 000nmol*L-1)有抑制作用.结论蛋白激酶C抑制剂Ro 31-8220可抑制纤维蛋白原的产生.     

桑拿脱水和低氧刺激后运动对白细胞热休克蛋白70表达及有氧能力的影响

目的:通过观察桑拿高温脱水和低氧恢复期运动时的白细胞热休克蛋白70(HSP70)、最大吸氧量(VO2max)、血乳酸(BLa)的变化,并与常温条件下相同运动负荷时相比较,探讨桑拿高温脱水和低氧刺激后恢复期运动对热休克蛋白表达和有氧能力的影响。方法:10名身体健康的体育系男性大学生,在三种不同环境下进行递增负荷运动:(1)桑拿前(常温条件,25℃,相对湿度65%);(2)桑拿后(进行桑拿浴之后,常温条件,25℃,相对湿度65%);(3)低氧后(低氧实施期之后,常温条件,25℃,相对湿度65%),分别测试递增负荷运动前安静时、运动后即刻、运动后3小时受试者白细胞HSP70表达、血液SOD活性和MDA含量及VO2max、血乳酸(BLa)和HR等生理机能指标。结果:(1)桑拿前安静时的HSP70(13701.87±5367.17)水平明显高于桑拿后(7517.57±1980.01,P<0.05)和低氧后(2850.79±2233.81,P<0.05);(2)桑拿后和低氧后运动后恢复期除MDA外,HSP70水平、SOD浓度低于桑拿前。(3)桑拿后和低氧后的VO2max及运动时间都较桑拿前略有增加。同时HRmax和BLa浓度有所下降,但无显著性差异(P>0.05)。以上结果表明,运动负荷可增加热休克蛋白70表达量,在桑拿后恢复期有可能具有“应激保护”作用。桑拿和低氧刺激后运动负荷的刺激,增加有氧能力,可能与热休克蛋白合成变化有关。     

Protein synthesis rate measured with l-[1-11C]tyrosine positron emission tomography correlates with mitotic activity and MIB-1 antibody-detected proliferation in human soft tissue sarcomas

Protein synthesis rate (PSR) can be assessed in vivo using positron emission tomography with l-[1-¹¹C]tyrosine (TYR-PET). Biological activity of soft tissue sarcomas (STS) can be measured in vitro by the mitotic rate and number of proliferating cells. In STS the grade of malignancy, in which the mitotic index plays a major role, is considered to be the major standard in predicting biological tumour behaviour. This study was designed to test the validity of TYR-PET in relation to different histopathological features. In 21 patients with untreated STS, the PSR was measured using TYR-PET. The number of mitoses was counted and tumours were graded according to the grading system of Coindre et al. (Cancer 1986; 58:306–309). Proliferative activity was assessed by immunohistological detection of the Ki-67 nuclear antigen using MIB-1 monoclonal antibody. To test the association between the PSR and these tumour parameters, a correlation analysis was performed. A significant (P<0.05) correlation was found between PSR and the Ki-67 proliferation index (R = 0.54), and between PSR and mitotic rate (R = 0.64). There was no correlation between PSR and tumour grade. The present study in malignant soft tissue tumours relates in vivo tumour metabolism as established with TYR-PET to tumour activity measured in vitro and indicates that the non-invasive method of TYR-PET can estimate the mitotic and proliferative activity in STS. Received 18 August and in revised form 24 November 1998     

食管癌相关血清小分子蛋白谱的初步研究

目的 分析食管鳞癌血浆蛋白表达谱改变,筛选恰当的蛋白分类芯片用于建立食管鳞癌血清标志诊断模型.方法 血浆蛋白经离子交换,按不同pH值范围预分离为6个组份,各组份分别在弱阳离子交换型和铜离子螯和型等两类蛋白芯片上分选与富集,经表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术分析食管鳞癌差异表达蛋白.分析5例食管鳞癌和2例性别、年龄匹配的对照血清,初步获得弱阳离子交换型和铜离子螯和型蛋白芯片表达图谱.结果 血浆蛋白经不同离子交换柱预分离和不同蛋白分类捕获芯片富集,在相对分子质量0～50 000范围内,弱阳离子交换型和铜离子螯和型蛋白芯片上检测到近百种差异蛋白峰,其中部分差异峰具有统计学意义(P＜0.05).结论 血浆蛋白经不同pH区段预分离和分类捕获后可降低高丰度蛋白干扰,提高负载疾病信息的低丰度蛋白/肽段显示度.弱阳离子交换型和铜离子螯和型蛋白芯片结合蛋白可呈现食管癌术前与术后,以及食管癌和健康对照者的差异表达谱.初步研究提示,食管癌外周血浆存在肿瘤候选标志分子(谱).     

辐射反应性A1蛋白质的分离纯化

本文撮道了用制备电泳和柱层析二种方法结合分离纯化放射病反应性增多的A₁蛋白质。方法简便,操作流程短,重复性娥经鉴定A₁蛋白质是一种未见文献报道的蛋白质。以此制备抗血清可用于放射病临床治疗的监测和放射病病理机制的研究。