肺癌的早期诊断一CT与p53、p16对比研究

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)的CT征象与p53、p16基因蛋白异常表达之间的相关性.方法应用免疫组化SABC法检测52例经手术病理证实的周围型非小细胞肺癌(NSCLC)石蜡包埋标本p53、p16基因蛋白表达,并与相应的CT征象作对比研究.结果(1)正常肺组织、癌旁肺组织和肺癌组织中,p53基因蛋白阳性表达率分别为0.0%、45.0%、63.5%;p16基因蛋白阳性表达率分别为85.7%、55.0%、45.0%.(2)CT显示NSCLC肿块轮廓出现深分叶征、棘状突起征,边缘出现短毛刺征组p53蛋白表达率高,p16蛋白表达率低.结论CT征象与p53、p16等分子生物学指标对比观察,有助于提高肺癌的早期诊断水平.     

肺癌的早期诊断—CT与p53、p16对比研究

目的　研究非小细胞肺癌 (NSCLC)的CT征象与 p5 3、p16基因蛋白异常表达之间的相关性。 方法　应用免疫组化SABC法检测 5 2例经手术病理证实的周围型非小细胞肺癌 (NSCLC)石蜡包埋标本 p5 3、p16基因蛋白表达 ,并与相应的CT征象作对比研究。结果　 (1)正常肺组织、癌旁肺组织和肺癌组织中 ,p5 3基因蛋白阳性表达率分别为 0 .0 %、45 .0 %、63 .5 % ;p16基因蛋白阳性表达率分别为 85 .7%、5 5 .0 %、45 .0 %。 (2 )CT显示NSCLC肿块轮廓出现深分叶征、棘状突起征 ,边缘出现短毛刺征组 p5 3蛋白表达率高 ,p16蛋白表达率低。结论　CT征象与p5 3、p16等分子生物学指标对比观察 ,有助于提高肺癌的早期诊断水平。     

自制组织芯片研究p16蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨p16基因蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及意义.方法 采用自制组织微列阵（组织芯片）和免疫组织化学SP法研究p16蛋白在非小细胞肺癌组织、正常肺组织中的基因表达情况.结果 p16蛋白在NSCLC中的阳性表达率为51.66%（31/60）,在正常肺组织中阳性表达率为80.00%（16/20）,P＜0.05.肺鳞癌p16的阳性表达率为31.03%（9/29）,肺腺癌阳性表达率为70.96%（22/31）,P＜0.05.结论 p16蛋白在非小细胞肺癌的发生与发展过程中发挥了重大作用.p16蛋白的表达与非小细胞肺癌组织的病理类型有关.     

肺癌p16、Rb基因mRNA和蛋白水平表达的定位观察

为研究p16和Rb基因在蛋白水平和mRNA水平的表达及其肺癌发生发展的关系,采用免疫组化和原位杂交的方法,对89例肺癌手术标本进行了p16和Rb基因表达的定位观察。发现p16基因蛋白的丢失主要发生于非小 细胞肺癌,Rb基因蛋白的丢失主要发生小于细胞肺癌。两种基因各自在蛋白水平和mRNA水平的表达基本相符。提示p16和Rb基因的表达与肺癌的组织学类型密切相关,有可能作为非小细胞肺癌与小细胞肺癌基因分型诊断的分子生物学指标之一;在翻译水平上也存在着引起基因失活的可能机制。     

MTS1/p16基因产物在非小细胞肺癌中的表达及其意义

为研究p16蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其与非小细胞肺癌发生发展的关系,应用SP法对52例非小细胞肺癌石蜡标本进行p16蛋白的检测。结果发现44例(84.6％)p16蛋白表达阳性,p16蛋白在良、恶性细胞中均有表达,肿瘤细胞中p16表达呈现异质性;各肿瘤类型中鳞癌和大细胞癌阳性率高于腺癌,但无显著差异,高分化腺癌阳性率高于低分化腺癌(户<0.05);伴淋巴结转移者阳性率低于非转移者(P<0.01),且p16蛋白表达阳性率与肿瘤大小相关。表明p16基因表达缺失参予了非小细胞肺癌的发生发展过程,且与肿瘤分化、转移有关。     

肺癌患者CDH13基因启动子甲基化状态研究

目的应用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测非小细胞肺癌（NSCLC）CDH13基因启动子甲基化情况。方法留取44例非小细胞肺癌患者手术标本及12例非肺癌患者正常肺组织,MSP分析CDH13基因启动子甲基化情况。结果 44例非小细胞肺癌中CDH13基因启动子甲基化阳性率为54.5%（24/44）,12例正常肺组织中未检测到此基因的甲基化（0/12）。CDH13基因甲基化与患者性别及吸烟与否无关;肿瘤分期越晚甲基化的发生率越高。结论原发性非小细胞肺癌中存在着较高比例的CDH13启动子甲基化,提示CDH13在非小细胞肺癌的发生中起着重要作用。     

大肠癌肿瘤组织中p16基因异常甲基化检测

采用甲基化特异PCR技术 (MSP法 )检测大肠癌患者肿瘤组织中p16基因启动子区异常甲基化改变情况 ,探讨其与大肠癌发生、发展和临床资料的关系。结果显示 ,13例标本 ( 40 .6% )呈p16甲基化阳性 ;DukesC、D期病人肿瘤组织中p16甲基化发生率 ( 63 % )明显高于DukesA、B期病人 ( 2 5 % ) ;在病理分期中 ,高、中分化癌中的p16甲基化阳性率( 3 0 % )低于低分化癌的阳性率 ( 10 0 % ) ;具淋巴结转移癌患者肿瘤组织中p16基因甲基化的阳性率( 63 % )高于淋巴结未转移的阳性率 ( 2 5 % )。研究表明 ,p16甲基化与大肠癌的发生发展和转移呈一定相关性 ,p16甲基化有可能作为大肠癌病人诊断、判断预后的候选标志物之一     

非小细胞肺癌MAGE—3基因的表达

为探讨以MAGE 3基因编码的肿瘤抗原作为靶点对非小细胞肺癌 (NSCLC)患者进行免疫治疗的可能性 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 3种人肺癌细胞系和 5 6例NSCLC标本及相邻正常肺组织标本MAGE 3mRNA的表达。结果显示 ,3种人肺癌细胞系均表达MAGE 3mRNA ;5 6例NSCLC标本中 ,30例表达MAGE 3mRNA ,其中鳞状细胞癌的表达率明显高于腺癌的表达率 (P <0 .0 1) ,而相邻正常肺组织均不表达MAGE 3mRNA。MAGE 3mRNA在NSCLC中呈高比例表达 ,提示该基因编码的肿瘤抗原可以作为对NSCLC患者进行免疫治疗的攻击靶点。     

LRP16基因在肺癌中的表达及其临床意义

目的研究肺癌组织中LRP16基因的蛋白表达水平及其临床病理意义。方法收集54例原发型肺癌患者手术切除的新鲜组织标本和部分临床病理资料,用Westernblot方法检测肿瘤组织及癌旁正常肺组织中LRP16蛋白的表达水平,并分析其与临床病理资料间的联系。以肿瘤组织LRP16蛋白的表达较癌旁正常肺组织高2倍为LRP16过表达的标准。结果54例肺癌标本中有15例LRP16过表达,过表达率约27.8%(15/54)。23例肺腺癌中有11例(47.8%)LRP16过表达,27例肺鳞癌中有4例(14.8%)LRP16过表达,二者比较差异显著(P<0.05)。在2例大细胞癌和2例小细胞癌中,LRP16均呈极低表达或未表达。肿瘤直径>3cm的10例仅2例(20.0%)LRP16过表达,直径=3cm的44例中有13例(29.5%)LRP16过表达,二者比较无显著性差异(P>0.05)。有肺门或(及)纵隔淋巴结转移的20例中有10例(50.0%)LRP16过表达,而无转移的34例中仅5例(14.7%)LRP16过表达,二者比较差异显著(P<0.05)。结论LRP16基因在肺腺癌组与鳞癌组、有淋巴结转移组与无淋巴结转移组表达均有较大差异,提示其不仅是一个肺癌相关基因,而且可能与肺癌的分子分期相关。     

非小细胞肺癌呼出气冷凝液中p16基因突变及表达分析

目的探讨在呼出气冷凝液(EBC)中检测p16基因突变对于非小细胞肺癌(NSCLC)诊断的可行性及临床意义。方法选取自2010年3月至2012年4月就诊于南通大学第二附属医院的58例NSCLC患者及同期于本院进行体检的健康体检者30例为研究对象。应用聚合酶链反应(PCR)扩增及基因测序方法检测两组研究对象EBC中p16基因1-2号外显子的变异情况。分析p16基因突变与肺癌患者临床病理特征的关系。结果 58例NSCLC患者EBC标本中,成功检测54例EBC标本,其中,8例发生突变,1号外显子突变3例,2号外显子突变5例,总突变率为14.8%(8/54)。健康体检者EBC中均未检测到p16基因突变。EBC中p16基因突变在性别、吸烟史、组织类型、分化程度、有无淋巴结转移等分组中比较,差异均无统计学意义(P>0.05);EBC中p16基因突变在不同肿瘤分期间比较,差异有统计学意义(P<0.05),提示p16基因突变率与肿瘤分期具有相关性。结论在NSCLC患者EBC中可以检测到p16基因突变。EBC中p16基因突变检测有可能为临床辅助诊断NSCLC提供一种新的途径。EBC中的p16基因可作为诊断NSCLC的分子生物学标志物之一。     

p16基因在恶性间皮瘤组织中的表达及其意义

目的 探讨恶性间皮瘤组织中p16的表达情况及其与组织学类型、临床分期及预后的关系.方法 采用免疫组化方法检测80例恶性间皮瘤组织中的p16基因的表达.结果 80例恶性间皮瘤组织中p16基因阳性表达率35%,阴性表达率为65%,差异有显著性意义(P＜0.05).p16基因的阳性表达随恶性间皮瘤临床分期升高而降低.p16基因阳性表达的恶性间皮瘤患者生存期明显大于阴性表达者(P＜0.05).上皮型与肉瘤样型的p16基因阳性表达差异有显著性意义(P＜0.05).结论 p16基因的表达与恶性间皮瘤的组织学类型有关,阴性表达是预后不良标志.     

细支气管肺泡癌中PCNA、p16和p27的表达及其临床意义

目的分析细支气管肺泡癌(BAC)标本中增殖细胞核抗原(PCNA)和肿瘤抑制因子p16和p27的表达及与临床病理特征、预后的关系,进而评价其作为判断BAC预后指标的可行性。方法检测68例手术切除的BAC患者石蜡包埋组织,并取同期24例相应癌旁正常肺组织作正常对照,采用免疫组织化学染色法检测以上标本中PCNA、p16及p27的表达情况。结果 BAC组织中PCNA表达水平显著高于正常肺组织(P<0.05)。BAC组织中p16、p27表达水平显著低于正常肺组织(P<0.05);PCNA高表达同BAC的组织学类型、淋巴结转移有相关性(P<0.05),而p16、p27的失表达同淋巴结转移有相关性(P<0.05)。结论联合检测BAC组织中PCNA、p16和p27的表达水平有助于预测患者预后。     

犬胆管金属支架诱导p16、p53基因扩增的实验研究

目的 探讨胆道金属支架在诱导抑癌基因扩增方面的价值.方法 健康成年实验犬24只,采用经皮经肝穿刺胆囊的方法于犬胆总管下段植入支架1枚,术后正常喂养平均半年,再次麻醉后活体开腹取支架覆盖段胆管壁与支架上段胆管壁组织,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测所取组织p16、p53、p15、Bcl-2及K-ras基因的表达情况,计算两个部位胆管壁目的 基因表达阳性率,采用X~2检验进行统计学分析.结果 共20只实验犬建模成功.支架覆盖段胆管壁p16、p53基因表达阳性率分别为80%(16/20)、45%(9/20),支架上段胆管壁p16、p53基因表达阳性率分别为15%(3/20)、0,以上差异具有统计学意义(X~2值分别为16.94、9.17,P值均＜0.05).支架覆盖段胆管壁p15、Bcl-2、K-ras基因表达阳性率分别为60%(12/20)、100%(20/20)、0,支架上段胆管壁p15、Bcl-2、K-ras基因表达阳性率分别为70%(14/20)、100%(20/20)、0,两个部位间差异均无统计学意义(P值均＞0.05).结论 胆管壁p16、p53的扩增加强与胆道金属支架的植入有一定的相关性,对于不存在胆道支架植入禁忌证的恶性梗阻性黄疸患者建议行胆道支架植入术治疗.     

腺病毒介导的p16和p53的联合应用对胆管癌细胞QBC939的生长抑制作用

为研究p16和p53基因的联合应用对胆管癌细胞的作用,将重组体腺病毒p16、p53、p16联合p53转移到人胆管癌细胞QBC939,对p16、p53基因的表达,细胞的生长抑制及机制进行了分析。RT－PCR显示在胆管癌QBC939细胞系中p16呈低表达,p53不表达,重组体腺病毒能介导p16和p53等外源基因在胆管癌QBC939细胞系中高效表达,两者联合应用能明显抑制QBC939细胞的生长和集落形成。流式细胞计数证实其能诱导,QBC939细胞发生明显半调并导致其发生G1期阻滞,本研究显示p16及p53基因通过诱导肿瘤细胞凋亡及G1期阻滞在肿瘤的基因治疗方面发挥作用,两者联合应用具有协同作用。     

p53,p16,PCNA蛋白在食管癌中的表达及其临床意义

目的探讨p53,p16,PCNA蛋白在食管癌中的表达及临床意义。方法用免疫组织化学染色SP法对62例食管癌标本进行p53,p16,PCNA蛋白测定。结果62例食管癌中,p53,PCNA蛋白阳性表达均为71.0%(44/62),p16缺失率48.4%(30/62)。p16缺失与肿瘤浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05、P<0.01)。而p53,PCNA蛋白同时表达56.5%(35/62),亦与肿瘤浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05、P<0.01)。结论食管癌p53,PCNA蛋白同时表达及p16缺失可视为危险预后因素。     

ras、p16、p53和幽门螺杆菌感染与胃癌发生关系的研究

采用聚合酶链反应－单链构象多肽性分析法（PCR－SSCP）及HP尿素酶快速检测法，随机对46例慢性浅表性胃炎、39例慢性萎缩性胃炎、39例胃溃疡、36例胃癌的胃粘膜活检标本进行了ras、p16、p53及HP检测，并对其在胃癌致癌机制中的相互关系进行研究。结果表明，①ras及p53在胃癌标本中的检出率明显高于萎缩性胃炎、胃溃疡及浅表性胃炎（P＜0．05）；②p16在胃癌标本中的检出率远远低于基本正常胃粘膜及其他胃良性病变（P＜0．05）；③HP在胃癌标本中的检出率明显高于萎缩性胃炎、胃溃疡及浅表性胃炎（P＜0．05）；④ras和p53阳性表达的各种胃良、恶性疾病中的HP阳性检出率均高于p16阳性表达的各种胃良、恶性疾病中的HP阳性检出率（P＜0．05）。提示ras、p53、p16和HP感染在胃癌致病机制中可能具有重要作用，并可能有相互协同作用。     

Combined p16 and p53 expression in cervical cancer of unknown primary and other prognostic parameters

Background and purpose

Cervical cancer of unknown primary (CUP) represents an uncommon and heterogeneous subentity of head and neck cancer. However, both optimal diagnostics and therapy remain unclear. An improved understanding of the underlying pathology is essential to enable future tailored therapies and optimized outcomes.

Materials and methods

We retrospectively analyzed 53 patients with head and neck CUP and 48 available cervical lymph node specimens. All patients have received radiotherapy between 2007 and 2015. Preradiotherapy involved lymph node specimens were analyzed for p16 and p53 immunoreactivity. The prognostic relevance of the combined p16 and p53 status and other clinical parameters were examined by univariate and multivariate analyses.

Results

Median patient age was 61.5 years and median irradiation dose to the involved nodal levels was 66?Gy. Of the 48 evaluated specimens, 13 (27%) were p16-positive and 31 (64.6%) p53-positive. After a median follow up of 32.9 months, patients with p16-negative and simultaneously p53-positive tumors showed a significantly inferior tumor-specific survival (TSS) compared to those with either p16+/p53?, p16+/p53+, or p16?/p53? (univariate: p = 0.055, multivariate: p = 0.038). Other factors with an adverse impact on TSS in the univariate analysis were smoking history (p = 0.032) and nodal stage (p = 0.038).

Conclusions

The combined p16- and p53-expression status in cervical metastases of CUP may represent a simple method for risk stratification. Further validation of these biomarkers in large prospective trials is essential to design rational trials for CUP treatment optimization.

     

p16蛋白在卵巢子宫内膜异位症中的表达及临床意义

目的探讨p16蛋白在卵巢子宫内膜异位症中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学的方法(S-P)检测p16蛋白在卵巢子宫内膜异位症及正常子宫内膜组织中的表达。结果 p16蛋白在卵巢子宫内膜异位症中的表达明显低于正常子宫内膜组织,差异有统计学意义(P<0.05)。在卵巢子宫内膜异位症中p16蛋白的表达与痛经、月经异常、不孕无明显关系,而与囊肿大小、异位内膜浸润深度及盆腔浸润情况关系密切,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p16蛋白与卵巢子宫内膜异位症的发生、发展关系密切。     

辐射诱导表达载体pEgr-p16的构建及其体外蛋白表达的研究

目的构建辐射诱导表达载体pEgr—p16并研究其体外稳定转染联合^60Co．γ射线照射对人宫颈癌HeLa细胞p16蛋白表达变化的影响。方法利用双酶切、粘端连接的方法构建了含有辐射诱导特性的早期生长反应因子Egr-1和p16的pEgr—p16的质粒载体，以脂质体介导的方法，将重组载体导入人HeLa细胞，采用免疫细胞化学和流式细胞术的方法检测照射转染后的HeLa细胞p16蛋白表达的变化。结果经全自动测序证明辐射诱导表达载体pEgr—p16构建正确；稳定转染可见有明显的p16表达增强；5Gy以内p16蛋白表达呈剂量依赖性的增加，在2Gy照射后2hp16蛋白表达水平即开始增高，4h达到最高，12h趋于正常水平。结论本研究成功构建了辐射诱导表达载体pEgr-p16，在HeLa细胞中蛋白表达明显增强。