黄芪多糖保护去卵巢大鼠成骨细胞功能活性的机制研究

目的　探讨黄芪多糖对去卵巢大鼠成骨细胞功能活性和核因子E2相关因子（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）/醌氧化还原酶1（NQO1）通路的影响。方法　双侧卵巢切除法构建骨质疏松大鼠模型并分为模型组、雌二醇（0.1 mg/kg）组、黄芪多糖组（20 mg/kg）、黄芪多糖（20 mg/kg）+全反式维甲酸（ARTA,7 mg/kg）组,另选健康大鼠作为假手术组（生理盐水灌胃）,每组15只,干预8周。采用X线小动物骨密度仪检测大鼠胫骨骨密度、骨矿量,三点弯曲法测定生物力学性质;分离各组大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）并诱导成骨细胞分化,MTT法检测成骨细胞活性,Bradford法检测碱性磷酸酶（ALP）活性,邻甲酚酞络合酮法测定钙沉积量,酶联免疫吸附试验检测骨成型蛋白2（BMP2）、骨钙素（BGP）、骨保护素（OPG）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,Western blot检测Nrf2、HO-1和NQO1表达。结果　与假手术组相比,模型组骨密度、骨矿量、最大载量、断裂能、成骨细胞活性、ALP活性、钙沉积量和BMP2、BGP、OPG、SOD、Nrf2、HO-1、NQO1水平降低,MDA水平升高（P＜0.05）;与模型组比较,雌二醇组、黄芪多糖组大鼠骨密度、骨矿量、最大载量、断裂能、成骨细胞活性、ALP活性、钙沉积量及BMP2、BGP、OPG、SOD、Nrf2、HO-1、NQO1水平均升高,MDA水平降低（P＜0.05）,而与黄芪多糖组比较,黄芪多糖+ARTA组大鼠上述指标变化趋势相反（P＜0.05）。结论　黄芪多糖可改善去卵巢大鼠成骨细胞功能,机制可能与激活Nrf2/HO-1/NQO1通路有关。     

加兰他敏介导Nrf2/HO-1信号通路对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的 探讨加兰他敏介导核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）损伤的影响及其机制。方法 48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、加兰他敏组、加兰他敏+ML385组,每组12只。假手术组大鼠进行手术操作但不烙闭巩膜静脉,其余各组大鼠采用巩膜上静脉烙闭法建立慢性高眼压大鼠模型。加兰他敏组大鼠ip 4 mg/kg加兰他敏溶液;加兰他敏+ML385组大鼠ip 4 mg/kg加兰他敏溶液和30 mg/kg ML385。采用便携式动物眼压计测定眼压;苏木精–伊红（HE）染色观察视网膜组织形态及RGCs数量;TUNEL染色检测RGCs凋亡情况;试剂盒法检测视网膜组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）水平;Western blotting法检测视网膜组织中Nrf2、HO-1蛋白表达。结果 与模型组相比,加兰他敏组大鼠眼压降低,视网膜组织病理损伤得到改善,RGCs数量增多,RGCs凋亡率降低,视网膜组织中SOD、CAT活性以及Nrf2、HO-1蛋白表达水平均升高,MDA含量降低（P<0.05）...     

巴曲酶对缺血性眩晕大鼠及其脑组织Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的探讨巴曲酶对缺血性眩晕大鼠眩晕症状、抗氧化指标、炎症因子、血液流变学指标及脑组织NF-E2-相关因子2/血红素氧合酶1(Nrf2/HO-1)信号通路的影响。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、巴曲酶组(尾iv 1 BU/kg)、NRF2抑制剂(ML385)组(ip 30 mg/kg)、巴曲酶+ML385组(尾iv 1 BU/kg巴曲酶后ip 30 mg/kg ML385),每组8只,除假手术组外,其余各组大鼠均通过结扎右侧颈动脉及右侧锁骨下动脉构建缺血性眩晕大鼠模型,造模成功后按照各组给药方式进行给药处理,持续1周。全自动血液流变分析仪检测各组大鼠血液流变学指标,眩晕实验测定各组大鼠眩晕症状的变化程度;苏木精-伊红染色(HE)检测大鼠脑组织病理变化;酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测大鼠血清一氧化氮(NO)、内毒素(ET),脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;蛋白免疫印迹(WB)法检测大鼠脑组织中Nrf2/HO-1通路蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠跳台逃避潜伏期显著延长,眩晕症状、脑组织神经细胞受损严重,血液流变学指标,血清NO和ET水平,脑组织中TNF-α、IL-1β、MDA水平显著升高,SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达显著降低。与模型组相比,巴曲酶组大鼠眩晕症状、脑组织神经细胞受损得到缓解,血液流变学指标、血清NO和ET水平、脑组织中TNF-α、IL-1β、MDA水平显著降低,脑组织SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高;ML385组大鼠眩晕症状及各项指标与模型组变化趋势相似且更严重;与巴曲酶组相比,巴曲酶+ML385组大鼠眩晕症状、脑组织神经细胞受损严重,血液流变学指标,血清NO和ET水平,脑组织中TNF-α、IL-1β、MDA水平显著升高,SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达显著降低。结论巴曲酶可能通过改善血液流变学、提高抗氧化能力、抑制炎症因子分泌及启动Nrf2/HO-1通路发挥对缺血性眩晕的保护作用。     

番石榴叶总黄酮对糖尿病大鼠肾脏Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的 探讨番石榴叶总黄酮（TFPGL）对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及机制探讨。方法 雄性SD大 鼠24只,按随机数字表法分成对照组、糖尿病组、TFPGL治疗组,每组8只,后2组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素 （55 mg/kg）诱导糖尿病模型,TFPGL治疗组加用200 mg/kg TFPGL灌胃。12周后收集血、尿及肾组织,检测血糖（BS）、 血尿素氮（BUN）、尿蛋白/尿肌酐比值（ACR）及血清肌酐（SCr）的变化,HE染色检测肾脏病理改变,免疫荧光、免疫组 织化学染色及Western blot检测肾脏核因子NF-E2相关因子2（Nrf2）、血红素氧合酶-1（HO-1）表达。结果 与对照 组相比,糖尿病组BS、BUN、ACR及SCr明显升高,Nrf2表达增加,HO-1表达下降（均P＜0.05）;而给予TFPGL治疗 后,BS、BUN、ACR及SCr较糖尿病组明显降低,Nrf2、HO-1表达明显增加（均P＜0.05）。结论 TFPGL对糖尿病大鼠 肾脏病变具有一定的治疗效果,其机制可能与降低血糖和激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨虾青素对创伤性脑损伤模型大鼠氧化应激和炎症反应的影响

目的 探讨虾青素对创伤性脑损伤（TBI）大鼠氧化应激和炎症反应的影响。方法 将雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、虾青素低剂量组（20 mg/kg）、虾青素高剂量组（40 mg/kg）、虾青素+ML385组[虾青素40 mg/kg+核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)抑制剂ML385 30 mg/kg],每组14只。除假手术组外,其余各组大鼠按改良的Feeney自由落体撞击法复制TBI大鼠模型。各药物组大鼠灌胃或腹腔注射相应药液,假手术组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水。分别于药物干预后第1、3、7天对各组大鼠的神经功能进行评分;于药物干预后第7天,观察各组大鼠脑组织形态学变化并进行炎症浸润评分,观察其脑组织神经细胞超微结构,检测脑组织中氧化应激指标[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）]、炎症反应指标[肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、诱导型一氧化氮合酶]含量和Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白及mRNA的表达情况。结果 与假手术组比较...     

木犀草素对脊髓损伤大鼠Nrf2/HO-1通路的影响

摘要：目的:观察木犀草素对脊髓损伤大鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、木犀草素低、中、高剂量组和阳性对照组,除假手术组外,其余各组均采用改良的Allen重物打击法制备大鼠脊髓损伤（SCI）模型,建模成功后,分别给予生理盐水、10 mg·kg-1木犀草素、20 mg·kg-1木犀草素、40 mg·kg-1木犀草素、30 mg·kg-1甲泼尼龙2 ml灌胃处理,q12 h,连续7d。采用BBB评分法检测大鼠下肢运动功能恢复情况;苏木素-伊红（HE）染色观察脊髓损伤区神经元形态变化情况;末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）测定大鼠脊髓损伤组织细胞凋亡情况;酶联免疫吸附（ELISA）法检测脊髓损伤组织中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性;蛋白免疫印迹分析法检测核转录因子红系2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达。结果:假手术组尼氏小体多且均匀分布,神经元结构清晰;模型组神经元胞体固缩,形态各异,尼氏小体数量明显减少;木犀草素各剂量组及阳性对照组尼氏小体数量增多,神经元损伤较模型组有所好转。与假手术组相比,模型组TUNEL阳性细胞数、MDA浓度、Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,BBB评分、SOD活性显著降低（P<0.05）;与模型组相比,木犀草素低、中、高剂量组TUNEL阳性细胞数、MDA浓度呈剂量依赖性降低（P<0.05）,BBB评分、Nrf2、HO-1蛋白表达水平和SOD活性呈剂量依赖性升高（P<0.05）;与木犀草素低、中剂量组相比,阳性对照组术后3 d和术后7 d的BBB评分、SOD活性、Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高,TUNEL阳性细胞数、MDA浓度降低（P<0.05）;与木犀草素高剂量组相比,阳性对照组术后3 d的BBB评分、Nrf2蛋白表达水平降低,术后7 d的BBB评分、HO-1蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论:木犀草素能够改善大鼠脊髓损伤,可能与促进大鼠脊髓组织Nrf2/HO-1通路活化,降低氧化应激相关。     

金丝桃苷调控Nrf2/HO-1/NQO1通路减轻大鼠肾缺血再灌注损伤

目的 探究金丝桃苷对大鼠肾缺血再灌注(IR)损伤及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的调节。方法 以结扎双肾动脉60 min再恢复灌注120 min构建肾IR大鼠模型,将40只SD大鼠随机均分为对照组,模型组,金丝桃苷12.5、25、50 mg·kg^-1组,留取大鼠血液和肾脏组织标本,检测24 h蛋白尿、血肌酐及尿素氮、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,HE染色观察肾脏组织病变,免疫组化法检测caspase-3表达,qRT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL)-6、IL-10 mRNA表达,Western blot法检测肾组织中Bcl-2、Bax、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达。另取32只大鼠随机均分为对照组、模型组、金丝桃苷50 mg·kg^-1组和金丝桃苷+ML385(30 mg·kg^-1)组,进行上述检测。结果与模型组比较,金丝桃苷25、50 mg·kg^-1组24 h蛋白尿、血肌酐、尿素...     

核因子-κB抑制剂联合核因子E2相关因子2抑制剂对人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用机制研究

目的探究核因子κB（NF-κB）抑制剂（BAY11-7082）联合核因子E2相关因子2（Nrf2）抑制剂（ML385）对人结肠癌细胞HCT116的作用机制。方法体外培养人结肠癌细胞HCT116,将细胞分为4组:空白对照组、NF-κB抑制剂组、Nrf2抑制剂和联合组。空白对照组以RPMI-1640培养基进行培养,NF-κB抑制剂组以10μmol·L^-1 BAY 11-7082干预,Nrf2抑制剂组以5μmol·L^-1 ML385干预,联合组以10μmol·L^-1 BAY 11-7082+5μmol·L^-1 ML385干预,干预时间为24 h。MTT法检测人结肠癌细胞HCT116增殖抑制率,以流式细胞术和Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡状况,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白及Nrf2、NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果 ML385、BAY 11-7082均能显著抑制人结肠癌细胞HCT116增殖（均P<0.05）;干预24 h,空白对照组、Nrf2抑制剂组、NF-κB抑制剂组和联合组的细...     

藏药三果汤调节Nrf2/HO-1信号通路干预高脂血症大鼠的作用机制研究

目的：基于Nrf2/HO-1信号通路探讨藏药三果汤对高脂血症大鼠保护作用及相关作用机制。方法：雄性SD大鼠48只,随机分为6组,即正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组（3.5 mg/kg）,藏药三果汤低、中、高剂量组（0.43 g/kg、0.86 g/kg、1.72 g/kg）,每组8只。正常组给予基础饲料喂养,其余各组给予H00016高脂饲料喂养,制备高脂血症大鼠模型,造模的同时,各给药组每天一次给予相应药物灌胃,正常对照组、模型对照组给予等体积的生理盐水（1次/d）,连续灌胃6周。实验期间每周固定时间称取各组大鼠体重一次,6周后试剂盒检测血清中血脂（TC、TG、LDL与HDL）及氧化指标（MAD、SOD与GSH）的水平。Western Blot法测定肝组织中Nrf2、HO-1、Keap1、NQO1蛋白表达,采用person相关性分析分析血脂与氧化指标之间的相关性。结果：与正常对照组比较,模型对照组的体重明显增加,血清中的TC、TG、LDL、MDA含量明显升高,而血清中HDL含量明显减低,SOD、GSH活力明显减低（P<0.05或P<0.01）;与模型对照组比较,各给药组的体重减轻,血清中的TC、TG、LDL、MDA含量明显减低,血清中的HDL含量明显升高,SOD、GSH活力明显升高（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较,模型对照组Keap1蛋白水平表达明显上调,Nrf2、HO-1与NQO1蛋白水平表达明显下调（P<0.05或P<0.01）,与模型对照组比较,三果汤低、高剂量肝组织中的Keap1蛋白水平表达明显下调,Nrf2、HO-1与NQO1蛋白水平表达明显上调（P<0.05或P<0.01）。相关性分析可见TG与SOD、HO-1及NQO1呈负相关,与Keap1呈正相关,TC与SOD、HO-1、GSH及Nrf2呈负相关,与Keap1及MDA呈正相关。结论：藏药三果汤可改善高脂血症大鼠体重及血脂水平,其机制可能与调节Nrf2/HO-1信号通路,改善氧化应激有关。     

BMAL1对H2O2诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制探讨

目的 探讨节律基因BMAL1对过氧化氢（H2O2）诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制。方法 构建 BMAL1稳定过表达的H9C2细胞系后,实验分为2个部分。（1）实验1。对照组、H2O2组（0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）、 BMAL1 过表达（BMAL1-OE）组（BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞）、BMAL1 过表达+H2O2（BMAL1-OE+H2O2）组 （0.2 mmol/L的H2O2处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h）。（2）实验2。H2O2组、BMAL1-OE+H2O2组、BMAL1过表 达+抑制 NRF2+H2O2（BMAL1-OE+ML385+H2O2）组（NRF2 抑制剂 2 μmol/L 的 ML385 预处理 BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞 24 h,再用 0.2 mmol/L 的 H2O2处理 24 h）、BMAL1 过表达+抑制 HO-1+H2O2（BMAL1-OE+Znpp+H2O2）组 （HO-1抑制剂5 μmol/L的Znpp预处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h,再用0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）。CCK-8 法检测细胞活力,羟胺法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性、TBA 法检测丙二醛（MDA）含量,Western blot 法检测 BMAL1、核因子 E2 相关因子 2（NRF2）和血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达水平。结果 （1）与 Control 组相比, BMAL1-OE组BMAL1 mRNA表达水平升高,H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性下降、MDA含量增加,BMAL1、 NRF2和HO-1蛋白相对表达水平降低（P＜0.05）;与H2O2组相比,BMAL1-OE+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活 性增加,MDA 含量减少,而 BMAL1、NRF2 和 HO-1 蛋白相对表达水平升高（P＜0.05）;（2）与 BMAL1-OE+H2O2组相 比,BMAL1-OE+ML385+H2O2组和BMAL1-OE+Znpp+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性降低,MDA含量增加 （P＜0.05）。结论 BMAL1可能通过上调NRF2/HO-1信号轴,减轻H2O2诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤。     

外源性硫化氢通过Nrf2/ARE/HO-1通路对精神分裂症大鼠认知功能及肠道屏障功能的影响 #br#

目的 探讨外源性硫化氢（H2S）通过核因子E2相关因子2（Nrf2）/抗氧化反应元件（ARE）/血红素氧化酶1 （HO-1）通路对精神分裂症大鼠认知功能及肠道屏障功能的影响。方法 40只SD大鼠按照随机数字表法分为对照 组、模型组、H2S干预组（腹腔注射10 mg/kg的H2S供体GYY4137）、Nrf2抑制剂组（腹腔注射10 mg/kg的Nrf2抑制剂 ATRA）、H2S+Nrf2抑制剂组（腹腔注射GYY4137和ATRA）,每组8只。除对照组外,其余各组通过腹腔注射0.2 mg/kg 的MK-801构建精神分裂症大鼠模型,模型构建成功后按照各组给药方式进行干预,模型组和对照组以生理盐水替 代,连续干预7 d。Morris水迷宫实验测定大鼠的认知功能;HE染色观察大鼠海马组织及肠组织病理学变化;TUNEL 检测大鼠肠黏膜细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒测定大鼠血浆中H2S、D-乳酸含量及肠组织超氧 化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6水平;Western blot检测大鼠肠组织凋 亡、Nrf2/ARE/HO-1通路相关蛋白表达情况。结果 与对照组相比,模型组大鼠海马组织、肠组织损伤加重,逃避潜 伏期、血浆D-乳酸、肠黏膜细胞凋亡率、肠组织Caspase-3、Bax蛋白、MDA、TNF-α、IL-6、Nrf2、HO-1蛋白水平升高 （P＜0.05）,穿台次数、血浆H2S水平、小肠绒毛高度、隐窝深度、肠组织Bcl-2蛋白、SOD水平降低（P＜0.05）;与模型 组相比,H2S干预组大鼠海马组织、肠组织损伤减弱,逃避潜伏期、血浆D-乳酸、肠黏膜细胞凋亡率、肠组织Caspase- 3、Bax蛋白、MDA、TNF-α、IL-6水平降低（P＜0.05）,穿台次数、血浆H2S水平、小肠绒毛高度、隐窝深度、肠组织Bcl-2 蛋白、Nrf2、HO-1、SOD水平升高（P＜0.05）;Nrf2抑制剂可部分逆转H2S对模型大鼠认知功能、肠道屏障、海马组织的 有益作用。结论 外源性H2S可明显改善精神分裂症大鼠的认知功能和肠道屏障功能,可能与激活Nrf2/ARE/HO-1 通路有关。     

褪黑素对帕金森病大鼠Nrf2/HO-1通路及小胶质细胞活化的影响

目的 探讨褪黑素对帕金森病大鼠转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）的调控作用及其对小胶质细胞活化的影响。方法 取SD大鼠72只,按照随机数字表法分为对照组、模型组、褪黑素（5 mg/kg）组、Nrf2抑制剂全反式维甲酸（ATRA,7 mg/kg）组、Nrf2抑制剂阴性对照（Nrf2-NC）（植物油,10 mL/kg）组、褪黑素＋ATRA（5 mg/kg＋7 mg/kg）组,每组12只。除对照组外,其余各组大鼠通过脑黑质区内注射6-羟多巴胺（6-OHDA）建立帕金森病模型。造模成功后各组开始给药,模型组和对照组ip等量生理盐水,各组连续给药8周,2次/d。末次给药后对大鼠进行行为学评分;免疫组化法检测黑质部多巴胺能神经元及小胶质细胞活化阳性染色细胞数目;免疫荧光共定位检测Nrf2、活化小胶质细胞（IBA1标记）重合表达的细胞数目;酶联免疫吸附法（ELISA）检测黑质部代谢产物α-突触核蛋白（α-Syn）和β淀粉样蛋白（Aβ）。采用Western blotting检测黑质部Nrf2、HO-1、肿瘤坏死因子（TNF-α）、环氧化酶2（COX-2）、小胶质细胞活化特异性标记物（OX-42）蛋白相对表达水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠出现单侧或双侧后肢部分瘫痪及行走、进食困难现象,行为学评分显著升高（P<0.05）。与模型组相比,褪黑素组大鼠出现行走时转圈,很少有瘫痪及行走困难症状,且行为评分降低（P<0.05）。ATRA组大鼠单侧或双侧后肢部分瘫痪大鼠例数增多,行为学评分最高（P<0.05）。与对照组相比,模型组大鼠黑质区Nrf2与IBA1重合表达细胞数目、小胶质细胞活化数目、α-Syn和Aβ水平及HO-1、OX-42、TNF-α、COX-2水平和细胞核中Nrf2表达水平升高（P<0.05）,多巴胺能神经元数目减少。与模型组相比,褪黑素组大鼠黑质Nrf2与IBA1重合表达细胞数目、多巴胺能神经元阳性染色数目、HO-1及细胞核中Nrf2表达升高（P<0.05）,小胶质细胞活化数目、α-Syn及Aβ水平、TNF-α、COX-2、OX-42表达降低（P<0.05）;ATRA组黑质区Nrf2与IBA1重合表达细胞数目、多巴胺能神经元数目、HO-1水平及细胞核中Nrf2水平降低（P<0.05）,小胶质细胞活化数目、α-Syn和Aβ水平、TNF-α、COX-2、OX-42表达水平进一步升高（P<0.05）。褪黑素＋ATRA组大鼠上述指标变化与褪黑素组相反（P<0.05）。褪黑素＋ATRA组及Nrf2-NC组上述指标与模型组相比差异无统计学意义。结论 褪黑素可能通过激活Nrf2/HO-1通路,抑制炎症反应及小胶质细胞活化,减少帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元丢失。     

基于核因子NF-E2相关因子/血红素氧合酶-1信号通路研究丁苯酞对糖尿病脑小血管病大鼠的作用机制

目的:通过核因子NF-E2相关因子(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路研究丁苯酞治疗糖尿病脑小血管病大鼠的作用机制。方法:将建模成功的糖尿病脑小血管病大鼠随机分为丁苯酞治疗组和模型组，行水迷宫实验，取材后石蜡切片染色、脱水封片，显微镜观察大鼠大脑皮质的组织学结构及该区域神经元细胞的组织病理学改变；应用Western blot法检测脑组织Nrf2/HO-1信号通路中Nrf2和HO-1蛋白表达。结果:水迷宫实验d 1～d 4,与模型组相比，丁苯酞治疗组大鼠定位航行实验逃避潜伏期逐渐缩短。脑组织镜下观察，与模型组相比，丁苯酞治疗组大鼠脑组织细胞排列规则、细胞核饱满圆润、固缩现象减少。Western blot法检测发现，与模型组相比，丁苯酞治疗组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1蛋白表达增高。结论:丁苯酞治疗组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1增加，表明丁苯酞可能通过上调抗氧化应激蛋白的表达发挥脑保护作用。     

芒柄花素对脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症反应的抑制作用

目的 基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路，探讨芒柄花素对脂多糖（LPS）诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症反应的抑制作用。方法 体外培养肺癌人肺泡基底上皮细胞A549，分为对照组（不干预）、模型组（1μg/mL LPS）、芒柄花素不同浓度组（1μg/mL LPS+6.25、12.5、25、50μmol/L芒柄花素），检测各组细胞培养液中炎症因子（白细胞介素8、肿瘤坏死因子α）水平和细胞活力。另取A549细胞分为对照组、模型组（1μg/mL LPS）、LPS+25组（1μg/mL LPS+25μmol/L芒柄花素）、抑制剂组（1μg/mL LPS+20μmol/L LY294002）、芒柄花素+抑制剂组（1μg/mL LPS+25μmol/L芒柄花素+20μmol/L LY294002）和芒柄花素+激活剂组（1μg/mL LPS+25μmol/L芒柄花素+10μmol/L SC79），检测各组细胞炎症因子分泌水平和mRNA表达水平、细胞凋亡情况和PI3K/Akt信号通路关键蛋白表达情况。结果 与模型组比较，25μmol/L的芒柄花素能显著降低细胞培养液中炎症因子水平，...     

Nrf2-ARE信号通路在左乙拉西坦抗癫痫中的作用

目的探讨Nrf2-ARE信号通路在左乙拉西坦抗癫痫中的作用,以及应用左乙拉西坦对认知功能的影响。方法成年♂SD大鼠36只,250~300 g,随机分为生理盐水对照(control)组、戊四唑(1,5-pentamethylene-1H-tetrazole,PTZ)癫痫模型组、左乙拉西坦(levetiracetam,LEV)对照组以及左乙拉西坦治疗组,每组9只。以Morris水迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力;用免疫印迹法测定海马组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量。结果与癫痫模型组相比,给予左乙拉西坦治疗的癫痫大鼠在Morris水迷宫测试中潜伏期明显缩短(P<0.05),海马Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达均明显增高(P<0.01)。结论左乙拉西坦能够改善癫痫大鼠的认知功能,其机制可能通过Nrf2-ARE通路,使HO-1、NQO1蛋白表达增多,起到抗癫痫的作用。     

褪黑素激活Nrf2和HO-1对锰诱导纹状体氧化应激的影响

目的探讨Nrf2和HO-1在锰所致纹状体氧化应激中的作用及褪黑素(MT)对其的影响。方法小鼠82只,均分为6组,分别为对照组、低MnCl2组、中MnCl2组、高MnCl2组、MT对照组和MT+高MnCl2组。第5、6组提前皮下注射(sc)给予5 mg/kg MT,2 h后,第2、3、4和6组分别腹腔注射给予12.5、25、50和50 mg/kg MnCl2,连续2周。用流式细胞仪测定细胞内ROS,比色法检测GSH和MDA含量,免疫组化法检测Nrf2和HO-1表达,Western blotting检测Nrf2和HO-1的蛋白水平。结果与对照组相比,在各MnCl2组中ROS含量、MDA含量、Nrf2和HO-1的阳性表达及其蛋白水平均增加,GSH含量下降。而MT对照组中仅Nrf2和HO-1表达及蛋白水平均明显增加。与高MnCl2组相比,在MT+高MnCl2组ROS和MDA含量均明显下降,GSH含量、Nrf2和HO-1阳性表达及蛋白水平明显增加。结论褪黑素可拮抗锰所致的小鼠纹状体氧化应激,其机制可能与Nrf2和HO-1有关。     

富马酸二甲酯调控Nrf2-GPX4介导的铁死亡途径对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用研究

目的 基于核因子E2相关因子2(Nrf2)-谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)介导的铁死亡途径探讨富马酸二甲酯（DMF）对心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的保护机制。方法 将72只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、I/R组、Ferrostatin-1组（Fer-1组）、DMF低剂量组（DMF-L组,25 mg/kg）、DMF高剂量组（DMF-H组,50 mg/kg）、DMF+ML385组（50 mg/kg DMF+30 mg/kg ML385）,每组12只,给予相应的药物干预,1次/d,连续7 d;同时结扎左冠状动脉前降支建立心肌I/R大鼠模型。再灌注12 h后,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌钙蛋白I(c TnI)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平;苏木精-伊红（HE）染色观察心肌组织病理学变化;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;DHE荧光染色法检测心肌组织活性氧（ROS）水平;生化法检测心肌组织匀浆中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;比色法检测心肌组织Fe2+含量;Western blot检测心肌组织Nrf2、...     

咪达唑仑对低氧/复氧诱导的HK-2细胞凋亡及Nrf2/HO-1通路的影响

摘要：目的:探讨咪达唑仑对低氧/复氧诱导HK-2细胞凋亡的作用,及对核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶-1（HO-1）通路的影响。方法:HK-2细胞分为正常对照组、低氧/复氧组、不同浓度(2,4,8μmol·L-1)咪达唑仑组,CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,试剂盒检测细胞活性氧簇（ROS）和丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性,蛋白质免疫印迹技术（WB）检测HK-2细胞Nrf2和HO-1表达水平。结果:相较于正常对照组,低氧/复氧组细胞活性及SOD活性明显降低（P<0.05）,细胞凋亡率、ROS和MDA含量明显升高（P<0.05）。相较于低氧/复氧组,咪达唑仑各浓度组细胞活性、SOD活性及Nrf2和HO-1表达明显升高（P<0.05）,细胞凋亡率、ROS和MDA含量明显降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性。结论:咪达唑仑可促进Nrf2/HO-1信号通路,提高细胞抗氧化能力,抑制低氧/复氧诱导的HK-2细胞凋亡。     

灯盏花素对心肌缺血再灌注损伤大鼠的心肌保护作用

目的 观察灯盏花素对心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI）大鼠的心肌保护作用,并探讨其可能的机制。方法 将60只SD大鼠随机分为健康组、模型组、灯盏花素低剂量和灯盏花素高剂量组,各15只;灯盏花素低剂量、灯盏花素高剂量组大鼠腹腔注射灯盏花素（50、100 mg·kg-1）;健康组、模型组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。每日1次,干预5d。模型组、灯盏花素低剂量组、灯盏花素高剂量组最终均纳入10只大鼠。检测心电图指标;2,3,5-氯化三苯基四氮（2,3,5-triphenyltetrazolium chlorid,TTC）染色检测心肌梗死面积;检测血清心肌损伤指标;检测血清氧化应激指标;检测血清炎性因子水平;蛋白质印迹法（Western blotting）检测心肌组织白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,灯盏花素低剂量组大鼠室颤（ventricular fibrillation,VF）和室性心动过速（ve...     

基于Nrf2/HO-1信号通路的中药有效成分缓解肝损伤研究进展

近年研究已证实,氧化应激是造成肝损伤的重要因素,研究发现核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）可以通过调控氧化应激以缓解肝损伤。中药单体或中药复方可以通过调控该信号通路减少氧化应激、铁死亡、炎症和细胞焦亡的发生以缓解肝损伤。对中药中的黄酮类、多糖、酚酸、甾体类等有效成分通过 Nrf2/HO-1信号通路在氧化应激与肝损伤之间的相互作用进行综述,对于寻求靶向 Nrf2/HO-1信号通路发挥缓解肝损伤作用的中药提供依据,同时为中药治疗肝损伤作用机制的深入研究提供参考。