半乳糖凝集素-1预处理对机械通气相关性肺损伤小鼠的影响

目的 探讨半乳糖凝集素-1(Galectin-1)预处理对机械通气相关性肺损伤(VILI)小鼠的影响。方法 选择清洁级健康雄性C57BL/6小鼠30只,6～8周龄,体重22～30 g。采用随机数字表法将小鼠分为三组：对照组(C组)、VILI组(V组)和Galectin-1+VILI组(G组),每组10只。C组气管插管后保持自主呼吸4 h, V组和G组气管插管后机械通气4 h。气管插管前1 h C组和V组腹腔注射生理盐水0.75 ml, G组腹腔注射Galectin-1 3μg。于气管插管前即刻、自主呼吸或机械通气结束时采集动脉血检测PaO₂,后处死小鼠,收集肺泡支气管灌洗液(BALF),采用ELISA法检测BALF中IL-1β和IL-18浓度。取肺组织测定湿/干重比(W/D),采用qRT-PCR法检测肺组织GSDMD、caspase-1和caspase-11 mRNA表达量,Western blot法检测肺组织GSDMD、caspase-1和caspase-11蛋白含量,HE染色法观察病理改变并行肺损伤评分。结果 与C组比较,V组和G组机械通气结束时PaO     

GSK484对小鼠呼吸机相关性肺损伤及中性粒细胞胞外诱捕网的影响

目的评价GSK484对小鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)及中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的影响。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠48只, 5～6周龄, 体质量15～20 g, 采用随机数字表法将小鼠分为4组(n=12):自主呼吸组(S组)、自主呼吸+GSK484干预组(SG组)、VILI组(V组)、VILI +GSK484干预组(VG组)。S组及SG组气管插管后自主呼吸4 h;V组及VG组机械通气4 h(潮气量30 ml/kg、呼吸频率75次/min、吸呼比1∶2、呼吸末正压0 mmHg、吸入氧气浓度21%)。于VILI建模前3 d, SG组及VG组腹腔注射GSK484 4 mg/kg, 1次/d, S组及V组每天以等容量生理盐水代替。小鼠自主呼吸或机械通气4 h时, 采集腹主动脉血样, 行血气分析, 记录PaO2;随后处死小鼠, 收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。确定肺组织湿重/干重比值(W/D);肺组织HE染色后, 光镜下观察病理学结果并行损伤评分;采用ELISA法检测BALF IL-1β、IL-6、TNF-α及髓过氧化物酶(MPO)浓度;采用Western bl...     

不同剂量瘦素对大鼠机械通气肺损伤的影响

目的评价不同剂量瘦素对大鼠机械通气肺损伤的影响。方法健康清洁级SD雄性大鼠48只,6～8周龄,采用随机数字表法分为四组:气管切开保留自主呼吸的假手术组(A组)、机械通气模型组(B组)、瘦素10μg/kg组(C组)和瘦素50μg/kg组(D组),每组12只。采用10%水合氯醛3.5 ml/kg麻醉大鼠,疼痛反射消失后C组腹腔注射瘦素10μg/kg,D组腹腔注射瘦素50μg/kg,A、B组腹腔注射等容量生理盐水,注射后即刻进行气管切开,插管机械通气。A组气管插管后保留自主呼吸,B、C、D组机械通气建立VILI模型,参数设置:V_T 20 ml/kg,RR 80次/分,I∶E 1∶1,FiO_2 21%,PEEP 0 mmHg,通气时间4 h。分别于基础状态、通气结束时抽取股动脉血进行血气分析。通气结束后放血处死大鼠,在4℃下取肺组织并收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF),光镜下进行中性粒细胞计数,采用ELISA法测定TNF-α、IL-6、IL-1β浓度;取肺组织称重,计算肺湿干重比(W/D);观察肺组织病理改变并进行病理评分;采用Western blot检测肺组织研磨液中NF-κB p65含量。结果与A组比较,B、C、D组W/D、肺损伤评分、BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织NF-κB p65含量明显升高(P0.01)。与B组比较,C、D组BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织肺损伤评分、NF-κB p65含量明显降低(P0.05)。与C组比较,D组BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织肺损伤评分、NF-κB p65含量明显降低(P0.05)。结论瘦素可降低大鼠机械通气肺损伤中炎性因子的表达水平,减轻肺损伤,50μg/kg较10μg/kg作用明显。     

七氟醚减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤

目的 探讨七氟醚对大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)的影响并探讨其可能机制。方法 健康SPF级雄性SD大鼠36只,6～8周龄,体重220～280 g。随机分为三组：对照组(C组)、VILI组(V组)和七氟醚组(S组),每组12只。大鼠给予1%戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉后行气管切开插管术,C组自主呼吸4 h, V组和S组插管后机械通气4 h, S组机械通气期间吸入2%七氟醚4 h。通气参数：V_T 20 ml/kg, RR 80次/分,I∶E 1∶1,FiO₂ 21%,PEEP 0 cmH₂O。机械通气结束时采集股动脉血测定PaO₂。处死大鼠,取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),计算肺组织湿/干重比值(W/D),采用ELISA法检测BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-18浓度,二氯荧光黄双乙酸盐法检测BALF中肺泡巨噬细胞活性氧(ROS)水平,Western blot法及qRT-PCR法检测肺组织NF-E2相关因子2(Nrf2)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1...     

组织蛋白酶B在大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用：与NLRP3炎症小体的关系

目的评价组织蛋白酶B(CTSB)在大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法 SPF级健康雄性SD大鼠36只, 6～8周龄, 体重220～300 g, 采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、VILI组(V组)和VILI+CA074-me组(Me组)。C组和V组大鼠气管插管前1 h腹腔注射等量生理盐水, Me组腹腔注射CA074-me 5 mg/kg。C组自主呼吸4 h, V组和Me组行机械通气4 h, 通气参数:VT 20 ml/kg, 通气频率80次/min, FiO2 21%, PEEP 0 cmH2O。气管插管前和自主呼吸或通气结束后采集股动脉血行动脉血气分析, 记录PaO2, 随后处死大鼠, 收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和取肺组织, 确定肺组织湿重/干重(W/D)比值, HE染色法观察病理学结果并进行肺损伤评分, 采用ELISA法检测BALF及血清IL-1β和IL-18浓度。采用qRT-PCR法检测肺组织CTSB、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和caspase-1的mRNA表...     

亚甲蓝对大鼠机械通气相关肺损伤中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体的影响

目的评价亚甲蓝对大鼠机械通气相关损伤(VILI)中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法清洁级成年雄性SD大鼠36只,8周龄,体重240～260 g,采用随机数字表法分为三组:自主呼吸对照组(C组)、大潮气量模型组(H组)和大潮气量+亚甲蓝组(MB组),每组12只。三组大鼠均行气管切开插管术,MB组经腹腔注射1%亚甲蓝50 mg/kg,10 min后以V_T 20 ml/kg行机械通气;C组经腹腔注射等容量生理盐水后保持自主呼吸;H组经腹腔注射等容量生理盐水,10 min后以V_T 20 ml/kg行机械通气。通气参数:FiO_2 21%,I∶E 1∶1,RR 80次/分,PEEP 0,通气时间4 h。于基础状态、通气结束时经颈总动脉取血行血气分析,通气结束后颈总动脉放血处死大鼠,收集肺组织标本、支气管肺泡灌洗液(BALF)。光镜下观察肺组织病理学改变,记录肺损伤评分,计算肺组织湿/干重比值(W/D)。采用ELISA法测定BALF中总蛋白含量以及血清、BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-18浓度;鲁米诺化学发光法检测肺组织中活性氧(ROS)含量;RT-PCR法及Western blot法分别检测肺组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)mRNA表达量及蛋白含量。结果与C组比较,H组肺损伤评分、W/D明显升高(P0.01),BALF中总蛋白以及血清、BALF中IL-1β和IL-18浓度明显升高(P0.01),肺组织中ROS含量、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量及蛋白含量明显升高(P0.01)。与H组比较,MB组肺损伤评分、W/D明显降低(P0.05),BALF中总蛋白以及血清、BALF中IL-1β和IL-18浓度明显降低(P0.05),肺组织中ROS含量、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量及蛋白含量明显降低(P0.05)。结论亚甲蓝通过抑制大鼠肺组织中NLRP3炎性小体的激活,阻碍促炎因子IL-1β及IL-18的形成,减轻大鼠VILI。     

西格列汀对小鼠内毒素性肺损伤时黏蛋白5AC表达的影响

目的评价西格列汀对小鼠内毒素性肺损伤时黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠36只, 6～8周龄, 体质量20～25 g, 按照随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、内毒素性肺损伤组(L组)和内毒素性肺损伤+西格列汀组(S组)。L组和S组气管内滴注LPS 3 mg/kg制备小鼠内毒素性肺损伤模型, C组小鼠气管内滴注等量生理盐水。S组于LPS滴注前1 h腹腔注射西格列汀100 mg/kg, C组和L组小鼠于气管内滴注生理盐水前1 h腹腔注射生理盐水。LPS或生理盐水滴注后24 h时经股动脉采血行动脉血气分析测定PaO2及葡萄糖水平, 随后处死小鼠收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织, ELISA法检测血清及BALF IL-6、IL-1β和TNF-α浓度。称重后计算肺组织湿质量/干质量(W/D)比值, HE染色法观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分, 采用免疫组化法及免疫组化综合评分法检测MUC5AC的表达, 采用qRT-PCR法检测肺组织MUC5AC的mRNA表达水平。结果与C组比较, L组和S组PaO2降低, 葡萄糖水平、W/D...     

机械通气对糖尿病小鼠肺微血管通透性的影响

目的 观察机械通气对糖尿病小鼠肺微血管通透性的影响.方法 雄性SPF级C57/BL6小鼠64只,10～ 12周龄,体重20～25 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=16):对照组(C组)、机械通气组(M组)、糖尿病组(D组)和糖尿病机械通气组(DM组).D组和DM组腹腔注射链脲佐菌素150 mg/kg,以0.1 mol/L枸橼酸盐缓冲液溶解制备小鼠糖尿病模型,气管切开后自主呼吸通气4h.C组和M组腹腔注射等容量枸橼酸缓冲液,气管切开后接呼吸机行机械通气4h.每组随机取8只小鼠,采集动脉血样,测定PaO2;然后处死小鼠,取肺组织,电镜下观察超微结构,测定湿/干比(W/D比)和髓过氧化物酶(MPO)活性.每组随机处死4只小鼠,测定肺微血管通透性.每组随机取4只小鼠,体外原代细胞培养肺微血管内皮细胞并鉴定,采用跨内皮细胞的[14C]BSA检测肺微血管内皮细胞通透系数.结果 与C组比较,M组、D组和DM组PaO2降低,肺组织MPO活性、肺微血管通透性和内皮细胞通透系数升高,M组和DM组肺组织W/D比升高(P＜0.05);与D组比较,DM组PaO2降低,肺组织W/D比、MPO活性、肺微血管通透性和内皮细胞通透系数升高(P＜0.05).结论 机械通气导致糖尿病小鼠肺损伤可能与肺微血管通透性增加有关.     

外源性肺泡表面活性物质对大鼠呼吸机相关性肺损伤的保护作用

目的探讨气管注入肺泡表面活性物质(PS)对大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)的保护作用及机制。方法将40只Wistar大鼠采用区组法随机分为对照组、高潮气量组(HV组)、VILI组和PS组4组,每组各10只。对照组未行机械通气,其余3组容量控制通气,PS组同时经气管内插管注入猪PS100mg/kg。监测心率、平均动脉压(MAP)、血气分析、肺湿/干重比(W/D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数,测定肺组织核因子-κB(NF-κB)活性和BALF中及血清白细胞介素-8(IL-8)浓度,并观察大体及光学显微镜下肺组织损伤的改变。结果损伤性机械通气后大鼠MAP及氧合指数(PaO2/FiO2)显著降低,而肺组织NF-κB活性和W/D显著增高。PS组与VILI组相比,MAP、PaO2/FiO2、肺组织NF-κB活性、BALF中白细胞计数、BALF及血清中IL-8浓度均有统计学意义(P<0.05)。组织学检查显示PS组较VILI组病变明显减轻。结论经气管注入PS可抑制VILI大鼠NF-κB基因表达,对VILI有保护作用。     

核因子-κB介导脂多糖诱导急性肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达

目的探讨核因子(NF)-κB在脂多糖诱导大鼠急性肺损伤过程中对肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法采用腹腔注射脂多糖(LPS)致大鼠脓毒症急性肺损伤模型。取健康SPF级雄性SD大鼠72只,体重180~220g,采用随机数字表法,分为对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(L组,n=30)、吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)溶剂对照组(P组,n=6),PDTC治疗组(LP组,n=30)。各组分别给予腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)(C和P组)或LPS(L和LP组);P组和LP组在PBS或LPS注射前15min,给予腹腔注射PDTC 100mg/kg。C组和P组腹腔注射PBS后的16h,L组和LP组注射LPS后的16h后各取6只大鼠检测其肺湿/干重比(W/D);C组和P组腹腔注射PBS后的16h,L组和LP组注射LPS后的4h(T1)、8h(T2)、16h(T3)、24h(T4)和48h(T5)时各取6只大鼠经处理后采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中髓过氧化物酶(MPO)和白细胞介素6(IL-6)水平,Western blot法检测肺组织HMGB1的表达水平,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织的病理变化。结果与C组比较,L组肺组织W/D、BALF中MPO和IL-6水平明显升高(P0.01),病理切片显示严重肺组织损伤,T2~T4时肺组织中HMGB1的表达水平明显升高(P0.05);使用PDTC治疗后,与L组比较,肺组织W/D、BALF中MPO和IL-6水平明显降低(P0.01),病理示肺损伤程度明显减轻;T2~T4时肺组织HMGB1表达水平明显降低(P0.05)。结论在脂多糖诱导急性肺损伤中,被激活的NF-κB通过介导晚期炎症因子HMGB1的表达来参与急性肺损伤的发生与发展过程。     

大鼠呼吸机相关肺损伤热休克蛋白70和核因子-κB的表达及其意义

目的 探讨呼吸机所致肺损伤(VILI)炎症反应中热休克蛋白70(HSP70)和核因子-κB(NF-κB)表达的意义.方法 健康SD大鼠30只,实施麻醉和气管切开术后分别接受不同潮气量(VT)的通气(通气时间均为4 h).随机分为以下3组:对照组(A组);常规通气组(B组,VT=10ml/kg);损伤通气组(C组,VT=40ml/kg).4 h后放血处死动物,测定肺湿/干比重、髓过氧化物酶(MPO)活性及肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量,光镜下行白细胞(WBC)计数;Western blot检测肺组织HSP70及NF-κB的表达.结果 在大潮气量机械通气4 h后,BALF中总蛋白含量、肺湿干比、WBC计数和MPO水平(3.89±0.31、5.83±0.42、6.10±0.80、7.31±1.21)均明显更高(P＜0.05);肺组织中HSP70、NF-κB表达水平(1.36±0.13、0.41±0.07)均显著增加,且两者呈负相关.结论 HSP70可通过抑制NF-κB的活性,保护肺组织避免VILI.     

乌司他丁对大鼠机械通气肺损伤时γ-氨基丁酸信号通路的影响

目的探讨乌司他丁对大鼠机械通气引起的呼吸机相关性肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)时γ-氨基丁酸(GABA)信号通路的影响。方法选取健康成年雄性Wister大鼠36只,采用随机数字表法分为三组:正常对照组(C组)、机械通气肺损伤组(VILI组)和机械通气肺损伤+乌司他丁处理组(UTI组),每组12只。VILI组与UTI组采用VT40ml/kg机械通气4h的方法制备大鼠VILI模型。机械通气前1h,UTI组腹腔注射乌司他丁1×10~5 U/kg,C组和VILI组给予等容量生理盐水。收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),检测BALF中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的浓度;取肺组织,检测湿/干重比(W/D)、肺组织IL-1β、TNF-α和ICAM-1 mRNA的表达;采用免疫组化与Western blot法检测肺组织GAD与GABAA受体的表达量,观察病理学结果并进行肺损伤评分。结果与VILI组比较,UTI组W/D(6.7±2.4vs.8.5±2.3)、肺损伤评分[(6.9±2.3)分vs.(11.8±2.7)分]明显降低(P0.05);BALF中IL-1β[(56±11)ng/L vs.(77±15)ng/L]、TNF-α[(105±29)ng/L vs.(158±37)ng/L]及ICAM-1[(205±46)ng/L vs.(293±61)ng/L]浓度明显降低(P0.05);肺组织IL-1β(1.81±0.26vs.2.58±0.34)、TNF-α(1.61±0.15vs.2.94±0.27)、ICAM-1(1.74±0.27vs.2.79±0.31)mRNA表达量明显降低(P0.05);GAD(0.44±0.08vs.0.18±0.04)和GABAA(0.30±0.09vs.0.15±0.04)受体表达量明显增加(P0.05)。结论乌司他丁可减轻大鼠机械通气引起的呼吸机相关性肺损伤,其机制可能与激活γ-氨基丁酸信号通路有关。     

不同程度呼吸机相关性肺损伤大鼠血清CC10蛋白水平的比较

目的 比较不同程度呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠血清CCIO蛋白的水平.方法 清洁级Wistar大鼠40只,雌雄不拘,体重200～250 g,随机分为5组(n=8),对照组(Ⅰ组)仅切开气管,不行机械通气;轻度肺损伤组(Ⅱ组)潮气量(VT)7 ml/kg,机械通气2 h;中度肺损伤组(Ⅲ组)VT 7 ml/kg,机械通气4 h;重度肺损伤组(Ⅳ组)VT 40 ml/kg,机械通气2 h;极重度肺损伤组(Ⅴ组)VT 40 ml/kg,机械通气4 h.Ⅰ组在气管切开后即刻,其余各组在机械通气结束时采集腹主动脉血3 ml,并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定血清和BALF中CC10蛋白水平;观察肺Clara细胞;计算肺湿/干重比(W/D).结果 Ⅳ组和Ⅴ组终末细支气管、呼吸细支气管管腔有大量脱落Clara细胞,血管壁有大量漏出的CC10蛋白,其余组上述表现不明显;Ⅱ组～Ⅴ组血清CC10蛋白水平逐渐升高,肺组织损伤程度逐渐加重(P＜0.05);与Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组比较,Ⅳ组和Ⅴ组BALF中CC10蛋白水平降低(P＜0.05);血清CC10蛋白水平与肺组织损伤程度和肺W/D呈正相关,相关系数分别为0.915和0.846(P＜0.01);BALF中CC10蛋白水平与肺组织损伤程度和肺W/D呈负相关,相关系数分别为-0.799和-0.816(P＜0.01).结论 血清CC10蛋白水平与大鼠呼吸机相关性肺损伤程度有关.     

整合素αvβ6 在大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用

目的 探讨整合素αvβ6 在大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用.方法 清洁级雄性SD大鼠24只,随机分为3组(n=8),对照组(C组)不行机械通气;高潮气量组(H组)行高潮气量(40 ml/kg)机械通气4 h,呼吸频率40次/min,氧浓度21%;高潮气量+阻滞剂S247组(HS组)腹腔注射S247(含有αv 亚单位整合素非特异性阻滞剂)100 mg/kg,1次/d,持续2周,在最后一次腹腔注射S247后30 min行高潮气量机械通气,参数设定同H组.C组和H组于上述相应时点腹腔注射等量生理盐水.通气结束后处死大鼠,观察肺组织病理学,计算肺湿,干重比(W/D),记录支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞(WBC)计数,测定总蛋白(TP)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的浓度、整合素αvβ6 mRNA及其蛋白的表达水平.结果 C组未见肺损伤的发生;H组肺泡结构严重破坏,肺泡内渗出物、出血和间质水肿明显;HS组中等程度炎性细胞浸润,肺泡内出血和肺泡壁增厚.与C组比较,H组和HS组肺W/D、BALF中WBC计数、TP浓度升高,整合素αvβ6 mRNA及其蛋白表达上调,H组BALF中MIP-2浓度升高(P＜0.01);与H组比较,HS组肺W/D、BALF中WBC计数、TP、TNF-α、MIP-2浓度降低,整合素αvβ6 mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.05或0.01).结论 整合素αvβ6参与了大鼠VILI的发生.     

脂氧素受体激动剂BML-111减轻大鼠机械通气肺损伤

目的探讨脂氧素受体激动剂BML-111对机械通气肺损伤(VILI)的保护作用及其机制。方法 32只健康雄性SD大鼠随机均分四组,L组:VT6ml/kg;H组:VT20ml/kg;BML组:VT20ml/kg,机械通气开始时腹腔注射BML-111(1mg/kg);BOC组:VT20ml/kg,机械通气开始前30min腹腔注射叔丁氧羟基-苯丙氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸(BOC-2,50μg/kg),机械通气开始时腹腔注射BML-111(1mg/kg)。RR均为80次/分,机械通气时间均为4h。实验结束处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本。观察肺组织病理学变化,Western Blot法检测肺组织中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化水平、核转录因子(NF)-κB核转位。对BALF中细胞进行分类计数,检测BALF中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平。结果 H、BOC组BALF中蛋白浓度和中性粒细胞计数、TNF-α、IL-1β和L-6含量明显高于L和BML组(P0.05或P0.01)。H、BOC组ERK、p38MAPK和JNK磷酸化水平明显高于L和BML组(P0.05或P0.01)。H、BOC组IKB-α表达明显低于L和BML组(P0.05或P0.01);H、BOC组NF-κB p65亚基从胞浆向胞核转位明显高于L和BML组(P0.05或P0.01)。结论 BML-111抑制MAPK的磷酸化和NF-κB信号通路激活,并可能是其减轻VILI的机制之一。     

不同机械通气模式对老年腹部手术患者细胞因子的影响

目的探讨不同机械通气模式对于老年腹部手术患者细胞因子的影响。方法 72例择期进行腹部手术全麻机械通气的老年患者(年龄65岁)分为6组,每组12例。A组:VCV(Vt 6 m L/kg)+PEEP 8 mm Hg+auto-flow模式;B组:VCV(Vt 6 m L/kg)+PEEP 8 mm Hg+const-flow模式;C组:VCV(Vt 6 m L/kg)+PEEP 12 mm Hg+auto-flow模式;D组:VCV(Vt 6 m L/kg)+PEEP 12mm Hg+const-flow模式;E组:VCV(Vt 10 m L/kg)+auto-flow模式;F组:VCV(Vt 10 m L/kg)+const-flow模式。6组患者全身麻醉气管插管后,均予以VCV(Vt 6 m L/kg)+const-flow模式通气60 min,再按分组的通气模式进行通气,总通气时间大于5 h。在通气1 h及5 h两个时间点,抽取静脉血和支气管肺泡灌洗液检测IL-8、IL-10、MMP-9、SP-A以及SF浓度。结果大潮气量组(E、F两组)较小潮气量四组(A、B、C、D四组)通气5 h后,血与BALF中测定的IL-8、MMP-9浓度以及血中测定的SP-A、SF浓度明显升高(P0.05),血与BALF中测定的IL-10浓度以及BALF中测定的SP-A浓度明显降低(P0.05)。通气5 h后F组较E组,血及BALF中IL-8以及MMP-9、血SF、血SP-A更高(P0.05),而BALF中SP-A则更低(P0.05)。结论 (1)大潮气量机械通气较小潮气量机械通气而言,更有利于促进IL-8、MMP-9、SF的分泌,抑制IL-10的释放,BALF中SP-A下降,血中SP-A升高,进一步加剧了VILI的程度。(2)就老年(年龄65岁)腹部手术患者而言,围手术期以VCV(Vt6 m L/kg)+PEEP 12 mm Hg+auto-flow模式机械通气较其他五种通气模式,更有利于减轻肺组织急性炎症反应及氧化应激反应的激活,减轻机械通气所致生物伤,从而减轻VILI的程度。     

白细胞介素-17A在小鼠机械通气相关性肺损伤中的作用

目的探讨白细胞介素-17A(IL-17A)在小鼠机械通气相关性肺损伤中的作用。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠40只,2～3月龄,体重25～30 g。将小鼠随机分为四组:假手术组(S组),假手术+IL-17A单克隆抗体组(SA组),机械通气肺损伤模型组(V组),机械通气损伤模型+IL-17A单克隆抗体组(VA组),每组10只。S组和SA组仅行气管切开保留自主呼吸。V组和VA组机械通气4 h。SA组和VA组在气管切开后于腹腔注射IL-17A单克隆抗体(10μg, 0.1 ml),S组和V组于腹腔注射等体积的抗体稀释液。机械通气结束时处死小鼠取肺组织,采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)浓度,测定肺组织湿干重比值(W/D),采用TUNEL染色法测定肺组织细胞凋亡指数,采用Western Blot法检测肺组织IL-17A和cleaved-caspase-3蛋白含量,采用HE染色法观察肺组织病理学结果并进行肺损伤评分。结果与S组比较,V组和VA组BALF中TNF-α和IL-6浓度、W/D、细胞凋亡指数、肺组织IL-17A和cleaved-caspase-3蛋白含量、肺损伤评分均明显升高(P0.05),肺组织病理学改变加重。与V组比较,VA组BALF中TNF-α和IL-6浓度、W/D、细胞凋亡指数、肺组织IL-17A和cleaved-caspase-3蛋白含量、肺损伤评分均明显降低(P0.05),肺组织病理学损伤改善。S组和SA组各项指标差异无统计学意义。结论大潮气量机械通气可导致机械通气相关性肺损伤,IL-17A介导了机械通气相关性肺损伤的发生、发展过程,可能与IL-17A加重炎症反应和诱导细胞凋亡有关。阻断IL-17A可通过减轻肺组织炎症反应、减少细胞凋亡改善机械通气相关性肺损伤。     

洛沙坦对糖尿病小鼠机械通气相关肺损伤的影响

目的 评价洛沙坦对糖尿病小鼠机械通气相关肺损伤的影响.方法 SPF级雌性C57/BL6小鼠48只,10 ～ 12周龄,体重20 ～ 25 g,采用随机数字表法,将小鼠随机分为3组(n=16)∶对照组(C组)、糖尿病机械通气组(DM组)和洛沙坦组(L组).DM组和L组采用腹腔注射链脲佐菌素150mg/kg的方法制备糖尿病模型.取糖尿病模型制备成功的小鼠进行机械通气4h,吸入氧浓度50％,通气频率70次/min,潮气量15 ml/kg,PEEP 2 cm H2O.L组于机械通气前30 min腹腔注射洛沙坦30mg/kg.机械通气4h时采集颈动脉血样,测定PaO2,随后处死,取肺组织,测定湿/干重比(W/D比)、髓过氧化物酶(MPO)活性和肺微血管通透性;采用实时荧光定量RT-PCR法测定血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体AT1 mRNA的表达水平;ELISA法测定AngⅡ的含量;Western blot法测定细胞核内NF-κB p65的表达水平.结果 与C组比较,DM组和L组PaO2降低,肺组织W/D比、MPO活性、肺微血管通透性和AngⅡ含量升高,AT1 mRNA和NF-κB p65表达上调(P＜0.05);与DM组比较,L组PaO2升高,肺组织W/D比、MPO活性、肺微血管通透性和Ang Ⅱ含量降低,AT1 mRNA和NF-κB p65表达下调(P＜0.05).结论 洛沙坦通过抑制AT1受体和Ang Ⅱ水平,从而改善肺微血管通透性和抑制NF-κB活化,减轻糖尿病小鼠机械通气相关肺损伤.     

内质网IRE1α/XBP1信号通路在小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用：与NLRP3炎症小体的关系

目的评价内质网肌醇需要酶1α/X盒结合蛋白1(IRE1α/XBP1)信号通路在小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠36只, 6～8周龄, 体质量25～30 g, 采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、内毒素性ALI组(ALI组)和内毒素性ALI+STF-083010组(ST组)。ALI组和ST组雾化吸入LPS 3 mg/ml 30 min制备小鼠内毒素性ALI模型, C组雾化吸入等量生理盐水, ST组于雾化吸入LPS前1 h时腹腔注射IRE1α/XBP1信号通路阻断剂STF-083010 50 mg/kg, 其余2组腹腔注射等容量生理盐水。LPS或生理盐水雾化吸入后24 h时处死小鼠, 收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并取肺组织标本, 肺组织HE染色后光镜观察病理学结果, 行肺损伤评分并计算肺湿重/干重(W/D)比值;ELISA法测定BALF上清液IL-1β和IL-18浓度;Western blot法检测肺组织p-IRE1α、XBP1s、NLRP3、ASC和...     

TRPV4在右美托咪定改善机械通气致脑损伤小鼠认知功能降低中的作用

目的评价瞬时受体电位香草酸4(TRPV4)在右美托咪定改善机械通气致脑损伤小鼠认知功能降低中的作用。方法清洁级健康雄性C57BL6小鼠90只, 体质量20～25 g, 8～12周龄, 采用随机数字表法分为5组(n=18):对照组(C组)、机械通气组(V组)、HC-067047组(H组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定+GSK1016790A组(DG组)。C组不行机械通气, 自主呼吸空气6 h;V组机械通气6 h;H组机械通气3和6 h时分别脑室内注射TRPV4阻断剂HC-067047 10 mmol;D组和DG组机械通气前30 min腹腔注射右美托咪定50 μg/kg;DG组机械通气前60 min脑室内注射TRPV4激动剂GSK1016790A 5 μmol。每组随机取6只小鼠分别于机械通气前1 d、机械通气后3和7 d时行Morris水迷宫实验。机械通气后1 d, 每组随机处死6只小鼠取脑组织, 采用TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡情况, 计算凋亡指数。每组随机处死6只小鼠取海马组织, 采用Western blot法检测TRPV4、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)、p-Akt...