小檗碱通过诱导细胞抑制性自噬发挥抗胃癌作用

目的探讨中药黄连活性成分小檗碱抗胃癌作用及相关机制。方法用MTT法检测小檗碱对人胃癌BGC-823细胞的生长抑制作用;用MDC染色结合流式细胞术及GFP-LC3质粒转染法检测小檗碱引起BGC-823细胞发生自噬;用Western印迹法检测自噬标志蛋白LC3和Beclin-1表达水平;引入自噬抑制剂3-MA和CQ,用MTT法检测小檗碱诱导的自噬与细胞存活之间的关系;建立人胃癌BGC-823细胞裸鼠移植瘤模型,评价小檗碱在体内抑制人胃癌细胞移植瘤的生长作用,用免疫组化法和Western印迹法检测肿瘤组织中自噬相关蛋白的表达水平。结果小檗碱呈时间-剂量依赖性的诱导BGC-823细胞死亡,其48 h的IC50值为24μmol·L~(-1)。与对照组相比,小檗碱处理后细胞中自噬小体的数目及自噬标志蛋白LC3及Beclin-1的表达水平皆随时间依赖性增加,且抑制自噬后小檗碱引起的细胞死亡率下降,提示小檗碱诱导的自噬发挥抑制细胞生长的作用。裸鼠移植瘤实验表明,5、10及20 mg·kg~(-1)的小檗碱均对裸鼠移植瘤的生长具有显著的抑制作用,且抑制作用与剂量成正比。其中小檗碱高剂量组的相对肿瘤增殖率为28%,优于阳性对照药物5-FU(31%)。同时,小檗碱不影响裸鼠的体重,裸鼠生长状态良好,说明其毒性较小。进一步发现小檗碱能够呈剂量依赖性的增加肿瘤组织中自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达水平。结论小檗碱在体内和体外通过诱导细胞抑制性自噬而发挥抗胃癌作用。     

小檗碱双向调节细胞自噬机制的研究进展

自噬是一种广泛存在于真核细胞内的自我保护机制,它主要通过分解蛋白质和多肽的循环以维持细胞内环境稳定。自噬失调常与多种疾病密切相关,如神经退行性疾病、心血管疾病、内分泌疾病、癌症等。自噬调节剂具有治疗多种疾病的潜力,但因其本身的毒性和非特异性,目前尚未应用于临床。小檗碱是一种从黄连中分离出来的具有多种生理功能的异喹啉生物碱,低毒易得,具有双向调节自噬的特性。一方面,小檗碱能上调细胞基础自噬,有助于维持细胞内稳态。另一方面,小檗碱能恢复应激诱导的过度自噬,缓冲细胞损害。近年来,小檗碱因其独特的双向调节机制而备受关注,在药物开发和临床应用领域也备受期待。因此,本文总结了小檗碱对自噬调控的相关机制,突出小檗碱作为自噬调节剂的独特优势,以期为其扩大临床应用范围提供参考。     

小檗碱诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡的研究

目的探讨小檗碱诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞(MOLT-4)凋亡的作用。 方法将处于对数生长期的MOLT-4细胞分为3组，A组加入小檗碱(10，100 mg·L^–1)，B组加入柔红霉素1 mg·L^-1，C组加入小檗碱＋柔红霉素，作用6 和24 h后，用MTT法检测细胞存活率；用流式细胞术、DNA电泳及光学显微镜观察小檗碱对MOLT-4细胞凋亡的影响。结果作用6，24 h后，A组(10 mg·L-¹)细胞存活率分别为81.80%，64.67%； B组为98.38%，38.46%，C组为68.35%，20.51%；C组与A、B组比较，在两个时间段差异均有显著性(P＜0.05)。小檗碱诱导MOLT-4细胞发生典型的细胞凋亡形态学变化，出现DNA规律性断裂，电泳呈典型的梯状条带变化。细胞周期分析提示小檗碱浓度在10，100 mg·L-1时作用24 h细胞凋亡率分别为5.83%，19.93%。结论小檗碱具有诱导白血病细胞凋亡的作用，且小檗碱可增强柔红霉素的抗肿瘤作用，为其临床应用提供了依据。     

SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长

目的研究SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的作用和机制。方法以人乳腺癌MCF-7细胞为研究目标,Muse细胞分析仪检测SAHA对细胞活力的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA对CTSV的mRNA及蛋白表达的影响,同时检测利用siRNA干扰技术敲除CTSV后的细胞CTSV表达水平;细胞免疫荧光法检测SAHA对LC3II分子的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA诱导自噬过程中相关ATG分子和LC3的mRNA和蛋白的变化;Bafilomycin A1抑制自噬,随后利用Western blot和Muse细胞分析仪分别检测p62蛋白水平和SAHA作用后的细胞活力。结果SAHA可以抑制MCF-7细胞的增殖,并促进CTSV的表达。CTSV-siRNA转染细胞后,CTSV的mRNA和蛋白水平均显著性降低。SAHA增加了LC3免疫荧光点的分布,与CTSV-siRNA共同作用可恢复由CTSV-siRNA敲减引起的细胞自噬减弱。SAHA在增强ATG4C和Beclin1表达的同时,LC3B也随之升高而mTOR则下降。抑制CTSV表达后也同时逆转了SAHA的效应。Bafilomycin A1阻断自噬后,被SAHA抑制的p62蛋白的表达和细胞活力显著增强。结论SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长。     

左旋一叶蔌碱诱导人非小细胞肺癌A549细胞自噬机制的研究

目的：研究左旋一叶荻碱诱导人非小细胞肺癌A549、细胞自噬的机制。方法：常规体外培养人非小细胞肺癌A549细胞株,取对数生长期的细胞传代24h后加入不同浓度（6．25、12．5、25、50、100、200μMol／L）左旋一叶荻碱处理,分别继续培养24、36、48h后,用CCK-8法测定细胞增殖活性;倒置显微镜下观察对照组和各实验组的细胞形态变化;分别用不同浓度（0、20μmol／L）左旋一叶荻碱作用A549细胞48h后,进行单丹磺酰尸胺（monodansylcadaverine,MDC）染色,分别通过荧光显微镜检测细胞自噬发生情况;荧光定量RT-PCR法检测Beclin1在mRNA水平表达变化情况。结果：左旋一叶荻碱可以抑制A549细胞增殖,并且呈浓度和时间依赖性（P〈0．05）。其中,21．204μmol／L左旋一叶荻碱作用A549细胞48h后,细胞死亡率接近50％;倒置显微镜观察到药物作用后细胞形态发生了明显变化;随着左旋一叶荻碱剂量增加,MDC阳性细胞的荧光强度及细胞内MDC荧光颗粒数目明显增加。另外,研究还发现随着药物浓度的上升,自噬基因Beclin 1的表达明显增强。结论：左旋一叶荻碱具有抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡,其作用具有浓度和时间依赖性。左旋一叶荻碱上调自噬基因Beclin 1 mRNA的表达水平可能是其诱导A549细胞自噬性凋亡的机制之一。     

白藜芦醇诱导人乳腺癌MDA-MB231细胞凋亡及自噬

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)诱导人乳腺癌MDA-MB231细胞凋亡及自噬蛋白表达的作用与机制。方法以人乳腺癌MDA-MB231细胞为研究对象,MTT法检测Res(0、1、5、10、20、50、100、200 mg·L~(-1))抑制MDA-MB231细胞增殖情况; Res(0、5、20、60 mg·L~(-1))处理MDA-MB231细胞,划痕实验检测细胞迁移能力,Annexin V/PI双染法检测细胞早期凋亡率,免疫荧光法检测细胞LC3Ⅰ/Ⅱ的表达;Res(0、20、60 mg·L~(-1))处理MDA-MB231细胞,蛋白免疫印迹法检测细胞中自噬相关蛋白p62及Beclin-1的表达。结果Res在体外可明显抑制MDA-MB231细胞增殖,且呈浓度依赖关系。随着Res浓度的增高,乳腺癌细胞迁移能力较对照组分别下降了(8. 7±1. 1)%、(16. 5±2. 9)%和(32. 2±3. 6)%。流式细胞仪检测结果表明,早期凋亡细胞数增加;激光共聚焦检查显示,细胞质中LC3Ⅰ/Ⅱ绿色荧光增加;蛋白免疫印迹法检测出MDA-MB231细胞p62蛋白表达下降,Beclin-1蛋白表达升高。结论 Res可抑制人乳腺癌MDA-MB231细胞增殖,其机制可能与Res诱导细胞凋亡和自噬有关。     

小檗碱对人胃癌MGC-803细胞生长抑制及诱导凋亡的作用

目的　研究小檗碱对胃癌细胞株生长抑制、诱导凋亡作用 ,及其作用浓度、时间与细胞数目、凋亡程度的关系。方法　苔盼蓝细胞计数 ,MTT染色 ,甲基绿 派诺宁染色观察凋亡特征及计数 ,流式细胞仪技术 ,琼脂糖电泳技术分析药物对DNA作用。结果　小檗碱能抑制胃癌细胞MGC 80 3的生长。 8mg·L-1、4mg·L-1、2mg·L-1、1mg·L-1小檗碱 72h的抑制率分别为 10 0 %、80 4%、5 1 5 %、8 5 %。小檗碱作用细胞后 ,细胞表现出较为典型的细胞凋亡形态 :细胞核固缩 ,染色质凝集断裂 ,颗粒含量增加等 ;72h死亡的细胞中抗拒苔盼蓝染色者 ,仍高达 6 0 %～ 82 % ,胞膜完整 ;流式细胞仪DNA直方图上出现典型亚二倍体峰 ;琼脂糖凝胶电泳分析表明 :小檗碱可使染色质断裂 ,且发生于细胞膜结构被破坏之前 ,DNA形成大片段 ,但不形成小片段。结论　小檗碱体外能抑制胃癌MGC 80 3细胞增殖和诱导细胞凋亡 ,其细胞毒性 (致细胞坏死作用 )较弱     

小檗碱增强TRAIL诱导白血病细胞凋亡

目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）联合小檗碱诱导Molt-4细胞凋亡作用及其对NF-κBP65表达的影响。方法：采用四甲基偶氮唑（MTT）比色法测定TRAIL单独和联合应用小檗碱时对Molt-4细胞的生长抑制率；用流式细胞术和光镜细胞形态观察来检测凋亡；应用免疫印迹法检测单独和联合用荮组细胞凋亡相关蛋白酶caspase3，caspase8及NF-κB／P65表达。结果：（1）MTT结果发现小檗碱可增加TRAIL对Molt-4细胞的生长抑制率，且呈时间和剂量依赖性（P〈0．05）。（2）流式细胞术可以检测到凋亡，光镜细胞形态观察可见凋亡特异性形态改变。（3）Western blot结果显示（a）单独用TRAIL组及TRAIL联合小檗碱用药组caspase3，caspase8活化程度随TRAIL质量浓度依次增加，联合用药组活化作用更强。（b）单独用TRAIL组NF-κB／P65表达随剂量增加而增加。联合小檗碱用药组NF-κB／P65表达与单独用TRAIL组相比则明显受抑制。结论：（1）小檗碱可协同TRAIL诱导Molt-4细胞凋亡。（2）小檗碱协同TRAIL诱导Molt-4细胞凋亡的分子机制涉及抑制NF-κB／P65表达和caspase3，caspase8剪切活化。     

小檗碱调节己糖激酶Ⅱ抑制乳腺癌细胞糖酵解的作用研究

摘 要 目的：研究小檗碱对乳腺癌细胞糖酵解的干预作用及对己糖激酶Ⅱ的影响。方法: 分别采用人乳腺癌MDA MB 231,MCF 7细胞株,通过MTT实验, 考察小檗碱对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,检测小檗碱干预后乳腺癌细胞中葡萄糖消耗及乳酸含量,评价小檗碱对乳腺癌细胞糖酵解的影响;检测乳腺癌细胞中ATP及NAD+/NADH含量,评价乳腺癌细胞能量供应情况;通过检测己糖激酶Ⅱ活性及蛋白定量,明确小檗碱对乳腺癌细胞己糖激酶的影响。结果: 小檗碱对人乳腺癌细胞株MDA MB 231,MCF 7细胞增殖,具有明显抑制作用,并呈浓度依赖性;小檗碱可以明显降低不同乳腺癌细胞株中葡萄糖消耗及乳酸含量,中高剂量组相较于对照组差异有统计学意义(P<0.05);同时相较于对照组,中高剂量组可明显降低细胞ATP含量,升高NAD+/NADH含量(P<0.05);此外小檗碱可以抑制乳腺癌细胞己糖激酶Ⅱ活性及其蛋白含量。结论: 小檗碱可以明显抑制乳腺癌细胞增殖,并抑制乳腺癌细胞糖酵解,降低其能量供应,同时明显抑制乳腺癌细胞中己糖激酶Ⅱ的表达。     

三氧化二砷对三阴性乳腺癌细胞增殖及凋亡的抑制作用

目的探讨三氧化二砷对人三阴性乳腺癌细胞HCC1937的抑制作用。方法体外培养人乳腺癌HCC1937细胞,利用MTT法及倒置荧光显微镜观察三氧化二砷对人乳腺癌HCC1937细胞生长的抑制作用。结果不同浓度的三氧化二砷均可抑制人乳腺癌HCC1937细胞的增殖,促进其凋亡。三氧化二砷20μg/m1对肿瘤细胞作用72h,其生长抑制率达80.51%。结论三氧化二砷可有效抑制人乳腺癌HCC1937细胞生长,且呈时间、剂量依赖关系。     

条件性重编程技术分离培养人原代乳腺癌干细胞

目的 应用条件性重编程细胞(Conditionally Reprogrammed Cells,CRCs)技术建立高效、稳定的人乳腺癌千细胞体外培养,建立潜在的乳腺癌干细胞靶向药研究模型.方法 收集人乳腺癌组织样本,采用CRCs技术分离培养原代乳腺癌细胞,用CD24免疫磁珠标记原代乳腺癌细胞后使用磁性细胞分选仪分选出乳腺...     

低氧激活自噬促进人间充质干细胞成骨分化的研究

目的 探讨低氧对人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)成骨分化的效应及分子机制。方法 在正常氧压(20% O₂)和低氧(5% O₂)条件下培养hMSCs;采用成骨分化诱导液(BDM)诱导hMSCs成骨分化;利用茜素红染色法考察细胞钙沉积情况;通过Western blotting检测细胞自噬相关蛋白的表达水平以及MAPK、PI3K-AKT-mTOR信号通路的激活情况。结果 低氧条件下,hMSCs钙沉积较常氧条件增强;BDM诱导hMSCs成骨分化过程伴随着LC3表达增加,抑制细胞自噬可以明显减弱低氧促进的细胞钙沉积;低氧促进的细胞发生钙沉积伴随着MAPK以及PI3K-AKT-mTOR信号通路的失活;抑制MAPK以及PI3K-AKT-mTOR信号通路有利于细胞自噬发生,进而促进hMSCs钙沉积。结论 低氧下可以通过激活细胞自噬来促进hMSCs成骨分化,抑制MAPK以及PI3K-AKT-mTOR信号通路可以进一步促进细胞自噬的发生,从而协同促进hMSCs成骨分化。     

金丝桃素联合紫杉醇通过上调胞内ROS水平抑制乳腺癌细胞生长

目的 研究紫杉醇联合金丝桃素对乳腺癌细胞增殖的影响。方法 利用乳腺癌细胞株MCF-7和Bcap-37为研究对象,分别进行单药及联合用药,通过MTT法检测药物对肿瘤细胞增殖活性的影响;通过流式细胞技术检测药物对肿瘤细胞凋亡的影响;通过对线粒体膜电位、凋亡相关caspase-3蛋白表达量、ROS含量、还原型谷胱甘肽含量变化及谷胱甘肽S转移酶活性等进行检测。结果 紫杉醇（0.5 mg·L^–1）与金丝桃素（0.5 mg·L^–1）联合,作用24 h,在MCF-7及Bcap-37细胞中的协同指数Q分别为1.30和1.41,表现出良好的药物协同效应。2种细胞的线粒体膜电位明显下降,凋亡相关蛋白caspase-3表达水平及胞内ROS水平升高,而还原型谷胱甘肽水平降低,谷胱甘肽S转移酶活性受到抑制。结论 联合使用紫杉醇与金丝桃素的光动力疗法可以强化药物对乳腺癌细胞MCF-7以及Bcap-37的杀伤作用,促进细胞凋亡,为乳腺癌的组合疗法奠定了细胞实验基础。     

利巴韦林对人肺腺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Hela迁移和凋亡的影响研究

目的:研究利巴韦林对人肺腺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Hela迁移和凋亡的影响。方法:以A549、Hela细胞为模型细胞,分别分为对照组和利巴韦林低、中、高剂量(20、40、80μmol/ml)组,作用24 h后检测各组细胞的存活率、迁移能力、凋亡情况、酸性膜泡积累情况、自噬标志蛋白LC3(以LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ为指标)的表达情况。结果:与对照组比较,利巴韦林能降低A549、Hela细胞的存活率(中、高剂量组差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01)和迁移能力,增加A549、Hela细胞的凋亡率(低、中、高剂量差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01)、酸性膜泡积累数量与剂量呈反相关,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(中、高剂量差异均有统计学意义,P<0.01),作用与剂量呈正相关。结论:利巴韦林可能通过诱导细胞自噬降低A549、Hela细胞的迁移并诱导其凋亡。     

辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞增殖及凋亡作用研究

目的探讨辛基酚（octylphenols,OP）诱导乳腺癌细胞凋亡及抑制乳腺癌细胞增殖的可能机制。方法应用MTT法及流式细胞仪检测OP对乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制及细胞周期的变化;Real Time PCR和Western blot法检测OP对MCF-7乳腺癌细胞中细胞周期相关蛋白p27Kip1和CyclinE的mRNA及蛋白表达的影响及对凋亡抑制蛋白PAK4表达的影响。结果 OP对MCF-7细胞增殖有明显的抑制作用,MCF-7细胞阻滞在G0/G1期,使S期的细胞减少;Real Time PCR和Western Blot检测发现培养的MCF-7细胞,随着OP的处理浓度增加,CyclinE蛋白在分子水平和蛋白水平均降低,p27Kip1的表达量升高。结论 OP可能通过调控细胞周期相关蛋白的表达,抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖。     

藤梨根提取物通过Akt-mTOR介导的自噬信号通路抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解

目的 探究藤梨根提取物对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移、侵袭及糖酵解的影响。方法 MDA-MB-231细胞经藤梨根提取物处理后,MTT试验与克隆形成试验检测细胞增殖能力;划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭,Western blotting检测基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达情况,采用葡萄糖摄取试剂盒和乳酸检测试剂盒检测细胞葡萄糖摄取量和乳酸生成量,采用Western blotting检测细胞内M2型丙酮酸激酶（PKM2）,葡萄糖转运体1（GLUT1）和乳酸脱氢酶A （LDHA）以及Akt-mTOR介导的自噬信号通路相关蛋白表达情况。结果 与对照组比较,10 mg·mL^-1藤梨根提取物能显著抑制MDA-MB-231细胞的细胞活性（P<0.05）,而浓度为0.1和1 mg·mL^-1的藤梨根提取物则对细胞活性无明显影响。藤梨根提取物能够剂量依赖性地抑制MDA-MB-231细胞的克隆形成率、迁移率、侵袭细胞数量、葡萄糖摄取量和乳酸生成量（P均<0.05）。藤梨根提取物（1 μg·mL^-1和10 μg·mL^-1）能够减少细胞迁移标记蛋白（MMP-2和MMP-9）的表达,抑制糖酵解相关蛋白PKM2,GLUT1和LDHA的表达（P均<0.05）。此外,藤梨根提取物抑制了Akt/mTOR信号通路中关键蛋白的活性,减少了p-Akt和p-mTOR表达,促进LC3Ⅰ转化为LC3Ⅱ,上调自噬相关蛋白Beclin1,下调自噬标记蛋白p62,增强MDA-MB-231细胞自噬活性（P均<0.05）。结论 藤梨根提取物抑制细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解,其作用可能与失活Akt-mTOR途径诱导的自噬有关。     

紫草素对人结肠癌细胞HCT116自噬和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人结肠癌细胞HCT116自噬和凋亡的影响。方法:以0(空白对照)、10、20、40μg/mL紫草素作用于HCT116细胞48 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;分别采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法和Western blotting法检测细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)和自噬相关蛋白Beclin-1、p62的mRNA及其蛋白表达水平。结果:与空白对照比较,10、20、40μg/mL紫草素作用48 h后HCT116细胞的增殖抑制率和凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01)。10、20、40μg/mL紫草素作用于HCT116细胞48 h后均可不同程度地升高细胞中LC3、Beclin-1、p62 mRNA及其蛋白的表达水平,除10μg/mL紫草素作用后细胞中LC3 m RNA表达水平升高不显著外,其余指标水平与空白对照比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:紫草素可诱导人结肠癌细胞HCT116发生凋亡,并激活其自噬途径。     

青藤碱逆转人乳腺癌MCF-7细胞他莫昔芬耐药及机制研究

目的 探究青藤碱（sinomenine,SIN）对人乳腺癌MCF-7细胞他莫昔芬（tamoxifen,TAM）耐药的逆转作用及相关机制。方法 采用高剂量短时间刺激诱导法构建MCF-7/TAM耐药株,并通过MTT法验证细胞耐药性的改变,进一步采用MTT法检测SIN和TAM对MCF-7/TAM细胞的增殖抑制作用,并采用CompuSyn软件评估两者的联合效应。流式细胞术检测SIN和TAM对MCF-7/TAM细胞凋亡和周期的影响,Western blotting检测SIN对MCF-7/TAM细胞中PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。结果 MCF-7/TAM细胞对TAM敏感性显著降低,已产生耐药性;SIN和TAM单用均能够抑制MCF-7/TAM细胞的增殖,TAM和SIN联合使用对MCF-7/TAM细胞的抑制作用显著增强,经CompuSyn软件分析显示两药具有协同作用;SIN和TAM联用能够更显著地诱导MCF-7/TAM细胞凋亡和阻滞细胞周期;MCF-7/TAM细胞中PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平显著高于MCF-7细胞,SIN干预后MCF-7/TAM细胞中PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平显著下降。结论 SIN能够通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而逆转MCF-7细胞对TAM耐药。     

耐药人乳腺癌细胞中葡萄糖神经酰胺合成酶的表达及意义

目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因在人乳腺癌细胞株(MCF-7)和耐阿霉素人乳腺癌细胞株(MCF-7/ADR)中的表达及意义。方法:采用MTT法检测阿霉素对MCF-7/ADR和MCF-7的半数抑制浓度(IC50),用不同浓度的GCS抑制剂PDMP预处理MCF-7/ADR不同时间后检测IC50;运用流式细胞术检测MCF-7及PDMP预处理MCF-7/ADR前、后GCS蛋白的表达水平;应用实时荧光定量PCR法检测MCF-7及PDMP作用前、后MCF-7/ADR中GCS基因的表达(GCSN)水平。结果:阿霉素对MCF-7/ADR和MCF-7的IC50分别为(18.95±0.54)、(0.84±0.07)μg·mL-1;MCF-7/ADR对MCF-7的耐药倍数为22.69倍,PDMP作用后阿霉素对MCF-7/ADR的IC50下降至(5.63±0.58)μg·mL-1。MCF-7/ADR中GCS蛋白及GCSN的表达均高于MCF-7(P<0.01),PDMP使MCF-7/ADR中GCSN表达水平从0.0048±0.0017下降至0.0021±0.0004。结论:GCS可能参与肿瘤耐药的发生过程,并在MCF-7/ADR多药耐药中起重要作用。