昼夜节律振荡在器官缺血再灌注损伤中的作用研究进展

昼夜节律存在于人体的中枢和外周器官中, 在生理或病理状态下都发挥着关键的调节作用。缺血再灌注(I/R)损伤是缺血的组织血液循环得到恢复后, 组织再次受到额外的损伤。各器官缺血再灌注损伤发生率高, 严重危害人类健康。研究结果显示昼夜节律振荡对器官缺血再灌注损伤的发生和严重程度有重要影响, 相关信号通路可以作为治疗靶标, 具有潜在应用价值, 但目前未得到全面总结。我们回顾了昼夜节律振荡与各器官缺血再灌注损伤相关研究, 总结了相关信号分子通路, 为器官缺血再灌注损伤的预防及治疗提供新的思路。     

乙醛脱氢酶2在缺血再灌注损伤中的研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)是指血供中断再通后, 组织器官损伤加重的过程, 其损伤机制复杂, 主要包括氧化应激、钙超载、炎性反应等, 由此引起的临床疾病称为再灌注综合征。乙醛脱氢酶2(ALDH2)是人体乙醇代谢过程中的关键酶, 主要功能是将乙醛代谢成无毒的乙酸。近年来有大量研究表明, ALDH2在缺血再灌注损伤中有明确的保护性作用, 其特异性激动剂Alda-1也被广泛运用于IRI相关研究中。本文就ALDH2的结构、功能、基因多态性和在各器官IRI中的研究进展进行了综述, 探讨ALDH2成为IRI治疗靶点的可能性。     

线粒体转录因子A在缺血再灌注损伤中的研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)是一种常见的临床综合征, 其病理机制复杂, 涉及多种因素相互作用, 预防和治疗棘手。文献显示, 在IRI的组织和器官中能观察到明显的线粒体损伤, 线粒体DNA拷贝数下降, 且线粒体转录因子A(TFAM)表达水平降低。TFAM是重要的线粒体DNA(mtDNA)结合蛋白, 能够调节mtDNA的转录和复制, 抑制线粒体氧化应激和凋亡, 在IRI治疗中具有重要的应用潜力。本文综述了TFAM的分子生物学特性、功能和信号通路等以期探究TFAM在IRI中的作用机制, 并整理了近几年治疗相关的研究进展, 探讨TFAM作为治疗IRI的靶点的可能性。     

白藜芦醇预处理对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探究白藜芦醇(resveratrol, Res)预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)的影响。方法将42只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组:假手术组(Sham组, 12只)、心肌缺血再灌注损伤组(IR组, 12只)、白藜芦醇组(Res组, 12只)和地尔硫卓组(阳性对照组, 6只)。IR组、Res组和阳性对照组大鼠均采用结扎冠状动脉左前降支30 min再灌注2 h的方法建立MIRI模型, Sham组大鼠只穿线不结扎。建立MIRI模型前, Res组和阳性对照组大鼠连续7 d、每天分别腹腔注射1次Res(20 mg/kg)和地尔硫卓(5 mg/kg), Sham组和IR组大鼠每天腹腔注射1次等容量二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)溶液。4组大鼠于再灌注2 h时取腹主动脉血, 采用ELISA法测定血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme, CK-MB)浓度;取心肌组织测定...     

移植肾缺血再灌注损伤后间质纤维化

本文讨论了缺血再灌注损伤导致移植肾间质纤维化的相关分子机制, 重点是血管功能障碍、上皮细胞和周细胞在这一过程中的作用, 讨论了不同方式的动物实验模型构建及其影响, 并介绍了近年来一些针对这一过程进行预防及治疗的新的方案。     

肝脏缺血再灌注损伤的临床与基础研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)是指器官在缺血的基础上恢复血流后损伤进一步加重甚至发生不可逆性损伤的现象。在临床上IRI常见于肝、脑和肾等实质性器官。其中, 肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏部分切除术和肝移植后肝功能受损甚至肝衰竭的主要原因之一, 其与患者的预后密切相关。HIRI的发生发展涉及多种机制, 而氧自由基的积聚和炎症的改变是主要的病理生理过程。此外, HIRI与双刃剑补体联系紧密。本文主要论述HIRI的基础和临床两方面研究进展, 为HIRI的防治提供理论和实践的参考。     

铁死亡在脂肪肝缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨铁死亡在大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤中的表达及作用。方法:随机数字表法将36只7~8周龄清洁级雄性SD大鼠分为6组：普通饲料(ND)和高脂饲料(HFD)分别喂养的假手术(Sham)、肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)和HIRI联合铁死亡抑制剂(Fer-1)治疗(HIRI+Fer-1)组,每组6只。油红O和苏木精-伊红...     

间充质干细胞减轻肾脏缺血再灌注损伤机制的研究进展

肾脏缺血再灌注损伤是现代重症医学的一大难题, 常见于休克、大手术、创伤和脓毒症等临床环境。传统的支持治疗和血液滤过疗法, 治疗效果欠佳, 长期预后不好。临床前研究结果显示, 间充质干细胞能够减轻肾脏缺血再灌注损伤和促进肾脏修复。间充质干细胞主动归巢至肾脏损伤部位, 通过旁分泌机制, 分泌一系列活性因子和释放细胞外囊泡, 发挥免疫调节、抗纤维化、抗凋亡和调节自噬等效应, 从而促进肾脏损伤修复。本文拟就间充质干细胞减轻肾脏缺血再灌注损伤机制的研究进展进行综述。     

三结构域家族蛋白在器官缺血再灌注损伤中的研究进展

缺血再灌注损伤(I/R)是恢复某些缺血组织器官的血液灌流以及氧供后, 组织损伤不但没有减轻、反而进一步加重的病理过程。心、脑、肺、肾、肝等重要器官I/R发生率高, 致死率高, 严重影响人类健康。三结构域蛋白(TRIM)具有共同的氨基末端三方结构域排列-RING-Bbox1/2-卷曲螺旋(RBCC), 调节各种生物过程。本文系统地总结了TRIM家族蛋白的分类与功能以及其在器官缺血再灌注损伤中的作用机制, 为I/R的诊治提供理论依据。     

脊髓损伤中铁死亡相关基因的生物信息学分析

目的探讨脊髓损伤(SCI)中铁死亡的相关分子机制并分析其生物学功能。方法从基因表达(GEO)数据库搜索并下载SCI相关数据组表达基因芯片数据GSE183591, 从FerrDb数据库下载铁死亡相关基因, 使用Network Analysis分析GSE183591获得差异表达基因(DEGs), 对数据取交集获得铁死亡相关差异表达基因(FRDEGs), 使用David工具进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析, 使用STRING网站构建蛋白与蛋白相互作用网络并通过cytoHubba确定关键基因, 使用CIBERSORT包进行22种免疫细胞浸润分析, 使用Timer 2.0工具进行9种免疫浸润细胞分析。结果共识别42个在1、2、8周共同表达的FRDEGs。GO和KEGG分析结果发现FRDEGs主要在免疫和炎性反应方面富集。STRING分析结果显示, 共有42个节点, 71条边, cytoHubba分析确认了5个中枢调控基因, Toll样受体4(Tlr4)、白细胞介素-1β(IL1b)、转化生长因子1(Tgfb1)、血红素加氧酶1(Hmox1)、Cd44。CIBERS...     

自噬对铁死亡的调控作用及其在肾损伤中的研究进展

自噬是一种通过降解受损的蛋白质、细胞器和胞内病原体等来维持体内平衡的保守生物过程, 它既可以促进细胞生存, 也可以加速细胞死亡。铁死亡是2012年发现的以脂质过氧化和细胞膜损伤为特征的新型调节性细胞死亡方式。在过去的几年里, 越来越多的研究表明自噬和铁死亡之间存在复杂的相互作用。肾疾病发展过程中会受多种细胞死亡途径的调节, 自噬和铁死亡在其中发挥重要作用。然而, 自噬和铁死亡在肾损伤中的潜在联系尚未被认识。本文就自噬对铁死亡的调控作用及其在肾损伤中的可能联系进行阐述, 为急慢性肾损伤的研究提供新的理论支持。     

右美托咪定预处理通过抑制铁死亡减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤

目的探究右美托咪定(dexmedetomidine, Dex)预处理通过抑制铁死亡对小鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)的影响和相关机制。方法健康SPF级雄性C57BL/6小鼠42只, 6～8周龄, 体重23～25 g, 按随机数字表法分为3组(每组14只):假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤组(IR组)、右美托咪定预处理组(Dex+IR组)。Sham组左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery, LAD)只穿线, 不结扎;IR组LAD结扎30 min, 再灌注24 h;Dex+IR组缺血前30 min腹腔注射Dex 25 μg/kg, 手术方法同IR组。伊文蓝和2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC)双染色法检测心肌缺血面积及心肌梗死面积, H-E染色观察心肌组织形态变化, 透射电镜观察心肌组织线粒体超微结构, 比色法检测心肌组织中Fe2+、丙二醛(malondial...     

HIF-PHI减轻炎症反应预防小鼠肾缺血再灌注损伤

目的探讨低氧诱导因子—脯氨酰羟化酶抑制剂(hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor, HIF-PHI)预处理小鼠能否减轻炎症反应, 减少细胞凋亡, 缓解肾脏缺血再灌注损伤。方法将雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(IRI)组、IRI+HIF-PHI组, 每组6只, 其中IRI+HIF-PHI组提前1周隔天灌胃罗沙司他20 mg/kg。建立肾脏缺血再灌注模型后, 检测各组小鼠血清肌酐(sCr)水平;HE染色观察小鼠肾组织病理变化并进行损伤评分;原位末端标记法(TUNEL)评估肾组织细胞凋亡;实时定量逆转录聚合酶链(RT-PCR)反应检测肾脏组织内低氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白介素1β(IL-1β)的mRNA表达水平;免疫荧光及免疫组化分别检测HIF-1α, 炎症因子TNF-α和IL-1β表达情况。结果与IRI组相比, IRI+HIF-PHI组小鼠sCr水平明显降低(P<0.01), 肾组织损伤情况明显改善, 肾小管损伤半定量评分更低(P...     

缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探究缺血预处理(IP)对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用。方法将18只购自湖南斯莱克公司的雄性C57BL/6J小鼠完全随机分为假手术组(Sham), 缺血再灌注组(I/R)和缺血预处理组(IP)3组, 使用肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和Paller评分来判断肾脏损伤程度, 对IRI组和IP组进行转录组测序, 对测序结果进行KEGG聚类分析和蛋白相互作用分析, 并对结果进行定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)验证, 采用t检验进行两组间的比较。结果 IP组损伤低于I/R组, IP组的SCr低于I/R组(141.6±15.38比193.10±10.55, t=6.185, P<0.01)、IP组BUN低于I/R组(39.44±2.44比54.96±6.54, t=4.957, P<0.01), 以及Paller评分IP组低于I/R组(27.12±2.28比43.53±3.34, t=9.084, P<0.01)。测序结果示IP组比I/R组有1 560个差异基因, 其中863个表达升高, 697个降低。KEGG富集...     

自噬在缺血后处理减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的评价自噬在缺血后处理减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用。方法 SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠32只,9～12周龄,体重25～29 g,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(IIR组)、缺血后处理组(IPO组)和缺血后处理+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(IPO+3-MA组)。采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min恢复灌注2 h的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型,IPO组于恢复灌注前3 min给予3个循环灌注30 s,缺血30 s的处理。于再灌注2 h时采集股动脉血样,测定血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸及肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)的浓度,随后处死小鼠取小肠组织,光镜下观察病理学结果并行Chiu评分,计算肠组织含水量;Western blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1和p62的表达。结果与S组比较,IIR组和IPO组Chiu评分升高,血清DAO、D-乳酸和I-FABP的浓度及肠组织含水量升高,肠组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,Beclin-1表达上调,p62表达下调(P<0.05);与IIR组比较,IPO组Chiu评分降低,血...     

脂肪肝在肝移植中的应用前景

肝移植是目前治疗终末期肝病最为有效的方法, 但供体肝的缺乏, 限制了肝移植的发展。随着脂肪性供肝等边缘性供肝使用的增加, 如何使边缘性供肝更好地发挥作用, 成为了新的研究热点。脂肪肝作为供体使用, 虽可缓解受者需求与供者器官短缺之间的矛盾, 但肝移植术后发生早期移植物功能不全的风险也随之增加。在脂肪肝作为供体的肝移植手术中, 应尽可能地应用脂肪样变性程度在中度及以下的供肝, 这样可以降低术后并发症, 并且对于受者恢复也很有利;与此同时术后脂质指标的监测也显得尤为重要, 必要时可加用药物干预, 从而提高移植物功能。     

芹菜素对小鼠肺缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的观察并探讨芹菜素对小鼠肺缺血再灌注(I/R)损伤的影响及机制。方法根据随机数表法, 将40只雄性C57/B6小鼠平均分为假手术组(Sham组)、I/R组、低剂量芹菜素组和高剂量芹菜素组, 每组10只。采用左肺门夹闭1 h, 再灌注2 h的方法构建小鼠肺I/R损伤模型。低剂量芹菜素组和高剂量芹菜素组小鼠分别在肺I/R造模前连续7 d给予芹菜素(10 mg·kg-1·d-1和50 mg·kg-1·d-1)灌胃。再灌注2 h结束后, 留取小鼠肺组织, 通过HE染色评估小鼠肺损伤状况并评分;RT-PCR检测小鼠肺组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、环加氧酶2(PTGS2)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA表达水平;Western blot检测小鼠肺组织Bax、Bcl-2、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、PTGS2和GPX4的蛋白表达。最后, 按处理方式不同, 将处理后的A549肺上皮细胞分为PBS组、缺氧/复氧(H/R)组、H/R+芹菜素组和H/R+芹菜素+莫立司他组。用莫立司他激活HIF-1α后, 进一步观察...     

c-Jun氨基端激酶介导细胞自噬参与肠缺血再灌注肺损伤

目的探讨c-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路活化在肠缺血再灌注(II/R)肺损伤的作用及其机制。方法夹闭6～8周龄雄性SD大鼠肠系膜上动脉[SCXK(京)2016-006]建立II/R肺损伤模型, 首先用随机数据表法将36只大鼠随机分为假手术组(Sham)及肠缺血45 min后再灌注即刻(0)、2、6、8、16 h组(每组6只), 蛋白质印迹法(Western blot)检测II/R肺组织磷酸化JNK(p-JNK)及活化蛋白-1(AP-1)蛋白表达;然后再取24只大鼠随机分为Sham组, II/R+溶剂对照组(II/R), II/R+JNK抑制剂组(JNK-), II/R+JNK激动剂组(JNK+), 每组6只, JNK抑制剂SP600125或JNK激动剂Anisomycin预处理大鼠, II/R后6 h处死大鼠提取肺组织, Western blot方法检测肺磷酸化JNK(p-JNK)、AP-1蛋白水平, 免疫荧光检测自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)及p62表达, 测量肺组织湿/干重比(W/D)及苏木精-伊红(HE)染色显微镜观察肺组织病理性学改变, ...     

小鼠骨髓间充质干细胞通过糖代谢途径减轻肾缺血再灌注损伤

目的探究小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对肾缺血再灌注损伤(IRI)的作用。方法雄性C57BL/6小鼠30只, 根据随机数字法分为6组(每组5只):空白组、常氧BMSC外泌体组、低氧BMSC外泌体组、IRI组、常氧BMSC外泌体+IRI组、低氧BMSC外泌体+IRI组。缺血25 min, 再灌注24 h后行肾脏功能和组织病理检查。另取小鼠30只, 分为三组(IRI组、常氧+IRI组、低氧+IRI组, 每组10只), 观察各组存活率。同时, 检测肾内炎性因子, 巨噬细胞的极化, 糖酵解和氧化磷酸化水平。结果常氧+IRI组小鼠的血肌酐及尿素氮低于IRI组(P<0.05), 且病理损伤轻。IRI组, 常氧+IRI和低氧+IRI组的7 d存活率分别为20%, 50%和80%(P<0.05)。RT-PCR结果示IRI造成肾组织内肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和IL-10的表达水平增加, 而低氧可降低TNF-α、IL-1β、MCP-1(P<0.05), 但升高IL-10(P<0.05)。低氧可促进巨噬细胞向M2型极化, ...     

G9a抑制剂BIX-01294对小鼠肝缺血再灌注损伤的影响及其机制

目的探讨G9a抑制剂BIX-01294在小鼠肝脏缺血再灌注中的影响及潜在机制。方法将雄性C57BL/6J小鼠随机抽样法等分成空白组、缺血再灌注(IR)组、不同剂量BIX-01294预处理组(10、30、50 mg/kg), 每组8只, 连续5 d腹腔注射给药, 空白组及IR组给予等量无菌生理盐水, 药物干预组给予等量药物, 建立肝部分(70%)热缺血再灌注模型(缺血1 h, 再灌注6 h), 实验结束收集小鼠静脉血及缺血肝组织进行检测。结果苏木精-伊红(HE)染色显示, IR组肝小叶结构紊乱, 肝细胞大面积变性坏死;IR+BIX组肝细胞坏死面积减小, 肝组织结构损害较轻。IR+BIX(50 mg/kg)组血清[谷丙转氨酶(ALT):(348.82±95.4) U/L, 谷草转氨酶(AST):(220.7±43.38) U/L]较IR组[ALT:(1 384.96±183.61) U/L, AST:(1 111.39±167.08) U/L]显著下降(P<0.01), 以50 mg/kg效果最佳。与IR组[丙二醛(MDA):(1.76±0.54) nmol/mg prot;超氧化歧...