miR-9通过Wnt/β-catenin信号通路调控甲状腺癌细胞侵袭和迁移的机制研究

目的 探讨miR-9对甲状腺癌细胞侵袭和迁移影响及对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用.方法 采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测miR-9在正常甲状腺上皮细胞系Nthyori3-1和人甲状腺癌细胞系TPC-1、MDA-T32及SW579中的表达情况,采用脂质体转染技术将miR-9 mim...     

AGGF1通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌发生发展

目的 研究G补缀FHA域血管新生因子1（angiogenic factor with G-patch and FHA domain 1,AGGF1）调控Wnt/β-catenin信号通路对结直肠癌细胞（colorectal cancer,CRC）增殖、侵袭和上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）的可能机制。方法 通过裸鼠荷瘤免疫组化法检测AGGF1在正常组织和癌组织中的表达。qRT-PCR和Western blotting检测NCM460、SW620、HT29、HCT116、SW480中AGGF1的mRNA和蛋白表达水平。于HCT116细胞中过表达AGGF1,分为Vector组和AGGF1组;于SW620细胞中敲减AGGF1,分为shControl组和shAGGF1组。CCK-8法和克隆形成试验测定细胞活性和细胞克隆数目。划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭情况。免疫荧光检测细胞E-cadherin、N-cadherin的表达。Western blotting检测细胞E-cadherin、N-cadherin、AGGF1、β-catenin、糖原合酶激酶-3β （glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β）、p-GSK-3β蛋白表达水平。结果 AGGF1蛋白表达在CRC组织中明显增高。AGGF1 mRNA和蛋白表达水平在HCT116细胞中最低,在SW620细胞中最高。CCK-8法、克隆形成试验、划痕试验和Transwell试验结果显示,在HCT116细胞中,与Vector组比较,AGGF1组48,72,96 h细胞活性、克隆细胞数目、相对迁移距离、侵袭细胞数显著增加（P<0.05或P<0.01）;而在SW620细胞中,与shControl组比较,shAGGF1组结果相反（P<0.05或P<0.01）。免疫荧光和Western blotting检测结果显示,与Vector组比较,AGGF1组E-cadherin荧光表达和蛋白表达水平降低（P<0.01）,N-cadherin增强（P<0.05或P<0.01）,同时上调AGGF1、β-catenin、p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达（P<0.01）;与shControl组比较,shAGGF1组E-cadherin荧光表达和蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,N-cadherin显著降低（P<0.05或P<0.01）,同时下调AGGF1、β-catenin、p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达（P<0.05或P<0.01）。结论 AGGF1可通过激活Wnt/β-catenin信号通路异常表达,上调β-catenin、p-GSK-3β、N-cadherin表达,下调E-cadherin表达,促进CRC细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,从而促进CRC发生发展。     

白藜芦醇通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞生长的研究

目地探讨白藜芦醇抗肿瘤活性的作用机制。方法本研究使用白藜芦醇处理体外培养结肠癌细胞系HCT116后,通过细胞生长实验和MTT增殖实验来探讨其对HCT116细胞生长、增殖的影响;通过免疫印迹实验检测β-catenin的表达水平和Wnt信号通路靶基因c-Myc和cyclinD1的表达,检测白藜芦醇对Wnt信号通路活化的影响。结果白藜芦醇能显著抑制HCT116的生长增殖,降低β-catenin的表达水平,抑制Wnt信号通路靶基因c-Myc和cyclinD1的表达。结论白藜芦醇通过抑制Wnt信号通路从而抑制肿瘤生长,本研究为白藜芦醇抗肿瘤机制提供了新的思路和方向。     

芹菜素调控Wnt信号通路对卵巢癌细胞侵袭能力的影响

目的　探讨芹菜素对Wnt/β-catenin 信号通路的调控及其对卵巢癌细胞侵袭能力的影响。方法　在经芹菜素处理的人卵巢癌细胞系HO8910 中,通过实时PCR 和Western blot 检测Wnt/β-catenin 通路相关蛋白及下游蛋白的表达;采用Transwell 法检测细胞体外迁移和侵袭能力;利用Luciferase 双荧光素酶报告系统检测Wnt/β-catenin 通路的活化情况。结果　芹菜素作用24 h 能够有效抑制HO8910 细胞的迁移和侵袭能力,降低β-catenin 和E-catenin 的mRNA 相对表达量和蛋白表达水平。芹菜素对Wnt/β-catenin 信号通路中相关蛋白及下游靶蛋白具有调控作用（P<0.0001）。结论　芹菜素可以通过抑制人卵巢癌细胞中Wnt/β-catenin 信号通路,下调促转移靶蛋白的表达,抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力。     

小白菊内脂通过wnt/β-catenin影响胃癌细胞侵袭、迁移、凋亡的机制研究

目的 研究小白菊内酯对胃癌细胞的侵袭、迁移和凋亡的影响.方法 采用终浓度为10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L的小白菊内酯处理胃癌细胞SGC-7901、SNU-1作为不同浓度小白菊内酯处理组,以0μmol/L小白菊内酯处理的SGC-7901、SNU-1细胞作对照(control)组;用...     

Wnt/β-catenin信号通路在复发性流产的研究现状

复发性流产是育龄期女性的常见疾病,严重影响女性的生活情况及家庭幸福。复发性流产是临床常见病、疑难病,病因至今仍不明确。Wnt/β-catenin信号通路是最经典的Wnt信号通路,参与众多的生命活动与进程,能够影响细胞的增殖、迁移、侵袭等行为,众多研究表明Wnt/β-catenin信号通路参与了复发性流产的发病。本文主要从滋养细胞的增殖、侵袭和侵袭、胎盘的血管生成及子宫内膜的蜕膜化对Wnt/β-catenin信号通路在复发性流产的发病机制进行综述。     

基于Wnt/β-catenin信号通路的中医药防治骨质疏松症研究进展

目的 为中医药防治骨质疏松症提供参考。方法 以“Wnt/β-catenin信号通路”“骨质疏松症”“中医药”为关键词,检索国内外数据库中相关文献,分别探讨骨质疏松症的发病机制、Wnt/β-catenin信号通路与骨质疏松症的关系及中医药基于Wnt/β-catenin信号通路防治骨质疏松症的研究进展。结果 Wnt/β-catenin信号通路与骨质疏松症的发生密切相关。现阶段关于中医药防治骨质疏松症的研究较广泛,组方中应用频次较高的中药包括熟地黄、淫羊藿、黄芪、骨碎补、补骨脂,其中大部分被证实可通过调控Wnt信号通路或下游靶基因表达促进骨形成和骨矿化。结论 以Wnt/β-catenin信号通路为切入点研究骨质疏松症的防治,可为该病的中医药治疗和中药研发提供一定的理论依据。     

Wnt/β-catenin信号通路抑制剂的抗肿瘤研究进展

Wnt信号通路广泛存在于多细胞真核生物中,并且高度保守,在胚胎发育过程中起到重要作用。大量研究表明,Wnt信号通路的异常激活与肿瘤的发生发展密切相关,其在多种恶性肿瘤的增殖、分化、凋亡、迁移、侵袭、上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)及肿瘤干细胞特性中发挥重要作用,因此开发靶向Wnt信号通路的抗肿瘤药物具有重要意义。目前,Wnt信号通路抑制剂的研究已取得一定进展。本文主要对近年来Wnt途径中关键成员Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。     

SFRP1通过抑制Wnt/β-catenin通路促进心肌细胞增殖的分子机制

目的 探讨SFRP1是否通过抑制Wnt/β-catenin通路促进心肌细胞增殖。方法 选取c57BL/6雄性小鼠18只,出生后1 d、7 d及28 d的c57BL/6小鼠各6只分为3组,分离和提取心肌组织,检测心肌组织中SFRP1的mRNA及蛋白表达水平。利用出生后1 d的乳鼠心脏培养小鼠原代心肌细胞,予SFRP1-shRNA慢病毒转染细胞,免疫荧光检测心肌细胞增殖标志物Ki67和PH3表达变化,Western blot检测胞浆β-catenin蛋白表达变化。结果 SFRP1 mRNA和蛋白水平在小鼠出生后逐渐下降(P<0.05)。转染SFRP1-shRNA慢病毒后,SFRP1蛋白表达水平均下降(P<0.05),其中shRNA-2干扰效果最好。与空载组相比,shRNA组细胞Ki67和PH3表达下降,同时胞浆β-catenin蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 SFRP1通过抑制Wnt/β-catenin信号通路促进心肌细胞增殖。     

Wnt/β-catenin信号通路在低氧促进hBMSCs体外增殖中的作用

目的 探讨持续低氧环境对入骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)体外增殖的影响,并初步探讨Wnt/β-catenin信号通路在其中的作用.方法 将购自江阴齐氏生物科技有限公司第2代hBMSCs进行传代、纯化,取第4代hBMSCs进行流式细胞仪检测鉴定;根据培养条件不同分为常氧组(20％氧浓度)和低氧组(3％氧浓度);CCK-8法测定各组生长曲线;采用RT-PCR检测Wnt/β-catenin信号通路关键组件β-catenin、cyclinD1 mRNA表达水平;Western blot检测β-catenin、P-β-catenin蛋白表达水平.结果 第4代hBMSCs流式鉴定结果显示:骨髓基质标志CD90表达为98.7％,而造血细胞标志CD19表达为0.3％;与常氧组比较,低氧组增殖速率更快,β-catenin、cyclinD1 mRNA表达升高(P＜0.05),β-catenin蛋白表达升高(P＜0.05),P-β-catenin蛋白表达下降(P＜0.05).结论 持续低氧环境可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路而促进hBMSCs体外增殖.