膈下逐瘀汤联合环磷酰胺对EAC肝癌小鼠细胞凋亡影响的实验研究

[目的]研究膈下逐瘀汤联合环磷酰胺对小鼠EAC肝癌细胞的抗癌作用及机制。[方法]40只小鼠,皮下注射浓度为2.0×106/mL的EAC肝癌小鼠细胞株0.2 mL/只,分别给予膈下逐瘀汤、环磷酰胺、膈下逐瘀汤联合环磷酰胺处理小鼠,10d后处死小鼠计算抑瘤率;HE染色下观察肿瘤细胞形态学改变。[结果]膈下逐瘀汤联合环磷酰胺抑制肿瘤作用最明显,其抑瘤率为38.65%。中西联合用药能有效的诱导肿瘤细胞凋亡。[结论]膈下逐瘀汤联合环磷酰胺对EAC肝癌小鼠细胞有明显的抑瘤作用,其抑制肿瘤的机制可能是诱导肿瘤细胞的凋亡。     

小柴胡汤联合5-氟尿嘧啶治疗Hca—f肝癌小鼠实验研究

[目的]研究中医经典方剂小柴胡汤（以下简称xcht）联合化疗药物5-氟尿嘧啶（以下简称5-Fu）对小鼠Hca—f肝癌的抑瘤作用及其免疫作用机制。[方法]无菌条件下抽取Hca—f腹水为瘤源,用生理盐水稀释为4x10。个瘤细胞／mL,每鼠予0．2mL于其右侧腋窝皮下接种。24h后随机分成单纯肿瘤组、xcht组、5-Fu组、xcht＋5-Fu组,给药10天后,处死小鼠,剥离并称量瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察肿瘤细胞的形态;电镜下观察凋亡小体。[结果]xcht能抑制Hca—f小鼠体内肿瘤的生长,并能提高5－Fu对Hca—f肝癌小鼠的疗效。[结论]小柴胡汤与5－Fu联合用药对小鼠体内Hca—f肝癌细胞的生长有较好抑制作用,且疗效优于单独用药。     

小柴胡汤联合环磷酰胺对腹水瘤细胞株肝癌小鼠肿瘤间质血管生成影响随机平行对照研究

[目的]观察小柴胡汤联合环磷酰胺对腹水瘤细胞株(EAC)肝癌小鼠体重、肿瘤间质血管生成影响。[方法]使用随机平行对照方法,将40只昆明小鼠,采用完全随机化分组方法分为模型组、中药组、西药组、联合组,每组10只。各组皮下注射浓度为2.0×106/ml的EAC肝癌小鼠细胞株0.2ml/只造模,分别给予小柴胡汤、环磷酰胺、小柴胡汤+环磷酰胺灌胃。免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)表达、光镜下观察形态学改变,透射电镜观察肿瘤组织血管生成。[结果]中药组、西药组、联合组VEGF阳性表达,瘤组织内的VEGF蛋白表达阳性率和平均染色强度均低于模型组(P<0.01),联合组最明显。光镜下显示:中药组、西药组、联合组肿瘤间质毛细血管数量均减少,联合组最为明显,中药组次之。电镜下显示:中药组、联合组都可以破坏肿瘤组织内新生毛细血管结构,联合组破坏最严重。[结论]小柴胡汤联合环磷酰胺可降低EAC肝癌小鼠瘤组织中VEGF蛋白表达;、抑制肿瘤间质血管生长。     

小柴胡汤诱导荷瘤小鼠S_(180)细胞凋亡及对细胞周期的影响

目的探讨小柴胡汤SRBD对荷瘤小鼠S180的抑瘤作用及可能机制。方法通过体内实验,观察不同浓度SRBD对小鼠肉瘤S180的抑制作用,用流式细胞仪(FCM)检测法研究SRBD诱导肿瘤细胞凋亡以及对肿瘤细胞周期的影响。结果SRBD中、小剂量组中SRBD对荷瘤鼠S180细胞有明显抑制作用,各剂量组SRBD均可诱导荷瘤鼠S180细胞凋亡,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);SRBD中、小剂量组S期细胞数明显减少(P<0.05),G0/G1期细胞数明显增加(P<0.05),S180细胞增殖指数明显下降(P<0.05)。结论SRBD对小鼠肉瘤S180的生长具有抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡及抑制癌细胞增殖周期有关。     

红三叶联合环磷酰胺对小鼠宫颈癌U14作用的实验研究

目的观察红三叶联合环磷酰胺对小鼠宫颈癌细胞系U14的作用。方法将U14瘤液接种在小鼠右前肢腋下,然后随机分为对照组、环磷酰胺组、红三叶低剂量组、红三叶中剂量组、红三叶高剂量组、红三叶低剂量+环磷酰胺组、红三叶中剂量+环磷酰胺组,对照组给予羧甲基纤维素钠,其余组给予相应药物灌胃及腹腔注射给药。给药6 d,每天观察各组小鼠饮食、精神、活动情况及瘤体生长情况,第10天称取小鼠体质量,脱椎处死,取瘤块称质量,计算抑瘤率及两药相互作用系数(CDI和Q值),光镜观察肿瘤组织病理学改变,TUNEL方法检测细胞凋亡情况。结果对照组小鼠肿瘤结节最明显,生长速度也最快。红三叶高剂量组、红三叶低剂量+环磷酰胺组、红三叶中剂量+环磷酰胺组对U14荷瘤小鼠的抑瘤率均达到了有效标准,同时单用红三叶的药物剂量不能小于400 mg/kg。红三叶促宫颈癌U14细胞的凋亡作用随着药物剂量的增加而明显,红三叶中剂量+环磷酰胺组促凋亡作用优于环磷酰胺组,两药联用具有协同作用。结论红三叶对U14荷瘤小鼠有抑瘤作用,以红三叶与环磷酰胺联用效果最明显,提示红三叶与环磷酰胺联用作为临床治疗宫颈癌的辅助药物值得关注。     

小柴胡汤对免疫抑制小鼠细胞因子影响的研究

目的：观察小柴胡汤对免疫抑制小鼠免疫相关因子的影响。方法：取健康昆明鼠90只,按照随机分组的原则分为5组：设正常对照组和治疗组,治疗组分为模型对照组和小柴胡汤低、中、高剂量组,每组18只。正常对照组腹腔注射生理盐水1mL/d,同时用生理盐水经食道灌胃0.3mL/d;治疗组用环磷酰胺腹腔注射（100mg/kg/d[1]）,模型对照组同时用生理盐水经食道灌胃0.3mL/d;低、中、高剂量组同时分别用小柴胡汤0.3mL/d（剂量为10g/kg、20g/kg、40g/kg）经食道灌胃,连续7d。末次给药后测量体重,摘眼球取血,分离血清,用ELISA法测定血清TNF-α、IL-2、IL-6含量;分离胸腺并测定重量,计算胸腺指数。结果：与模型对照组比较,小柴胡汤高、中、低剂量组胸腺指数均有显著升高（P〈0.01）;小柴胡汤高剂量组TNF-α有显著升高（P〈0.05）;小柴胡汤高、中、低剂量组IL-2均有显著升高（P〈0.01）;小柴胡汤高、中剂量组IL-6均有显著升高（P〈0.01）。结论：小柴胡汤能够拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用,对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的胸腺指数有明显的提高作用;能够升高免疫抑制小鼠血清IL-2、IL-6及TNF-α的水平,其中小柴胡汤中、高剂量组效果更显著。     

小柴胡汤诱导内异症异位内膜细胞凋亡的研究

目的探讨小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜细胞凋亡的影响。方法建立大鼠内异症模型,采用透射电镜技术及免疫组化方法,观察小柴胡汤对异位内膜细胞形态结构和Fas及Caspase-3蛋白表达的影响。结果中、高剂量小柴胡汤(10,15 g.kg-1.d-1)治疗后,异位内膜有较多腺上皮细胞出现凋亡的特征,表现为细胞体积变小,核固缩,胞浆和核染色质凝集,密度增高,细胞间凋亡小体,同时间质细胞中可见一些坏死细胞;异位内膜Fas蛋白、Caspase-3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜。结论小柴胡汤可通过上调Fas蛋白的表达,诱导异位内膜细胞的凋亡。     

日本对小柴胡汤的实验研究

日本对小柴胡汤的实验研究张家口市２５１医院（０７５０００）陈敬然小柴胡汤由柴胡、黄芩、人参、半夏、甘草、生姜、大枣组成。主治＂往来寒热，胸胁苦满，嘿嘿不欲饮食，心烦喜呕，口苦，咽干，脉弦。＂近年来，该方引起了国外学者的广泛重视，并进行了研究。１增强免...     

三叶青黄酮诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 观察三叶青黄酮对SMMC-7721肝癌细胞诱导凋亡的作用.方法 通过四氮噻唑蓝(MTT)比色法检测三叶青黄酮对细胞的抑制增殖作用;光学显微镜、荧光显微镜下形态学观察;DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪(FCM)研究分析三叶青黄酮对肝癌细胞的诱导凋亡作用.结果 三叶青黄酮能显著的抑制SMMC-7721肝癌细胞的生长,并具有浓度依赖性.光学显微镜、荧光显微镜下观察,发现细胞凋亡现象;DNA琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯形条带;流式细胞仪(FCM)检测分析出现凋亡亚二倍体峰.结论 三叶青黄酮对肝癌细胞具有诱导凋亡作用,有抗肝癌的药用价值.     

小柴胡汤对人食管癌细胞株Eca-109增殖和凋亡的影响

目的通过使用中药小柴胡汤作用于人食管癌细胞株Eca-109,研究其抗肿瘤的作用机制;方法分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、Hoechst33342染色法以及流式细胞仪检测法,观察小柴胡汤对Eca-109细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。结果经不同溶度小柴胡汤处理后Eca-109细胞株,其生长明显受到抑制。MTT比色法结果说明小柴胡汤对Eca-109细胞株的增殖能起到明显抑制,流式细胞仪检测方法所检测出结果说明Eca-109细胞株的细胞周期G0/G1期细胞明显增多,S期细胞显著减少。结论本研究证实小柴胡汤在体外具有抗肿瘤作用,与其阻断细胞周期、增殖抑制和凋亡诱导有关。     

厚朴酚调控人小细胞肺癌H446细胞凋亡的机制研究

目的:探讨厚朴酚对人小细胞肺癌H446细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养人小细胞肺癌H446细胞,经不同浓度和不同时间的厚朴酚作用后,应用MTT法检测厚朴酚对H446细胞增殖的影响;采用流式细胞仪罗丹明123染色法检测线粒体膜电位的改变;蛋白印迹方法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:厚朴酚可呈时间剂量依赖性抑制H446细胞增殖,诱导线粒体膜电位的下降,免疫印迹结果显示Bcl-2的表达降低,Bax、Cyto.c和活化pro-caspase 9的表达增加。结论:厚朴酚可显著抑制H446细胞增殖,介导线粒体途径的细胞凋亡。     

精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的抑制作用

目的探讨精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的抑制作用。方法 40只SPF级SD雄性大鼠随机分成5组:正常组、模型组、精杞低剂量组[500 mg/(kg·d)]、精杞高剂量组[1 000 mg/(kg·d)]和丙酸睾酮组[5 mg/(kg·d)],每组8只。给药组用药14 d后,除正常组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺25 mg/(kg·d)连续5 d,造模期间各给药组延续给药,造模结束后次日处死全部大鼠。HE染色法观察睾丸组织形态;透射电镜观察生精细胞超微结构;ELISA法检测血清睾酮(T)、卵泡生成素(FSH)和黄体生成素(LH)含量及附睾管腔液中唾液酸(SA)的含量;流式细胞仪分析精子细胞凋亡和细胞周期。结果与正常组比较,模型组睾丸曲精细管内各级生精细胞含量较少,结构杂乱,生精细胞核崩解、坏死,线粒体肿胀空泡化,嵴断裂,高尔基复合体结构紊乱。与模型组比较,各给药组病理减轻。与正常组比较,模型组大鼠T、FSH、LH、SA含量及各期细胞存活率、G₁期细胞比例降低,凋亡率及S期细胞比例增加(P<0.01)。与模型组比较,给药组T、FSH、LH、SA含量及各期细...     

附子提取物对移植性肝癌H22细胞凋亡影响的实验研究

目的:研究附子提取物抗移植性肝癌H22的作用机制,并探讨与环磷酰胺是否具有增效协同作用.方法:建立移植性肝癌H22模型,随机分组,腹腔注射给药,观察各组抑瘤效应,检测TNF-α、NF-κB及Caspase-3表达.结果:附子提取物能显著抑制肝癌移植瘤的生长(P＜0.05),与环磷酰胺合用可显著抑制移植瘤生长(P＜0.01),有协同作用(q＞1);附子提取物可显著促进移植瘤TNF-α和Caspase-3表达,抑制NF-κB表达(P＜0.05),合用环磷酰胺可极显著促进TNF-α和Caspase-3表达、抑制NF-κB表达(P＜0.01).结论:附子提取物具有确切的抑瘤作用,其效应机制可能与活化细胞凋亡信号传导通路,诱导肿瘤细胞凋亡有关,并与环磷酰胺有协同增效作用.     

志苓胶囊对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖抑制和诱导凋亡的影响

目的研究志苓胶囊（ZLJN）对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖影响及诱导凋亡作用。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成分配制成不同浓度的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,采用MTT比色法、集落形成试验,分别检测细胞存活率和集落形成率。通过流式细胞仪进行DNA倍体分析、Bcl-2蛋白表达、线粒体跨膜电位及Caspase-3活性检测;DNA片段化分析法、Annexin V-FITC标记法、TdT酶介导的原位缺口末端标记法（TUNEL）检测凋亡细胞。结果不同浓度的药物组与NCI-H446共培养后,细胞生长明显受抑制,细胞集落形成率明显降低,呈浓度依赖性;各药物组处理后的细胞线粒体跨膜电位和Bcl-2蛋白表达水平下降,Caspase-3活性增强;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯形带;各药物组均检测到明显的亚二倍体G1峰（凋亡峰）;Annexin V-FITC法检测到早期凋亡细胞;TUNEL法检测到晚期凋亡细胞。复方组诱导细胞凋亡作用强于中药组和西药组。结论志苓胶囊可以有效抑制NCI-H446细胞增殖,诱导其凋亡,细胞线粒体跨膜电位水平降低,Caspase-3活性增强和Bcl-2表达下调可能参与了该过程。     

补肺解毒汤对气阴两虚型肺癌患者化疗的增效减毒作用

目的:观察补肺解毒汤加减联合化疗治疗中晚期气阴两虚型非小细胞肺癌患者的临床疗效。方法:将70例中晚期气阴两虚型非小细胞肺癌患者按照随机数字表法分为治疗组35例和对照组35例,对照组采用化疗治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用补肺解毒汤治疗,治疗4个周期后,观察两组临床疗效,Karnofsky功能状态评分标准(KPS)评分、骨髓抑制情况、免疫功能改善、毒副反应情况。结果:补肺解毒汤联合化疗组和化疗组总有效率分别为85.72%,62.86%,补肺解毒汤联合化疗组近期疗效明显优于化疗组,呈显著性差异(P<0.05);补肺解毒汤联合化疗组和化疗组患者生活质量提高率分别为62%,33.33%,补肺解毒汤联合化疗组明显优于化疗组,呈显著性差异(P<0.05);补肺解毒汤联合化疗组出现外周血象异常情况明显低于化疗组,具有显著性差异(P<0.05);补肺解毒汤联合化疗组和化疗组治疗前后比较,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+和自然杀伤(NK)细胞活性等免疫指标均呈现不同程度的显著性差异(P<0.05),补肺解毒汤联合化疗组比化疗组免疫力明显提高;与化疗组比较,补肺解毒汤联合化疗组不良反应发生率明显低于对照组,呈显著性差异(P<0.05)。结论:补肺解毒汤为基础方加减联合化疗药物治疗气阴两虚型中晚期非小细胞肺癌能有效缓解患者临床症状,减轻患者化疗的毒副反应,提高机体免疫力,改善生活质量等方面起协同作用,在临床可以广泛应用。     

健脾润肺解毒汤联合西药治疗晚期非小细胞肺癌随机平行对照研究

[目的]观察健脾润肺解毒汤联合西药治疗晚期非小细胞肺癌疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将50例门诊及住院患者按抽签法分为两组。对照组25例单纯NP方案,顺铂35mg/m2,1次/d,第1、2d静滴;长春瑞滨25mg/m2,1次/d,第1、8d静滴。治疗组25例健脾润肺解毒汤(黄芪30g,党参20g,生白术、茯苓各15g,北沙参、麦冬、天门冬、百合各20g,白英30g,三叶青20g,半枝莲30g,壁虎3条,甘草10g),1剂/d,水煎500mL,早晚口服;西药治疗同对照组。连续治疗21d为1疗程。观测临床症状、生活质量改善情况、不良反应。连续治疗2疗程,判定疗效。[结果]治疗组完全缓解5例,部分缓解10例,稳定8例,进展2例,总有效率60.00%。对照组完全缓解0例,部分缓解7例,稳定12例,进展6例,总有效率28.00%。治疗组疗效优于对照组(P0.05)。生活质量改善情况治疗组优于对照组(P0.05)。[结论]健脾润肺解毒汤联合西药治疗晚期非小细胞肺癌效果显著,值得推广。     

地榆升白片对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制的拮抗作用

目的:观察地榆升白片对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用.方法:Balb/C小鼠24只随机分为空白对照组、模型组、地榆升白片组.腹腔注射环磷酰胺100 mg· kg-1建立骨髓抑制模型,地榆升白片组按100 mg·kg-1灌胃,给药10d.观察地榆升白片对模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞数、骨髓中DNA含量的影响,流式细胞术检测骨髓中各时相细胞周期百分比.结果:模型组小鼠外周血白细胞数、血小板数、骨髓有核细胞数以及骨髓中DNA含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01);骨髓细胞周期中G0/G1期细胞百分比显著增高,G2/M期细胞百分比显著降低(P＜0.05或P＜0.01).地榆升白片可以显著增加模型小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数及骨髓中DNA含量,恢复骨髓中各期细胞百分比(P＜0.05或P＜0.01).结论:地榆升白片对环磷酰胺致骨髓抑制有显著的改善和恢复作用.     

红花桑寄生总黄酮提取物选择性抑制人源肿瘤细胞增殖和诱导凋亡

目的 观察红花桑寄生总黄酮提取物（Nispex）的体外抗肿瘤效果。方法 应用MTT法研究Nispex对人及小鼠多种肿瘤细胞和非肿瘤细胞增殖的抑制效果, 采用细胞集落培养法研究Nispex对人源肿瘤细胞中增殖细胞群的影响;采用AO/EB荧光染色、末端原位标记（TUNEL）法以及AnnexinV流式细胞术检测细胞凋亡。结果 Nispex能显著抑制人源肿瘤细胞增殖和诱导人源肿瘤细胞凋亡, 对肿瘤细胞中的增殖细胞群作用更为敏感。但Nispex对人源非肿瘤细胞的抑制作用不明显, 对鼠源细胞在检测浓度范围内未见有作用。结论 Nispex是一种对人源肿瘤细胞具有良好选择性的天然植物提取物。