海马神经元的老龄性改变及人参皂甙对其作用的研究

观察老龄大鼠海马ＣＡ：区神经元超微结构的改变以及人本皂甙对其改变的影响。结果表明：老龄大鼠海马ＣＡ３区神经元内脂褐素含量增加，线粒体等细胞器出现明显变性改变，同时可见突触变性；并出现髓样体和膜性结构等异常改变。而投与人参皂甙的老龄大鼠给药组与对照组相比，海马ＣＡ３区神经元上述结构的改变均见明显减轻。提示人参皂甙具有稳定神经元膜系统，促进蛋白质合成，延缓神经元衰老的作用。     

人参皂甙Rg1,Re对β—淀粉样蛋白诱导原代培养海马及皮质神经元损伤的保护

目的：研究人参皂甙Ｒｇ１,Ｒｅ对β－淀粉样蛋白（β－ＡＰ）诱导原代培养海马及皮质神经元损伤的影响。方法：测定神经元细胞培养上清中的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放度来检测细胞的受损程度。结果：经终浓度为０．４μｍｌ／Ｌ的β－ＡＰ诱导损伤１２ｈ,神经元细胞培养上清中的ＬＤＨ释放度明显升高;人参皂甙Ｒｇ１,Ｒｅ在１０,２０μｍｏｌ／Ｌ浓度时均能使ＬＤＨ的释放度显著减少。结论：两种人参皂甙在一定剂量范围内能对抗β－ＡＰ诱导的神经元损伤,表现出对神经元一定程度的保护作用。     

赤上茯苓苷对小鼠海马CA1区神经元的缺血再灌注损伤的保护 …

研究赤土苓苷（Ｓｍｉｇｌａｂｒａｎ,Ｓｍｉ）对小鼠海马ＣＡ１区神经元的缺血再灌注损伤的保护作用。方法：深用结扎双侧颈总动脉造成小鼠脑缺血再灌注损伤,分别观察了不同再灌注时间（１、３、５ｄ）小鼠的存活率及海马ＣＡ１区神经元的普通病理改变,同时观察了赤土茯苓苷上述改变的影响。结果：Ｓｍｉ１００、２００ｍｇ／ｋｇ能明显提高脑缺血后再灌注３ｄ、５ｄ小鼠的存活率,脑缺血再灌注的早期,海马ＣＡ１区神经元数目及     

大鼠下丘脑神经元突触的老龄性改变及人参皂甙对其影响的研究

在电子显微镜下观察老龄大鼠下丘脑视上核（ＳＯＮ），室旁核（ＰＶＮ），弓状核（ＡＲＮ）神经元突触超微结构的改变及人参皂甙对这些改变的影响。结果：老龄组各核团神经元的突触发生两方面变化，其一，突触前后膜致密物变薄，突触连接间断、缩短，突触呈“Ｓ”样弯曲；人参皂甙组，前三种改变明显减少，而未见突触呈“Ｓ”样弯曲。第二，突触小泡大小不等、数量减少、聚积、小泡远离突触前膜，轴突终末大颗粒囊泡减少；人参皂甙组     

糖尿病性高血糖对大鼠缺血性脑损伤的影响

目的：研究糖尿病性高血糖（ＨＧ）对大鼠缺血性脑损伤的影响。方法：链脲佐菌素引起糖尿病４周的大鼠遭受１０ｍｉｎ前脑缺血,观察脑损伤的病理改变。结果：在海马ＣＡ１和下脚区,ＨＧ组与正常血糖（ＮＧ）组神经元损伤程度相似。然而,ＨＧ组动物有严重的顶叶皮质神经元坏死和“额外脑结构损伤”。结论：糖尿病高血糖大鼠缺血后脑损伤明显加重。     

急性脑缺血大鼠边缘系统谷氨酸及其受体对下丘脑垂体肾上腺轴的影响

目的观察脑缺血／再灌流过程中海马和下丘脑的谷氨酸、谷氨酸受体（ＧｌｕＲ）的变化特征及其对下丘脑－垂体－肾上腺轴（ＨＰＡ）活动的影响。方法应用高效液相色谱、受体的放射配体结合分析、核酸原位杂交、放射免疫分析分别监测大脑中动脉闭塞大鼠海马和下丘脑的谷氨酸含量、促皮质释放激素（ＣＲＨ）信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）表达水平、血浆促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）浓度变化。结果动脉闭塞１５分钟，下丘脑、海马两部位的谷氨酸含量迅速增加，缺血１小时达高峰，复流后迅速回落至基线水平；再灌流２４小时再次中度升高，并持续至４８小时后缓慢回降。缺血期海马、下丘脑的ＧｌｕＲ下调，再灌流期呈现典型的上向同种特异性正向调节。缺血１小时颞皮质，海马、下丘脑等区ＣＲＨｍＲＮＡ表达明显活跃，并持续至再灌流９６小时，血浆ＡＣＴＨ浓度同步升高。再灌流损伤高峰期下丘脑谷氨酸含量与ＣＲＨｍＲＮＡ阳性表达细胞数、血浆ＡＣＴＨ浓度间均呈显著正相关。结论谷氨酸参与了急性脑缺血特定条件下ＨＰＡ的异常活动，可能是一个重要的触发因子     

川芎嗪对新生鼠缺血缺氧脑损伤FOS蛋白表达的影响

目的：研究实验性大鼠缺血缺氧脑损伤（HIBD）时FOS蛋白的表达及川芎嗪对FOS蛋白表达的作用。方法：采用7日龄SD新生鼠结扎左侧颈总动脉并进行缺氧，制备HIBD模型，应用免疫组化方法观察川芎嗪对HIBD新生鼠海马和皮质部位FOS蛋白表达的影响。结果：生理盐水对照组海马、皮质部位FOS表达明显增强；经川芎嗪干预后，HIBD新生鼠海马、皮质FOS蛋白表达均显著降低（P＜0．05）。结论：提示川芎嗪可抑制缺血缺氧脑损伤FOS蛋白的表达，对HIBD具有保护作用。     

大鼠海马突触发育可塑性研究

目的：观察大鼠海马ＣＡ１区突触发育的超微结构,提出其突触发育可塑性的形态学特征和参考突触数密度。方法：采用连续超薄切片,观察突触发育的形态特征,结合体视学ｄｉｓｅｃｔｏｒ法测量突触总体及穿孔突触数密度。结果：突触生后发育过程中,形态具有复杂的三维结构,穿孔突触的突触接触区曲面凸向突触前区域,２０日龄曲度大于３０日龄。可见突触小泡偏侧分布现象。２０日龄突触后致密物质比３０日龄组厚,均可见Ｔｔｅｒｍｉｎａｌｓ和Ｃｔｅｒｍｉｎａｌｓ两种类型突触下致密小体分布。海马ＣＡ１区生后２０至３０日龄突触数密度增加。结论：穿孔突触接触面曲度较大,并凸向突触前区域,突触后致密物质较厚,可见突触下致密小体,均可作突触发育和可塑性突触的形态特征。     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤线粒体形态观察及定量研究

观察及定量分析新生鼠缺氧因性脑损伤时脑选择性易损区海马ＣＡ１区锥体细胞线粒体形态改变。制备新生鼠缺氧缺血性服损伤模型，电镜观察，生物体视学测量线粒体形态。缺氧缺血性脑损伤时线粒体肿长，嵴溶解，断裂和消失。线粒体平均截面周长和平均截面积增加；比表面，嵴膜宽度及平均截线长减少。缺氧缺血性脑损伤时线粒体形态发生显变化。     

毛冬青甲素对脑细胞缺氧损伤的保护及其机制的实验研究

以刺激海马脑片ＣＡ３区ｓｃｈａｆｆｅｒ侧支诱发ＣＡ１区的电位变化为指标，观察脑片在缺氧、复氧过程中群锋电位的变化，研究毛冬青甲素对其影响及谷氨酸在其中所起的作用，实验结果表明，ＩＡ能明显延长ＰＳ幅值在缺氧时开始减小和消失的时间；明显降低缺氧损务电位出现率和提高复氧后ＰＳ的恢复率；明显对抗Ｇｌｕ对ＰＳ幅值的抑制性影响。提示ＩＡ对大鼠海马脑片缺氧损伤具有明显保护作用，其作用机制对抗Ｇｌｕ的神经毒性作用     

人参皂甙对培养大鼠皮层神经细胞O_2~-和H_2_O_2损伤的保护作用

目的：研究人参皂甙对培养大鼠皮层神经细胞自由基损伤的保护作用。方法：应用O-2和H2O2对培养大鼠皮层神经细胞损伤模型。结果：与损伤组比较，人参皂甙保护组的乳酸脱氢酶（LDH）释放量显著减少（P<0．01）；而细胞存活率显著增高（P＜0．01）。结论：人参皂甙能保护培养大鼠皮层神经细胞少受自由基损伤。     

兴奋性氨基酸拮抗剂对离体皮质神经细胞缺氧损伤的保护作用

近年来，许多研究的结果显示，兴奋性氨基酸谷氨酸，天冬氨酸等通过其受体介导了缺氧，缺血性脑损伤，同时兴奋性氨基酸受体拮抗剂对缺氧，缺血性脑损伤有一定的保护作用，本文研究了离体培养的小鼠皮层神经细胞的缺氧模型，并观察缺氧和兴奋性氨基酸受体激动剂Ｎ－甲基Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）对神经细胞的损伤作用，同时应用兴奋性氨基酸ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＣＰＰ，Ｋｅｔ，及非ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＮＢＱＸ观察其对缺氧及ＮＭＤＡ     

脑溢安含药血清对谷氨酸致培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 :研究中药复方脑溢安对培养大鼠皮层神经元谷氨酸兴奋毒损伤的保护作用 ,为脑溢安用于治疗中风提供实验依据。方法 :建立谷氨酸致离体培养的大鼠皮层神经元兴奋毒损伤模型 ,用中药脑溢安浸膏粉含药血清进行干预 ,检测各组细胞培养液中的乳酸脱氢酶 (LDH)活性。结果 :脑溢安浸膏粉含药血清能显著地对抗培养皮层神经元的谷氨酸兴奋毒损伤 ,培养液中LDH活性明显降低 (P <0 .0 1)。实验过程中 ,含药血清加入量 5 %至 2 0 %均可。致神经元损伤的谷氨酸浓度以 1mmol·L- 1 以下为宜。结论 :脑溢安含药血清对谷氨酸致培养皮层神经元损伤具有明显保护作用     

依达拉奉对谷氨酸诱导神经元释放一氧化氮的影响

目的探讨依达拉奉（Edaravone,Eda）对谷氨酸（Glutamate,Glu）诱导皮层神经元释放一氧化氮的影响。方法 SD乳鼠皮层神经元原代培养7d后,分对照组、Glu组（50μM）以及Glu（50μM）＋Eda（100μM）组,分别在加药前、加药6h和24h后取三组培养基以硝酸还原酶法检测NO浓度。结果加药前三组培养基的NO浓度没有显著差异（P〉0.05）,加药6h、24h后,Glu组和Glu＋Eda组NO浓度均显著高于对照组（P〈0.01）,而且Glu组NO浓度显著高于Glu＋Eda组（P〈0.01）。结论依达拉奉能降低谷氨酸诱导皮层神经元释放一氧化氮。     

CBD和尼莫地平对培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 研究一种神经营养物质CBD和尼莫地平（Nimodipine,Nim）联合应用对培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用。方法 分别采用谷氨酸化学或机械划痕创伤性损伤培养大鼠皮层神经元,根据培养细胞台盼蓝活力计数和培养上清乳酸脱氢酶（LDH）检测评估损伤程度。结果 CBD和Nim单独应用时,对谷氨酸和创伤介导的培养皮层神经元损伤有中等程度的保护作用,与单独损伤未加保护性药物组相比较有显著性差异（P<0.01）。CBD和Nim联合会用时,保护作用比单独应用明显增强（P<0.01）。结论 CBD和Nim联合应用有明显的协同作用。     

NMDA受体不同亚单位分布造成肌萎缩侧索硬化中运动神经元选择性易损

目的：研究NMDA受体不同亚单位NR2A和NR2B分布与肌萎缩侧索硬化中运动神经元选择性易损的关系。方法：首先在离体培养的脑组织片中用谷氨酸转运抑制剂造成兴奋毒性损伤,观察在同等损伤条件下运动皮层和梨状区皮层是否出现有差异的神经元数量减少,然后用Western blot方法测定运动皮层和梨状区皮层的NR2A和NR2B的蛋白含量,证明选择性运动皮层损伤与NR2A和NR2B的不同分布方式有关,为进一步明确NR2A和NR2B在运动神经元谷氨酸慢性损伤中的作用不同,在离体培养的皮层运动神经元和脑组织片中分别抑制NR2A和NR2B,观察对运动神经元产生的影响。结果：用谷氨酸转运抑制剂THA 100 μmol/L 损伤脑片2周后,运动皮层神经元的死亡率高于梨状区皮层,分别为64.50%±2.19%和30.43%±4.75%(P<0.01)。Western blot结果表明NR2B/NR2A比值在运动皮层明显高于梨状区皮层,分别为0.87±0.09和0.47±0.09 (P<0.01)。抑制剂保护作用试验中,NR2B抑制剂显示出保护作用,离体培养的皮层运动神经元对照组、谷氨酸损伤组、谷氨酸+NR2A抑制剂组和谷氨酸+NR2B抑制剂组的运动神经元死亡率分别为6.85%±1.47%、47.48%±5.75%、45.76%±8.09%和18.10%±3.11%,脑片对照组、THA损伤组、THA+NR2A抑制剂组和THA+NR2B抑制剂组的运动神经元死亡率分别为12.49%±2.09%、100%、110.87%±15.76%和35.13%±5.32%。结论：NR2A和NR2B在运动神经元慢性谷氨酸损伤中所起的作用不同,NR2B在运动皮层的高分布造成肌萎缩侧索硬化中运动神经元的选择性易损。     

补阳还五汤对大鼠脑皮层神经元生长的影响

目的：观察含补阳还五汤的药物血清对体外培养大鼠脑皮层神经元生长的影响，为补阳还五汤治疗缺血性脑损伤提供实验依据。方法：以体外培养新生SD乳鼠大脑皮层神经元为观察对象，采用四唑盐（MTT）比色法测定细胞生长情况，观察含药血清对常规培养及在缺氧状态下神经元生长的影响，结果：补阳还五汤对常规培养及在缺氧条件下培养的神经元有显著促进生长作用，与空白血清组比较有显著差（P＜0．05），结论：大鼠以补阳还五汤灌胃给药后，其血清中的药物成份有促进体外培养神经元细胞生长的作用。     

八肽胆囊收缩素对谷氨酸神经毒性的拮抗作用

目的：探讨八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对谷氨酸神经兴奋毒性的作用。方法：采用神经元原代分离培养技术，应用电镜观察经不同药物处理后的大鼠大脑皮层神经元的形态学变化，同时测定细胞上清液中ＬＤＨ活性值，并进行ｔ检验等统计学分析。结果：ＣＣＫ－８能明显改善由谷氨酸诱导的神经元结构的破坏和减少神经元损伤后ＬＤＨ的释放，该作用可被ＣＣＫ＿Ｂ受体拮抗剂阻断。结论：ＣＣＫ－８可通过Ｂ受体介导产生对谷氨酸神经毒性的拮抗作用。     

纳洛酮对离体人脑神经元缺氧损伤谷氨酸释放的影响

目的建立原代培养人脑神经元缺氧模型,探讨纳洛酮对神经元缺氧损伤中谷氨酸释放的影响.方法应用无血清原代培养人胚胎大脑神经细胞,经神经微丝染色证实可获得富含神经元的混合培养细胞.将神经元细胞随机分为对照组、缺氧组和给药组(纳洛酮终浓度分别为0.25、5、10 μg/ml).对照组为正常培养,缺氧组和给药组细胞进行缺氧结合无糖处理(氧糖剥夺)l h并继续复氧培养24h.于复氧24 h后观察细胞形态学变化,测定细胞外液乳酸脱氢酶(LDH)浓度,应用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)观察细胞存活率,应用高效液相色谱法测定细胞外液谷氨酸浓度.结果缺氧组细胞外液LDH、谷氨酸浓度显著高于对照组(P＜0.01),MTT法测得光密度(OD)值则显著低于对照组(P＜0.01);应用纳洛酮后,随药物浓度增加,各组细胞外液谷氨酸浓度与缺氧组比较呈现逐渐降低趋势(P＜0.05,P＜0.01),MTT法测得OD值呈现逐渐升高趋势(P＜0.01),至纳洛酮10μg/ml时恢复至对照组水平(P＞0.05).结论纳洛酮可以减少缺氧神经元的谷氨酸释放,减轻兴奋性神经毒性,对神经元缺氧损伤具有保护作用.     

抗抑郁药万拉法新和氟西汀对大鼠神经的保护作用

目的: 探讨抗抑郁药万拉法新和氟西汀对谷氨酸损伤的海马神经元的神经保护作用。方法: 采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制谷氨酸损伤模型以模拟抑郁症时的病理改变;实验分为正常对照组、谷氨酸损伤组、谷氨酸损伤+万拉法新及+氟西汀各给药组(50、100、200及　500 μmol•L^-1或10、100及　500 μmol•L^-1);应用MTT法分别检测万拉法新和氟西汀对谷氨酸损伤大鼠海马神经元存活率的影响,并用分光光度法测定乳酸脱氢酶（LDH）的释放情况以及SOD活性的改变。结果: 谷氨酸使大鼠海马神经元存活率降至正常的50% (P<0.05);谷氨酸损伤+万拉法新组(100和200 μmol•L^-1)神经元存活率均高于谷氨酸损伤组 (P<0.05或P<0.01),而谷氨酸损伤+氟西汀各组神经元存活率无升高。谷氨酸损伤组LDH的释放急剧升高,约是正常对照组的7.4倍;两药物均能不同程度地减少LDH 的释放。谷氨酸损伤组与正常对照组比较,SOD活性明显下降（P<0.01）;与谷氨酸损伤组比较,万拉法新组(10和100 μmol•L^-1)SOD活性均明显升高（P<0.001）,谷氨酸损伤+氟西汀组(100和500 μmol•L^-1)SOD活性均降低（P<0.05）。结论: 抗抑郁药万拉法新和氟西汀都具有一定的神经保护作用, 且万拉法新神经保护作用强于氟西汀。