荧光原位杂交检测乳腺癌HER2（++）扩增状态及其与临床病理的相关性

目的 使用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization, FISH）检测HER2基因扩增情况,并探讨影响HER2基因扩增的因素及其与临床病理特征的关系。方法 收集新疆医科大学附属肿瘤医院2013年l月至2015年12月间IHC检测HER2（++）的乳腺癌病例325份,均采用IHC和FISH两种方法分别检测所有患者的石蜡标本HER2表达和扩增情况,并分析HER2扩增状态与患者各临床病理特征的关系。结果 全组患者经IHC检测HER2表达均为（++）,FISH检测HER2扩增率为12.9%（42/325）,对12项临床和病理指标进行单因素分析显示：HER2扩增状态与激素状态、肿瘤直径、P53显著相关（P<0.05）,而与ki67表达、组织学分级、肿瘤个数等因素均无关（P>0.05）。结论 雌孕激素表达均阴性、肿瘤直径>2 cm、P53表达阳性是预测FISH检测IHC HER2（++）扩增的独立因素。     

HER2阳性胃癌临床病理特征分析

[目的]分析胃癌HER2阳性率,探讨HER2阳性胃癌临床病理特征。[方法]采用免疫组织化学法（IHC）检测HER2蛋白表达,采用荧光原位杂交（FISH）检测HER2基因扩增。[结果]110例胃癌组织HER2IHC阳性率为6．4％（7／110）,FISH阳性率为14．5％（16／110）。排除IHC2＋,IHC与FISH检测结果符合率为96％。HER2总体阳性率为10．9％。Lauren分型肠型胃癌HER2阳性率高于混合型和弥漫型（18．0％vs5．0％,P〈0．05）。WHO分型管状腺癌HER2阳性率高于其他类型（19.3％VS2．3％,P〈0．05）,中、高分化胃癌HER2阳性率高于低分化胃癌（20．0％vs5．7％,P〈0．05）。HER2阳性率在不同年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期胃癌中无统计学差异（P〉0．05）。[结论]胃癌HER2阳性与Lauren分型及wHO分型、分级有关。     

两种荧光原位杂交试剂盒检测乳腺癌HER2基因状态的比较

目的：应用两种荧光原位杂交（FISH）试剂盒检测乳腺癌组织HER2基因状态,旨在比较两者在信号的强度和染色结果上的差异。方法：采用美国PathVysis和北京金普嘉公司生产的FISHHER2检测试剂盒检测10例免疫组化（IHC）HER2蛋白2＋以上HER2的基因状态。结果：PathVysis公司试剂盒在荧光显微镜下观察：细胞核红绿信号清晰,可以采集比较好的图片,容易进行细胞计数;北京金普嘉公司试剂盒在荧光显微镜下观察：细胞核红色信号清晰,绿色信号不明显。结论：PathVysis公司试剂盒HER2和17号染色体信号强,稳定性好,重复性强;北京金普嘉公司试剂盒,简单快速,成本低,对HER2基因不扩增或高度扩增的病例不影响结果判读;当HER2基因与17号染色体比值为临界值时（1.8-2.2）或17号染色体为多倍体的病例,应采用PathVysis公司试剂盒。     

MUC1与HER2基因在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌发病趋势逐年升高,近年来研究发现,MUC1、HER2基因的表达水平能反映乳腺癌的某些生物学特征,与乳腺癌的发生、转移、预后等关系密切。MUC1基因在乳腺癌组织中出现质和量的异常表达。MUC1基因的编码产物成为十分重要的癌标志物,并且是检测乳腺癌淋巴结微小转移的指标。HER2基因在肿瘤组织中呈现过度表达,在正常组织中表达水平较低,被认为是判断乳腺癌预后的独立标记物,其高表达提示乳腺癌细胞的高转移潜能,表现出较高的侵袭性临床病理特征。随着研究的深入,在乳腺癌基因靶点治疗方面也取得了巨大的进展。针对HER2的基因靶点治疗已日趋成熟,Herceptin目前已被证实在乳腺癌的治疗中有巨大的应用前景。MUC1的基因靶点治疗尚处于试验阶段。本文从基因定位、结构、执行功能的分子机制角度对MUC1,HER1在乳腺癌中的作用进行了总结,以便更深入的认识这些基因及其表达产物的生理和病理生理作用,利于乳腺癌的诊断和治疗。     

色素原位杂交法和免疫组织化学法检测乳腺癌HER-2基因扩增及蛋白表达

目的:对照色素原位杂交法(chromogenic in situ hybridization,CISH)和免疫组织化学法(immuno-histochemistry,IHC)检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体(human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)基因扩增及其蛋白表达的状况.方法:采用CISH技术检测145例乳腺癌组织中HER-2的基因扩增情况,其中14例标本经过荧光原位杂交(fluorescence in si-tu hybridization,FISH)检测,随后分别用FISH和IHC方法检测的HER-2基因扩增及蛋白表达状况与之进行回顾性对照,并按照病理分级、淋巴结状态、绝经与否和雌激素受体(estrogen receptor,ER)/孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达情况进行分层,分析HER-2表达与乳腺癌各高危因素之间的关系.结果:CISH检测发现,HER-2无扩增71例(50.0%),低扩增11例(7.6%),高扩增63例(43.4%).14例FISH与CISH检测结果比较,符合率为100.0%.145例IHC与CISH检测结果的符合率为84.8%(P<0.05).在IHC检测积分为0/ 以及 的病例中,HER-2基因扩增与蛋白表达情况基本一致,其符合率均在90%以上;而在IHC检测积分为 的标本中,HER-2基因扩增率仅为61.1%.CISH及IHC检测均显示ER/PR表达情况与HER-2阳性呈负相关,ER和PR均为阴性患者的HER-2基因扩增率和蛋白表达率明显高于ER/PR阳性的患者(CISH:68.3%vs 38.8%,P<0.01;IHC:71.7%vs 48.2%,P<0.01).HER-2状态与乳腺癌病理分级、腋淋巴结转移以及绝经与否无关(P>0.05).结论:CISH技术检测HER-2操作简便,准确性高,可以代替FISH技术,对IHC评分为 的病例应进一步确认HER-2状态.HER-2除了与ER/PR表达相关外,与其他乳腺癌高危因素无关,可作为独立指标进行检测.     

erbB2/HER2在肺癌组织中的表达及意义

目的：研究erbB2基因在肺癌的表达,方法：应用免疫组织化学的方法检测20例正常肺组织和60例肺癌HER2（第二人体表皮生长因子受体,human epidermal-growth-factor receptor2,HER2)蛋白的表达。结果：HER2在正常肺组织无过度表达,肺癌中存在HER2的过度表达,过度表达率为66.7%。肺癌HER2的过度表达更多见于中晚期的肺癌,且与患者术后3年生存率呈负相关。结论：HER2在正常肺组织无过度表达,在肺癌中存在过度表达,提示erbB2基因编码的HER2蛋白在细胞的正常生长及肺癌的发展中均起一定的作用。有可能成为观察肺癌预后的一个指标。     

乳腺髓样癌HER．2基因扩增与临床病理因素相关性分析

目的：总结分析荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization,FISH）技术检测乳腺髓样癌HER-2基因扩增的经验和临床病理学意义。方法：用FISH和免疫组化技术诊断32例乳腺髓样癌患者HER-2基因状态,并分析典型髓样癌和非典型髓样癌HER-2基因扩增的关系。结果：乳腺髓样癌HER-2基因扩增阳性率为37．5％（12／32）,其中典型髓样癌为7．7％（1／13）,非典型髓样癌为57．9％（1l／19）。HERu2基因扩增与髓样癌肿瘤类型（P=0．008）、肿瘤大小（P=0．040）、淋巴结转移（P=0．006）、临床分期（P=0．037）、HER-2蛋白表达（P=0．0001）和p53蛋白表达（P=0．015）有关,与患者年龄（．P=0．438）、ER（P=0．081）和PR（P=0．517）无关。乳腺髓样癌类型与HER-2蛋白表达有关（P=0．010）,与患者年龄（P=0．426）、肿瘤大小（P=0．786）、淋巴结转移（P=0．115）、临床分期（P=0．129）、ER（P=0．116）、PR（P=0．773）和p53（P=0．280）无关。结论：HER-2基因扩增可能参与乳腺髓样癌的演化与进展,乳腺典型髓样癌与非典型髓样癌的HER-2基因扩增有显著性差异,临床应用FISH技术诊断HER-2基因扩增靶标有助于指导乳腺非典型髓样癌-妁分子靶向治疗。     

IHC、FISH与CISH检测乳腺癌Her-2基因状态的对比研究

目的 比较免疫组织化学法(IHC)、荧光原位杂交法(FISH)与显色原位杂交法(CISH)检测乳腺癌HER2基因状态的一致性,探讨FISH法与CISH法榆测乳腺癌HER2基因状态的临床意义.方法 对64例乳腺浸润性导管癌石蜡标本分别应用IHC法、CISH法与FISH法检测HER2蛋白、HER2基因状态及17号染色体多体的发生率.结果 HER2蛋白表达(+++)组,IHC与CISH、FISH法检测HER2基因扩增阳性的符合率均为100%;HER2蛋白表达(++)组,IHC与CISH、FISH法检测的符合率分别为95.83%与91.67%;HER2蛋白表达(+/-)组,IHC与CISH、FISH法检测的符合率亦均为100%.FISH法与CISH法的检测结果1例存在差异,FISH法与CISH法检测HER2基凶状态总的符合率为98.41%.17号染色体多体的发生率在IHC(+++、++、+/-)三组中分别为45.16%、45.83%和11.11%,其总的发生率为40.62%.结论 IHC法柃测HER2蛋白仅作为初筛方法;FISH法与CISH法检测HER2基因状态存在较高程度的符合率,CISH法可作为一种更加方便可行的方法检测HER2基凶状态;在疑有17号染色体多体干扰时,应进一步行FISH法检测.     

乳腺癌患者血清HER2的检测及其临床意义

目的：探讨乳腺癌患者血清HER2水平与组织HER2水平和临床病理特征的关系,分析其对患者治疗药物选择和预后预测的意义。方法：选择福建省肿瘤医院2008年1月至10月经病理证实的乳腺癌患者67例,乳腺良性肿瘤患者20例,另选择体检健康女性20例。应用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织HER2的表达,ELISA法检测血清HER2的表达水平。结果：乳腺癌患者血清HER2水平及阳性率均高于健康女性及乳腺良性肿瘤患者（P<0.05）;组织HER2阳性乳腺癌患者血清HER2水平及阳性率均高于组织HER2阴性乳腺癌患者（P<0.05）,且血清HER2阳性率与组织HER2表达状态正相关,血清学检测方法与组织学检测方法一致性较好;部分组织HER2阴性乳腺癌发生复发转移后血清HER2增高,复发转移性Ⅳ期患者血清HER2阳性率高于Ⅰ〖DK〗～Ⅲ期患者（P<0.05）。结论：乳腺癌患者中血清HER2水平增高,其阳性率与组织HER2表达状态及临床分期相关,该检测对乳腺癌的诊断、评价HER2状态及判断预后有一定意义。     

增殖抑制基因在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的：探讨新的增殖抑制基因（hypevplasia suppressor gene，HSG）在乳腺癌组织中的表达及其意义。方法：应用免疫组织化学和原位杂交法检测55例乳腺癌标本和18例癌旁正常乳腺组织标本中HSG的表达。应用Image Proplus数码图像分析系统测定组织切片的积分吸光度（D）值，分析其与临床病理参数的相关性。结果：HSGmRNA及其蛋白的阳性染色主要集中于细胞质，呈棕黄色颗粒。55例乳腺癌标本中HSG mRNA及其蛋白的阳性表达率分别为40．00％（22／55）和41．82％（23／55），而癌旁正常乳腺组织的表达率分别为83．33％（15／18）和88．89％（16／18），2组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。在乳腺癌组织中HSGmRNA及其蛋白的低表达与组织学分级、淋巴结转移和雌激素受体（estrogen receptor，ER）有关（P〈0．05），与肿瘤大小和年龄等无关（P〉0．05）。结论：HSG在不同乳腺组织中的表达量不同，提示HSG可能与乳腺癌的发生、发展有密切关系。     

核心蛋白聚糖在乳腺癌中表达的探讨

目的：探讨核心蛋白聚糖（DCN）在乳腺癌中的表达。方法：采用原位杂交和免疫组织化学方法研究DCNmRNA及蛋白在38例乳腺癌及9例相对正常乳腺组织中的表达。结果：在乳腺癌癌细胞内可见DCNmRNA表达．阳性率为88．00％（22／25），正常乳腺腺细胞内未见DCNmRNA表达，差异具有非常显著性（P〈0．01）。DCN蛋白在38例乳腺癌中表达阳性率为55．26％（21／38），相对正常乳腺腺细胞内未见DCN蛋白表达，差异具有非常显著性（P〈0.01）。在乳腺癌间质DCN蛋白表达较相对正常乳腺组织增高，差异具有非常显著性（P〈0．01）。结论：DCNmRNA及蛋白在乳腺癌癌细胞及间质表达均较相对正常乳腺组织增高．     

Moderate Immunohistochemical Expression of HER‐2 (2+) Without HER‐2 Gene Amplification Is a Negative Prognostic Factor in Early Breast Cancer

Background.

Human epidermal growth factor receptor (HER)-2 testing in patients with operable breast cancer is aimed at identifying candidates for adjuvant anti–HER-2 treatment. However, commonly defined “HER-2⁻” tumors express variable levels of the HER-2 protein, which can influence prognosis. We compared the clinical outcomes of operable breast cancer patients stratified according to a common HER-2 testing algorithm.

Methods.

We studied 1,150 women (median age, 58 years; range, 22–94 years) undergoing surgery for early breast cancer at our institution. HER-2 status was determined using the HercepTest™ (Dako, Glostrup, Denmark) and, when needed, by fluorescence in situ hybridization (FISH). Patients receiving adjuvant trastuzumab were excluded. The impact of HER-2 status on the disease-free survival (DFS) time was studied using multivariate Cox proportional regression analysis.

Results.

Four hundred-fifty seven (40%), 454 (39%), 116 (10%), and 123 (11%) patients were considered HER-2 0+, HER-2 1+, HER-2 2+/HER-2⁻ by FISH, and HER-2⁺ (3+ or HER-2⁺ by FISH), respectively. Compared with a HER-2 0 or 1+ status, a HER-2 2+/HER-2⁻ by FISH status was associated with a worse DFS outcome on multivariate analysis. Compared with a HER-2⁺ status, a HER-2 2+/HER-2⁻ status showed a time-dependent effect on the DFS probability, with an initial advantage that worsened every year by a factor of 1.649.

Conclusion.

A HER-2 2+/HER-2⁻ status is an adverse prognostic factor in patients with operable breast cancer. Because of suggestions from randomized trials that the benefits of adjuvant trastuzumab may not be limited to patients with HER-2⁺ tumors, patients with a HER-2 2+/HER-2⁻ status are ideal candidates for studies testing this hypothesis.     

HER2基因突变在乳腺癌治疗中的研究进展

人表皮生长因子受体2(HER2)是一种酪氨酸激酶受体,是乳腺癌治疗的主要药物靶点和临床生物标志物。大约2%的乳腺癌存在HER2突变。无论HER2表达水平或扩增状态如何,有HER2突变的乳腺癌都可能对靶向HER2治疗有反应,因此本文对HER2基因突变在乳腺癌治疗中的研究进展进行梳理和综述。     

乳腺癌HER2 过度表达预后相关因素研究

 目的　研究乳腺癌患者HER2 过度表达与其他临床预后因素的相关性及对预后的影响。方法 　收集我院2002 年1 月～2003 年12 月乳腺癌Ⅰ～ Ⅲ期患者共176 例,检测HER2 表达,与其他临床预 后因素进行相关分析;同时比较HER2 过度表达和阴性表达患者的预后。结果　本组患者HER2 过度 表达与PR( P = 0. 002) 、ER( P = 0. 031) 表达呈负相关,而与其他预后因素无相关性。多因素分析表明 HER2 是无病生存时间的独立预后因素( P = 0. 018) 。结论　HER2 过度表达可作为乳腺癌无病生存时 间的独立预后因素并指导乳腺癌的治疗。     

HER3在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌患者HER3与HER2、ER和PR之间的关系及其对乳腺癌预后的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测癌组织中HER3、HER2、ER和PR蛋白的表达,对患者随访,随访终点为总生存时间(overall survival,OS)。结果 HER2、HER3、ER和PR在136例乳腺癌患者中的阳性表达率分别为:50%、41.18%、60.9%和27.21%。HER3与年龄、淋巴结转移、分期、肿瘤类型以及化疗状态的差异无统计学意义(P>0.05)。HER3阳性与阴性患者OS差异有统计学意义(P=0.015)。HER3(+)HER2(+)组乳腺癌患者较其他组OS明显缩短(P=0.047)。HER3的表达与PR表达无明显关系(P=0.214),但可抑制ER产生(P=0.001)。HER2阳性和HER3的过度表达高度相关(P=0.000)。结论HER3可作为独立的临床预后因子,HER3阴性患者OS较长。     

乳腺癌中VEGF基因mRNA的表达及其与临床病理因素的关系

目的探讨乳腺癌组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）mRNA表达情况及其与临床病理因素及其他分子指标的关系。方法应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测48例乳腺癌组织,20例乳腺纤维腺瘤组织VEGF mRNA的表达,并以免疫组化SABC法检测VEGF蛋白在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤组织中的表达,分析其与乳腺癌中HER-2,ER,PR蛋白表达的关系。结果经实时荧光定量RT-PCR法检测,VEGF121mRNA、VEGF165mRNA在乳腺癌组织,乳腺纤维腺瘤组织中的2-ΔCt值分别为：0.5733±0.1764、0.310±0.098,0.2961±0.0845、0.2657±0.0342。乳腺癌组织的VEGF mRNA阳性表达率均显著高于乳腺纤维腺瘤组织（P〈0.05）,但与患者的年龄、淋巴结转移、肿块大小、组织学分级、pTNM分期等临床病理因素无关（P〉0.05）。HER-2在乳腺癌和纤维腺瘤中表达分别为18.8%0、%,差异具有显著性（P〈0.05）。Spearman等级相关分析表明VEGF与HER-2,ER,PR表达不相关（P〉0.05）。HER-2与雌激素受体、孕激素受体的表达呈负相关（γ=-0.335,P=0.005;γ=-0.300,P=0.012）。结论 VEGF在乳腺癌中高表达,但与ER,PR表达不相关。HER-2可作为判断乳腺癌预后的1个重要参考指标。