导读

基因治疗与表达载体构建是本期文章收录的主题。基因治疗是指向靶细胞引入正常有功能的基因,以纠正或补偿致病基因所产生的缺陷,从而达到治疗疾病的目的。其中将目的基因导入靶细胞并使之表达是其关键环节,因此介导的表达载体的选择便显得格外重要。基因治疗载体可分为病毒性载体和非病毒性载体。病毒性载体中反转录病毒载体对淋巴细胞、神经细胞、肝细胞、心肌细胞、肌细胞和多种肿瘤细胞均具有较高的转导效率;腺相关病毒载体被广泛用于治疗恶性肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病及器官移植     

慢病毒——基因转移的潜在新载体

随着对疾病分子机制认识的加深及生物技术的发展,基因治疗已成为治疗感染性疾病、遗传疾病、神经系统疾病以及肿瘤的新焦点。用于基因治疗的载体系统可分为病毒性载体和非病毒性载体两类。目前常用的病毒载体包括逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、疱疹病毒载体、痘苗病毒载体等,但是这些载体均存在不足之处,严重影响了基因治疗的有效性及安全性。在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题,是无法高效转导非分裂期细胞,而腺病毒载体虽然能转导非分裂期细胞,但在体内不能实现目的基因稳定的长期表达,且反复应用容易引…     

慢病毒———基因转移的潜在新载体

随着对疾病分子机制认识的加深及生物技术的发展，基因治疗已成为治疗感染性疾病、遗传疾病、神经系统疾病以及肿瘤的新焦点。用于基因治疗的载体系统可分为病毒性载体和非病毒性载体两类。目前常用的病毒载体包括逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、疱疹病毒载体、痘苗病毒载体等，但是这些载体均存在不足之处，严重影响了基因治疗的有效性及安全性。在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题，是无法高效转导非分裂期细胞，而腺病毒载体虽然能转导非分裂期细胞，但在体内不能实现目的基因稳定的长期表达，且反复应用容易引起免疫反应。慢病毒载体不但可以感染非分裂期细胞，还具有容纳外源性目的基因片段大、免疫反应小等优点，在基因治疗中具有广泛的应用前景。现以HIV-1为例，就慢病毒载体的生物学特征、慢病毒载体的构建、在基因治疗中的应用以及生物安全性等方面作一综述。     

肝癌的基因治疗探讨

本研究探讨肝癌基因治疗的载体及治疗策略。根据临床实践及相关文献资料,分析肝癌的基因治疗载体及临床治疗策略。肝癌的基因治疗载体为病毒、非病毒载体,治疗方法为诱导癌细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成及激活机体免疫系统等。肝癌为常见的癌症,探讨基因治疗载体及方法,具有重要的临床价值。     

肝癌的基因治疗

<正>相对于传统的疾病治疗方法,基因治疗是一种全新的理念。这种治疗理念是将外源基因通过各种特殊处理的载体导入到机体细胞内,从而发挥目的基因的治疗效果。目前,基因治疗肝癌的过程中,实验经常使用到病毒载体和非病毒载体。载体包裹目的基因转染癌细胞,使得癌细胞受到杀伤或者生长抑制。常使用的基因治疗策略有:①直接或者间接地诱导癌细胞凋亡;②激活机体的免疫系统杀伤肿瘤细胞;③抑制肿瘤组织血管生成。随着对基因表达技术的深入研究,现在的基因治疗已经逐步发展成为一种"载体具有靶向性、基因表达具有选择性"的基本模式[1]。     

肝细胞癌的靶向基因治疗

靶向基因治疗技术的发展和应用为肝癌治疗提供了新的手段，具备广阔的临床应用前景。基因治疗必需具备遗传物质和目的基因载体两个条件。载体分为病毒载体和外病毒载体，而遗传物质则可根据相应的治疗目的加以选择。     

腺病毒载体的研究及应用进展

病毒载体能够携带外源基因并包装成感染性病毒颗粒,介导外源基因的转移和表达。腺病毒载体转导目的基因具有高效率、低致病性、高滴度以及在体内不整合入宿主细胞染色体等优点,被认为是最有效的转基因载体之一,哺乳动物来源的各种腺病毒被广泛用于基因治疗、肿瘤治疗及疫苗等领域。此文对腺病毒载体的特点及研究进展做一综述。     

整合素靶向性病毒载体对肿瘤细胞基因转导的促进作用

在进行基因导入研究及临床试验中，目前采用的载体通常包括了病毒及非病毒两大类。对于非病毒载体用于基因转染有许多报道。而腺病毒作为基因载体，因其具有的高效转导能力及对分裂或非分裂细胞均能转导等优点而被广泛应用于针对疾病的基因治疗中。对腺病毒进入细胞机制进行的深入研究结果发现，腺病毒与细胞结合的第一步是与细胞表面的柯萨奇腺病毒受体（coxsackie adenovirus receptor，CAR）结合，第二步是利用其在五角体基（pentonbase）中的RGD序列和细胞表面的整合素结合，     

基因治疗产品及其载体的研究进展和挑战

基因治疗是一种通过改变个体的基因表达来治疗疾病的方法，为肿瘤、罕见病及其他难治性疾病提供了全新的治疗策略。基因治疗通过基因编辑技术实现对个体致病基因的改造，同时也依赖基因递送载体改善其在体内的稳定性和靶向性。本综述简述了基因治疗的方式，结合目前的基因治疗产品，介绍了病毒、非病毒基因递送载体和基因编辑技术在基因治疗中的发展概况，并总结归纳了临床实践中基因治疗的安全性问题。     

病毒性肝炎的基因治疗进展

基因治疗是对病毒性肝炎防治极有潜力的治疗策略，两个肝炎基因治疗途径相关的基础研究正在进行：第一，基于核酸的抗病毒治疗途径，如通过转基因表达的反义寡核苷酸、反义RNA，核酶以及感染肝细胞核心蛋白负向变异决定簇的表达已被用于阻止病毒复制；第二条有效疫苗的基因治疗途径是通过发展载体来表达病毒抗原、辅助细胞因子及T细胞协同刺激分子。     

肝癌靶向基因治疗载体研究进展

<正>目前对于肝癌治疗的研究已经进入分子水平,随着分子生物学的快速发展和基因工程技术的日臻成熟,肝癌的基因治疗已经迅速发展成为继手术切除、放化疗和介入治疗之后一个新的治疗模式。虽然已有许多将目的基因转入活细胞的方法,但仍存在转移效率不高、靶向性不高的问题。因此寻求一种高靶向性、高转染率的方法已成为研究肝癌靶向基因治疗的热点。在肝癌靶向基因治疗过程中,目前常用的治疗基因转移方法主要包括病毒载体和非     

用于基因治疗和DNA疫苗的质粒DNA下游技术

基因治疗是将核酸导入人体细胞来改变基因组成而达到治疗目的的一种治疗战略。核酸是一种编码治疗性蛋白、破坏性蛋白或标记蛋白的双链DNA；它也可以是结合到宿主细胞靶序列上的反义RNA或单链DNA，通过阻滞mRNA或基因启动子来抑制基因的表达。第一个基因治疗产品一问世，很快便得到市场认可，预计该类产品的销售额到2010年将超过450亿美元。有效的基因治疗的先决条件是将核酸有效地传送到靶细胞。除了用反义疗法外，该核酸还必须到达细胞核。目前已经开发了能传递核酸的病毒载体和非病毒载体。尽管用病毒载体有许多优点，但是尚无足够…     

肝癌基因治疗进展

原发性肝癌（Pri mary liver cancer,PLC）是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,以我国和亚非地区发病率高。基因治疗是指将人的正常基因或有治疗作用的基因以一定的方式导入人体靶细胞,来纠正基因缺陷或通过药物等手段来逆转某些基因发生改变,从而达到治疗疾病的目的。近年来,随着分子生物学技术的发展，基因治疗成为治疗肝癌的新方法，本文就近年来肝癌基因治疗研究进行综述。     

基因治疗的载体系统及应用

目前的基因载体系统可分为病毒载体和非病毒载体。利用病毒载体介导的基因转移 ,以其高转染率和良好靶向性成为肿瘤基因治疗中应用最广泛的方法。非病毒载体由于其非免疫性和易于生产性而逐渐引起学者瞩目。基因治疗是一种用正常基因取代缺陷基因的治疗 ,目前主要用于肿瘤治疗 ,同时在基因治疗造血细胞疾病、心血管疾病、风湿性关节炎方面 ,已在动物试验中取得一定进展。1　基因载体系统本文介绍几种将外源基因引入宿主细胞的转移方法 ,这些方法可使外源基因短期 (数天 )或长期 (数星期或数年 )稳定的表达[1] 。通常可将这些方法分为病毒载…     

IL-10基因载体对大鼠血管平滑肌细胞增殖和球囊损伤后新生内膜形成的影响

目的 探讨白细胞介素-10 (IL-10)基因载体对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞(SHRVSMC)增殖和球囊损伤后新生内膜形成的影响.方法 成功构建慢病毒IL-10基因载体.自发性高血压大鼠(SHR)随机分为4组:正常对照组、模型组、损伤+空载体组(空载体组)、损伤+慢病毒IL-10基因治疗组(IL-10基因治疗组).大鼠颈动脉球囊损伤模型建立后,取出颈总动脉下段1/3行HE染色,计算机图像分析仪测量血管壁(中膜)/腔面积比(wall area/lumen are-a,W/L).颈总动脉段上1/3检测金属基质蛋白酶-12 (matrix metalloproteinase,MMP-12)的信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)表达.结果 慢病毒IL-10基因治疗组W/L比值比模型组和空载体组明显减小;IL-10基因治疗组MMP-12的mRNA相对表达量比模型组和空载体组明显减小.结论 IL-10基因治疗能抑制大鼠体内血管平滑肌细胞增殖和球囊损伤后新生内膜形成,是有效的再狭窄治疗手段.     

基于多糖聚合物的非病毒基因载体的研究进展

基因治疗是通过一定的载体或手段将功能性外源基因导入受体细胞中,通过外源基因的表达产物或是通过外源基因抑制某些基因的转录或翻译,达到治疗的目的。基因载体有2种:病毒载体传递体系和非病毒载体传递体系。病毒载体传递体系因安全问题使其在临床应用中多有限制。非病毒载体有着诸多优势,但较低的转染效率限制了其在研究及临床上的应用。本文综述近年来一类基于多糖聚合物设计的非病毒载体的研究进展,并阐述其在基因治疗中的优势及应用。     

基因治疗载体的研究现状

基因治疗是随着现代分子生物学技术的发展而诞生的一种生物医学治疗技术,主要涉及载体、目的基因和靶细胞三方面。将目的基因导入靶细胞,得到稳定高效的表达是基因治疗的关键问题,因而选择合适的载体是基因治疗成功的基础。目前应用的载体主要包括病毒载体和非病毒载体两类,此文就近几年来有关基因治疗载体的研究作一简要综述。     

shRNA病毒递送载体

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种有力的基因沉默工具,在功能基因组学、微生物学、基因表达调控机制研究等领域广泛应用。RNAi可以用于鉴定药物靶标及治疗疾病,尤其是传统治疗手段无效的重大疾病。如何将双链小干扰RNA(siRNA)高效传递至体内靶细胞是RNAi成功用于疾病治疗的关键,也是目前研究的热点。由于病毒载体能高效转导多种细胞成为基因工程和基因治疗的主要载体。目前,越来越多的研究将病毒载体应用于介导RNAi,然而病毒载体存在靶向性差、生物安全性等问题。本文针对这些病毒载体的优劣进行归纳并指出今后改进的方向。     

基因治疗在肾脏疾病中的应用进展

基因治疗是利用DNA重组和基因转移技术在基因水平对疾病进行治疗的一种方法。目前用作基因治疗载体的主要有病毒载体、细菌载体、人工载体和脂质体载体等。病毒载体常用的是逆转录病毒、腺病毒(Ad)、腺相关病毒(AAV)、慢病毒和单纯疱疹病毒(HSV)。细菌载体和人工载体则还处于研究阶段。     

阳离子脂质体在基因转染载体中的研究进展

目前基因治疗面临的首要技术问题是基因药物的载体,用于基因治疗的载体主要分为两大类:病毒载体和非病毒载体.病毒载体可能在体内发生基因的重组或互补,因此具有较大的潜在危险,限制了它在临床基因治疗上的应用[1].非病毒载体中发展最为成熟的是阳离子脂质体(cationic liposomes,CL)载体,它具有可自然降解、无免疫原性、可重复转染等优点,迄今已有数十种阳离子脂质体被用于基因转染[2].该项技术目前已成为基因治疗的研究热点之一,现就其进展综述如下.