经口感染弓形虫垂直传播小鼠模型的建立

目的建立经口感染弓形虫RH株速殖子垂直传播小鼠模型。方法将54只妊娠0天的BALB/c孕鼠随机分为6组,于妊娠第8天,分别用0,1000,2000,4000,8000,16000个弓形虫速殖子灌胃感染,妊娠第18天处死,记录活胎率,测定母鼠肝、胎盘和胎仔脑组织弓形虫抗原。结果经ELISA检测弓形虫循环抗原证实,孕鼠死亡率与胎盘和胚胎感染率均随感染剂量的增加而升高,而活胎率下降。1000,2000组的胎盘、胚胎未发生感染,4000组的胚胎感染率5.13%,16000组的胚胎感染率20.00%,但孕鼠的健康状况差、死亡率高,均不适宜建立弓形虫垂直传播动物模型。综合分析表明,8000组孕鼠既有较高的存活率,又可保证胎盘和胚胎较高的感染率。结论每只孕鼠灌胃感染8000个速殖子为建立弓形虫垂直传播小鼠模型的适宜剂量。     

不同佐剂的弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的黏膜免疫应答

目的比较IFN-γ、蜂胶佐剂以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助可溶性速殖子抗原(STAg)增强机体黏膜免疫应答的水平,探讨两种佐剂联合应用的免疫效果。方法将5～6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4组(各15只):20μgSTAg,20μgSTAg 40μg蜂胶,20μgSTAg 1000UIFN-γ或20μgSTAg 40μg蜂胶 1000UIFN-,γ均溶于总体积为20lμ的PBS中,滴鼻免疫(10lμ/鼻孔),免疫2次,间隔14d。末次免疫后第10天用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击。攻击后第43天处死全部存活小鼠,比较各组小鼠肠黏膜小肠上皮内淋巴细胞(IEL)、PP结T淋巴细胞数;检测小鼠粪便、鼻咽冲洗液、肺冲洗液、阴道冲洗液中弓形虫特异性sIgA含量。结果各佐剂组小鼠IEL、PP结T淋巴细胞数显著高于STAg组,黏膜sIgA含量显著高于STAg组;蜂胶 IFN-γ联合组小鼠黏膜免疫应答水平高于单独佐剂组,其中显著高于蜂胶组(P<0.05)。结论IFN-γ作为弓形虫黏膜疫苗佐剂的效应优于蜂胶,IFN-γ 蜂胶作为复合黏膜佐剂鼻内免疫效果优于两者单独应用。     

高脂饮食对早发子痫前期样改变孕鼠血脂和妊娠结局的影响

目的 探讨孕鼠早发子痫前期样改变时,高脂饮食对其血脂水平及妊娠结局的影响.方法 C57BL/6J野生型孕鼠皮下注射左硝基精氨酸甲酯建立早中晚不同时段发病的子痫前期样模型(L-NAME组),同时设立相应对照组皮下注射等量生理盐水(NS组).将以上各组孕鼠再分为高脂饲料亚组(HF,n=6)及标准饲料亚组(SC,n=6)饲喂.同法设立apoE-/-孕鼠作为各相应组的基因型对照.进行动物模型鉴定;于孕中、晚期进行标本采集.比较各组血脂水平和妊娠结局.结果 WT及apoE-/-早中期L-NAME组与相应NS组比较,血浆中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)游离脂肪酸(FFA)升高明显(P＜0.05),其中以早期L-NAME组升高尤为显著(P＜0.05);apoE-/-孕鼠(L-NAME 组及NS组)血浆中TG、TC含量明显高于WT各相应组(P＜0.05),而血中FFA含量差异不明显(P＞0.05);WT及apoE-/-HF亚组血脂水平比SC亚组有不同程度升高,其中以早期HF+L-NAME尤为明显(P＜0.05).WT及apoE-/-早、中期L-NAME组胎盘重量和胎仔重量明显低于相应NS组(P＜0.05),晚期L-NAME组胎盘重最和胎仔重量与相应NS组相比差异无统计学意义(P＞0.05);各apoE-/-组胎盘重量和胎仔重量比相应WT组低;WT及apoE-/-的HF亚组与相应SC亚组比较,胎盘重量和胎仔重量也有不同程度降低,以早期发病的HF+L-NAME组降低尤为明显(P＜0.05).活胎数及吸收胎数在apoE-/-及WT的L-NAME组与NS组间差异明显(P＜0.05),主要表现为早期L-NAME组活胎数降低,吸收胎数增加.结论 妊娠期受到不良因素影响越早,发生早发子痫前期样改变时对血脂及妊娠结局的影响越显著;饮食环境因素町以加重不良因素对血脂及妊娠结局的影响;apoE基因缺陷可引起更为不良的血脂水平变化及妊娠结局.     

不同剂量CpG ODN联合STAg鼻内免疫BALB／c小鼠诱导的免疫应答

目的 观察弓形虫可溶性速殖子抗原（STAg）与不同剂量的CpG ODN联合滴鼻免疫小鼠的免疫效果，探索CpG ODN佐剂最佳剂量。方法 5-6周龄BALB／c小鼠50只随机分为5组，每组10只，实验组以20μg STAg联合不同剂量CpG ODN佐剂滴鼻免疫小鼠，佐剂剂量分别为0、1、5、10μg，对照组以PBS滴鼻，间隔2wk免疫2次。末次免疫后30d断颈处死全部小鼠，分离脾、Peyer＇s patch（PP结）、肠系膜淋巴结（MLN）和IEL淋巴细胞，观察淋巴细胞增殖情况。用ELISA的方法检测血清IgG和粪便IgA含量。结果 与PBS组和0剂量佐剂组相比，10μg CpG ODN联合STAg免疫后，小鼠肠粘膜淋巴组织和脾淋巴细胞增殖明显（P〈0．05）。10μg组血清IgG远高于对照组（P〈0．05），粪便IgA高于对照组（P〉0．05）。结论 CpG ODN可作为STAg的粘膜佐剂，10μg CpG ODN与STAg联合具有最佳的免疫效果。     

弓形虫ESA鼻内免疫小鼠诱导的黏膜及系统免疫应答

目的 观察弓形虫排泄-分泌抗原(excreted-secreted antigen,ESA)鼻内免疫小鼠诱导黏膜和系统免疫应答的效果.方法 将64只BALB/c小鼠随机分为8个组,每组8只.实验组小鼠分别用腹腔感染弓形虫小鼠第0,6,12,24,36,48和60小时无菌收集的腹腔液中获取的ESA 20 μg/只滴鼻免疫小鼠2次,间隔14 d,以PBS20 μl/只滴鼻为对照.逐日观察小鼠状况,于末次免疫后第14天颈椎脱位处死小鼠,检测血清特异性IgG、小肠冲洗液sIgA水平,分离肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocytes,iIEL)及肠系膜淋巴结淋巴细胞(mesenteric lymph node lymphocytes,MLNL)并计数.结果 60 h组小鼠初次免疫后第8-11天,有倦怠、饮水及采食量减少等表现,体重增长较其他组缓慢(P＜0.05),其他组小鼠健康状况良好.不同时相ESA鼻内免疫小鼠后特异性抗体水平升高,MLNL、iIEL发生增殖性应答.48 h组和60 h组各项指标均明显高于0 h组(P＜0.01)及PBS组(P＜0.05).结论 48 h和60 h弓形虫ESA均能诱导黏膜及系统免疫应答,但60h ESA可能对机体有毒副作用,不适宜直接滴鼻免疫,48 h ESA可作为弓形虫黏膜疫苗的候选抗原.     

孕中期弓形虫感染对胎鼠生长发育及营养状况的影响

目的探讨孕中期弓形虫感染孕鼠对胎鼠生长发育及营养状况的影响。方法BALB/c孕鼠在孕第8天经腹腔接种弓形虫速殖子,于孕14、16、18d处死,剖取胎鼠。记录胚胎总数、死胎数、活胎数。测量活胎身长、尾长。火焰原子吸收分光光度法测定活胎体内Zn、Cu、Fe微量元素含量。采用考马氏亮蓝G-250染色法对胎鼠总蛋白进行定量分析。结果①在孕14、16、18d,染虫组的胚胎总数、活胎数、胎鼠的平均体重比对照组均明显减少(P<0.05)。染虫组胎鼠平均身长、尾长在孕14d时虽有下降,但无统计学意义(P>0.05),而孕16、18d时均明显下降(P<0.05)。②染虫组胎鼠体内Zn含量在孕14～18d均低于对照组(P<0.05);Cu含量在孕14d与对照组无差异,而在孕16、18d均低于对照组(P<0.05);Fe含量在孕14～18d均低于对照组(P<0.05)。③染虫组孕14d胎鼠总蛋白含量与对照组无差别(P>0.05),而孕16、18天均明显减少(P<0.01)。结论孕中期弓形虫感染孕鼠,可引起胚胎营养不良和发育障碍。     

重组人IL-2对感染弓形虫孕鼠T细胞亚群及垂直传播的影响

目的研究重组人IL-2对感染弓形虫孕鼠T细胞亚群及垂直传播的影响。方法取BALB/C孕鼠90只,随机分为空白组、感染组、IL-2组。于妊娠第8d空白对照组腹腔注射0.2ml生理盐水,其余各组腹腔注射200个弓形虫速殖子,并于妊娠第7、8、9dIL-2组每只孕鼠腹腔注射1 000UIL-2,其余两组腹腔注射0.2ml生理盐水。妊娠第10、12、14、16d取妊娠鼠脾,流式细胞仪检测CD4~＋及CD8~＋水平,并在妊娠第12d解剖孕鼠,观察活胎率及胎仔脑组织弓形虫感染情况。结果与空白组相比,妊娠各期感染组的脾CD4~＋T细胞水平显著降低,而CD8~＋T细胞水平显著升高（第10、12、1 4d）,二者比值明显倒置;IL-2组的CD4~＋T细胞水平在妊娠第10、12、14d高于感染组,CD8~＋T细胞水平在妊娠第10、12、14d低于感染组,CD4~＋/CD8~＋T细胞比值在妊娠第10、12、14d高于感染组。活胎率也明显升高,宫内胚胎弓形虫感染率明显降低。结论 IL-2可以改善感染弓形虫孕鼠的细胞免疫功能,提高孕鼠免疫力,减少垂直传播概率。     

孕中期弓形虫感染对孕鼠血红系列及血清铁蛋白的影响

目的 探讨弓形虫感染对孕中期孕鼠血红系列及血清铁蛋白含量的影响.方法 孕中期BALB/c鼠随机分为染虫组和对照组,染虫组经腹腔接种纯化弓形虫速殖子100个/0.2 ml,对照组腹腔注射0.2 ml PBS.在孕10,12,14,16,18 d,摘眼球取血,进行孕鼠血红系列分析和血清铁蛋白(Ferr)含量测定.结果 ①染虫孕鼠全血红细胞(RBC)计数、血红蛋白(HGB)含量、红细胞压积(HCT)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)与对照组均无差异(P＞0.05).②染虫孕鼠红细胞体积分布宽度(RDW)比对照组轻微增加,但无统计学意义(P＞0.05).③染虫孕鼠红细胞平均体积(MCV)在孕10,14 d与对照组比较无统计学差异(P＞0.05),在孕12,16,18 d显著减小(P＜0.05).④染虫孕鼠红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)在孕14,16,18 d显著降低(P＜0.01).⑤染虫孕鼠血清铁蛋白含量在孕16,18 d显著低于对照组(P＜0.01).结论 弓形虫感染可引起孕鼠MCV、MCHC及血清Ferr含量下降,孕鼠有轻度低铁血症.     

STAg和霍乱毒素不同程序滴鼻免疫小鼠诱导抗弓形虫作用

目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和霍乱毒素(cholera toxin,CT)佐剂不同程序滴鼻免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染能力,确定STAg和CT滴鼻免疫的最佳程序。方法BALB/c小鼠随机分为3组:1次、2次和3次免疫组,用20 μg STAg 1 μg CT/只分别滴鼻免疫1次,2次或3次,前2次间隔2周,末次间隔1周。末次免疫后第14天,用4×104个速殖子/只灌胃攻击所有小鼠,观察小鼠健康及死亡情况,攻击后第30天处死,ELISA法检测血清IgG和粪便IgA,计数肝、脑组织内弓形虫速殖子,分离并计数派伊尔结(Peyer′spatches,PP)和脾淋巴细胞数。结果2次和3次免疫组小鼠存活率明显高于1次免疫组(P<0.05),肝、脑组织内虫荷显著低于1次免疫组(P<0.001),血清IgG和粪便IgA高于1次免疫组,PP和脾淋巴细胞数无显著性变化。结论STAg和CT佐剂滴鼻免疫2次或3次能有效诱导小鼠抗弓形虫感染。     

孕鼠体内高血糖对胎鼠心肌细胞的影响

目的:探讨孕鼠体内高血糖环境对胎鼠心脏组织的影响.方法:选择30只清洁级成年雌性SD大鼠,随机分为A组、B组、C组,每组10只.A组于妊娠第6天腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)50 mg/kg,B组于妊娠第13天腹腔注射STZ 50 mg/kg,C组于妊娠第6天腹腔注射等量pH4.5,0.1 mmol/L柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液.3组孕鼠均于妊娠第21天剖腹取胎,测定胎鼠体质量、身长,计算死胎数量.采集胎鼠血样测定血糖.取胎鼠心肌组织,分别于光镜和电镜下观察心肌结构的改变,并用免疫组织化学法检测各组胎鼠心肌组织中caspase-3抗原的表达. 结果:(1)干预前3组孕鼠血糖比较,差异无统计学意义(P＞0.05);干预后孕鼠血糖A组和C组、B组和C组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),但A组与B组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)3组胎鼠体质量、身长A组和B组均高于C组,差异有统计学意义(P＜0.01),A组与B组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).3组胎鼠出生后血糖A组和B组明显低于C组,差异有统计学意义(P＜0.01),A组与B组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).A组、B组、C组胎鼠死亡率分别是31.96%,12.84%和3.88%,3组间比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(3)胎鼠心肌组织光镜下A组、B组胎鼠心肌细胞表现为不同程度排列紊乱,肌纤维水肿,胞质中可见大小不等的空泡,心肌细胞出现坏死.A组、B组、C组胎鼠心肌病变积分比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(4)Caspase-3表达于胎鼠心肌细胞膜和胞浆中.3组胎鼠心肌组织中cspase-3表达的阳性面积率和平均光密度比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(5)胎鼠心肌组织电镜下改变为细胞核皱缩、线粒体数目减少、肌原纤维断裂、肌节模糊.A组胎鼠心肌细胞内线粒体数密度明显低于B组和C组(P＜0.01).A组和B组胎鼠心肌细胞内线粒体平均体积明显高于C组(P＜0.01).结论:孕鼠体内高血糖水平对胎鼠心脏影响明显.且孕鼠体内高血糖持续时间越长,胎鼠心脏改变越明显.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点,诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据,做出准确诊断,给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂,腹腔内疾病占64．63％,共17种病因;腹腔外疾病占35．37％,共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查,在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。