RCS大鼠视网膜变性过程中α亚型神经节细胞树突形态学变化

目的研究皇家外科学院大鼠(royal college of surgeon rat,RCS)视网膜变性过程中α亚型视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)树突形态学变化规律。方法按照视网膜色素变性发展的不同阶段,选取出生后21、30、60、90d的RCS-P+大鼠(RCS组)与RCS-rdy+大鼠(对照组)各3只,采用DiI示踪标记方法观察RCS组α亚型视网膜神经节细胞的树突在视网膜变性过程中形态学变化的规律。结果RCS组各天龄间、对照组大鼠发育过程中各天龄间、RCS组与对照组相对应天龄段间一、二级分支数目之间比较无显著差异(P0.05)。RCS组大鼠视网膜变性过程中,α亚型RGCs树突一级分支直径60d组较21d组变细[(2.02±0.17)μmvs(2.66±0.11)μm,P0.01],RCS组与对照组大鼠α亚型RGCs树突一级分支直径比较,21d增粗[(2.66±0.11)μmvs(2.23±0.10)μm,P0.01]。RCS组90d(15.44±1.50)较21d(26.91±3.01)、30d(27.20±1.99)α亚型RGCs细胞树突分支频率显著减少(P0.01,P0.05)。对照组大鼠发育过程中α亚型RGCs树突分支频率比较,60d(28.67±2.78)较21d(16.09±1.71)、30d(17.75±1.79),90d(26.18±2.48)较21d组有显著增加(P0.01,P0.05),其余各组间没有明显差异(P0.05)。RCS组与对照组大鼠α亚型RGCs树突分支频率相对应21、30、60、90d组间比较均有显著差异(P0.05)。结论RCS大鼠视网膜色素变性过程中,视网膜α亚型RGCs树突分支频率在早期增多,但随着病变的发展到中、晚期树突终末分支显著减少,提示在视网膜变性过程中α亚型RGCs树突的信息传递功能可能发生了变化。     

枸杞子提取液对RCS大鼠遗传性视网膜变性的作用

目的 观察枸杞子提取液(LBA)对RCS大鼠遗传性视网膜变性的治疗作用.方法 出生后RCS大鼠24只,随机分为对照组和治疗组,每组12只.治疗组RCS大鼠出生后10 d开始喂食1 mg/kg的LBA, 对照组正常饲养.两组大鼠分别在出生后25、35、45 d取眼球,制备组织切片,应用苏木精-伊红(HE)染色和TUNEL染色观察视网膜感光细胞坏死和凋亡情况,并应用免疫组化方法检测Caspase-2的表达.结果 治疗组大鼠出生后25 d 和35 d时TUNEL染色阳性细胞与对照组相比明显减少(t=3.33～6.72,P<0.05);治疗组和对照组大鼠生后25～45 d时Caspase-2在节细胞层和内核层均有表达,但在25 d时治疗组与对照组相比明显减少(t=6.33,P<0.05).结论 在RCS大鼠遗传性视网膜变性的早期,LBA通过抑制细胞凋亡及Caspase-2表达对神经元起保护作用.     

LCVS1002诱导大鼠视网膜变性

【立论依据】 Müller细胞的胶质化是很多视网膜变性疾病共有的病理过程,抑制胶质化能够保护视网膜。课题组前期研究表明LCVS1002在早期实验性糖尿病视网膜(diabetic retinopathy)病变大鼠的玻璃体中明显升高,我们推测LCVS1002可能参与了DR的视网膜变性。 【设计思路】 体内试验:检测正常SD大鼠和STZ诱导的糖网病大鼠的视网膜组织中LCVS 1002和GFAP的表达;在SD大鼠过表达LCVS1002以及在DR大鼠视网膜knockdown－LCVS1002检测其视网膜结构和功能的变化。体外试验:以661w细胞为研究对象,检测LCVS1002对神经视网膜作用的可能机制。 【实验内容】 (1)选用正常SD大鼠,采用视网膜免疫荧光方法检测出生后1~6周视网膜LCVS1002、GFAP的表达。(2)选用正常SD大鼠,对照组腹腔注射枸橼酸缓冲液,实验组注射链脲佐菌素(STZ),采用视网膜组织免疫荧光检测造模成功后的第1~7天视网膜LCVS 1002和GFAP的表达。(3)选用正常SD大鼠,在出生后10 d实验组视网膜下腔注射LCVS1002腺相关病毒(AAV2/8),对照组注射相同滴度空病毒载体,采用视网膜电生理、组织免疫荧光和TUNEL方法在4、6周分别检测视功能、LCVS1002、GFAP、Recoverin的表达和视网膜细胞的凋亡情况。(4)LC3-II腺病毒感染661W细胞后24 h,用LCVS1002处理,检测自噬。 【材料】 体内实验材料:雄性SD大鼠,由同济大学医学院实验动物中心提供。体外实验材料:661W细胞系。 【可行性】 实验所用病毒由公司商品化提供,实验所用技术包括视网膜下腔注射、免疫荧光、细胞培养是实验常规技术,能够保证实验顺利开展。 【创新性】 首次证明LCVS1002能够引起DR视网膜变性,参与DR早期的病变,有望作为一个DR的生物标记物(biomarker)。     

不同类型视网膜变性眼底荧光血管造影表现

目的:对几种类型视网膜变性患者眼底荧光血管造影表现进行观察研究.方法:8例(16眼)视网膜变性患者按常规方法进行眼底荧光血管造影.结果:双眼改变较为对称,病变相对安静,层次偏浅,以视网膜色素上皮和脉络膜毛细血管层萎缩为主,早期脉络膜背景荧光暗淡,透见脉络膜大血管,并可出现低荧光区.与继发性视网膜色素变性有区别.结论:脉络膜毛细管萎缩造成的脉络膜微循环障碍可能是导致视网膜变性患者视网膜色素上皮及视网膜感光细胞营养不良的因素之一.     

视网膜变性模型大鼠部分生物学特性分析

目的了解视网膜变性模型大鼠（RCS大鼠）的部分生物学特性，为视网膜变性模型大鼠的推广与应用提供基础资料。方法应用定期测定RCS大鼠体重、统计繁殖特性和检测RCS大鼠主要脏器重量、系数以及血液生理与生化指标的方法，初步探索RCS大鼠的生物学特性。结果RCS大鼠平均产仔数为6～7只，仔鼠成活率为69％，平均胎间隔为45．3±7．5d。RCS大鼠的体重随周龄增加而增长，前20周增长快，后期增重较慢，基本保持在平台期：雄鼠的生长速度比雌鼠快，30周龄的雄鼠和雌鼠的体重分别可达300．14±10．32g和202．01士9．45g。雌雄大鼠之间的血液白细胞数（WBC）存在显著差异（P〈0．05），白细胞分类中淋巴细胞绝对值（LYMPH）存在显著差异（P〈0．05）。雌雄大鼠之间肝、脾、肾的重量及系数均有显著差异（P〈0．05）。结论RCS大鼠种群引进繁育成功，为RCS大鼠生物学特性的标准化提供可靠数据。     

结晶样视网膜变性的不同临床表现

两个家系的结晶样视网膜变性呈两种不同的临床表现,一种倾向于黄色斑点状视网膜变性,另一种则倾向于视网膜色素变性。     

不同日龄Wistar大鼠脏器重量测定

动物的内脏器官重量组成和形态易受动物品系、年龄、性别和环境等因素影响，目前，国内有关大鼠脏器重量正常值及一些因素对其的影响的报道不多。作者从军事医学科学院实验动物中心Wistar封闭群大鼠(饲养条件为t=18℃～28℃，Rh=40～70%的开放系统)中选取健康正常的25d、40d、65d、90d大鼠共     

腺病毒介导神经生长因子对遗传性视网膜变性RCS大鼠？…

目的：探讨先天性视网膜变性病因以及对其进行基因治疗的可行性。方法：ＴＵＮＥＬ法对ＲＣＳ大鼠视细胞的丧失进行研究;构建分泌表达型重组腺病毒穿梭质粒ｐＨｄＥ１ＣＭＶ－ＮＧＦ,经与ｐＪＭ１７在２９３细胞中同源重组,获得复制缺陷型重组腺病毒ＡｄＥ１ＣＭＶ－ＮＧＦ。琼旨糖覆盖法测定滴度。ＡｄＥ１ＣＭＶ－ＮＧＦ和ＡｄＥ１ＣＭＶ－ＬａｃＺ转导培养视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌ ｐｉｇｍｅｎｔ ｅｐｉｔｈｅｌｉｕ     

结晶样视网膜变性2例

结晶样视网膜变性是一种少见的眼底病,现将本人遇到的2例,报告如下:例1,张××,男,27岁.因双眼视力下降2年来我院就诊.以往视力好,无夜盲史.父母为非近亲婚姻.兄弟姐妹6人均健,无同样疾病患者,全身健康状况良好.     

视网膜黄斑变性威胁中老年健康

黄斑变性日渐成为常见病,但是人们对黄斑变性这种疾病仍然缺少认识和了解,甚至有些老年朋友得上黄斑变性疾病才开始了解一点这方面的知识,本文将为您揭开这种疾病的神秘面纱!     

视网膜锥体细胞退行性变大鼠的视觉电生理学观察

目的　研究视网膜锥体细胞功能异常大鼠的视觉电生理特点 .方法　按国际临床视觉电生理学会标准化方案 ,采用 RETIport系统和自制的氯化银角膜电极、不锈钢针状电极对成年雄性 SD大鼠观察视网膜电图暗适应视网膜电图(ERG)、振荡电位 (OPs波 )和明适应 ERG和颜色光 ERG;采用 RETIscan系统观察明暗适应条件下的白色和颜色光多焦点视网膜电图 (m ERG) .颜色光 ERG和 m ERG记录通过在被测眼前分别加红、绿、蓝色滤光片后进行 .结果　大鼠 ERG和 OPs波形与人类相似 .正常大鼠的白色和颜色光 m ERG均能够记录到 .在暗适应条件下 ,m ERG总和反应 (n=5大鼠 )的 b波幅值和潜伏期分别为 :(12 6± 4 1)μV,(44 .8± 2 .4 )ms(白 ) ;(10 4± 39) μV,(47.8± 0 .8) ms(绿 ) ;(86± 33)μV,(47.2± 1.9) ms (蓝 )和 (76± 2 1)μV,(6 5 .0± 1.9) m s(红 ) .明适应条件下正常大鼠的 m ERG仍能够记录到 ,但是波幅值较低 .电生理异常大鼠 ERG和 OPs波形未见异常 ,明适应 ERG和 m ERG波形消失 .暗适应条件下的白光 m ERG波形难以辨别 ,但是颜色光 m ERG波形可以记录到 ,其总和反应 b波幅值和潜伏期 (n=2只眼 )分别为 :(42± 7) μV,(5 0± 7) ms (绿 ) ;(31.1± 0 .4 )μV,(5 0± 8) ms (蓝 ) ;(12 5±4 1) μV,(5 7± 3     

Long Evans大鼠视网膜神经节细胞电生理学发育特性研究

目的 研究Lnng Evans大鼠不同发育阶段视网膜神经节细胞(Retinal Ganglion Cells，RGCs)电生理学特性，认识视觉发育过程中视网膜神经元成熟的细胞内机制。方法 取出生后3～31d Lnng Evans大鼠，制备视网膜片，寻找RGCs行膜片钳全细胞记录，给予不同强度去极化脉冲，诱发动作电位。结果 33只Long Evans大鼠共获得94个RGCs，按动作电位类型RGCs分为单锋型、瞬变型和持续型，在视觉发育不同阶段，3种类型的RCCs所占比例不同，在电生理特性上有显著差异。结论 在视觉发育过程中，RGCs的电学特性逐渐成熟，动作电位的幅度、频率存在差异，提示不同类型的RGCs在编码及传递时间、空间视觉信息中具有不同作用。     

中药黄斑颗粒对大鼠视网膜光损伤的防护作用

目的：观察中药复方制剂黄斑颗粒对大鼠视网膜光损伤的防护作用。方法：雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组、模型组和黄斑颗粒组,每组8只。黄斑颗粒组采用黄斑颗粒3.125g/kg,1次/d,灌胃10d。暗适应24h后,采用自制光损伤箱,平均光照强度2800Lux,散瞳放入光损伤箱中持续光照5h后,置于暗环境饲养,继续用药。2周后做视网膜电流图（electroretinogram,ERG）,记录最大反应a、b波及振荡电位（oscillatory potentials,OPs）,并留取眼球HE染色,光学显微镜测算外核层层数。结果：光照2周后,与模型组相比,黄斑颗粒组视网膜结构保存完好,正常对照组外核层平均有9－11层,黄斑颗粒组外核层平均仍有7－9层,而模型组仅有3－6层,差异有统计学意义（P〈0.01）。黄斑颗粒组ERG反应振幅明显高于对照组,其中b波黄斑颗粒组为（319.38±71.96）μV,模型组为（135.16±42.30）μV;a波振幅黄斑颗粒组为（184.63±47.23）μV,模型组为（83.35±27.75）μV;OPs黄斑颗粒组为（239.38±20.19）μV,模型组为（125.44±26.23）μV。两组间差异有统计学意义（P〈0.01）。a、b波潜伏期差异无统计学意义。结论：中药复方制剂黄斑颗粒对大鼠视网膜光损伤在形态和功能上有明显的防护作用。     

光性视网膜变性猪视网膜移植术后视功能的综合评价

目的 通过移植分化完成而发育不完全的新生猪全层视网膜组织,探讨此种供体改善光变性猪视功能的可能性.方法 选1～6 d新生小猪为供体,用准分子激光微切削脉络膜制备神经上皮-RPE联合移植片,并通过玻璃体-视网膜手术将联合移植片移植进光变性猪视网膜下腔.在视网膜移植术后1周、1～5个月,通过检眼镜、眼底彩照、荧光造影,观察移植物的存活状况及宿主视网膜有无排斥反应迹象;用mfERG检测并比较不同时相间N1、P1波振幅和潜伏期,综合评价移植术后视网膜功能的变化.结果 对8只光变性猪15眼实施视网膜移植手术,移植物植入视网膜下腔11眼,手术成功率为84.6%.移植术后1～2个月可见与宿主视网膜有清楚界限的移植床及其内灰黑色移植物, FFA检查可见移植物有荧光渗漏.光变性猪视网膜移植术后1～5个月, mfERG检测N1波、P1波幅值和潜伏期并在不同时相点间比较,发现N1波、P1波幅值随存活时间延长而增高,反应活跃区在第2、3环;而各环N1波、P1波潜伏期较手术前均明显缩短,存活后期更显著.结论 功能检测结合活体形态的同步观察,综合评价视网膜移植术后光变性猪视网膜功能改善的效果,从而证实了分化成熟的新生猪视网膜移植确实改善了光变性猪的视网膜功能.     

周边部视网膜格子样变性的预防性光凝治疗

目的：观察对周边部视网膜格子样进行预防性激光光凝治疗的疗效。方法：用氩蓝绿激光对６７眼周边部视网膜格子样变性进行全环绕式视网膜光凝术。结果：术后２１眼随访６个月、４６眼随访１２个月,无一眼发生孔源性视网膜脱离。结论：对伴有干性裂孔、玻璃体牵引、一眼已有视网膜脱离、无晶状体或人工晶状体眼的周边部视网膜格子样变性进行预防性激光光凝治疗是必需、安全和有效的。     

近视眼与视网膜退行性病变

目的探讨近视眼眼底的视网膜退行性病变的分布规律。方法选择近视眼患者503例984只眼，充分散瞳后验光，并依近视程度分为三组，即Ⅰ组：近视屈光度〈-3．00DS；Ⅱ组：近视屈光度-3．00DS～-6．00DS：Ⅲ组：近视屈光度〉-6．00DS。用间接检眼镜和裂隙灯联合三面镜或全视网膜镜详细检查眼底，记录周边部视网膜变性数量、特点和位置，并进行统计分析。结果984只眼的屈光状态为（-6．56±5．70）DS，周边部视网膜变性155只眼，百分率为15．75％，其中单眼19例（10．98％）；双眼73例（89．02％），周边部视网膜变性百分率：Ⅰ组为17．42％；Ⅱ组为33．54％；Ⅲ组为49．04％。双眼的变性区分布有对称性，百分率为60．65％。变性区多位于颞侧象限，颞上或颞下象限无明显差异。变性区以不压变白和树枝样变性多见，其次为格子样变性和单纯视网膜裂孔。结论高度近视眼周边部视网膜变性发生率高，不同屈光度组的周边视网膜变性的构成比存在显著差异，且随近视屈光度的增加而增高，且有对称性，这些特征对高度近视眼的诊断、治疗和预后具有指导意义。     

高度近视眼周边部视网膜变性特点与分布规律

目的探讨高度近视眼周边部视网膜变性特点与分布规律。方法选择近视眼患者503例984只眼,充分散瞳后验光,用间接检眼镜和和裂隙灯联合三面镜或全视网膜镜详细检查眼底,记录周边部视网膜变性数量、特点和位置,并进行统计分析。结果984只眼的屈光状态为(8.69±4.35)D,周边部视网膜变性155只眼,发生率为15.75%,其中单眼19例(10.98%);双眼73例(89.02%),双眼的变性区分布有对称性,发生率为60.65%。变性区多位于:颞侧象限,颞上或颞下象限无明显差异。变性区以不压变白和树枝样变性多见,其次为格子样变性和单纯视网膜裂孔。结论高度近视眼周边部视网膜变性发生率高,且有对称性,这对高度近视眼的诊断、治疗和预后有指导意义。     

RCS大鼠视网膜色素变性过程中视网膜形态学研究

目的研究遗传性视网膜色素变性大鼠(Royal College of Surgeons rat,RCS rat)在视网膜变性发展过程中视网膜形态学变化.方法 RCS-p (视网膜含色素的变性大鼠)按出生后视网膜变性的发展状况分为变性早期(RCS15 d)、中期(RCS 30 d)、晚期(RCS90 d)3个时相点,分别采用相应时期的RCS-rdy p (视网膜含色素的正常大鼠)作为对照组(control groups,C 15 d,C 30 d,C 90 d),每组5眼,取各组大鼠眼球进行视网膜切片,行HE染色,采用MIAS-1000图像分析系统在400倍光镜下测视网膜外节(OS)、外核层(ONL)以及内核层(INL)厚度.结果①视网膜感光细胞随着病变的发展逐渐变性死亡,晚期视网膜色素上皮层和感光细胞层结构紊乱,但光镜下观察内核层、神经节细胞层仍保持较正常的形态.②与对照组比较,RCS大鼠视网膜色素变性过程中感光细胞外节膜盘堆积,外核层变薄,内核层在变性中期增厚,早期及晚期变薄.结论①RCS大鼠病变发展过程中视网膜各层神经元形态改变的不一致性.②变性中期视网膜内核层较对照组增厚,可能与该时期内核层神经元缺乏前级神经元的信号输入致细胞突起反应性增生,产生视网膜形态重构(remodeling)有关.